人造激素已用于人体临床实验尿激酶细菌合成获得成功

初步材料证明,细菌制造的人生长激素具有天然产品的生物活性,但其活性还不及天然产品那样高,1980年在基因工程历史上细菌合成的人生长激素第一次注入到人体中,这是在英国伦敦出现的事,开始在健康人身上实验人造胰岛素(SN;118(4):53)这种胰岛素很有效地使血糖水平降低。以后继续在糖尿病患者进行类似的实验,可以预     

苏联用基因工程技术创建高产人生长激素微生物

人生长激素是调节代谢各方面的关键激素之一。继七十年代后期首次细菌合成生长激素抑制素(somatostatin,1977)、生长激素(1979)胰岛素(1979)和其他激素(BXO,1984,29:195-204)之后,苏联科学工作者(M等,1985)。     

生长激素对氨基酸转运和蛋白质合成有急性兴奋效应

生长激素(GH)对不同组织中的氨基酸转运和蛋白质合成有急性兴奋作用,但这些效应是生长激素的促生长作用还是独立的胰岛素样的作用,至令没有得到证实。与天然的人生长激素(22K hGH)相比,分子量为20000道尔顿人生长激素的变异体(20K hGH)的促生长活性与胰岛素样活性的比值很高,因此,它可作为探讨上述问题的工具。作者用雌性去垂体大鼠离体的膈肌进行实验,比较天然22K hGH 与变异体20K hGH 刺激氨基酸转运与蛋白质合成的相对活性。将一对完整的偏侧膈在不同浓度的22K hGH 或20K hGH存在或缺如的情况下预先孵育1h,在孵育的最后1h 内,在孵育液中加~(14)C 标记的3-氧-甲基葡萄糖,以测定 hGH 在糖转运中的胰岛素样活性,同肘亦加入~3H 标记的α-氨基异丁酸或~3H 标记的苯丙氨酸,分别     

世界激素市场报道

当今,世界激素市场正以高速度迅猛发展。例如,在激素置换治疗市场,预计到2000年时,美国当家产品(American Home Products)Premarin的市场份额很可能达到10亿美元。在胰岛素和人类生长激素市场,经遗传工程改造的天然人类激素已成为生物技术的成功产品之一。 Datamonitor在“1993～2000年的世界激素市场”报道里,详细地分析了这种产品的整个市场状况,     

哺乳动物细胞中基因工程人生长激素的提纯和性质研究

 在哺乳动物细胞中克隆表达的人生长激素,经等电点和乙醇沉淀后,再用亲和层析法,获得产品。经对该产品的各项生化指标分析鉴定和活力测定,所得结果都与天然人生长激素相符合,证明其性质相同。     

激素和活性多肽

动物细胞,另二则为分泌人生长激素人原生质周围空间中的大肠杆菌系统。本文讨论了后一种系统,提出证实生物合成和天然22k人生长激素的证据。(戴顺志)8803了3使用生吻电化学系统生物合成幽类化合物〔俄〕z‘Yaroploov,A.I.…了Biokhi-miya(Moseow)一1586,51(9)一1442一1445〔译自CBA,198了,(4),1722〕 在有外源性电子受体甲硫酸吩嗓存在时,使用冻干的球型节细菌(Arfhrobacter夕Iobijorm‘s)(3一幽酮类1一脱氢酶)细胞,使氢化一可的松氧化为强的松龙。此固定化冻干细胞保留着20%的原活性。在固定化和非固定化细胞的稳定性上实际上并无差别…     

基因工程的现状与未来(续)

借助基因工程制造药物 谈起基因工程在实际生产中的应用时,话题是药物生产,而人干扰素、人生长激素和胰岛素更是它们的三大支柱。此外还有关于β内啡肽和生长激素释放抑制因子(这两种物质有调节脑神经的作用)、肠促胰液肽和胸腺素d_1(调节免疫反应)等药物生产的报道。     

编码人生长激素的DNA序列在大肠杆菌中的直接表达

编码人生长激素的DNA通过用化学合成的DNA与酶促制备的CDNA连接而建立。这一“杂化物”基因在乳糖操纵子控制下在大肠杆菌中表达,产生的肽在大小和免疫学性质上具有成熟的人的生长激素的特性。 人生长激素(HGH)是垂体前叶合成的具有191个氨基酸的蛋白质。垂体机能减退 的侏儒因HGH缺陷而身材矮小,在儿童期使用人生长激素可以治疗这一缺陷症。另外,HGH在治疗各种创伤疾病如骨折、皮肤烧伤、溃疡等被证实是有效的。由于生长激素具种属专一性,人的尸体成为HGH的唯一来源。 生长激素mRNA的初级翻译产物是一个蛋白前体,含有与生长激素N末端相接的一段信号肽。这种信号或“前”序列是分泌蛋白的特征。对于大鼠生长激素(RGH),已经鉴定了由RGH mRNA制备的CDNA序列中前序列的26个氨基酸残基。由人生长激素cDNA序列获得的信息,我们设计并建立了一个细菌质粒,它可以在微生物细胞中指导合成大量的成熟HGH。     

胰岛素对生长激素的分泌和细胞内信号传导的影响（英文）

生长激素(growth hormone,GH)在行使其功能时需要经历一系列的过程,包括从垂体分泌和进入血液循环到达靶器官或细胞(受体前过程)以及和生长激素受体(GH receptor,GHR)结合并引发细胞内信号转导(受体后过程)。胰岛素可以直接或间接地影响这些过程。GH从垂体的生长激素分泌细胞中分泌需要依赖于下丘脑释放的生长激素释放激素(GH-releasing hor-mone,GHRH)和生长激素抑制素(somatostatin,SS),在生理或病理条件下,胰岛素可以对这两种激素以及GH分泌细胞施加不同影响,从而干预GH的分泌及循环水平。血糖、血脂以及饮食习惯都可以改变胰岛素对GH的影响。胰岛素还能通过影响GHR的敏感性,以及影响胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1),进而影响GH。受体后过程也是GH行使功能的重要一环,细胞内信号转导依赖于信号通路完成。GH信号转导通路和胰岛素的信号通路有部分交叉,这使得两者的信号可以相互作用,胰岛素通过这种作用对GH的信号转导产生影响。还有很多因素可以改变胰岛素对GH的影响,包括细胞因子信号抑制物、GHR敏感性以及JAK2蛋白和胰岛素受体底物间的相互作用,且随着胰岛素浓度升高和作用时间延长,胰岛素对GH的影响趋向于增强。但胰岛素的浓度和时间对GH分泌和细胞内信号转导的具体影响还未完全阐明。胰岛素和SS的关系也有待进一步研究。     

蛋白质工程

基因工程的全部过程已经定型,原理也查清楚了,余下的工作无非都是修修补补的事。现代技术已能做到,不论这个基因从何而来的,是人工合成的还是从某个机体里分离取得的,在实际操作中总是有可能使之在动物或细菌中表达的。 基因工程的少数几种产品也已投入市场,胰岛素1985年的销售额达到0.5-0.6亿美元,人生长激素的兴旺景象象一直延续了第四个季度。     

生物工程技术预测

一、医药与医疗方面利用重组DNA技术商品化生产胰岛素(84.2～87.1)、干扰素(84.6～87.7)、牛生长激素(84.12～88.2)、人生长激素(85.8～89.2)、肝炎疫苗(85.9～89.1)和癌疫苗(93.10～97.6)。利用重组DNA技术开发感冒疫苗(85.G～89.1)和癌疫苗的生产技术(89.7～93.1)。     

金属巯基组氨酸三甲内盐-人生长激素融接的基因可促进小鼠的生长

把小鼠的金属巯基组氨酸三甲内盐基因的启动基因或调节区段接到编码人的生长激素的结构基因上,用显微注射法,把融接的基因导入小鼠受精卵中,有23只小鼠(70％)被稳定地掺入了融接的基因,在它们的血清中人的生长激素浓度很高,长得比其对照小鼠大得多,人生长激素的合成可被正常诱导金属巯基组氨酸三甲内盐基因表达的镉或锌进一步诱导,在能表达人生长激素的转基因的小鼠的血清中,胰岛素样的生长因子的浓度也随着增加,从它们的垂体的组织学研究表明,正常合成生长激素的细胞的机能已经失调,融接的基因可在所有鉴定过的组织中表达,然而人生长激素信使RNA对内源的金属巯基-1信使RNA的比率随不同的组织和不同的动物而变化,这说明外源基因的表达受整合的位置和所处的组织环境所影响。     

世界生物技术药品的市场现状及展望

生物技术的发展非常迅速,它在医药领域所发挥的重要作用已经是不容置疑的。在化学合成药开发日趋艰难的今日,生物技术药品为人们寻求新药带来了希望。生物技术药品是指利用现代生物技术如基因工程、细胞工程、酶工程等生产的药品。 (一)世界生物技术药品的现状目前已经上市的生物技术药品主要以采用基因工程生产的药品为主。其中主要产品及上市年限如下,人胰岛素(1982)、乙型肝炎疫苗(1987)、人生长激素(1987)、α—干扰素(1987)、     

《重组DNA产物》

该书分十一个部分:①重组DNA技术:分离、克隆及其基因表达;②从生长激素抑制素到人类胰岛素;③酵母;外源蛋白生产时的另一种微生物;④人干扰素的基本知识⑤对来自人干扰素重组DNA生物学特性的临床前景的估价;⑥由细菌产生的人α干扰     

Genentech开发动向

在医药方面,Genentech已将胰岛素基因工程制品投入市场;人生长激素及α干扰素正在等待食品及药物管理局批准;γ干扰素及血纤蛋白溶酶激活剂(tissue plasminogen activator)正在进行第二期临床试验。     

申请进行前临床安全试验销售许可证生物技术医药制品者须知

<正>1.前言 用新的生物技术方法诸如重组DNA技术(rDNA)和大规模细胞培养技术现在可以生产许多种作为生物学医药制品用的蛋白、多肽及其他物质。这些制品包括人体天然存在的蛋白和多肽,如激素(胰岛素、人生长激素、红细胞生成素等);血液制剂(如Vlll因子、纤维蛋白溶解酶原活化因子等);细胞因子(如干扰素、白细胞介素、菌落刺激因子、细胞毒素等);以及鼠型或人型的单克隆抗体等。用作新疫苗的病毒和细菌抗原也可用其生产。可以预想,许多新的单抗和细胞因子制品将得到迅速发展,血液制剂和疫苗的开发也将持续取得进展。而且编码蛋白的DNA单一位或多位点诱变技术和基因化学合成技术的使用,为随意修饰已知蛋白和肽类的氨基酸顺序提供丁美好前景,这将产生     

再生胰腺提取物诱导人羊膜间充质干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞

利用天然生物诱导剂大鼠再生胰腺提取物(Rgenerating pancreatic extract,RPE)定向诱导人羊膜间充质干细胞(Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)向胰岛素分泌细胞分化。切除大鼠60%胰腺刺激胰腺再生,而后制备RPE,以终浓度为20 mg/L的RPE诱导hAMSCs。实验通过形态学鉴定、双硫腙染色、免疫荧光分析、RT-PCR基因检测和高糖刺激胰岛素分泌等实验鉴定细胞诱导结果。实验结果显示P3代hAMSCs经RPE诱导后形态变化明显,诱导15 d后细胞呈簇状生长,经双硫腙染色可见棕红色细胞团;免疫荧光染色结果显示诱导细胞呈胰岛素阳性表达;RT-PCR实验证明诱导细胞阳性表达人胰岛相关基因Pdx1和insulin;高糖刺激实验证明培养液中有胰岛素成分产生,且分泌量随刺激时间的延长先增加而后趋于稳定。实验结果表明hAMSCs在体外经RPE诱导可以分化为胰岛素分泌细胞。     

链霉菌DNA克隆系统研究进展

自从1974年细菌DNA的体外重组技术问世以来,以大肠杆菌为材料所做的DNA克隆的努力,已经取得了很大的成就。人的生长激素、胰岛素、干扰素等已经可望利用微生物来生产。DNA体外重组技术在生产实践上的应用,必将对人类带来深远的影响。以DNA重组技术为基础的遗传工程能不能应用于放线菌?由于放线菌这一类微生物所产生重要的次级代谢产物如抗生素等,对医药、     

牛和猪的生长激素在细菌中高效率表达

用垂体的Poly(A)mRNA制备的cDNA含有牛和猪生长激素(bGH,pGH)编码序列,并在细菌中克隆。由各自cDNA的核苷酸序列而得知的肽激素的一级结构大约有90％的同源性。为了组建能在细菌中高效产生成熟的动物生长激素的表达质粒,利用合成DNA的方法来修饰克隆的cDNA。     

乳腺生物反应器及基因药物tPA的研制与开发

生物医药产业经历了天然药物 (如中草药 )、化学方法合成新的药物 (如西药 )和基因药物这三个发展阶段 .基因药物也经历了细菌基因工程、细胞基因工程和乳腺生物反应器 (即利用转基因动物乳腺来生产基因药物 )这三个发展阶段 .目前 ,国内外主要是采用前两种方法 (微生物发酵法、哺乳动物细胞培养法 )来生产基因药物 ,其产品有胰岛素、白细胞介素、干扰素、凝血因子、EPO(促肾红细胞生长素 )等 .虽然在细菌和酵母中生产基因药物周期短 ,且相对便宜 ,但产品质量往往达不到要求 ;动物细胞培养方法生产基因药物 ,质量很好 ,但生产成本很高 ,价…