制备遗传工程小鼠的技术改进

遗传工程小鼠是当今生命科学领域集成度最高的研究体系之一。特别在“人类基因组计划和小鼠基因组计划”完成后,遗传工程小鼠在制备人类疾病模型、药物开发和评价、基因功能分析以及比较基因组学中发挥着越来越重要的作用。由此,也推动了遗传工程小鼠相关技术的快速发展。就遗传工程小鼠制备的现况、存在的问题以及新策略等相关问题进行了总结。     

噬菌体整合酶--基因转移的工具酶

噬茵体整合酶是整合位点序列特异性的酶类。由于这一特性,它可用于向染色体定位特异性地导入目的基因,在遗传工程、基因治疗、转基因动物等领域极具应用前景。本文综述噬茵体整合酶的发现与分类、结构与功能及其应用前景。     

法国的遗传工程业简介

法国现在已经有五家经营遗传工程的企业,并各有一班子人马担任遗传工程设计施工的主角; 1.基因转移公司(Transgene):这个公司的科学顾问是巴黎巴斯德研究所遗传工程部负责人P.Kourilsky,位于法国斯特拉斯堡的基础分子生物学和植物科学中心,政府有少量投资。     

蛋白质工程-将是遗传工程的第二次浪潮

自从美国斯坦福大学P.Berg等人的第一个遗传工程实验成功以后,十余年来遗传工程研究突飞猛进,成果累累,遗传工程公司和研究机构象雨后春笋般的出现。现在,遗传工程已成为世界新技术革命的重要方面之一。 但从生产角度看,遗传工程要成为一门真正的产业,还有很长的路程要走。     

《遗传工程和生物工程学原典》

《遗传工程/生物工程学原典》(Genetic Engineering/Biotechnology Sourcebook)(1982),由美国122个政府机构和一些公益机构资助编篡发行的,成为叙述目前所有正在进行的遗传工程/生物工程学研究的一部原典。内容有:①重组DNA;②单克隆抗体;③质体;④激素;⑤合成干扰素;⑥癌症;⑦克隆;⑧基因转移。     

基因时代:“基因工程和下次工业革命”

本书以自动形象的文学手法介绍了遗传工程与下次产业革命的关系,属于高级科普性读物。书中以介绍遗传学基础知识为背景,重点阐述了遗传工程工业的生产与发展,遗传工程已发展成为羽毛丰满的完整的工业体系。这充分说明了生命科学已步入了生命科学领域,进而叙述了遗传工程对整个科学、商业、社会、医药卫生等各个方面的深刻     

显微注射法制备遗传工程小鼠模型的研究

遗传工程小鼠模型是基因功能、人类疾病发病机制及新药研究开发的最重要的模式生物之一。在建立遗传工程小鼠模型的众多方法中,显微注射法是目前国际上公认的制备转基因及基因剔除动物模型的首选。在进行了大量显微注射工作后,简要介绍建立遗传工程小鼠模型的基本技术与方法,并对在显微操作过程中较为关键的因素进行一些分析和讨论。     

植物基因打靶研究现状

基因打靶是八十年代后期发展起来的一门新兴的遗传工程技术,基因打靶在探索生物的基因功能,消除转基因的沉默,提高转基因的稳定性和表达效率以及基因治疗等方面的均取得了进展,基因打靶技术的前景广阔,它的产生是遗传工程领域的一次革命。目前,基因打靶在植物上的应用研究才刚起步。本文针对基因打靶在植物上的研究现状作一综述。     

甜菜胞囊线虫抗性基因及遗传工程改良策略

甜菜胞囊线虫(Heterodera schachtii)是甜菜的重要病害之一,给甜菜生产造成了极大的损失。随着分子生物学和遗传工程技术的发展,采用遗传工程改良策略进行甜菜抗性品种选育是甜菜胞囊线虫防治中最经济、有效的方法。介绍了甜菜胞囊线虫的生育史及抗性机制,综述了甜菜胞囊线虫抗性基因的克隆和鉴定研究进展及甜菜胞囊线虫抗性育种的遗传工程改良策略,并提出今后甜菜胞囊线虫抗性育种的展望。     

遗传工程的成就和展望

遗传工程一般是指将外源基因与DNA载体结合,形成重组DNA,然后引入到受体细胞,使外源基因复制并产生相应基因产物的技术,亦称为基因工程或重组DNA技术。也有人把细胞融合和染色体工程包括在遗传工程的范畴之内。 五十年代和六十年代分子遗传学的蓬勃发展,使人们搞清了基因的本质以及遗传信息复制和传递的机制,再加上七十年代初限制性内切酶的发现,基因分离技术的进展和细胞转化方法的建立,使遗传工程这门定向改造生物的新技术应运而生。1973年,Cohen等使大肠杆菌的抗四环素质粒和抗链霉素质粒在试管中重组,并在大肠杆菌中表达,进行了第一项遗传工程实验。     

Red体内同源重组介导的egfp、kan基因融合和重组质粒构建

重组工程是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术,可应用于靶DNA序列的敲入、敲除和基因克隆等。在应用重组工程技术进行基因亚克隆时发现,体外重叠PCR法难以获得高质量的目的DNA打靶片段,严重影响重组效率。为了解决上述问题,根据Red重组酶介导的体内同源重组工作原理进行了技术改进。先用PCR方法合成egfp和kan两条末端互补的线性DNA片段,然后将其电击共转化进入携带Red重组酶和pcDNA3.1载体DNA的大肠杆菌DY331菌株内,经体内同源重组直接产生的pcDNA3.1-egfp-kan环状重组质粒DNA分子可通过抗生素标记筛选获得,阳性率可达到45%,瞬时转染pcDNA3.1-egfp-kan可获得绿色荧光蛋白在293细胞中的表达。     

Red体内同源重组介导的egfp、kan基因融合和重组质粒构建

重组工程是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术,可应用于靶DNA序列的敲入、敲除和基因克隆等。在应用重组工程技术进行基因亚克隆时发现,体外重叠PCR法难以获得高质量的目的DNA打靶片段,严重影响重组效率。为了解决上述问题,根据Red重组酶介导的体内同源重组工作原理进行了技术改进。先用PCR方法合成egfp和kan两条末端互补的线性DNA片段,然后将其电击共转化进入携带Red重组酶和pcDNA3.1载体DNA的大肠杆菌DY331菌株内,经体内同源重组直接产生的pcDNA3.1-egfp-kan环状重组质粒DNA分子可通过抗生素标记筛选获得,阳性率可达到45%,瞬时转染pcDNA3.1-egfp-kan可获得绿色荧光蛋白在293细胞中的表达。     

食品工业用酶的克隆

遗传工程技术已成功地应用于药物工业,从而生产出许许多多新颖产品。愈来愈明显,这项技术也大规模地应用于生产对食品工业有价值的酶。通过遗传工程获得生产上     

准备进行大田试验的重组DNA植物

公司Cib一Geigy生物技木研究公司Mosanto农业公司Mosanto农业公司北卡罗林纳州立大学弗洛里达大学Mosanto农业公司Rohm&Haas公司Poimeer Hi一Bre迁国际公司美国农业部农业研究局Calgene公司 试验内容- 重组DNA玉米/引进混霉素(hygromy-c认)抗性和任葡糖昔酸酶标记基因 通过遗传工程表达苏云金杆菌(Bt(ssp.)Kurstaki)色一内毒素蛋白质的重组DNA玉米 通过遗传工程表达苏云金杆菌(Bt(ssp.)Kurstaki)各一内毒素蛋白质的重组DNA棉花-通过遗传工程表达苏云金杆菌Kurslakl两种HDI菌株卜内毒素蛋白质的重组DNA花草重组DNA花草/引进表…     

基因工程的现状与未来

今天,人们听到“生物工艺学”、“遗传工程”和“重组DNA”这些名词的机会,明显地多起来了。这方面的研究,已经向实际应用方面发展。看来这些技术已经引起各阶层人士的注意和兴趣。但是,人们又对这突然出现的热潮感到茫然。     

植物遗传工程 三、高等植物遗传工程的实验体系

关于高等植物遗传工程实验体系可以分作四个方 面来阐述,即：如何建立高等植物遗传工程实验体系; 已建成的实验体系的两个实例;植物遗传工程实验体 系的实际应用;存在的问题。     

我国生产工具酶的情况

1983年3月22日至3月28日中国科学院生物学部召开了生化试剂会议,着重检查了“1980年-1985年中国科学院遗传工程及分子遗传学工具酶研制、生产规划”。     

谈谈人类疾病的基因治疗

自１９６７年尼恩伯格（Ｎｉｒｅｎｂｅｒｇ）提出遗传工程可用于遗传病基因治疗设想，直到１９９０年７月３１日由美国国家卫生院重组ＤＮＡ委员会（ＲＡＣ）首次批准了２项人类基因治疗的临床方案，即腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）缺乏性的重症联合免疫缺陷症（ＳＣＩＤ）和黑色...     

几种限制性核酸内切酶

限制性核酸内切酶(简称限制酶)是遗传工程研究不可缺少的工具酶。曾作过一些介绍,新酶不断地扩大,这里仅就Boehringer Mannheim公司商品化生产的几种限制酶列表做一介绍:     

植物遗传工程

960679 遗传工程大麦的最新进展[英]/Mannonen,L.…∥Critical Rev. Biotechnol. -1994,14(4).-287～310[译自DBA,1995,14(12),95-07151] 就以下方面综述了大麦遗传工程的最新进展:大麦作为遗传工程的目标;遗传工程(遗传工程的先决条件,用于大麦转化的基因,大麦组织培养物的转化,大麦体细胞克隆变异,大麦转化的基因转