鲤鱼两个cGnRH-Ⅱ基因的发现及其在成熟个体的表达分析

促性腺激素释放激素(GnRH)是一个保守的神经十肽家族, 在调节脊椎动物的性腺发育和控制性成熟中起至关重要的作用. 用RACE和RT-PCR方法, 从鲤鱼脑组织克隆得到两个差异的cGnRH-Ⅱ cDNAs序列, 其长度分别为622, 578 bp. 两个cDNA编码的cGnRH-Ⅱ前体均为86个氨基酸, 包括一个信号肽、cGnRH-Ⅱ十肽和一个由蛋白水解位点(Gly-Lys-Arg)连接的GnRH相关肽. 内含子捕获和Southern杂交证实鲤鱼基因组中有两个cGnRH-Ⅱ编码基因, 且两个基因都可能以单拷贝形式存在. 鲤鱼cGnRH-Ⅱ的多基因编码现象为“基因复制”理论提供了新的证据. 采用半定量的RT-PCR分析了两个cGnRH-Ⅱ基因在鲤鱼成熟个体的脑区、垂体和性腺中的表达及相对表达水平. 表达分析结果表明, 脑区、垂体和性腺都能检测到cGnRH-Ⅱ基因的表达, 但cGnRH-Ⅱ基因在卵巢没有表达是例外, 而表达水平在不同的脑区、垂体和性腺存在差异. 根据两个cGnRH-Ⅱ基因的广泛表达特性, 推测鲤鱼cGnRH-Ⅱ的功能可能主要起神经递质或神经调节剂作用, 同时对促进和调控促性腺激素释放起一定作用, 而在垂体和性腺合成的cGnRH-Ⅱ可能起自分泌和旁分泌调节因子的作用.     

促性腺激素抑制激素与生殖轴的关系

下丘脑的促性腺激素释放激素((GnRH)对调控促性腺激素释放十分重要.10年前在鸟类中首先发现了促性腺激素抑制激素(GnIH),它的鉴定提示GnRH不是唯一能直接影响垂体促性腺激素释放的下丘脑神经肤.GnIH及其同系肽广泛存在于鸟类及哺乳动物体内,GnIH在脑部与GnRH神经接触,GnIH可以直接抑制垂体促性腺激素的合成和释放,GnIH及其受体在鸟类和哺乳动物的生殖腺存在.因此GnIH可以在多个水平直接影响生殖轴:脑部、垂体、生殖腺.     

草鱼促性腺激素受体的克隆及表达分析

利用RT-PCR技术从草鱼性腺中克隆出两种促性腺激素受体基因(FSHR和LHR),采用N-J法构建了系统进化树。通过RT-PCR及Real-time PCR技术对FSHR和LHR在成体草鱼不同组织中的时空表达进行分析,发现FSHR和LHR在草鱼卵巢、精巢中表达明显,表达量随着卵母细胞的发育逐渐增高,以上结果为进一步探讨GTHR在鱼类生殖周期中的生理功能奠定了基础。     

哺乳动物促性腺激素对文昌鱼卵母细胞成熟的影响

在繁殖季节,将哺乳动物促性腺激素注射到性腺正在成熟文昌鱼体内,注射３６小时后,检查促性腺激素的生理效应,结果表明这两种激素均有效地诱发卵母细胞成熟和产卵。从而认为雌性文昌鱼的生殖活动,像脊椎动物一样,可能受促性腺激素的调控。     

促性腺激素释放激素的结构及其生物学功能

促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽激素,是神经、免疫、内分泌三大调节系统互相联系的重要信号分子,对生殖调控具有重要意义.GnRH类似物是近年来应用最广的多肽类激素新药之一.就GnRH及其受体的结构及分布、GnRH在垂体和性腺水平调控生殖的一系列证据、影响GnRH释放的因素等进行了综述,并展望了GnRH研究的发展趋势及应用前景.     

外源激素对雄性黄鳝性类固醇激素分泌的影响

硬骨鱼类促性腺激素(GTH)的分泌受到双重调控,即促性腺激素释放激素(GnRH)的刺激和促性腺激素释放抑制因子(GRIF)的抑制1.       

奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素前体蛋白的克隆与表达

促性腺激素释放激素（gonadotropin—relying hormone,GnRH）是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。为研究GnRH对性腺发育的作用,构建了GnRH cDNA的原核表达载体并进行融合表达。利用RT—PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段克隆到表达载体pMAL—c2x中构建重组表达质粒pMAL—GnRH,并在大肠杆菌TB1中获得了高表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的41．6％。菌体经溶菌酶裂解,制备无细胞抽提液,Amylose—sepharose柱层析后得到分子量为56kD单一条带的目的蛋白。目的蛋白经Factor Xa酶切裂解,Amylose—sepharose过柱纯化后得到纯化的GnRH前体蛋白。该研究为鱼类GnRH蛋白的控制性腺成熟和抗体制备打下了基础．是国内鱼类GnRH前体蛋白在原核细胞中成功表扶的首次报道．     

褪黑素调控动物繁殖功能的作用途径

褪黑素是由松果体分泌的一种多功能吲哚类激素,在动物繁殖过程中起了至关重要的作用.褪黑素可通过多条途径调控动物的繁殖功能,主要包括：G蛋白偶联受体途径;作为神经内分泌激素对动物繁殖进行调控;与其核受体结合在转录水平上调控动物繁殖;通过抗氧化作用调控卵泡发育.本文就褪黑素对动物繁殖功能的调控途径进行综述,旨在为褪黑素调控动物繁殖的相关研究提供帮助.     

大鼠垂体促性腺激素细胞内cAMP的改变对LHβ mRNA表达的影响

目的 分析大鼠LHβ mRNA表达的促性腺激素释放激素(GnRH)受体后信号转导机制.方法 将体外培养的大鼠腺垂体促性腺激素(GTH)细胞用cAMP的兴奋剂FSK或抑制剂SQ22536处理后,再用高频GnRH脉冲刺激,然后用实时荧光定量PCR法测定细胞LHβ mRNA的Ct值,并与空白组比较.结果 LHβ mRNA的Ct值随着GTH细胞cAMP含量的增高而显著降低,随着cAMP含量的降低而显著增高.结论 cAMP是高频GnRH脉冲刺激所引起的LHβ mRNA表达的受体后的信号转导途径.     

促性腺激素释放激素受体的结构及其生物学功能

促性腺激素释放激素受体(GnRHR)属于类视紫红质G-蛋白结合受体(GPCRs)家族的成员.当促性腺激素释放激素(GnRH)与GnRHR结合后,一系列细胞内信号通路被激活从而调节和表达各种生物学功能.本文对GnRHR的基因结构、分子结构、信号调节及生物学功能等进行了综述.