单克隆抗体——一种制备血清学试剂的新工艺

<正>多年来抗体在多种疾病的诊断上具有重要作用。放射免疫测定和其它免疫学检测方法被广泛地运用在诊断试验室以检测并定量药物、细菌或病毒制品、肿瘤抗原和循环中的免疫球蛋白。然而免疫学检测方法往往由     

人对荚膜和无芙膜奈瑟氏脑膜炎球菌表面抗原的类特异性杀菌抗体

<正>杀菌抗体是脑膜炎球菌引起的败血症和脑膜炎的主要保护性抗体,它是由脑膜炎球菌带菌者或隐性感染者接触脑膜炎球菌的荚膜多糖或外膜表面抗原产生的,也可由奈瑟氏Lactamica菌或具有与脑膜炎球菌表面多糖抗原有交叉的细菌产生,为大肠杆菌KI—SB群脑膜炎菌有一样的荚膜多糖。     

胶乳凝集试验在感染性疾病中的应用

<正> 胶乳凝集试验(LPA)简单易行,快速,在检测细菌及病毒抗原或抗体方面具有较高的灵敏度和特异性。近年来受到国内外学者的重视,已广泛应用于多种细菌性疾病,病毒感染的快速诊断。     

土壤含水量驱动土壤病毒和细菌多度及其与土壤异养呼吸关系的变化

土壤微生物是维持陆地生态系统稳定性和功能的重要组成部分。病毒是地球上数量最多的生物实体,也是若干类型生境中微生物数量的重要调节者。因此,了解病毒与微生物的相互作用,对深入认识包括碳循环在内的生态系统过程具有重要意义。在实验室建立土壤微宇宙实验系统,跟踪调查恒定低含水量、恒定高含水量和波动含水量3种水分处理下土壤病毒和细菌多度的变化,以及土壤异养呼吸速率对土壤病毒-细菌相互作用的响应。相较于低水分处理,高水分处理显著增加了病毒多度（P<0.001）和病毒-细菌多度比（P=0.0026）,波动水分处理显著增加了病毒多度（P<0.001）。在高水分处理的土壤微宇宙中,细菌和病毒多度呈现出随时间动荡的信号,即细菌多度表现出增加-降低-增加的趋势,而病毒多度则表现出增加-降低的趋势,且其变化滞后于细菌。土壤异养呼吸速率与土壤含水量（P<0.001）、细菌多度（P=0.0045）和病毒多度（P<0.001）都具有显著的正相关关系。这些结果说明：病毒导致的下行控制可能是细菌多度的重要影响因子,在水分增加情形下,病毒有可能通过加速细菌的更新速率进而加速土壤呼吸。因此,病毒与细菌的相互作用可能是碳循环的重要决定因素。     

冰核细菌及冰核基因的应用研究进展

引起水由液态变为固态的物质称为冰核或成核剂。冰核种类繁多,目前已发现4属23种或变种的细菌、4属11种或变种的真菌和1种病毒,它们都具成冰活性。细菌冰核是一类蛋白质,也称冰蛋白,由细菌冰核基因编码。作为生物冰核领域的研究重点,冰核细菌的研究已涉及到促冻杀虫、防霜冻、植物病害等多个领域;同时冰核细菌已成功地应用于人工降雪、制冷和高敏检测等方面,具有广阔的应用前景。主要对冰核细菌的应用研究现状和发展进行综述。     

单克隆抗体在植物病原细菌抗原分析中的应用

血清学技术与各种生物学、生理、生化学方法相比,因其具有迅速性及特异性的高客观性优点,在植物病原细菌等病原体的诊断、检出及分类,鉴定等研究领域中被广泛应用。不过,迄今试验用的抗血清,大多是以细菌作为免疫原注射于兔子等制成的多克隆抗体。与植物病毒相比,细菌具有非常复杂的抗原构造,对应各自抗原决定基(epitopes)的B细胞经增殖产生抗体,且一个抗原决定基可产生类或亚类不同的抗体。因此,用这样的不均匀抗血清进行细菌的分类、鉴定及抗原分析和抗原分子的机能分析非常困难,甚至是不可能的,而且,因所用目的外细菌具有相同的抗原决定基,使病害的诊断也会有错误的危险。     

问题解答

问:病原体是抗原吗?答:病原体也叫“病原生物”,是能引起人和动植物传染病的微生物和寄生虫的统称。其中有细菌、病毒、立克次氏体、螺旋体、真菌、蠕虫及螨类等。抗原是一类能刺激人体免疫系统产生抗体或致敏细咆(即免疫淋巴细胞),并能与相应的抗体或致敏细胞特异结合,发生免疫应答的物质。     

转染瘤提供新的镶嵌抗体

在大约100年以前,人们就已证明,在血清中循环的抗体提供了免疫反应的基础。随着血清电泳的发展,人们又证明了这些抗体是蛋白质分子。多年来的研究已经揭示出:抗体负责对细菌和病毒疾病的特异保护作用,同时也包括正常的或与疾病有关的各种免疫反应,如炎症自身免疫性疾病,排移反应,以个体基因为介导的网状调节作用。     

嗜酸性细胞与嗜酸性细胞趋化因子

嗜酸性细胞是保护性杀伤细胞,主要杀伤多细胞寄生虫,有吞噬抗原一抗体复合物、被抗体覆盖了的细菌和某些病毒的功能,亦有调节变态反应的作用。过去认为嗜酸性细胞能中和炎症介质而起抗炎作用;目前有人提出嗜酸性细胞可能是炎症反应的原发性介质,具有细胞毒性。嗜酸性细胞趋化因子(ECF)的来源是肥大细胞、嗜碱性细胞、补体系统、淋巴细胞、抗原-抗体复合物以及某些癌肿(肺大细胞癌)等。ECF过多或活性过高是诱发嗜酸性细胞增多症的常见原因。     

新研究可能降低动物使用量

由于剑桥研究人员的努力,未来用于医学研究的实验动物需求量将会下降.他们已找到一种方法,能制备一种称为“魔弹”的抗体,这种抗体能与某种特异性目标,如分子、病毒或细菌等相结合.就目前而言,不得不在动物体内激发产生抗体,即费时又耗资,而且是争论的焦点. 不过,医学研究委员会的分子生物学实验室(位于剑桥)和一家生物技术公司(剑桥抗体技术公司)的研究小组在研究体外制备“魔弹”的道路上又迈出重要的一步.两位博士,Greg Winter和Andrew Griffiths在《自然》杂志上描述了他们是如何用病毒制备这类抗体的.可以制备无数种类的病毒,研究人员可以从中筛选出能与兴趣目标相结合的那一种抗体.这种目标可以是一种蛋白,也可以是癌细胞等等.     

治疗性单克隆抗体药物产品与技术发展现状

抗体治疗已有很长的历史,可以追溯到几千年以前.早在公元前200年,中国就出现了以疫苗接种形式对抗感染性疾病的方法.19 世纪后期,含有抗体的人源或动物血清被广泛用于病毒或细菌性疾病的预防和治疗.随着分子生物学的出现,用哺乳动物细胞制备重组抗体已成为可能.     

野猪瘁死症病原的分离鉴定

采集病死野猪的脾脏和血清,用特异抗猪瘟病毒抗体进行琼脂扩散试验检测发现有明显的沉淀线出现,证明野猪感染了猪瘟病毒,猪的致病性实验表明并非猪瘟强毒感染。采集病死野猪的心、肝、脾、肺、心血,经镜检、细菌分离培养、纯培养、生化试验和细菌G C mol%含量测定等检验,证实致病细菌有多杀巴氏杆菌,其G C mol%含量为39.7。毒力测试发现巴氏杆菌具有较强的致病性,LD50=10-1.57/0.5 ml。化脓放线杆菌的分离和毒力表明,化脓放线杆菌也参与致病作用。由此推测本次致死野猪的病原体为多杀巴氏杆菌并发或继发猪瘟病毒、化脓放线杆菌的三重感染所致。纸片扩散法(K-B法)药敏试验表明,两株细菌对头孢哌酮、头孢唑啉、丁胺卡拉霉素等高度敏感,为临床治疗和有效预防该瘁死症奠定基础。     

CRISPR/Cas9技术特异杀伤癌细胞——癌症治疗新策略

<正>CRISPR/Cas9技术,主要用于基因编辑。最近发现,CRISPR/Cas9技术亦可用于特异性杀伤癌细胞。天然状态下,CRISPR/Cas9系统存在于细菌,其功能是识别并切割入侵病毒或噬菌体的DNA,由此导致病毒或噬菌体死亡。因此,对于细菌来说,CRISPR/Cas9是一种"基因剪刀"或"基因武器",是细菌重要的"免疫系统"。目前,CRISPR/Cas9系统一般用于对单基因或多基因的敲除或插入,以构建细胞或动物研究模型。     

疫苗设计：未来的可能性和潜力

最近对各种病原体,包括病毒、细菌和寄生虫的复制和构造都有了较深入的了解,这些发展开拓了设计新疫苗的思路,这些疫苗可能在将来成为主要的预防和治疗的工具,在质量上和应用范围上都有所改进。主要的策略有两个。一个涉及到发展合成疫苗,主要由能产生中和抗体的病原体选择性抗原决定簇所组成。另外的策略是应用嵌合体,就是用活细菌或病毒为载体,携带靶病原体相应抗原决定簇。现代免疫学知识以及对免疫抗原呈递系统的改进,在合理设计疫苗的过程中也将扮演主要角色。本文总结了生产疫苗的现代方法并且探讨了更合理设计疫苗的方法上的进展,这些必将深刻的影响未来疫苗的生产。     

柯萨奇病毒A组2型生物化学特性及免疫原性分析

柯萨奇病毒A组2型（Coxsackievirus A2,CV-A2）每年引起的手足口病病例数不断增加,甚至导致死亡病例[1]。因此,急需对CV-A2的生化特性及免疫原性进行分析,顺利研制出CV-A2的手足口病疫苗。通过细菌表达结构蛋白全长或部分片段的GST融合蛋白,纯化CV-A2病毒颗粒;将纯化的病毒颗粒免疫动物后制备兔抗CVA2 VP1-VP4抗体及CV-A2病毒抗血清,通过免疫印染法（Western Blot,WB）、SDS-PAGE电泳法对CsCl密度梯度纯化的CV-A2的空心颗粒（EP）与实心颗粒（FP）的蛋白组分、纯度、多聚蛋白酶剪切进行分析。WB和间接免疫荧光法证明了抗体具有良好的特异性。EP由VP0、VP1、VP3构成,而FP的VP0被剪切,故由VP1-VP4构成。EP和FP比例为33%和67%,密度分别为.29、1.32 g/cm3,纯度分别为94.7%和97.3%。中和试验结果显示,兔抗全病毒抗体具有中和作用,而兔抗CV-A2 VP1-VP4抗体不具有中和作用。本研究建立了CV-A2纯化病毒结构蛋白的分析方法,研究了重组病毒蛋白及病毒颗粒的免疫原性及持久性,对包括CV...     

在治疗用蛋白浓缩物中病毒的灭活/清除

<正>随着认识的提高,传染性病毒可以由人血浆及重组/单克隆抗体所制的静注生物制品引起传播,所以,更多的努力趋于除去或灭活这些病毒。对由人血浆提取的治疗用蛋白,包括用加热、化学灭活剂、紫外线照射、基本脂类溶剂抽提、特异抗体中和和用各种分离技术除去病毒,都做了研究。对除去病毒的方法的基本要求是有选择的灭活或去除传染因子,保护制品的生物活性。     

关于破伤风类毒素呼吸道免疫的研究——佐剂的作用

引言 近几年,人们对呼吸道免疫的兴趣越来越大。这一方面是因为用这样的方法很容易实现大量人群的接种,另一方面,希望局部免疫可以通过呼吸道分泌免疫球蛋白(IgA型抗体),由此产生一道保护性屏障,以阻止微生物进入。病毒疫苗方面的研究支持这一观点(Waldman等1968;Waldman,Mann和Small 1969;Perkins等1969)。就大多数研究而论,常用死的或减毒的干燥或液体的细菌和病毒疫苗,很少涉及类菌素。     

嗜麦芽假单胞菌hCG结合蛋白抗体制备及其特性研究

用纯化的嗜麦芽假单胞菌ｈＣＧ结合蛋白制备多克隆抗体,间接免疫沉淀实验证明,该抗体能识别细菌ｈＣＧ结合蛋白ｈＣＧ复合物;配体印迹分析及免疫印迹分析发现,该蛋白能与ｈＣＧ发生特异的结合,其结合位置与抗体识别一致,为７０ｋＤ蛋白带;同时,该抗体不能特异地抑制细菌ｈＣＧ结合蛋白、大鼠睾丸或卵巢组织细胞膜制剂与ｈＣＧ结合。     

立克次体病的检疫和诊断(续二)

<正> (三)血清学鉴别诊断 血清学是鉴别诊断细菌、病毒、立克次体等微生物及其疾病的重要力法。熟练而准确地运用血清学技术才能做出正确、可靠的实验诊断。应用于立克次体和立克次体病的血清学诊断方法很多,最常用的有:补体结合试验、立克次体凝集及外斐氏凝集试验、间接血凝和反相血凝及其抑制试验、中和试验等。近年来免疫萤光抗体染色、酶免疫吸附及细胞免疫试验也常被采用。本文着重立克次体学上最常用的几种方法做一介绍。 血清学诊断的基本原则:(1)是应用已知的某种病原体或抗原去测知未知抗体的存在和滴度,以确定系由何种病原体而感染。当人或动物被某种病原体感染后,常在患者     

用酶联免疫吸附法检测狂犬病病毒膜糖蛋白抗体

<正>当今的狂犬病疫苗刺激机体产生的是对病毒所有蛋白的抗体,而中和病毒的感染性是由于抗体对膜糖蛋白G引起的。虽然病毒中和抗体不是防止狂犬病的唯一因素,但是血清中和抗体的存在是主动免疫成功的可靠标志。WHO建议中和抗体需要在小白鼠或者细胞培养中测定,用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)是细胞培养测定中和抗体所选择的方法。检测整个病毒或提纯的G蛋白的ELISA在文献中已有叙述,以整个病毒为抗原的方法,除了检出G蛋白抗体外还检出其他蛋白的抗体,因此将导致对保护力的错误评价。由于经济的原因,检测G蛋白抗体的ELISA方法无法被广泛应用。因此,我们试图研究一种提纯G蛋白的简单而经济的程序。本文结果表明基于这种蛋白的ELISA方法检测中和抗体具有高度的敏感性和特异性。