Analysis of clonality in cytologic material using the polymerase chain reaction (PCR)

Analysis of clonality in cytologic material using the polymerase chain reaction (PCR) Immunoglobulin heavy chain (IgH) gene rearrangement analysis was performed on 27 fine needle aspiration (FNA) specimens (13 reactive hyperplasia, 11 B cell non-Hodgkin's lymphoma (B-NHL), one Hodgkin's disease and two suspicious of non-Hodgkin's lymphoma). Satisfactory amplification was achieved in 23/27 cases. A polyclonal pattern was seen in 14 cases (11 reactive hyperplasia, one B-NHL, one suspicious of lymphoma, one Hodgkin's disease). A monoclonal band was seen in nine cases (eight B-NHL, one reactive hyperplasia). Amplification was unsuccessful in four cases. Clonal analysis by PCR-based IgH gene rearrangement analysis can be successfully applied to FNA material and can be useful in diagnosis, but the results must be interpreted in conjunction with morphology and other ancillary information. Analyse de la clonalité en utilisant la PCR sur matériel cytologique L'analyse des réarrangements géniques des chaînes lourdes des immunoglobulines (IgH) a été réalisée sur 27 produits de ponction à l'aiguille fine (13 cas d'hyperplasie réactionnelle, 11 cas de lymphome non hodgkinien de type B (LNH-B), un cas de maladie de Hodgkin et deux cas suspects de lymphome malin non hodgkinien. Une amplification satisfaisante a été obtenue dans 23 cas sur 27. Un aspect polychonal a été observé dans 14 cas (11 hyperplasies réactionnelles, 1 lymphome malin non hodgkinien de type B, 1 cas suspect de lymphome, 1 cas de maladie de Hodgkin). Une bande monoclonale a été observée dans 9 cas (8 LNH-B, 1 hyperplasie réactionnelle). L'amplification n'a pas réussi dans quatre cas. L'analyse de la clonalité par analyse des réarrangements géniques par PCR peut être appliquée avec succès au matériel cytologique qui est obtenu par ponction à l'aiguille fine et elle peut être utile au plan diagnostique, mais les résultats doivent étre interprétés en intégrant les informations morphologiques et les autres données complémentaires. Polymerase Chain Reaction an zytologischem Material Die Analyse schwerer Immunglobulinketten (IgH) wurde an 27 FNP (13 reaktive Hyperplasien, 11 B-NHL, 1 Hodgkin und und zwie verdächtige Fälle) analysiert. Eine ausreichende Amplifikation wurde in 23/27 Fällen erzielt. Ein polyklonales Muster wurde in 14 Fällen beobachtet (11 reaktive Hyperplasien, 1 B-NHL, 1 Hodgkin sowie 1 verdächtiger Fall). Ein monoklonales Band wurde 9 mal gefunden (8 B-NHL, 1 reaktive Hyperplasie). Die Amplifikation war ungenügend in 4 Fällen. Die PCR-Analyse kann für die Diagnostik von Nutzen sein muss jedoch zusammen mit der Morphologie und anderen Informationen interpretiert werden.     

Cytohistological correlation as a measure of quality assurance of a cytology laboratory

Cytohistological correlation as a measure of quality assurance of a cytology laboratory In a hospital-based cytology screening programme for the early detection of preinvasive lesions of the uterine cervix, 166 women with abnormal smears (human papillomavirus (HPV) changes, cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and invasive carcinoma) were referred to the central colposcopy clinic between January 1989 and December 1991. The colposcopist (V.S.) was able to take a direct biopsy in 156 cases. In the remaining 10 cases, biopsy could not be taken because of unsatisfactory colposcopy. A cytohistological correlation was obtained in 121/156 (77.5%) cases, and the remaining 35 cases showed a disparity in diagnosis. These were reviewed by one of us (P.S.) and the reasons for underdiagnosis/false negatives and overdiagnosis/false-positive results were analysed. It was found that sampling error was the cause of false negativity and underdiagnosis in most cases, while interpretative errors resulted in the overdiagnosis and false-positive smears. The reasons for interpretative errors were studied in detail. Les corrélations cyto-histologiques comme mesure de l'assurance qualité dans un laboratoire de cytologie Dans le cadre d'un programme hospitalier de dépistage précoce des lésions précurseurs et des lésions invasives du col utérin, 166 femmes ayant un frottis anormal (lésions virales à HPV, CIN, carcinome infiltrant) ont été vues dans le service central de colposcopie entre janvier 1989 et décembre 1991. Dans 156 cas, le colposcopiste (VS) a pu réaliser une biopsie. Dans les 10 cas restants, la colposcopie n'était pas satisfaisante et la biopsie n'a pas été pratiquée. Une corrélation cyto-histologique a pu être établie dans 121 cas sur 156 (77, 5%) avec, dans 35 cas, constatation d'une discordance diagnostique. Ces cas ont été revus par l'un de nous (PS) et les raisons de cette sous-évaluation diagnostique/faux-négatifs et de surévaluation diagnostique/faux-positifs, ont été analysées. Cette analyse montre que le prélèvement est à l'origine des faux-négatifs et de la sous-évaluation diagnostique dans la majorité des cas, alors que l'erreur d'interprétation est responsable de la surévaluation diagnostique et des faux-positifs. Les sources d'erreur d'interprétation ont été étudiées dans le détail. Die Korrelation zwischen Zytologie und Histologie als Massnahme der Qualitatssicherung eines zytologischen Labors Im Rahmen des Screeningprogramms eines Krankenhauses wurden 166 Frauen mit auffälligen Befunden (HPV, CIN oder invasive Karzinome) zwischen Januar 1989 und Dezember 1991 einer zentralen Kolposkopieklinik überwiesen. Biopsien konnten in 156 Fällen gewonnen werden, während das kolposkopische Bild dies in 10 Fällen nicht rechtfertigte. Übereinstimmung zwischen Zytologie und Histologie wurde in 121/156 (77,5%) erzielt. Abweichungen ergaben sich in 35 Fällen, die genau analysiert wurden. Entnahmefehler verursachten die meisten falsch negativen und unterbewerteten Fälle, während falsch positive und zu hoch bewertete Fälle auf Interpretationsfehlern beruhten. Diese wurden genau studiert.     

Pneumocystis Carinii Pneumonia: Relationship Between Cyst Size and Response to Treatment

Pneumocystis carinii pneumonia is a common cause of death in patients with AIDS. Diagnosis is based on cytological examination of smears prepared from induced sputum samples and bronchoalveolar lavage (BAL) specimens which have been stained with methenamine silver. We have examined 46 BAL/induced sputum specimens from patients who had clinical symptoms and signs suggestive of P. carinii pneumonia and measured the diameter of a minimum 100 cysts in each specimen. We found that cyst size correlated with response to treatment with co-trimoxazole. This observation has implications for the therapeutic management of patients with this infection. La pneumopathie áPneumocystis carinii est une cause de décès fréquente chez les patients atteints d'un syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA). Le diagnostic est basé sur l'examen cytologique des frottis préparés à partir du produit d'expectoration provoquée ou du liquide de lavage bronchoalvéolaire (LBA), après coloration de Grocott. Le diamètre d'au moins 100 kystes par échantillon a été mesuré dans 46 prélèvements de LBA/expectoration provoquée de patients présentant des signes cliniques suggérant une pneumopathie àPneumocystis carinii. Nous avons constaté que le diamètre des kystes est corrélé avec la réponse au traitment par co-trimoxazole, Cette observation a des implications sur la conduite du traitement des patients porteurs de cette infection. PCP ist eine häufige Todesursache bei HIV-Patienten. Die diagnose beruht auf dem cytologischen Nachweis in induzierten Sputumausstrichen oder bronchio-lo-alveolären Lavagen mit der Grokott-Färbung. In 46 positiven Fällen wurde der Durchmesser von mindestens 100 Cysten in jeder Probe gemessen und eine Korrelation zum Behandlungserfolg mit Co-Trimoxazol nachgewiesen.     

CONSÉQUENCE DE LA VARIATION DES EFFECTIFS DES FEMELLES DE DINARMUS VAGABUNDUS,SUR LE PARASITISME DE L'UN DE LEURS HÔTES CALLOSOBRUCHUS MACULATUS

Lorsque 2 femelles ou 3 femelles de l'ectoparasite D. vagabundus parasitent conjointement un même lot d'hôtes l'intensité du grégarisme larvaire s'accroît par rapport à celui observé en présence d'une seule femelle pondeuse. Cela se traduit par une augmentation significative du nombre moyen de descendants des 2 sexes mais la production moyenne en fils est toujours très inférieure à celle des filles. Cependant, lorsque la densité de femelles pondeuses passe de 1 à 3, le rapport des sexes mâles/femelles des descendants évolue vers l'unité traduisant une augmentation plus rapide de l'effectif des fils que des filles.     

An evaluation of ‘rapid review’ as a method of quality control of cervical smears using the AxioHOME microscope

An evaluation of ‘rapid review’ as a method of quality control of cervical smears using the AxioHOME miscroscope One method of quality control which has recently been recommended by professional bodies in the UK is the ‘rapid review’ method. This involves the microscopic 30 s review of all negative cervical smears with the intention of flagging potential missed abnormalities. Although it has been suggested that rapid review is better than 10% random rescreening of negative smears, the efficiency and efficacy of this method of quality control have not been thoroughly evaluated. We have used the AxioHOME system, which can record the area of a slide covered and the screening time, to investigate slide coverage during rapid review quality control, as performed by 15 cytoscreeners and MLSOs reviewing a test set of 22 slides each. The test set comprised 18 negative slides, three positive slides, and one unsatisfactory slide. We have recorded two distinct methods of rapid review in use amongst cytotechnologists, the step method and the whole slide method. The data show that rapid review takes longer on average than the recommended 30 s, the mean screening times being 76 s and 82 s for the step and whole slide methods, respectively. Abnormal smears were missed on three of 15 occasions by the step method (sensitivity 80%, positive predictive value 85%), and on seven of 30 occasions by the whole slide method (sensitivity 76.6%, positive predictive value 45%). However, the 95% confidence intervals were wide (57.7–90.7% for the step method, and 51.9–95.7% for the whole slide method). Analysis of scanning tracks and screening rates shows significant flaws in the methodology of rapid review. Abnormal cells were not identified, although dyskaryotic cells were included in the scanning track on nine occasions, seven using the whole slide method and two using the step method. On one occasion (using the step method) abnormal cells were not identified because they were not included in the scanning track. Further research is in progress to determine optimal methods of rapid review, and whether the rapid review technique is as effective as automated screening systems for quality assurance in cytology. Evaluation de la technique de ‘Relecture Rapide’ comme méthode de contrôle de qualité des frottis cervico-utérins, à l'aide du microscope AxioHOME Une des méthodes de contrôle de qualité récemment recommandée par le corps professionnel du Royaume Uni est la méthode dite de ‘relecture rapide’. Cette méthode consiste en une deuxième lecture d'une durée de trente secondes de tous les frottis cervicaux négatifs et dont l'objectif est de détecter les anomalies ayant pu échapper au premier examen. Bien qu'il ait été suggéré que cette méthode de relecture rapide soit meilleure que la relecture de 10% des frottis négatifs tirés au sort, le rendement et l'efficacité de cette méthode de contrôle de qualité n'ont pas été évalués complètement. Nous avons utilisé le système AxioHOME capable d'enregistrer la plage de la lame qui a été explorée ainsi que le temps de lecture afin d'étudier la surface explorée au cours de cette relecture rapide telle qu'elle a pu être pratiquée par quinze cytotechniciens et MLSOs, chacun ayant relu une série test de vingt deux lames. Cette série test comprenait dix huit lames négatives, trois lames positives et un frottis non satisfaisant. Nous avons noté que les cytotechniciens utilisaient deux méthodes de relecture rapide différentes, la méthode ‘pas à pas’ et la méthode ‘globale’. Les données montrent que la relecture rapide prend, en moyenne, un temps supérieur aux trente secondes recommandées, la moyenne des temps de lecture étant de 76 secondes et de 82 secondes respectivement pour la méthode ‘pas à pas’ et la méthode ‘globale’. Les anomalies n'ont pas été détectées dans trois cas sur quinze par la méthode ‘pas à pas’ (sensibilité 80%, valeur prédictive positive 85%), et dans 7 cas sur 30 par la méthode globale (sensibilité 76,6%, valeur prédictive positive 45%). Toutefois, l'intervalle de confiance à 95% est important (57,7%-90,7% pour la méthode ‘pas à pas’ et 51,9%-95,7% pour la méthode globale). L'analyse des surfaces balayées et des taux de détection montre des points faibles significatifs de cette méthodologie de relecture rapide. Dans 9 cas, les anomalies n'ont pas été identifiées alors que des cellules dyskaryotiques étaient présentes dans les plages balayées au cours de la relecture (sept utilisant la méthode globale et deux utilisant la méthode ‘pas à pas’). Dans un cas (avec la méthode ‘pas à pas’) les cellules anormales n'ont pas été identifiées parce qu'elles étaient absentes des plages de relecture. Des études sont en cours afin de déterminer quelles sont les méthodes optimales de relecture rapide et si ces techniques de relecture rapide sont aussi efficaces que les systèmes de lecture automatisée pour l'assurance de qualité en cytologie cervico-utérine. ‘Rapid Review’ als Methode der Qualitätskontrolle gynäkologischer Abstriche, Überprüfung mit dem AxioHOME-Mikroskop Die empfohlene ‘Rapid Review’ Kontrolle aller negativen Abstriche in nur 30 Sekunden anstelle des Nachscreenens von 10% der Präparate ist in ihrer Zuverlässigkeit bislang nicht überprüft worden. Mit Hilfe des AxioHOME-Mikroskops ist es möglich sowohl die ausgewertete Fläche, als auch die erforderliche Zeit zu erfassen. 15 Auswerter prüften mit der Methode jeweils einen Testsatz von 22 Präparaten. Er enhielt 18 negative, 3 positive und 1 nichtauswertbaren Abstrich. Getestet wurden zwei verschiedene Vorgehensweisen: die schrittweise und die das ganze Präparat erfassende. Beide erfordern mehr Zeit als 30 Sekunden; der mittlere Zeitaufwand betrug für die Schrittmethode 76 und für die Ganzheitsmethode 82 Sekunden. Die Schrittmethode verfehlte 3/15 Anomalien (Sensitivität 80%, positiver prädiktiver Wert 85%), die Ganzheitsmethode 7/30 (Sensitivität 76,6%, positiver prädiktiver Wert 45%). Der 95% Konfi denzbereich reichte für die Schrittmethode von 57,5–90,7% und für die Ganzheitsmethode von 51,9–95,7%). Die Analyse deckt wesentliche Schwachstellen des Rapid Review-Verfahrens auf. In 9 Fällen lagen nicht erkannte Zellatypien in den kontroll ierten Bahnen (7 bei des Schrittmethode, 2 bei der Ganzheitsmethode). Einmal lagen sie bei der Schrittmethode ausserhalb der geprüften Bahnen. Weitere Studien werden prüfen ab das Rapid Review-Verfahren automatisierten Systemen vergleichbar ist.     

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S. Matsui 816 Cet article développe des méthodes d'analyse stratifiée d'effets additifs ou multiplicatifs sur des critères binaires, dans le cadre d'essais randomisés avec défaut d'observance. Ces méthodes reposent sur une fonction d'estimation pondérée, garantissant une fonction d'estimation non biaisée à condition que la randomisation soit réalisée par strate. Quand les poids sont connus d'avance, l'estimateur obtenu est une extension naturelle de celui issu de la méthode d'estimation par variable instrumentale pour analyses stratifiées, et les bornes des intervalles de confiance dérivés des tests sont les solutions d'une équation quadratique du paramètre d'intérêt. Les poids optimaux qui maximisent l'efficacité asymptotique intègrent la variabilité inter‐strates de l'observance. Une évaluation basée sur l'efficacité asymptotique relative montre que l'efficacité peut être substantiellement améliorée en utilisant les poids optimaux plutôt que les poids conventionnels, lesquels n'intègrent pas la variabilité inter‐strates de l'observance. Enfin, ces méthodes d'analyse sont appliquées à une étude portant sur la maladie cardiaque coronarienne. L. Li , J. Shao , and M. Palta 824 Une erreur de mesure sur une covariable dans une régression est typiquement considérée pour agir d'une manière additive ou multiplicative sur la valeur de la vraie covariable. Cependant, une telle hypothèse ne tiens pas pour l'erreur de mesure sur la respiration dans les troubles du sommeil (SDB) dans l'étude de la Wisconsin Sleep Cohort Study (WSCS). La vraie covariable dans la sévérité de SDB, et le substitut observé est le nombre de pauses respiratoires par unité de temps de sommeil, qui a une distribution semi continue non négative. Avec une point masse de zéro. Nous proposons un modèle d'erreur de mesure à variable latente pour la structure d'erreur dans cette situation et l'implémentons dans un modèle linéaire mixte. La procédure d'estimation est similaire à une calibration dans une régression mais met en jeu une hypothèse sur la distribution de la variable latente. Les stratégies de modélisation et d'ajustement sont explorées et illustrées au travers de l'exemple du WSCS. J. P. Buonaccorsi , P. Laake , and M. B. Veierød 831 Cette note vise à clarifier les conditions sous lesquelles une analyse naïve impliquant un prédicteur entaché d'erreurs de classification induira un biais sur les coefficients de régression associés aux autres prédicteurs du modèle, prédicteurs dont on suppose qu'ils sont, pour leur part, parfaitement mesurés. Nous levons ici une incohérence apparente entre de précédents résultats et un résultat lié aux erreurs de mesure d'une variable continue dans une régression linéaire. Nous montrons que, de la même façon qu'une erreur portant sur une variable continue, une erreur de classification (même si elle n'est pas liée aux autres prédicteurs) induit un biais dans l'estimation des coefficients associés aux prédicteurs mesurés sans erreur, à moins que la variable entachée d'erreurs et les autres prédicteurs ne soient indépendants. Les biais conditionnels et asymptotiques sont discutés dans le cadre de la régression linéaire et explorés numériquement à travers l'exemple de la relation entre, d'une part, le poids à la naissance, et, d'autre part, le poids de la mère et le fait qu'elle fume ou non. J. Roy and X. Lin 837 Nous abordons les problèmes d'estimation dans les modèles linéaires généralisés pour données longitudinales avec sorites d'étude informative. Lorsqu'un individu sort de l'étude, non seulement la valeur de la variable réponse est manquante, mais souvent les valeurs de certaines covariables sont elles aussi non‐observées. Cependant, les modèles existants pour sortie d'étude informative supposent que les covariables soient complètement observées. Cette condition n'est pas réaliste en présence de covariables variant au cours du temps. Tout d'abord, nous étudions le biais asymptotique résultant de l'application des méthodes existantes, où les covariables temporelles manquantes sont gérées de manière naïve, c'est‐à‐dire (1) en utilisant seulement la valeur de base (“baseline”); (2) en reportant les valeurs de la dernière date d'observation, ou (3) en supposant qu'on peut ignorer les valeurs manquantes. Notre analyse de biais asymptotique montre que ces approches naïves produisent des estimateurs non consistants des paramètres. Dans un deuxième temps, nous proposons un modèle de sélection/transition qui autorise des sorties d'études avec valeurs manquantes, aussi bien sur les covariables explicatives que sur la variable réponse. Nous utilisons l'algorithme EM pour l'inférence de ce modèle. Nous illustrons la méthode proposée sur les données d'une étude longitudinale concernant des femmes infectées par le VIH. B. I. Graubard and T. R. Fears 847 Le risque attribuable ajusté (RA) est la proportion d'individus malades dans une population sujette à une exposition. Nous envisageons des estimations pour le RA ajusté basés sur les rapports de chance (odds ratios) à partir de régression logistique pour ajuster sur les effets confondus. Des méthodes de fonction d'influence utilisées en échantillonnage d'enquêtes sont appliquées pour obtenir des expressions simples et facilement programmables pour estimer la variance de^RA. Ces estimateurs de variance peuvent être appliqués à des données d'études de cas‐témoins, transversales et de cohortes avec ou sans appariement fréquentiel ou individuel et à des dispositifs échantillonnés qui vont de simples échantillons aléatoires à des échantillons groupés, stratifiés en plusieurs étapes et pondérés (par échantillonnage) du type de ceux utilisés dans les enquêtes nationales sur les ménages. L'estimation de la variance de^RA est illustrée au moyen de: (i) une étude transversale avec groupement en plusieurs étapes avec stratification pondérée issue de la troisième enquête nationale de santé et d'examens sur l'asthme de l'enfance, et (ii) une étude de cas‐témoins avec appariement fréquentiel dans le mélanome cutané malin.     

The Immunocytochemical Detection of P53 Protein In Cytological Specimens: Technical Considerations

The p53 gene encodes a 393 amino acid nuclear phosphoprotein that appears to act as a cell cycle checkpoint, possibly by transactivating other target genes. Abnormalities of the p53 gene are common in a wide range of human tumours and are associated in many cases with immunologically detectable p53 protein. Detection of p53 immunoreactivity is uncommon in normal cells, but is frequently seen in neoplasia. Here we define the optimum conditions for the detection of p53 immunoreactivity in cytological material, including fixation and storage. Immersion in acetone-methanol for 10 min is optimal, and after air drying, smears or cytospin preparations can be stored at - 70°C for at least 6 months. We describe the range of controls necessary, including the use of positive control cell lines with known mutations of the p53 gene and defined abnormalities of p53 protein. Negative controls should include cell lines (or strains) with no p53 abnormality as well as the conventional negative immunological controls. It is only with these technical caveats and controls that p53 immunoreactivity can be performed reliably on cytological specimens. Le géne p53 code pour une phosphoprotéine nucléaire de 393 acides aminés qui semble jouer en rôle dans la régulation du cycle cellulaire, probablement par transactivation d'autres gènes cibles. Les anomalies du gène p53 sont présentes dans un large éventail de tumeurs humaines et sont associées a la présence d'une protéine p53 détectable immunologiquement. La détection d'une immunoréactivité anti p53 est rare dans les cellules normales alors qu'elle est fréquente dans les tumeurs. Nous avons défini dans ce travail les conditions optimales pour la détection de l'immunoréactivité anti p53 sur matériel cytologique, y compris les conditions de fixation et de conservation. L'immersion dans l'acétone-méthanol pendant 10 minutes est optimale. Aprés séchage à l'air, les frottis ou les préparations par cytocentrifugation peuvent être stockés à—70°C pendant au moins 6 mois. Nous décrivons aussi l'éventail des contrôles nécessaires incluant I'utilisation, comme contrôle positif, de lignées cellulaires avec des mutations connues du gène p53 et des anomalies définies de la protéine p53. Les contrôles négatifs doivent comporter des lignées cellulaires (ou des espèces) sans anomalie de p53 ainsi que les contrôles immunologiques négatifs convrentionnels. C'est seulement lorsque ces précautions techniques et ces contrôles sont respectés que l'immunoréactivité anti p53 peut être étudiée valablement sur les prélèvements cytologiques. Das p53 kodiert ein aus 393 Aminosären bestehendes Phosphoprotein, das offensichtlich den Zellzyklus blockiert, möglicherweise durch Aktivierung anderer Gene. Veränderungen des p53-Gens wurden in zahlreichen menschlischen Tumoren nachgewiesen, sodaß eine positive Reaktion in Neoplasien häufig, in Normalzellen jedoch ungewöhnlich ist. Die optimalen Bedingungen für den p53-Nachweis in cytologischem Material werden hinsichtlich Fixation und Lagerung untersucht. Eine 10minütige Aceton-Methanol-Fixierung mit anschlies-sender Lufttrocknung erlaubt die Lagerung von Ausstrichen und Cytozentrifugen-präparaten bei - 70°C für mindestens 6 Monate. Die erforderlichen Kontrollen einschließlich positiver Zellinien mit bekannten Mutationen des p53-Gens und definierten Anomalien des Proteins werden beschrieben. Negativkontrollen sollten Zellinien ohne p53-Anomalie ebenso umfassen wie die üblichen negativen immunologischen Kontrollen. Nur unter diesen Bedingungen ist ein zuverlässiger Nachweis von p53 mögloch.     

READER REACTION

R. M. Fewster , J. L. Laake , and S. T. Buckland 856 Melville et Welsh (2001, Biometrics 57, 1130–1137) considèrent une approche de l'échantillonnage d'un transect en ligne en employant une étude de calibration séparée pour estimer la fonction de détection g. Ils présentent une étude de simulation opposant leurs résultats à ceux bien piètres d'un estimateur traditionnel, appelé l'estimateur “Buckland” et référencé dans Buckland et al. (1993, London, Chapman and Hall). Les résultats médiocres de l'estimateur “Buckland” peuvent être expliqués par : (i) l'estimateur est prévu pour des données de distance non tronquées, mais appliqué par Melville et Welsh à des données de distance tronquées ; (ii) les données de distance n'étaient pas fusionnées le long des transects, à l'opposé des pratiques courantes ; (iii) le biais de l'estimateur était évalué par rapport à une grille fixe plutôt que randomisée des lignes de transects. Nous examinons en détail les points précédents et nous montrons que les méthodes traditionnelles marchent bien lorsqu'on les applique correctement. Nous mettons aussi l'accent sur le fait que ce que Melville et Welsh appellent estimateur “Buckland” n'est pas un estimateur recommandé par Buckland et al. pour les applications pratiques d'échantillonnage. R. V. Gueorguieva 862 Souvent dans des études longitudinales ou dans des analyses de classification on observe simultanément des variables à réponse binaires et des variables continues qui doivent être modélisées conjointement. Dans une publication récente Dunson, Chen et Harry, 2003 (DCH) proposent une approche bayésienne pour modéliser en commun les résultats binaires et les résultats continus ; ils illustrent cette approche avec un exemple sur des données de toxicité. Dans cette note nous démontrons comment un logiciel standard (PROC NLMIXED dans SAS) peut être employé pour obtenir des estimations du maximum de vraisemblance d'un modèle dont le paramétrage est une alternative à celui utilisé par DCH pour cet exemple. Nous suggérons également qu'un modèle plus général avec les effets aléatoires additionnel ajuste mieux les données. Une anomalie apparente entre les estimations obtenues par DCH et les estimations obtenues plus tôt par Catalano et Ryan en 1992 est également résolu. La question du biais concernant l'effet dose est discutée. L'approche du maximum de vraisemblance est applicable aux situations générales avec des résultats de différents types et n'exige ni spécification à priori ni programmation supplémentaire. S. Pledger 868 Dorazio et Royle (2003, Biometrics 59, 351–364) ont étudié le comportement de trois modèles de mélange pour l'analyse des données de capture‐recapture en population fermée, en présence d'une hétérogénéité de capture entre individus. Leurs simulations provenaient d'une distribution béta‐binomiale, et leurs analyses étaient faites à partir des modèles béta‐binomial, logit‐normal, ou de mélange fini (à classes latentes). Dans cette réponse, des simulations à partir de distributions nombreuses et variées permettent d'avoir une vision plus large de la valeur relative de la distribution béta‐binomiale et des modèles de mélange fini, et donnent un premier aperçu des situations dans lesquelles ces modèles sont utiles.     

RÔLE DE L'EAU DE BOISSON SUR LA PRISE DE NOURRITURE SÈCHE ET LE DÉVELOPPEMENT OVARIEN DE LOCUSTA MIGRATORIA MIGRATORIOIDES

Pour déterminer la ration minimale d'eau nécessaire à la survie de Locusta migratoria migratorioides (R. et F.) adulte et les repercussions d'un stress hydrique prolongé sur le fonctionnement ovarien, nous avons séparé le facteur eau du facteur aliment en élevant les criquets de l'éclosion à l'âge adulte avec des germinations de blé lyophilisé, selon une technique décrite par Louveaux et al. (1980). Il est montré que la quantité d'aliments ingérée augmente avec la quantité d'eau bue (r = 0,91). La relation linéaire déterminée permet inversement, connaissant les quantités d'aliments ingérés, d'évaluer à 300 μl la ration quotidienne d'un criquet ayant un accès non limité à l'eau de boisson. Les femelles qui n'ont reçu que 50 μl d'eau par jour (j.) sont mortes avant le 9ème jour de traitement. La survie est assurée à partir de 100 μl/j. L'avancement de la vitellogenèse est également en relation avec la quantité d'eau absorbée quotidiennement. Aucun développement ovarien ne se produit jusqu'à 100 μl/j. Une vitellogenèse ralentie commence à partir de 150 μl/j. et elle devient normale à 300 μl/j. avec des pontes comparables à celles des témoins nourris de blé frais.     

Ultrastructure de Quelques Stades de la Microsporidie Octosporea muscaedomesticae Flu, Parasite de Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptère, Trypetidae)

La présence de diplocaryons à tous les stades de la sporulation d'Octosporea muscaedomesticae Flu, 1911 est mise en évidence ainsi qu'une membrane pansporoblastique autour des sporoblastes en développement et des spores. Le problème présenté par ces 2 faits est discuté. Une évolution étrange des ribosomes périnucléaires et démontrée. Une telle étude ultrastructurale est nécessaire et intéressante car O. muscaedomesticae est l'espèce-type du genre Octosporea.     

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S. E. Wright and A. J. Bailer 886 Une expérience avec expositions intermittentes de toxicologie expérimentale fournit l'arrière plan de la discussion du dispositif. Le problème sous‐jacent est de décider quand échantillonner une réponse non linéaire pour minimiser la variance généralisée des estimations des paramètres. Une stratégie heuristique commode peut être appliquée au problème fournissant des dispositifs optimaux ou presque optimaux. L'efficacité de l'approche heuristique permet une exploration directe de la sensibilité de la solution proposée aux particularités de la situation telle que l'hétéroscédasticité, la densité des dates d'observation, les critères du dispositif, et les contraintes sur les valeurs des paramètres. On présente aussi brièvement une application de l'optimisation de dispositif pour le choix des doses dans une expérience de toxicologie de la reproduction. D. V. Mehrotra , X. Li , and P. B. Gilbert 893 Afin de justifier le plan de la première étude au monde visant une démonstration de principe (proof‐of‐concept ou POC) de l'efficacité d'un vaccin HIV basé sur l'immunité et relayé par la cellule, nous évaluons huit méthodes pour tester l'hypothèse nulle composite d'absence d'effet du vaccin soit sur l'incidence d'infection HIV, soit la valeur de la charge virale chez les patients infectés, en comparaison au placebo. Les deux premières méthodes utilisent un seul test appliqué aux valeurs mesurées ou aux rangs du poids de la maladie (BOI) qui combine l'infection et la charge virale. Les six autres méthodes combinent des tests séparés pour les deux critères utilisant des versions pondérées ou non du Z à 2 parties, des méthodes de Simes et de Fisher. A partir de simulations extensives réalisées pour construire l'essai POC type, les méthodes BOI révèlent en général une puissance faible de rejeter l'hypothèse nulle composite (et donc d'entreprendre un futur essai à grande échelle pour le vaccin). Les méthodes par combinaison de Simes et de Fisher non pondérées ont les meilleures performances dans l'ensemble. Un aspect important est que la conclusion est la même si le test de la composante relative à la charge virale est ajusté pour le biais que peut introduire le conditionnement par un événement (l'infection HIV) survenant après la randomisation. Cet ajustement est obtenu en utilisant un modèle de biais de sélection basé sur le cadre de la stratification principale de l'inférence causale. X. Huang , J. N. Cormier , and P. W. T. Pisters 901 Dans le traitement du cancer, les patients reçoivent habituellement une variété de traitements séquentiels. Les traitements initiaux administrés à la suite du diagnostic peuvent varier, comme les régimes de rattrapage suivants donnés après la rechute de la maladie. Cet article considère la situation où ni les traitements initiaux, ni les traitements de rattrapage sont randomisés. En faisant l'hypothèse qu'il n'y a pas de variables de confusion non mesurés, nous estimons les effets causaux conjoints sur la survie des traitements initiaux et de rattrapage, c'est‐à‐dire, les effets des séquences de traitement à deux niveaux. Pour chaque séquence de traitement individuelle, nous estimons la fonction de la distribution de survie et la durée de moyenne de survie restreinte. Les différentes séquences de traitement sont alors comparées en utilisant ces estimations et leurs covariances correspondantes. Des études de simulation sont conduites pour évaluer la performance des méthodes en incluant la sensibilitéà la violation de l'hypothèse de facteurs de confusion non mesurés. Les méthodes sont illustrées par une étude rétrospective de patients ayant un sarcome des parties molles, qui avait motivé cette recherche. D. E. Schaubel , R. A. Wolfe , and F. K. Port 910 L'analyse de la survie est souvent utilisée pour comparer des traitements expérimentaux et conventionnels. Dans les études observationnelles, la thérapie peut changer pendant le suivie. De telles modifications peuvent se résumer par des covariables dépendantes du temps. Étant donné la pénurie croissante de donneurs d'organes, des reins à plus haut risque provenant de donneurs à critères élargis (ECD) sont de plus en plus transplantés. Les candidats à la transplantation peuvent choisir d'accepter un organe ECD (thérapie expérimentale), ou de rester en dialyse et d'attendre la possibilité d'une transplantation non‐ECD ultérieure (thérapie conventionnelle). Une analyse dépendante du temps en trois groupes pour ce type de données implique l'estimation de paramètres correspondants aux deux covariables indicatrices dépendantes du temps représentant les transplantations ECD ou non‐ECD, chacune étant comparée à ceux qui restent en dialyse en liste d'attente. Cependant, l'estimation du hasard ratio ECD par cette analyse dépendante du temps ne considère pas le fait que les patients renonçant à une transplantation ECD ne sont pas destinés à rester en dialyse pour toujours, mais peuvent plus tard recevoir une transplantation non‐ECD. Nous proposons une nouvelle méthode d'estimation du bénéfice de la survie de la transplantation ECD relative à la thérapie conventionnelle (liste d'attente avec la possibilité d'une transplantation non‐ECD ultérieure). Comparée à cette méthode dépendante du temps, la méthode proposée caractérise de manière plus précise la structure des données et produit une estimation plus directe du bénéfice relative à une transplantation ECD. I. Ninan , O. Arancio , and D. Rabinowitz 918 L'émission de neurotransmetteurs par les neurones peut être étudiée par des mesures d'intensité de coloration des terminaisons synaptiques. Le problème est alors d'estimer une espérance dans une situation où, au lieu d'observer des variables aléatoires indépendantes de même espérance, on observe, avec erreur, des sommes aléatoires indépendantes de variables de même espérance sans connaître le nombre de termes de la sommation aléatoire. On présente ici une approche non paramétrique de ce problème d'estimation. La méthode est illustrée sur les données d'une expérience dans laquelle le colorant cationique styrylpyridinium FM4‐64 a été utilisé sur des cultures de neurones de l'hippocampe murin. B. Klingenberg and A. Agresti 921 Cet article considère des test globaux de différence entre vecteurs appariés de distributions binomiales provenant de 2 échantillons de données binaires multivariées dépendantes. La différence est définie, soit comme une non homogénéité des distributions marginales, soit comme une asymétrie de la distribution jointe. Pour détecter le premier type de différence, nous proposons une extension multivariée du test de McNemar et montrons que c'est un test du score généralisé sous une approche GEE. Des caractéristiques univariées, telles que la relation entre le test de Wald et le test du score, ou l'abandon de paires avec la même réponse s'étendent au cas multivarié et le test ne dépend pas de l'hypothèse de travail de la dépendance entre les composantes de la réponse multivariée. Pour des données éparses ou non équilibrées, comme cela arrive quand le nombre de variables est grand ou les proportions proches de zéro, le test est mis en oeuvre en utilisant le bootstrap, ou si c'est trop compliqué au point de vue calculatoire par une distribution de permutation. Nous appliquons le test à des données de toxicité pour un médicament, dans lequel 2 doses sont évaluées en comparant les réponses multiples des mêmes sujets à chacune d'entre elles.     

CARACTÉRISTIQUES DE LA REPRODUCTION DE MACHAERIDIA BILINEATA DANS UNE SAVANE DE CÔTE D'IVOIRE

A partir de dissections systématiques de femelles capturées sur le terrain, une étude des caractéristiques de la reproduction de Machaeridia bilineata Stål a été réalisée dans les savanes de Lamto (Côte d'Ivoire), complétée par quelques données en provenance de Ouango-Fitini. Cet acridien univoltin, une des espèces dominantes de Lamto, passe la saison sèche au stade d'imago immature. Le dépôt du vitellus commence dans les ovocytes vers la mi-février, soit près de 2 mois après les mues. Au cours de sa vie, une femelle ne pond en moyenne qu'une fois et demi à deux fois, mais avec un taux de réussite de 95%. Chaque femelle produit alors de 15 à 20 ?ufs. Une des caractéristiques de cette espèce est la rétention des ovocytes dans les calices avant la ponte. A Ouango-Fitini, les phénomènes sont décalés de 5 à 6 semaines par rapport à Lamto. Il n'y a pas de lien entre le début de la maturation sexuelle et le passage des feux. Pour la période d'étude, il existe une relation avec l'arrivée des premières pluies, mais les limites de ce synchronisme restent à préciser.     

CONSÉQUENCES DE L'ALIMENTATION ARTIFICIELLE SUR LE DÉVELOPPEMENT LARVAIRE DE LA TEIGNE DU POIREAU,ACROLEPIOPSIS ASSECTELLA

L'importance des pressions de sélection au cours des premières générations, dans des élevages en alimentation artificielle, est mise en évidence par l'étude de souches d 'Acrolepiopsis assectella Zeller soumises à des changements de régime alimentaire. l'évolution du taux de survie et de la durée du développement des larves a été suivie pendant les premières générations après le changement, et ultérieurement contrôlée au cours de plusieurs années d'élevage dans les mêmes conditions. Le taux de survie semble atteindre assez rapidement un équilibre, dont le niveau n'est pas indépendant de l'aliment consommé, tandis qu la durée du développement larvaire devient identique pour toutes les souches dès la quatrième génération. Ces phénomènes semblent correspondre à une adaptation des insectes à leurs conditions d'élevage, qui provoquent une sélection dans les populations d'origine.     

CONSULTANT'S FORUM

R. A. Betensky , C. K. Christian , M. L. Gustafson , J. Daley , and M. J. Zinner 598 Le Groupe Leapfrog, un consortium de plus de 100 grands employeurs, qui déclare fournir collectivement l'assurance santéà plus de 33 millions de personnes, s'est réuni en 2000 dans le but d'utiliser les ressources du marché pour améliorer la qualité des soins de santé. Le résultat de l'initiative du groupe Leapfrog suggère la référence sélective des procédures complexes aux hôpitaux d'activitéélevée et détermine des seuils d'activité d'ensemble pour cinq procédures. Ceci a été basé sur l'hypothèse que les hôpitaux à faible volume d'activité présentent une mortalité plus élevée, ce qui peut être perçu comme l'hypothèse, en termes statistiques simplifiés, que le paramètre p de la binomiale est une fonction décroissante de n. L'analyse de la corrélation entre les rapports normalisés de la mortalité des hôpitaux (SMR, ie, le rapport de décès observés par rapport aux décès prévus) et les volumes d'activité des hôpitaux est révélatrice au sujet de l'hypothèse volume/mortalité. Cela présente un exemple pédagogique peu commun dans lequel la détection de la corrélation en présence de la dépendance non linéaire est d'intérêt primaire, alors que la corrélation au sens de Pearson est parfaitement adaptée. Les mesures non paramétriques fréquemment utilisées de l'association bivariée sont inadéquates, car elles ne peuvent pas faire de distinction entre la notion de corrélation et la notion de dépendance. T. A. Alonzo and J. M. Kittelson 605 La précision (sensitivité et spécificité) d'un nouveau test de dépistage peut être comparéà celui d'un test standard en appliquant les deux tests à un groupe de sujets pour lesquels le statut vis‐à‐vis de la maladie peut être déterminé par un « gold standard » (GS). Cependant, il n'est pas toujours possible d'utiliser le GS pour tous les sujets de l'étude. Par exemple, une étude est planifiée pour évaluer si le nouveau test de dépistage des cancers cervicaux (« ThinPrep ») est meilleur que le test standard (« Pap »), et dans ce cas, il n'est pas faisable (ou éthique) de déterminer le statut vis‐à‐vis de la maladie en réalisant une biopsie, dans le but d'identifier des femmes avec ou sans pathologie pour participer à l'étude. Quand le statut vis‐à‐vis de la maladie ne peut être connu pour tous les sujets de l'étude, la précision relative de deux tests de dépistage peut toujours être estimée en utilisant un schéma de dépistage positif apparié (PSP), dans lequel tous les sujets reçoivent les deux test de dépistage, mais n'ont le GS que si l'un des deux tests de dépistage est positif. Malheureusement, dans l'exemple des cancers cervicaux, le protocole PSP n'est pas non plus praticable puisqu'il n'est techniquement pas possible d'administrer et le ThinPrep et le Pap au même moment. Dans ce papier, nous évaluons un schéma de dépistage positif apparié randomisé (RPSP), dans lequel les sujets sont randomisés pour recevoir dans un premier temps un des deux tests de dépistage, et ils reçoivent l'autre test et le GS seulement si le premier test de dépistage est positif. Nous calculons les estimations du maximum de vraisemblance et les intervalles de confiance de la précision relative des deux tests de dépistage, et évaluons le comportement de ces estimations, sur petit échantillon, par des études de simulations. Des formules de calcul du nombre de sujets nécessaires sont appliquées à l'exemple d'essai de dépistage du cancer cervical, et l'efficacité du schéma DAPR est comparé avec d'autres schémas. G. Qin and X.‐H. Zhou 613 Pour un test diagnostic sur une échelle continué, l'indicateur le plus communément utilisé pour résumer la courbe ROC est l'aire sous la courbe (AUC) pour refléter la justesse de ce test diagnostic. Dans cet article, nous proposons une approche de vraisemblance empirique pour l'inférence sur l'AUC. Nous définissons tout d'abord un rapport de vraisemblance empirique pour l'AUC et nous montrons que sa distribution limite est un khi‐deux ajusté. Nous obtenons alors un intervalle de confiance pour l'AUC basé sur la vraisemblance empirique en utilisant la distribution du khi‐deux ajusté. Cette inférence par vraisemblance empirique pour l'AUC peut être étendue à des échantillons stratifiés, la distribution limite qui en résulte est alors une somme pondérée de khi‐deux indépendants. De plus nous avons réalisé des simulations pour comparer la performance relative de l'intervalle obtenu par l'approche de vraisemblance empirique par rapport aux intervalles obtenus avec l'approximation normale et par rééchantillonnage de type ?bootstrap?.     

DISCUSSION PAPER

Principal Stratification Designs to Estimate Input Data Missing Due to Death Nous nous intéressons à des études portant sur des cohortes d'individus après la survenue d'un événement critique, comme une blessure, et ayant les caractéristiques suivantes. Premièrement, les études sont conçues pour mesurer des variables d'“input”, qui décrivent la période avant l'événement critique, et pour caractériser la distribution des variables d'“input” dans la cohorte. Deuxièmement, les études sont conçues pour mesurer des variables d'“output”, principalement la mortalité après l'événement critique et pour caractériser la distribution prédictive (conditionnelle) de la mortalité connaissant les variables d'“input” dans la cohorte. De telles études présentent souvent la complication que les données d'“input” manquent pour ceux qui meurent peu après l'événement critique car le recueil des données est réalisé après l'événement. Les méthodes standard de prise en compte des “inputs” manquants, telles que les méthodes d'imputation ou de pondération basées sur l'hypothèse que l'on peut ignorer le processus de données manquantes, sont connues comme étant en général non valides quand le processus de données manquantes ne peut être ignoré, c'est à dire quand la distribution des “inputs” est différente chez ceux qui meurent et ceux qui survivent. Pour répondre à ce problème, nous proposons un nouveau schéma qui recueille et utilise l'information sur une autre variable importante—un traitement ou une variable sous contrôle externe, qui, si elle avait étéà son niveau optimal aurait pu empêcher le décès de ceux qui sont morts. Nous montrons que ce nouveau schéma peut être utilisé pour faire des inférences valides pour la distribution marginale des “inputs” dans la cohorte entière et pour la distribution conditionnelle de la mortalité connaissant les “inputs”, également dans la cohorte entière, même si le processus de données manquante ne peut être ignoré. Le contexte crucial que nous utilisons est la stratification principale basée sur les “outputs” potentiels, comme ici la mortalité après les deux niveaux de traitement. Nous montrons aussi à l'aide de données préliminaires sur des blessures, que notre approche peut donner des résultats qui sont plus raisonnables que les résultats obtenus par les méthodes standard, et ceci de façon relativement dramatique. Ainsi notre approche suggère que le recueil en routine de données sur des variables qui pourraient être utilisées comme traitement possible dans de telles études d'“inputs” et de mortalité devrait être fait en routine.     

Intérêt de l’introduction à la nomenclature du test de détection des HPV

Le cancer du col de l’utérus reste un problème de santé publique puisque 900 000 nouveaux cas sont diagnostiqués chaque année de par le monde [Luthra] et il est responsable en France de plus de 1600 décès par an. Pourtant, depuis plus de 40 ans, le dépistage de masse des précurseurs du cancer invasif est tout à fait réalisable et le traitement des anomalies cervicales pré-invasives amène généralement à la guérison.     

Étudein vitro en microcinématographie des réactions cellulaires d'invertébrés vis-a-vis d'agents bactériens et cryptogamiques

Le déroulement de divers types de phagocytoses, et de la formation de granulomes hémocytaires a été analysé en détail en utilisant la microcinématographie image par image. Ces réactions de défense ont été reproduitesin vitro sur les systèmes hémocytaires des mollusquesHelix etZonites, et ont permis de montrer pour les bactéries (Streptococcus) les différents stades de l'englobement direct et rapide des corps bactériens, ainsi que les mouvements orientés des pseudopodes accompagnés de déplacements des cellules qui aboutissent à l'incorporation des germes. Il a été observé que des hémocytes parviennent à phagocyter même des filaments myceliens de taille importante (Metarrhizium) par un processus lent consistant en la fixation progressive de la cellule qui plie le mycelium. Enfin, toute l'évolution de la formation des granulomes multicellulaires a été suivie d'une manière ininterrompue, notamment l'attraction des premières cellules, l'afflux et la superposition de plus en plus serrée d'hémocytes en nombre croissant, jusqu'à l'arrêt de l'évolution de cette réaction. Ces résultats mettent en évidence l'acquisition par les cellules groupées autour du champignon d'une attraction nette sur d'autres hémocytes, déclenchant de leur part une réaction d'adhésion. Ils montrent enfin que l'association de la reproductionin vitro des réactions cellulaires avec la technique microcinématographique est un principe d'étude particulièrement intéressant pour suivre la dynamique des réactions de défense à l'échelle cellulaire, et l'action de substances chimiques ou d'influences microbiennes sur ces processus.