革兰阴性杆菌产AmpC酶的初筛检测及意义

目的：探讨革兰阴性杆菌产AmpC酶的初筛检测及意义，并了解本院革兰阴性杆菌产生Am-pC酶的情况。方法：实验用头孢西丁三相试验进行检测。结果：从136株对第三代头孢菌素等多种抗生素耐药的革兰阴性杆菌中共检出46株产AmpC酶，检出率为33.8%，主要为肠杆菌属、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。结论：头孢西丁三相试验操作简便，可作为革兰阴性杆菌产AmpC酶的初筛检测，可为临床合理用药提供依据。     

革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的检测引起医院感染的革兰阴性杆菌携带产ESBLs和去阻遏AmpC酶状况,探讨各菌对临床常用抗生素的主要耐药机制及耐药性,为临床制定合理使用抗生素策略提供依据。方法采用全自动微生物分析仪（VITEK-32）做细菌鉴定和药敏试验,用纸片扩散确证法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,用三维法检测高水平表达染色体编码的AmpC酶。结果158株革兰阴性杆菌ESBLs检出率为26．6％,主要菌为大肠埃希菌（45．2％）、肺炎克雷伯菌（42．9％）、阴沟肠杆菌（11．9％）。AmpC酶检出率为10．1％,主要为鲍曼不动杆菌（43．8％）、阴沟肠杆菌（25％）;上述产酶细菌均对青霉素和一、二、三代头孢菌素、磺胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类耐药,对亚胺培南敏感。结论革兰阴性杆菌耐药机制主要是产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶,这些产酶菌株均出现多重耐药。     

重症监护病房革兰阴性杆菌产ESBLs、产AmpC酶的检测与耐药性

目的了解重症监护病房（ICU）革兰阴性杆菌产ESBLs、AmpC酶的情况及其耐药性,指导临床用药。方法回顾性分析2001年1月至2004年12月ICU病房患者感染性标本中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ES—BLs、AmpC酶的耐药情况。结果92株大肠埃希产ESBLs、产AmpC酶的检出率分别为64．1％和27．2％;86株肺炎克雷伯菌产ESBLs、产AmpC酶的检出率分别为52．3％和29．1％。这些细菌呈多重耐药且两种产酶菌株耐药性也略有不同。结论需加强ICU病原菌耐药性监测,指导临床合理用药。     

1939株革兰阴性杆菌的耐药监测分析

目的 了解广州华侨医院2007年至2009年分离的1 939株革兰阴性杆菌的耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 利用梅里埃VITEK-2 Compact微生物分析仪鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,采用WHONET 5.4 软件统计分析药敏结果.结果 2007年至2009年分离出的革兰阴性杆菌1 939株,居前...     

产酶革兰阴性杆菌致医院感染与耐药特性

目的：了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与诱导型β-内酰胺酶革兰阴性杆菌致医院感染的检出率及耐药特点,对产酶与不产酶菌株进行耐药性对比分析,为临床用药提供依据。方法：双纸片试验检测ESBLs与诱导酶,Etest ESBLs试条确定产ESBLs菌株,对临床分离的960株细菌采用K—B法进行药物敏感试验。结果：哌拉西林、头孢培南、亚胺培南、环丙沙星对296株铜绿假单胞菌的抗菌活性较强;肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对亚胺培南100％敏感,对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类药物,产ESBLs与不产ESBLs菌株之间呈现交叉耐药。结论：常规药敏试验不能完全反映产诱导酶的铜绿假单胞菌耐药特点,Etest ESBLs试条可提高检测ESBLs的阳性率和准确性,产ESBLs革兰阴性杆菌的耐药性高于非产酶菌株,ESBLs菌引起的感染,应用亚胺培南、头霉素类进行治疗。     

重症监护病房革兰阴性杆菌耐药性分析

目的了解深圳市人民医院重症监护病房(ICU)革兰阴性杆菌的分布及其耐药性,指导临床合理用药。方法收集来自重症监护病房各类标本分离的革兰阴性杆菌540株,用VITEK AMS-60或VITEK-Ⅱ全自动微生物分析仪进行菌种鉴定,用K-B法进行药敏试验。结果ICU检出的革兰阴性杆菌以鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主,ESBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌比例为61.6%和51.8%,各类细菌对常用抗菌药物表现为严重耐药和多重耐药。结论该院ICU检出的革兰阴性杆菌以鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主,且呈现多重耐药性。     

成人革兰阴性杆菌肺炎23例临床分析

本文以临床体征,胸片和连续二次以上细菌培养阳性为诊断标准,报告革兰阴性杆菌肺炎２３例,并就其临床表现,并发症及预后进行分析,提出８种情况应考虑革兰阴性杆菌肺炎,对临床诊断和治疗有指导意义．     

革兰阴性杆菌同产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的耐药性分析

目的了解革兰阴性杆菌同时表达超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶(AmpCs)情况及耐药性。方法采用ESBLs确认试验检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpCs,用KB法进行药敏试验。结果4098株革兰阴性杆菌中,检出同产ESBLs+AmpCs株739株,占18.0%;其中ESBLs+高产AmpCs508株,占12.4%,主要见于不动杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,检出率分别为50.8%、44.1%和42.2%;ESBLs+诱导AmpCs231株,占5.6%,粘质沙雷菌、不动杆菌检出率分别为35.1%、27.7%;产ESBLs+高产AmpCs菌株对亚胺培南(IMP)、头孢哌酮-他唑巴坦(CSL)和头孢吡肟(FEP)的耐药率分别为3.54%、6.30%和51.8%,均显著低于其余抗生素的耐药率(均P<0.001);产ESBLs+诱导AmpCs菌株对亚胺培南、头孢哌酮-他唑巴坦和头孢吡肟的耐药率分别为1.30%、6.06%和38.5%,均显著低于其余抗生素的耐药率(均P<0.001)结论同时产生超广谱β-内酰胺酶和AmpCs菌株对多重药物耐药,IMP、CSL和FEP对其具有良好的抗菌活性。     

65例革兰阴性杆菌败血症临床特点与耐药分析

目的了解革兰阴性杆菌败血症的临床特点、耐药状况与防治措施.方法回顾性分析我院2000年4月至2002年9月收治的65例革兰阴性杆菌败血症的临床资料.结果17例患儿中14例细菌侵入途径与呼吸道、消化道、脐部及皮肤感染有关.15例新生儿败血症中发热6例,异常分娩8例,中性粒细胞与C反应蛋白多不升高.48例成人患者均有发热,昏迷19例,气管插管或气管切开20例,手术21例,血液透析5例,机体免疫功能低下性疾病26例,颅脑外伤、脊柱伤与多发伤16例,肺部感染24例,白细胞计数正常20例.65株革兰阴性杆菌多重耐药37株.儿科17株与成人48株革兰阴性杆菌多重耐药率比较:x2=8.197,P＜0.005.结论做好围生期与哺乳期的保健.做好婴儿室、JCU、昏迷和机体免疫功能低下患者的防护和隔离,增强侵入性诊疗操作的无菌观念,是预防和减少革兰阴性杆菌败血症的根本措施.儿科与成人革兰阴性杆菌多重耐药率比较差异有显著性,与成人医院感染发生率高有关.65株革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南/西司他丁的敏感率为69.2%～95.4%.这些抗生素是治疗革兰阴性杆菌败血症的首选药物.治疗中应注意预防二重感染.     

mCIM试验检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌的应用价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌中的应用价值。方法采用mCIM、改良Hodge(MHT)及Carba NP试验分别检测106株碳青霉烯酶基因阳性的革兰阴性杆菌(36株肠杆菌科细菌、26株铜绿假单胞菌及44株鲍曼不动杆菌),并比较差异。同时,收集湘雅医院2016年1月-12月临床分离的非重复性耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌106株,同期随机选取100株分离的碳青霉烯类敏感菌株作为对照组,mCIM试验检测碳青霉烯酶,PCR检测碳青霉烯酶基因,分析其敏感性及特异性。结果 (1)106株碳青霉烯酶基因阳性菌株,mCIM试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为88.9%(32/36),铜绿假单胞菌均为阴性。MHT试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为77.8%(28/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为69.2%(18/26)。Carba NP试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为97.2%(35/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为57.7%(15/26)。鲍曼不动杆菌3种方法均为阴性。肠杆菌科细菌中,MHT与Carba NP试验差异有统计学意义(χ~2=6.222,P=0.028),MHT与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.600,P=0.343),Carba NP与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.934,P=0.357);铜绿假单胞菌中,MHT与Carba NP试验阳性,二者差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.565)。(2)144株临床分离肺炎克雷伯菌(碳青霉烯类耐药及敏感菌株分别为44株、100株),采用美罗培南和亚胺培南分别做mCIM试验,其敏感性和特异性均为100%,且与PCR的结果一致。结论 mCIM试验在肠杆菌科细菌中敏感性高、特异性强,操作简单,结果易于判断,具有良好的临床应用价值。     

外科重症监护病房革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性分析

目的监测外科重症监护病房(SICU)革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性。方法对中山大学附属第一医院SICU 2007年到2008年分离的革兰阴性杆菌及其耐药性进行回顾性分析。结果共分离到革兰阴性杆菌279株,前5位为大肠埃希菌(21.9%)、铜绿假单胞菌(20.8%)、鲍曼不动杆菌(15.8%)、肺炎克雷伯菌(11.8%)和嗜麦芽窄食单胞菌(11.5%)。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素敏感性最高,尚无耐药株;非发酵菌对阿米卡星耐药率最低,对其他抗生素耐药性高。结论 SICU革兰阴性杆菌的耐药性有上升的趋势,应加强细菌耐药性监测,合理使用抗生素,防止耐药菌株的传播。     

头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌AmpC基因和ESBLs检测及耐药性分析

目的了解深圳地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌头孢菌素酶(AmpC酶)基因型分布、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点。方法收集深圳地区三家大型综合医院临床标本分离对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌73株。用碱裂解法提取菌株的质粒,采用多重PCR扩增AmpC基因,应用DNA测序确定其基因型。并对所有菌株进行ESBLs表型确证试验;用K-B法对其进行药物敏感试验。结果 48株(65.8%)AmpC基因扩增阳性,经DNA测序显示,其中46株为DHA-1型,1株为CMY-2型,1株同时产DHA-1和CMY-2型;73株肺炎克雷伯菌中49株ESBLs阳性,其中36株AmpC基因和ESBLs均为阳性。AmpC和(或)ESBLs阳性菌株对多数药物的耐药率高于AmpC和ESBLs均阴性者。结论本地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶检出率高,基因型主要为DHA-1,同时产AmpC酶和ESBLs菌株较常见。     

Design and synthesis of potent Gram-negative specific LpxC inhibitors

Antibiotic resistant hospital acquired infections are on the rise, creating an urgent need for novel bactericidal drugs. Enzymes involved in lipopolysaccharide (LPS) biosynthesis are attractive antibacterial targets since LPS is the major structural component of the outer membrane of Gram-negative bacteria. Lipid A is an essential hydrophobic anchor of LPS and the first committed step in lipid A biosynthesis is catalyzed by a unique zinc dependent metalloamidase, UDP-3-O-(R-3-hydroxymyristoyl)-N-acetylglucosamine deacetylase (LpxC). LpxC is an attractive Gram-negative only target that has been chemically validated by potent bactericidal hydroxamate inhibitors that work by coordination of the enzyme’s catalytic zinc ion. An exploratory chemistry effort focused on expanding the SAR around hydroxamic acid zinc-binding ‘warheads’ lead to the identification of novel compounds with enzyme potency and antibacterial activity similar to CHIR-090.     

Avrilella dinanensis gen. nov., sp. nov., a novel bacterium of the family Flavobacteriaceae isolated from human blood

Polyphasic taxonomic analysis was performed on a novel bacterium, designated UR159^T, isolated in 2016 from human blood of a septic patient hospitalized in France. Preliminary 16S rRNA gene sequence-based phylogenetic analysis indicated that strain UR159^T belonged to the family Flavobacteriaceae, forming a distinct phyletic line distantly related (<94% sequence similarity) to known species of the family. Further phenotypic, chemotaxonomic and genomic analyses were performed. Cells were non-motile, oxidase-negative, catalase-positive Gram-negative rods. It was strictly aerobic yielding yellow-pigmented colonies, and was metabolically rather inert. Major fatty acids were iso-branched fatty acids, predominantly iso-C_15:0 (55.5%) and iso-C_17:1ω9c (8.8%). Whole genome sequencing revealed a 2.3-Mbp genome encoding a total of 2262 putative genes with a genomic DNA G + C content at 37.6 mol%. The average nucleotide identity (ANI) and in silico DNA-DNA hybridization (isDDH) values between strain UR159^T and the most closely related members of the Flavobacteriaceae family were <75% and <39%, respectively, much below the established cut-offs for ANI (<95–96%) and isDDH (<70%) for species and genus delineation. Average Amino Acid Identity (AAI) percentages were also estimated and were lower than 65% (cut-off proposed for genus delineation for uncultivated prokaryotes) in all cases, except for F. marinum that was just at the limit (65.1%). Based on these findings, we propose it as a new genus and species, Avrilella dinanensis gen. nov., sp. nov. (type strain UR159^T = CIP 111616^T = DSM 105483^T).     

重症监护病房革兰阴性菌分布及耐药性分析

目的：了解我院重症监护病房革兰阴性菌的分布和耐药情况。方法：WHONET5.6分析585例的革兰阴性菌的细菌培养和药物敏感试验结果。结果：585例革兰阴性菌标本中,排名前五位的是铜绿假单胞菌菌152株（25.98%）,鲍曼不动杆菌111株（18.97%）,肺炎克雷伯菌98株（16.75%）,大肠埃希菌49株（8.38%）,洋葱伯克霍尔德菌39株（6.67%）。这五种病原菌对14中抗生素的药敏试验发现,除了对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低外,对其他抗生素都有不同程度的耐药。结论：革兰阴性菌在感染的病原菌中仍占主要地位,耐药性也很严重,应及时检测病原菌变化及耐药趋势,指导临床合理使用抗生素。     

对安贞医院革兰阴性杆菌的耐药趋势调查

目的分析安贞医院感染菌中,居前5位的革兰阴性杆菌的耐药趋势,为临床合理使用抗生素提供必要依据。方法对2000～2002年该院分离的医院感染菌株中,居前5位的革兰阴性杆菌的耐药性,进行回顾性分析。结果革兰阴性杆菌中前5位细菌,对3代头孢菌素的耐药性增高。大多数细菌对亚胺培南和美洛培南敏感。阿米卡星的耐药性有所下降。大肠埃希菌对喹诺酮类抗生素耐药率在85％以上。结论不规范使用抗生素,使细菌的耐药性越来越高,交替使用抗生素可能是降低细菌对抗生素耐药性的有效方法。医院应宏观控制使用抗生素。     

Mechanism of chlorpromazine binding by Gram-positive and Gram-negative bacteria

Chlorpromazine forms charge-transfer complexes with xanthene dyes in bacteria. These complexes permit the differentiation of Gram-positive and Gram-negative bacteria in both light and polarization microscopy. The birefringence induced by the charge-transfer complex might explain the molecular basis of bacterial staining.The charge-transfer complexes formed between chorpromazine and xanthene dyes accumulate in the bacterial cell, mainly inside the bacterial cell wall. The complexes give the cells a color, which depends on the chemical composition of the staining structure, and in particular the polysaccharides of the cell wall in bacteria.Metachromatic granules were seen inside Gram-positive bacteria after chlorpromazine and rose bengal staining. Although the nature of these granules remains unclear, this type of binding may have a role in the inhibition of biochemical processes in the bacterial cells.     

肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布检测与耐药特性的相关性研究

目的研究肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布与耐药特性的相关性。方法收集2008年1月至2013年12月临床分离的100株肺炎克雷伯菌,采用K-B法进行体外药敏试验,采用ESBLs确证试验和AmpC三维试验确定产酶表型,采用聚合酶链式反应进行ESBLs酶及AmpC酶基因的检测。结果60株检测出ESBLs酶,其中60株内检出ESBLs基因阳性56株,主要为SHV型基因;检出AmpC酶的检测6株,主要为DHA型基因。其中两种基因同时阳性者1株。除哌拉西林/他唑巴坦,单产AmpC酶、ESBLs及两种基因同时阳性菌（SSBLs）对其他17种常用抗生素的耐药率均高于不产酶菌株。结论医院肺炎克雷伯菌的主要耐药机制为ESBLs酶及AmpC酶基因。ESBLs耐药基因检出率高,ESBLs阳性株耐药率明显高于ESBLs基因阴性株。     

部分革兰氏阴性菌脂多糖运输蛋白LptD的结构及功能研究进展

在革兰氏阴性菌中,脂多糖是外膜的重要组成部分,并参与构成细菌的固有免疫。而在大多数革兰氏阴性菌中,Lpt系统都是运输脂多糖的唯一途径,在该系统中LptD作为一个跨膜的外膜蛋白,也是脂多糖输出的最后一步,因此被许多学者称作脂多糖运输的"命门"。LptD参与多种重要的生物学功能,包括有机溶剂耐受性、疏水性抗生素耐受性、膜通透性等。但近来的研究表明,LptD最重要的功能是参与了脂多糖的运输,也因为其参与脂多糖运输而具有了多种功能。本文重点介绍部分革兰氏阴性菌LptD的蛋白结构及其功能研究进程,以期为进一步研究其它革兰氏阴性菌脂多糖运输通路(Lpt通路)及该通路上各蛋白间的相互作用机制提供参考。