肿瘤病毒研究进展

与人类肿瘤有关的病毒有ＥＢ病毒（ＥＢＶ）、人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和人类Ｔ细胞白血病病毒（ＨＴＬＶ）,与人Ｂｕｒｋｉｔｔ＇ｓ淋巴瘤（ＢＬ）、鼻咽癌（ＮＰＣ）、肛门生殖道肿瘤、肝癌和白血病发生有关。近年来对病毒致癌在基因水平上进行研究,多数病毒在癌变中起激发始动作用,与其他因素共同配合致癌。     

病毒致癌相关microRNA的研究进展

microRNA(miRNA)是一类内源性非编码的小RNA,广泛存在于病毒、植物和动物等生物体内。miRNA通过与目标mRNA互补配对,对基因进行转录后的表达调控,在生物体的发育、增殖、分化和凋亡等方面发挥重要的生理作用。最近的研究表明,miRNA与病毒介导的肿瘤之间存在密切关系,尤其在调控乙肝病毒介导的肝癌、人乳头瘤病毒介导的宫颈癌及EB病毒介导的鼻咽癌、淋巴瘤等肿瘤中发挥重要作用。在病毒导致肿瘤的发生与发展过程中,miRNA表达谱出现时间与空间上的改变,其表达调控成为近年来病毒致癌的研究热点。我们简要综述病毒致癌相关mi RNA的研究进展。     

鼻咽癌组织真菌分离和鉴定

广东位于我国南部,属热带亚热带地区,高温高湿,适于真菌生长繁殖,是中国鼻咽癌高发区,鼻咽癌的发生是否与真菌有关?鼻咽腔中真菌群落及其代谢活动,对鼻咽癌的发生影响如何?是值得深入探讨的。我们从1978年3月至1979年10月,与中山医学院附属肿瘤医院和肿瘤研究所协作,对305人鼻咽癌病组织进行了真菌分离和鉴定。     

Mir-378a-5p抑制鼻咽癌细胞系CNE-1 细胞增殖以及肿瘤生长的初步研究*

目的： MiR-378a-5p是一种被认为在多种肿瘤发生过程中具有抑制肿瘤生长的微小RNA。然而miR-378a-5p在鼻咽癌中的 作用尚未见报道。因此,本文旨在通过临床样本的miRNA 表达谱分析以及细胞学实验从而揭示miR-378a-5p在鼻咽癌肿瘤发生过程中的作用。方法与结果：我们通过生物信息学的方法获取了鼻咽癌临床样本中miR-378a-5p的表达信息并通过与正常组织的 对比发现miR-378a-5p在鼻咽癌肿瘤组织中表达水平显著降低（P<0.01）。其次,我们发现高表达miR-378a-5p的鼻咽癌CNE-1 细 胞增殖速度显著较对照组降低（约40%~50%）。克隆形成实验证实了瞬时转染miR-378a-5p的鼻咽癌CNE-1 细胞的克隆形成数 量显著减弱。我们通过将稳定表达miR-378a-5p的CNE-1 细胞注射到裸鼠体内形成移植瘤并记录肿瘤生长曲线,结果显示 miR-378a-5p高表达组的裸鼠移植瘤体积明显较对照组小约50%,肿瘤重量显著降低(对照组0.33 g,处理组0.15 g)。结论：本研究通过对临床样本的分析以及在细胞和动物水平的实验验证揭示了miR-378a-5p具有抑制鼻咽癌肿瘤细胞增殖和肿瘤生长的作用。     

MiR-378a-5p抑制鼻咽癌细胞系CNE-1细胞增殖以及肿瘤生长的初步研究（英文）

目的:MiR-378a-5p是一种被认为在多种肿瘤发生过程中具有抑制肿瘤生长的微小RNA。然而miR-378a-5p在鼻咽癌中的作用尚未见报道。因此,本文旨在通过临床样本的miRNA表达谱分析以及细胞学实验从而揭示miR-378a-5p在鼻咽癌肿瘤发生过程中的作用。方法与结果:我们通过生物信息学的方法获取了鼻咽癌临床样本中miR-378a-5p的表达信息并通过与正常组织的对比发现miR-378a-5p在鼻咽癌肿瘤组织中表达水平显著降低(P0.01)。其次,我们发现高表达miR-378a-5p的鼻咽癌CNE-1细胞增殖速度显著较对照组降低(约40%~50%)。克隆形成实验证实了瞬时转染miR-378a-5p的鼻咽癌CNE-1细胞的克隆形成数量显著减弱。我们通过将稳定表达miR-378a-5p的CNE-1细胞注射到裸鼠体内形成移植瘤并记录肿瘤生长曲线,结果显示miR-378a-5p高表达组的裸鼠移植瘤体积明显较对照组小约50%,肿瘤重量显著降低(对照组0.33 g,处理组0.15 g)。结论:本研究通过对临床样本的分析以及在细胞和动物水平的实验验证揭示了miR-378a-5p具有抑制鼻咽癌肿瘤细胞增殖和肿瘤生长的作用。     

肿瘤与遗传(上)

在各种类型的癌肿疾病中,有些与遗传有关。近年来证实了人类正常细胞中存在癌基因,其功能的逐渐阐明,必将使人们对肿瘤的病因学有更多的认识,可能为控制癌症作出重大贡献。一、肿瘤的遗传性分析一、历史的回顾:近一个世纪以来,人们对肿瘤病因学的认识注重于理化因素和生物致癌因子的研究,因而提出化学物质致癌论、辐射致癌论以及病毒致癌论。其中对肿瘤遗     

14-3-3θ蛋白在鼻咽癌中的表达和临床意义

目的:探讨14-3-3θ蛋白在鼻咽癌中的表达和临床意义。方法:在72例人鼻咽癌和正常鼻咽组织中利用免疫组织化学染色法检测14-3-3θ蛋白的表达情况,并分析其表达与鼻咽癌临床病理学特征之间的关系。结果:在72例鼻咽癌和正常鼻咽组织中,14-3-3θ蛋白表达的阳性率分别为69.4%和15.2%。统计学分析表明,14-3-3θ蛋白的表达与鼻咽癌临床分级(P=0.045)、淋巴结转移(P0.001)、肿瘤复发(P=0.041)具有显著相关性,而与鼻咽癌患者的年龄(P=0.444)、性别(P=0.795)、组织类型(P=0.468)等均无关。Spearman相关性统计分析发现,14-3-3θ蛋白高表达与鼻咽癌高临床分级(r=-0.256,P=0.030)、淋巴结转移阳性(r=0.506,P0.001)、肿瘤复发(r=0.106,P=0.033)呈正相关,而与鼻咽癌患者的年龄、性别、组织类型等均无相关性(P0.05)。结论:在鼻咽癌组织中,癌基因14-3-3θ在鼻咽癌组织中表达增加,并且与疾病临床分级、转移复发等密切相关。     

金属硫蛋白与肿瘤

近年来的研究发现,一些肿瘤组织的金属硫蛋白含量增加。致癌过程中ＭＴ的写表达与致癌素作用,癌基因激活和肿瘤迅速生长有关。ＭＴ的加旺表达也是细胞产生耐药的机制之一天肿瘤预防和治疗中,ＭＴ可保护细胞低抗重金属和烷化剂的致癌,致突变作用,ＭＴ还可用于肿瘤临床辅助治疗和用作肿瘤标志物。     

鼻咽癌与细菌L型的关系

大量研究表明,鼻咽癌与ＥＢ病毒有关。通过对９８例鼻咽癌组织的切片革兰氏染色Ｌ型检查、电镜和Ｌ型抗体免疫组化染色等研究,发现鼻咽癌组织中细菌Ｌ型亦甚常见,切片革兰氏染色有７８例查见细菌Ｌ型,其阳性率为７９．６％;免疫细化染色Ｌ型抗原检出阳性率为６２．２％,电镜不仅在细胞间质见到细菌Ｌ型,而且在癌细胞、巨噬胞细等细胞胞质内也见到细菌Ｌ型。提示,细菌Ｌ型与鼻咽癌关系十分密切,很可能是鼻咽癌致癌因子之一。     

鼻咽癌的CT 显像与VEGF 和p53 蛋白表达的相关性研究

目的:探讨鼻咽癌患者CT表现与血管内皮细胞生长因子以及p53蛋白表达的相关性.方法:选择经病理确诊的鼻咽癌患者36例,行螺旋CT扫描并采用免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF和p53蛋白的表达,分析影像学特征与VEGF及p53蛋白表达的相关性.结果:鼻咽癌患者肿瘤组织中VEGF的表达与CT征象中的侵及后鼻孔、颅底骨质破坏及颈部淋巴结转移正相关,p53蛋白的表达与颈部淋巴结转移正相关.结论:肿瘤组织中VEGF和p53蛋白表达与鼻咽癌的部分CT影像学特征相关,可作为评价鼻咽癌CT表现恶性度及预后的指标.     

用SOS显色法检测金属化合物的遗传毒性

用SOS显色法对12种金属化合物的遗传毒性进行了检测,发现多种金属化合物具有遗传毒性,在 SOS显色法中呈阳性反应,其中已知具有致癌作用的镍和钻化合物在Ames沙门氏菌／微粒体测试法 检测中呈阴性结果,镍化合物在枯草杆菌的Rec测试法中也呈阴性。uvrA基因的存在对SOS显色法 检测某些金属化合物的遗传毒性有重要的影响。     

用Hückel分子轨道法研究苯并吖啶类衍生物的致癌活性与电子结构的相关性

本文对苯并[a]吖啶和苯并[c]吖啶衍生物中具有较确切致癌活性标度的40个化合物,进行了HMO计算。对计算所得的分子轨道参数进行了多元回归分析,建立了致癌活性与分子轨道参数的定量关系式。该式对致癌与非致癌物质的正确区分率为90％。     

组织微阵列技术研究肿瘤转移相关基因在鼻咽癌中的表达与临床意义

利用高通量组织微阵列结合免疫组化检测MT1-MMP、MT2-MMP、Ezrin、nm23-H1、E-cad和TIMP-2在鼻咽癌组织中的蛋白质表达,探讨肿瘤转移相关基因异常表达在鼻咽癌侵袭转移中的作用,筛选鼻咽癌转移相关分子标志物.结果发现,鼻咽癌组织存在MT1-MMP、Ezrin蛋白高表达(P<0.01)和nm23-H1、TIMP-2蛋白低表达(P<0.05).临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白阳性表达显著高于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05,P<0.01),但临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中nm23-H1蛋白的阳性表达显著低于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05).鼻咽癌组织中MT1-MMP与MT2-MMP r=0.308,P<0.001),nm23-H1与E-cad(r=0.167,P<0.05)及TIMP-2(r=0.279,P=0.001),E-cad与TIMP-2(r=0.279,P=0.001)的蛋白质表达旱显著正相关.MT1-MMP与E-cad(r=-0.188,P<0.05)及TIMP-2(r=-0.233,P<0.05),Ezrin与E-cad(r=-0.204,P<0.05)的蛋白质表达呈显著性负相关.聚类分析显示,鼻咽癌MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白共同阳性表达显著高于慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05),但nm23-H1、E-cad和TIMP-2蛋白在鼻咽癌组织中的共同阴性显著高于癌旁上皮和慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01).多因素分析和有效性评估发现,MT1-MMP蛋白能较好地独立预测鼻咽癌淋巴结转移和临床进展.上述研究结果提示,多个肿瘤转移基因的蛋白质高表达,转移抑制基因的低表达和这些基因的蛋白质表达失平衡在鼻咽癌淋巴结转移和临床进展过程中起重要作用.MTI-MMP蛋白可作为预测鼻咽癌淋巴结转移的较好分子标志.     

实时定量PCR方法检测鼻咽癌病人全血EB病毒拷贝数的实验研究

EBV在多种肿瘤中存在,并在相关肿瘤的发病中起一定的作用。本文应用实时定量PCR方法检测鼻咽癌与健康对照全血EBV拷贝数。结果表明在73例鼻咽癌病人与83例正常对照中,NPC组中EBV阳性率为46.6%,对照组阳性率为13.3%。对照组平均EB病毒拷贝数为3.9×10~4拷贝/μgDNA,高于鼻咽癌组(1.7×10~5拷贝/μgDNA)。全血EBV的感染与鼻咽癌的发生相关,而裂解状态EBV在细胞转化过程中的作用可能更大。应用实时定量PCR进行全血EBV的检测可用于鼻咽癌的分子诊断。     

鼻咽癌癌变的分子机理

鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤,在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高,严重危害了我国南方地区人民生命健康.对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤,目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切相关.现主要阐述鼻咽癌作为一种多基因遗传性肿瘤的病因发病机制,初步建立鼻咽癌易感基因群的概念和鼻咽癌发生发展过程中易感基因群主导的多阶段性多米诺骨牌效应分子机制假说,为寻找鼻咽癌遗传易感风险因子,筛选鼻咽癌高危人群以及探索鼻咽癌靶向性及个体化的诊断和治疗手段奠定实验与理论基础.     

鼻咽癌5-8F细胞膜蛋白质组初步分析

细胞膜蛋白是细胞的重要组成部分,作为细胞的"门铃"与"门户",参与细胞内外物质交换、信息转换、细胞生长发育、细胞迁移以及免疫应答等重要生理活动.为鉴定鼻咽癌转移相关膜蛋白,运用差速离心联合双水相方法分离纯化鼻咽癌高转移细胞5-8F的细胞膜,SDS-PAGE分离膜蛋白,液相色谱/电喷雾串联质谱分析(LC-MS/MS)结合生物信息学分析鉴定出316种非冗余蛋白质,其中152种(48.5%)被注释为膜蛋白或膜相关蛋白.通过肿瘤差异蛋白质组数据库(dbDEPD)搜索,发现在114个膜蛋白中有49种膜蛋白与其它肿瘤的发生发展密切相关,其中21个膜蛋白与肿瘤转移相关.进一步分析发现膜蛋白CD104、VDAC2、CD298和SLC25A3与同属头颈部肿瘤的口腔癌转移相关,提示这4个膜蛋白也可能是鼻咽癌潜在的转移相关蛋白.研究结果提供了一个鼻咽癌细胞5-8F包含中高丰度膜蛋白的数据库,为进一步研究头颈部肿瘤鼻咽癌癌变分子机理积累了有价值的资料.     

利用GenMAPP筛查鼻咽癌差异表达基因

利用GenMAPP软件对鼻咽癌和正常鼻咽上皮基因微阵列表达谱结果进行分析,筛查鼻咽癌差异表达基因. 结果显示：在17 000个基因中,与正常鼻咽上皮相比,在鼻咽癌中发生2倍以上差异表达的基因共有339个,其中有160个基因在鼻咽癌中表达上调,179个表达下调. 这些基因分别与细胞增殖、基因转录、凋亡、信号转导、DNA损伤修复、肿瘤分化和浸润转移及细胞周期调节等相关. 鼻咽癌的发生发展存在多基因表达调控的改变,对其差异表达基因的研究有助于阐明鼻咽癌发生发展机制.     

E-cadherin 在鼻咽癌组织中的表达及临床意义*

摘要目的：检测鼻咽癌组织中上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）的表达情况,探讨E-cad 与肿瘤侵袭、转移的关系。方法：收集临床 确诊的存档鼻咽低分化鳞癌石蜡标本40例,鼻炎标本20 例。将每个标本的4 长切片分别进行HE染色、免疫组化PV 二步法及 阴性对照。HE 确认病理类型,结合临床资病例料进行TNM分期,根据PV 二步法染色结果检测E-cadherin 的表达,所得结果用 SPSS17.0 进行统计学检验。结果：E-cadherin 在鼻咽癌组织对比中呈不同程度的降低（P=0.002）,与性别、年龄无明显相关,与T 分 期（P=0.023）、淋巴结转移（P=0.001）、TNM 分期（P=0.000）显著相关。结论：1：E-cadherin 在鼻咽癌组和对照组的表达有显著的差 别,可能参与了鼻咽癌的发生发展。2：E-cadherin 的表达与肿瘤的淋巴结转移和病理分期有相关性,但与年龄和性别无相关性。 E-cadherin 的表达缺失是肿瘤远处转移的重要指标。3：E-cadherin 表达水平可能作为肿瘤侵袭,预测鼻咽癌颈部淋巴结隐匿性转 移的潜在肿瘤标志物。     

油菜素内酯促进农药在植物体内降解

中药狼毒在中国被广泛应用于治疗肿瘤,有多种成分被发现有抗肿瘤功能,但人们对这些化合物的作用靶点和作用机理依然缺乏了解。上海药物研究所发现狼毒中的二萜类化合物HJB直接作用于致癌基因JAK家族激酶。JAK激酶目前是制药企业的重要药物靶点,多家公司在寻找针对JAK激酶的抗肿瘤和抗炎症药物。狼毒中的HJB类化合物和其他JAK抑制剂不同,是通过共价键的形式作用于该家族蛋白的一个新区域。     

人鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜观察

为探讨高分化和低分化鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白（F-actin)的空间结构,采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素－鬼笔环肽（FITC－phalloidin)标记F-actin、碘化吡啶（PI）标记核酸的荧光探针双重标记技术,对鼻咽癌细胞F－actin进行光学切片、三维重组及形态学观察。实验结果可见高分化鼻咽癌细胞F－actin呈芒刺状分布于细胞表面,而在细胞突起末端细胞间连接处呈束状,放射状密集分布;代分化鼻咽癌细胞F－actin明显少于高分化鼻咽癌细胞,仅沿细胞膜表面呈弯曲细小绒毛状分布。结果表明F－actin在细胞内的空间分布与鼻咽癌的分化类型有关,肿瘤或恶性转化细胞的F－actin在形态和结构方面有异常改变;共聚焦激光扫描显微镜光学切片结合荧光双重标记技术是研究细菌骨架结构的理想方法。