哺乳类ICE样蛋白酶的研究现状

ＩＣＥ样蛋白酶是一族Ａｓｐ特异性的半胱氨酸蛋白酶,其中源于浦乳类的有ＩＣＥ、ＩＣＥｒｅｌⅡ／ＩＣＨ－２／ＴＸ、ＩＣＥｒｅｌⅢ、ＩＣＥ－／Ｎｅｄｄ－２、Ｍｃｈ２、Ｍｃｈ３、ＣＰＰ３２／Ｙａ－ｍａ／Ａｐｏｐａｉｎ以及ＩＣＥ－ＬＡＰ３。本文就有关这些哺乳类ＩＣＥ样蛋白酶的共同特点、作用底物、活性调节以及与细胞凋亡和某些疾病的关系的研究现状进行了简要综述。     

细菌蛋白酶的致病作用

细菌通过分泌胞外蛋白酶来分解宿主蛋白质,并激活血管舒张素－派肽级联系统,为其生长,繁殖提供所需要的营养物质,同时,细菌蛋白酶能破坏补体和（或）免疫球蛋白,从而使细菌逃避宿主的防御机制,保证其级在宿主体内生存,由此可见,蛋白酶在细菌感染过程中起重要作用。因此,人工合成不影响宿主蛋白酶的活性,而能特异地抑制某些特定细菌蛋白酶的蛋白酶抑制剂,可能是一种有用的抗菌物质,用以治疗细菌感染。     

细胞迁移相关蛋白酶的研究进展

蛋白酶在胚胎发育、免疫防御、损伤修复、血管新生及肿瘤转移等相关细胞迁移过程中发挥关键作用.近年,蛋白酶影响肿瘤细胞侵袭、迁移的机制研究渐成热点,但肿瘤细胞免疫逃逸、增生、迁移、侵袭、异位定植等机制仍不明确,因此对相关蛋白酶的功能和作用机制的研究愈显重要.本文从蛋白酶的正常生理功能入手,综述肿瘤细胞迁移中相关蛋白酶的研究进展,以期为靶向肿瘤浸润和迁移过程的蛋白酶抑制剂类新药筛选和研发提供线索和新思路.     

蛋白酶抑制剂对绿豆象幼虫中肠蛋白酶活性的影响

为明确蛋白酶抑制剂对绿豆象幼虫中肠蛋白酶活性的影响,采用室内人工接虫和生化测定的方法,研究了在离体条件和饲喂条件下4种蛋白酶抑制剂对绿豆象幼虫中肠蛋白酶的抑制作用,并测定了绿豆象幼虫取食不同含量的绿豆胰蛋白酶抑制剂(MBTI)的人工绿豆后,其中肠内总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性的变化.结果表明:在离体条件下,供试4种蛋白酶抑制剂对绿豆象幼虫总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性均有明显的抑制作用,且浓度越大,抑制效果越显著,其中以20μg·mL^-1的MBTI对3种酶活性的抑制效果最强,3种酶活性分别比对照降低了62.5%、41.2%和38.7%,而卵粘蛋白抑制剂(OI)抑制效果最弱.绿豆象幼虫取食含不同抑制剂的人工绿豆后,中肠内3种酶活性也均受到一定的抑制作用,取食后随龄期的延长,3种酶活性有所升高但仍显著低于对照,且以MBTI的抑制作用最强.当绿豆象幼虫取食不同含量MBTI的人工绿豆后,随MBTI含量的增加,对总蛋白酶活性和类胰蛋白酶活性的抑制作用均逐渐增强,但对类胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用并不显著,只有当MBTI含量达20%时,对类胰凝乳蛋白酶活性才表现出明显的抑制作用.     

水稻巯基蛋白酶抑制剂的纯化及其性质研究

水稻的糠皮和胚经生理盐水浸取、离心后的上清液加热至８０℃处理１０ｍｉｎ,离心获得的上清液调ｐＨ至８．０,得到沉淀。沉淀溶解于０．０１ｍｏｌ／ＬＨＣｌ,经透析冷冻干燥得水稻巯基蛋白酶抑制剂（ＣＰＩ）粗品;粗品再经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱线性离子梯度洗脱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱分子筛层析,即可获得在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ上均为单一蛋白带的ＣＰＩ样品。经上述步骤,ＣＰＩ可被纯化５８倍。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量均为１２０００,Ｎ末端氨基酸为Ｐｒｏ,等电点５．６．水稻ＣＰＩ经１００℃处理１０ｍｉｎ后,其抑制活性无任何变化,在ｐＨ２．０～９．０之间,活性也不发生改变,但ｐＨ在９．０以上,其活性逐渐下降,水稻ＣＰＩ对木瓜蛋白酶是一种高亲和性的抑制剂,它对木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶有强抑制作用,对菠萝蛋白酶仅有弱抑制作用,但对胰蛋白酶则全无抑制作用;其抑制类型属竞争性抑制剂类型,Ｋ＿ｉ值约３．５×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ对木瓜蛋白酶的抑制摩尔比约为１：１。     

嗜热菌Lon蛋白酶的逆境应答作用及其功能分析

Lon蛋白水解酶广泛存在于微生物以及动植物体内.它除了水解蛋白质的功能以外,还参与到细胞生理过程的调节当中.以嗜热栖热菌HB8(Thermus thermophilus HB8)的Lon蛋白酶(TTLon)及其两个片段TTlonL和TTlonS为研究对象,采用RT-PCR技术证明了TTLon在嗜热栖热菌HB8的逆境应答过程中发挥着重要作用,它的蛋白酶活性是受到Mg2+影响的,失去C端的TTlonL和TTlonS没有了蛋白水解酶活性和分子伴侣活性,但是它们仍然具有一定的ATP结合能力.     

弗林蛋白酶——一种重要的前体蛋白内切蛋白酶

在真核生物细胞中,许多具有生物活性的多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白酶切割后激活形成的。弗林蛋白酶（Furin)就是这个内切蛋白酶家族重要成员之一,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长因子、血清蛋白、基因金属蛋白酶、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒 素等。近年来Furin得到了迅速而广泛的研究,本简介了它的表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染的关系,以及它的抑制剂。     

中性蛋白酶AS 1.398固定化酶的研究

枯草芽孢杆菌AS1.398中性蛋白酶经海藻胶包埋制成固定化酶,用396的胶包埋率达98%,表现活力为7%左右。其最适反应pH为7.0,最适温度为55℃,与自然酶相一致。固定化酶的耐热性比自然酶高,最稳定的pH为7.0左右,pH8.0以上不稳定。海藻胶容易解体,球形破裂,因此只适合在中性条件下使用。     

寄生虫的蛋白酶

蛋白酶(PA)是催化肽键水解的酶,从病毒到人的生物中都存在。对多肽末端起降解作用的酶叫肽酶;而催化肽链内部裂解的酶为内切酶。依其活性部位的重要化学基团不同,蛋白酶可分为四大类:丝氨酸,金属,半胱氨酸(硫醇)及天冬氨酸     

鱼糜凝胶劣化现象相关蛋白水解酶

鱼糜凝胶劣化现象发生在鱼糜凝胶化过程中,导致鱼糜制品凝胶弹性下降,品质降低。研究表明,引起鱼糜凝胶劣化现象的原因是鱼糜内含的蛋白水解酶的作用。与该现象相关的蛋白水解酶类有肌浆型和肌原纤维结合型之分。大部分肌浆型蛋白水解酶为水溶性的,可以在鱼糜制备过程中漂洗去除。肌原纤维结合型蛋白酶不能通过漂洗有效去除,是引发鱼糜凝胶劣化现象的重要相关酶类。已证实的凝胶劣化相关肌原纤维结合型酶类包括丝氨酸型蛋白酶和溶酶体型组织蛋白酶。     

ATP依赖的人Lon蛋白酶的表达、纯化及其活性鉴定

ATP依赖的人Lon蛋白酶是一种同质寡聚、环状的蛋白酶,主要位于细胞线粒体基质中。许多研究表明,Lon蛋白酶对于维护细胞的内环境稳定起着重要作用,并参与线粒体蛋白质量控制和代谢调控。将pPROEX1 His6-Lon重组质粒在Escherichia coli Rosetta 2菌株中诱导表达用Ni2＋柱亲和层析法纯化,获得纯度较高的目的蛋白。经纯化后,Lon蛋白酶的比酶活达到0.17 U/mg。通过多肽底物Rhodamine 110、bis-（CBZ-L-alanyl-L-alanine amide）[（Z-AA）2 Rh110]的降解检测显示,Lon蛋白酶具有肽酶活性,并被ATP所刺激。Casein和线粒体转录因子A降解实验表明,纯化的Lon蛋白酶具有蛋白水解活性,而且蛋白水解活性依赖于ATP。     

毛霉蛋白酶的研究

蛋白酶是食品工业中最重要的加工配料(辅料)之一,蛋白酶在食品加工中的应用主要是利用了其对蛋白质所产生的多样化水解作用[1-2]。许多受人欢迎的食品,如干酪、啤酒和酱油等的生产过程都包含蛋白酶催化蛋白质水解这一关键性的反应。对这些食品加工技术的改进体现在,基于对这些加工过程所涉及的各种     

前体蛋白转化酶家族的重要成员之一：弗林蛋白酶

弗林蛋白酶(Furin)是前体蛋白转化酶家族的重要成员之一,广泛存在于各种组织和细胞系中。Furin经过两次自剪切去掉前肽后具有生理活性,能够识别特定的氨基酸序列并在TGN中对多种前体蛋白进行加工。Furin的作用底物不仅包括神经肽和肽类激素,还包括许多生长因子、受体、血浆蛋白酶、基质金属蛋白酶及细菌外毒素等,具有重要的生物学功能。