外植体与不同理化因子对虎杖愈伤组织诱导及次生代谢产物形成的影响

考察了外植体、培养基及光照条件对中药植物虎杖愈伤组织形成及次生代谢产物生产的影响。总的来看,所有愈伤组织中总酚和总黄酮含量比原植物的含量高2—3倍;而蒽醌的含量比原植物中含量低。外植体对愈伤组织形成及次生代谢产物生产的影响很大,所考察的3种外植体中。叶外植的愈伤组织诱导率最高而源于根外植体的愈伤组织具有最好的次生代谢能力。所考察的6种培养基中,MS＋0．5mg／L 2,4-D＋1．0mg／L 6-BA和N6＋0．5mg／L 2,4-D＋1．0mg／L 6-BA无论对于愈伤组织的产生还是次生代谢产物的累积都有较优表现。光照对愈伤组织诱导及次生代谢产物产生有明显影响。但二者无规律性联系。     

不同诱导子诱导虎杖愈伤组织白藜芦醇的生物合成

目的:研究不同胁迫条件对虎杖叶愈伤组织白藜芦醇含量的影响。方法:分别采用低温、热休克、紫外辐射、高盐、真菌诱激子、水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MJ)处理虎杖叶愈伤组织,HPLC测定其中白藜芦醇的含量。结果:经过低温、紫外辐射、真菌诱激子、SA处理,白藜芦醇含量分别提高38%、20%、24%和18%(P<0.01),而热休克、NaCl高盐和MJ处理后,白藜芦醇含量与对照无显著差异(P>0.05)。结论:适当的胁迫条件能促进虎杖叶愈伤组织中白藜芦醇的合成。     

虎杖愈伤组织的诱导及高产白藜芦醇材料的筛选

将虎杖(Polygonum cuspidatum)不同外植体经不同消毒时间处理后,接种在添加不同激素种类和水平的相同基本培养基上或相同激素种类和水平基本培养基上进行诱导实验,同时对根、根茎芽、叶、韧皮诱导的愈伤组织进行白藜芦醇的含量测定实验,其结果表明:基本培养基以MS较好,外植体叶对激素种类较为敏感,其中适当浓度的NAA诱导愈伤组织比2,4-D的效果要好,KT比BA要好,在有KT存在的培养基上诱导愈伤组织比较紧密,有利于分化;在MS NAA2m g/L KT0.1mg/L培养基上诱导愈伤组织较好,根茎芽的诱导率最高,为73%.愈伤组织的生长趋势从接种的第3d开始生长,到21d时生长达到最高峰,干重为0.461g,以后生长速度减慢.不同材料诱导的愈伤组织中白藜芦醇的含量以根茎部芽的愈伤组织含白藜芦醇最高,其次是叶和根,最低的为韧皮.     

不同因子对山药愈伤组织诱导的影响

研究了基因型、外植体、植物激素和光暗等因子对山药愈伤组织诱导的影响。结果表明 :(1)不同基因型山药均能诱导形成愈伤组织 ,但出愈率不同 ,其排列顺序是 :“4 7号”山药 >铁棍山药 >太谷山药。 (2 )不同外植体在同一种培养基上的诱导率存在差异。同一外植体在不同植物激素浓度配比中 ,诱导率也不同。叶片、茎段、零余子的最佳激素配比均为 6 - BA2 (mg/ L,以下单位同 ) +NAA2 ,诱导率分别为 53.3%、 6 5.6 %、 10 0 % ,茎尖的最佳激素配比为 6 - BA2 +NAA0 .2 ,诱导率为 93.3%。 (3)植物激素在愈伤组织诱导过程中起关键的作用。细胞分裂素与生长素组合使用优于单一激素。二者的浓度配比不同 ,出愈率也不同。 (4 )光暗条件对不同外植体愈伤组织诱导的影响不同。暗培养有利于零余子的诱导 ,而光培养则有利于叶片的诱导。     

黄花菜不同外植体形成的愈伤组织再生苗观察

研究了黄花菜不同外植体愈伤组织的形成与植株再生。结果表明,出愈率是花柄>花茎>叶片。愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L的培养基上出现致密愈伤组织颗粒,经增殖→分割→增殖的程序逐渐形成“球状体”似的愈伤组织。叶片、花茎形成的球状体经20代继代培养,再生能力没有减退,苗形态正常,根尖细胞染色体数目为2n=2x=22。该球状体经秋水仙素处理获得多种形态的四倍体苗和少数重复加倍现象。花柄球状体再生苗中出现了叶片花瓣状或类似花蕾状的形态异常苗,其频率与花柄所处的花期及花蕾大小有密切关系。再生异常苗的球状体继代培养,或者由异常苗叶片重新形成的球状体仍然再生异常苗。花柄球状体经秋水仙素处理,获得的变异株其染色体数目类型较多。因而不宜用花柄作黄花菜快速繁殖的外植体。     

不同生长调节剂对马蹄金愈伤组织诱导的影响

马蹄金是一种优良的地被兼观赏草坪植物。采用正交设计试验法 ,研究了四种不同生长调节剂对马蹄金子叶、叶片、叶柄和下胚轴愈伤组织诱导的影响。结果表明 :生长调节剂是诱导愈伤组织的关键 ,2 ,4 D对愈伤组织诱导具有显著的影响 ,适宜于马蹄金愈伤组织诱导的培养基及生长调节剂为MS +1 .0mg/L 2 ,4 D +0 .2mg/L 6 BA +0 .2mg/LKT +1 .0mg/Lα NAA。     

大花萱草不同外植体诱导愈伤组织的比较研究

选取4个萱草品种（H.hybrida Stella D＇Oro,H.hybrida pink Charm,H.hybrida Bayley Hay,H.hybrida Frans Hal）进行不同外植体诱导愈伤组织的研究.接种萱草叶片、根段、茎尖和子房花药几种外植体诱导愈伤组织发现：茎尖诱导愈伤组织的效果最好;叶片取材方便但是诱导率相对较低;根段较难诱导愈伤组织;子房和花药受取材时间限制且污染率较高,但是愈伤组织诱导率较叶片和根段高.激素的筛选试验表明,MS＋2mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA对愈伤组织诱导效果良好.对不同萱草品种的相同外植体进行愈伤组织诱导实验,发现其诱导效率也不同：萱草品种H.hybrida Stella D＇Oro生长愈伤组织数量最多,80%以上的茎尖诱导出愈伤组织并再生出芽;H.hybrida Pink Charm在愈伤组织诱导培养基上,约50%的无菌苗获得愈伤组织;H.hybrida Bayley Hay在愈伤组织诱导培养基上,经过1个月的诱导,即可产生愈伤组织,其诱导成功率为30%～40%;H.hybrida Frans Hal诱导产生愈伤组织的频率较低,为20%～30%.     

黄皮愈伤组织诱导及其对不同激素的响应

通过对黄皮不同外植体进行离体培养 ,初步获得了愈伤组织。结果表明 :腋芽、花芽容易诱导绿色愈伤组织 ,且愈伤组织较细密。叶柄的愈伤组织诱导率很低 ,时间长 ,生长缓慢。愈伤组织的增殖继代培养的初步研究表明 :花芽愈伤组织在继代培养基上形成白色、较松散的愈伤组织 ,质地较差 ;而腋芽及叶柄产生的愈伤组织生长极缓慢 ,难以继代。     

小桐子愈伤组织的诱导

本文以小桐子的叶片、叶柄、茎段及下胚轴和子叶作为外植体,研究不同外植体类型对愈伤组织诱导的影响,结果表明叶柄的诱导率最高,其次为茎段的诱导率。同时以小桐子的下胚轴作为外植体,研究植物生长调节剂种类及浓度配比对愈伤组织诱导的影响,结果显示6-BA与2,4-D的组合更适宜小桐子愈伤组织的诱导,MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L为小桐子愈伤组织诱导的最佳培养基,其愈伤组织诱导率高达96.7%。本研究为小桐子愈伤组织的分化、植株再生及相关的遗传转化研究提供了参考。     

无患子愈伤组织诱导的多因子正交试验研究

目的:探寻无患子愈伤组织诱导的最佳外植体、培养基和培养条件。方法:采用5因素混合水平正交设计,用DPS2000统计软件对其结果进行方差分析和多重比较(SSR)。结果:诱导愈伤组织的最佳外植体为当年生枝条水培芽的嫩茎段,用0.2%HgCl2消毒2min,其无菌存活率为98.33%,培养条件为光照或黑暗,最佳培养基配方为:MS(B5) 6-BA 1.5mg.l-1 NAA0.2mg.l-1,其愈伤组织的诱导率为97.78%。结论:激素配比是影响愈伤组织诱导的主要因素。较高的6-BA浓度(1.5~2.5mg.l-1)与较低的NAA浓度(0.2mg.l-1)配比,有利于无患子愈伤组织的诱导。     

药用植物佛甲草愈伤组织的诱导和培养

目的：佛甲草（Sedum lineare Thunb）是景天科植物中具有多种药用功能的植物,其肉质多浆的特点是愈伤组织成功诱导和培养的瓶颈。方法：以佛甲草的叶和茎为外植体,用正交试验对培养基中的激素浓度（2,4-D、6-BA和Kt）进行配置,在配置的18种培养基中筛选到适合佛甲草叶和茎愈伤组织诱导和继代的培养基配方。结果：MS＋3%蔗糖＋2,4-D2＋Kt1和MS＋3%蔗糖＋2,4-D2＋6-BA1培养基对茎和叶愈伤组织的诱导率分别达到70%和80%左右,而MS＋3%蔗糖＋2,4-D2＋6-BA1更有利于佛甲草愈伤组织的继代培养。结论：在愈伤组织培养中,佛甲草的茎和叶都可以作为优良的外植体进行愈伤组织的诱导和培养。实验结果为进一步通过组织培养手段提高佛甲草的药效成分提供了有益参考。     

兴安落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究

以成熟和未成熟合子胚为外植体,研究影响兴安落叶松（Larix gmelinii）胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明兴安落叶松合子胚带胚乳培养有利于胚性愈伤组织的诱导;内蒙沙地种源成熟合子胚的诱导率显著（p<0.05）高于加格达奇山地种源;冷藏处理可以提高成熟合子胚胚性愈伤组织的诱导率;不同发育时期的未成熟合子胚的诱导率存在显著差别（p<0.05）,其中以子叶初期合子胚（7月5日）诱导率最高;2,4-D对胚性愈伤组织诱导的影响较大,且与BA、KT存在一定的协同作用;S培养基比DCR和MS培养基更有利于胚性愈伤组织的诱导;培养基中琼脂含量为4 g·L^-1时,诱导率较高。     

紫锥菊愈伤组织诱导及生物活性成分分析

以紫锥菊(Echinacea purpurea)无菌苗为材料,研究了不同激素配比条件下不同外值体愈伤组织的诱导及所诱导的愈伤组织中的主要成分多糖和总酚,并应用高效液相色谱法对根愈伤组织提取物与紫锥菊根提取物中的酚酸类物质进行了比较分析.结果表明,紫锥菊不同部位愈伤组织诱导的最适宜激素配比不同,其中根愈伤组织诱导的最佳激素配比为0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L 6-BA.叶、茎、根诱导愈伤组织的多糖含量分别为10.15、11.84、14.49 mg/g干重;总酚含量分别为52.16、28.144、7.99 mg/g干重.根愈伤组织总酚和多糖含量均较高,其提取物的酚酸类物质的高效液相色谱与紫锥菊根提取物图谱主峰一致,且生长速度快、质地疏松,是细胞培养获取紫锥菊主要生物活性成分的适宜材料.     

唐菖蒲的愈伤组织诱导和植株再生

以唐菖蒲品种‘Advanced red’的籽球、花柱、子房和花丝为外植体,研究了不同种类和浓度生长调节物质以及籽球的不同接种方式对愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明：唐菖蒲籽球的中部切片为最佳外植体,倒接（形态学下端向上）是最佳接种方式,诱导非胚性（NEC）和胚性（EC）愈伤组织形成的最佳诱导培养基分别为MS＋6mg·L^-1 NAA和MS＋6mg·L^-1 TDZ,诱导率分别达65．53％和71．88％。NEC和EC均能分化不定芽,分化率分别达88．89％和61．11％。最佳生根培养基上的生根率为87．50％。     

泡桐愈伤组织再生植株的诱导与培养

首先以MS为基本培养基从18个不同浓度的NAA和BA组合中,找出了毛泡桐（Paulownia tomentosa）、南方泡桐（Pauiownia australis）、白花泡桐（Paulownia fortunei）、兰考泡桐（Paulownia elongata）和豫杂一号泡桐(Paulownia tomentosa×P.fortunei)叶片愈伤组织诱导芽分化最适培养基分别为MS+0.3NAA+12 BA、MS+0.3NAA+12 BA、MS+0.5NAA+12 BA、MS+0.5NAA+12 BA和MS+0.7NAA+12 BA;然后,筛选出了5种泡桐芽诱导根的最适培养基（分别为1/2MS+0.1NAA、1/2MS+0.1NAA、1/2MS、1/2MS+0.3NAA和1/2MS+0.5NAA）。这些结果为利用不同种泡桐的原生质体融合培育泡桐新品种奠定了一定的基础。     

泡桐愈伤组织再生植株的诱导与培养

首先以MS为基本培养基从 1 8个不同浓度的NAA和BA组合中 ,找出了毛泡桐 (Paulowniatomen tosa)、南方泡桐 (Pauiowniaaustralis)、白花泡桐 (Paulowniafortunei)、兰考泡桐 (Paulowniaelongata)和豫杂一号泡桐 (Paulowniatomentosa×P .fortunei)叶片愈伤组织诱导芽分化最适培养基分别为MS 0 .3NAA 1 2BA、MS 0 .3NAA 1 2BA、MS 0 .5NAA 1 2BA、MS 0 .5NAA 1 2BA和MS 0 .7NAA 1 2BA ;然后 ,筛选出了 5种泡桐芽诱导根的最适培养基 (分别为 1 /2MS 0 .1NAA、1 /2MS 0 .1NAA、1 /2MS、1 /2MS 0 .3NAA和 1 /2MS 0 .5NAA)。这些结果为利用不同种泡桐的原生质体融合培育泡桐新品种奠定了一定的基础。     

东北延胡索愈伤组织培养及延胡索乙素形成的适宜条件

比较了东北产两种延胡索各器官的愈伤组织发生情况,采用单因子和正交设计试验,对齿瓣延胡索(Corydalis remota)愈伤组织生长及延胡索乙素形成的适宜条件做了研究。结果表明,齿瓣延胡索各器官对培养基的响应性均显著高于东北延胡索(C. ambigua),其块茎愈伤诱导率高达93.3%;MS培养基对于愈伤组织诱导较White有利, 2 mg·L^-1 2, 4-D与1 mg·L^-1 KT的组合愈伤诱导率最高,并适于继代培养。正交试验结果表明,愈伤组织生长和延胡索乙素形成的适宜条件存在差异,在27组处理中, 1号培养基有利于培养物鲜重的提高, 9号有利于干物质的积累, 10号则有利于的延胡索乙素形成;培养基中几种无机离子和有机成分均显著影响愈伤组织生长和延胡索乙素形成,NH₄⁺/NO₃^-与Ca²⁺和K⁺之间的交互作用对于生物量积累和延胡索乙素含量均有显著影响。     

不同激素及其不同配比对绞股兰愈伤组织诱导的统计学分析

绞股兰的茎段和叶碎片外植体可在合适的激素调节诱导下形成愈伤组织．通过含有不同水平激素的MS培养基对绞股兰愈伤组织诱导试验,经统计学分析,可以找出对绞股兰脱分化形成愈伤组织细胞影响显著的激素及其适宜的激素水平．     

不同培养基对水稻胚性愈伤组织诱导及分化的影响

以水稻成熟胚为材料诱导愈伤组织,统计在不同基本培养基上的愈伤诱导率以及绿苗分化率,分析不同基本培养基及外源激素的含量和比例对愈伤组织生长及分化的影响。结果表明,试验材料对基本培养基具有选择性,MS培养基对籼稻种胚愈伤的诱导培养效果较好,NB培养基则更适合粳稻种胚愈伤的诱导培养;诱导继代培养基中加入多种氨基酸组合可有效提高出愈率和分化率,特别是粳稻的愈伤组织的诱导和分化需要多种氨基酸的共同作用;不同基因型水稻材料对激素和氨基酸组合的需求不同。