真核细胞中mRNA的降解机制

细胞中不同的ｍ ＲＮＡ 半寿期差异很大,ｍ ＲＮＡ 的稳定性受到多种因素的影响,现在已经发现了许多对ｍ ＲＮＡ 的稳定性有影响的顺式因子和反式因子。大量的研究证明在真核细胞内存在复杂的机制调节ｍ ＲＮＡ 的稳定与降解及其所引起的基因表达。现在可以肯定在真核细胞中至少存在着三种ｍ ＲＮＡ的降解方式：依赖于脱腺苷酸的降解,无义密码介导的ｍ ＲＮＡ 的降解和核酸内切酶的水解。其中依赖于脱腺苷酸的降解方式是细胞内大多数ｍ ＲＮＡ 降解的主要途径。     

真核细胞中mRNA降解机制研究进展

真核细胞中mRNA的半寿期差异明显，mRNA的降解是基因表达过程中一个重要的步骤，现已肯定在真核细胞中至少存在3种mRNA降解方式，即依赖于脱腺苷酸的降解，无义密码介导的mRNA的降解和核酸内切酶的水解。其中依赖于脱腺苷酸的降解是细胞内大部分mRNA降解的主要途径。另外，mRNA的稳定性还受多种因素影响，现已发现许多影响mRNA稳定性的“顺式因子”和“反式因子”。此外，mRNA降解可能与某些疾病的发生有关。     

真核细胞中mRNA的降解机制

细胞中不同的mRNA半寿期差异很大,mRNA的稳定性受到多种因素的影响,现在已经发现了许多对mRNA的稳定性有影响的顺式因子和反式因子。大量的研究证明在真核细胞内存在复杂的机制调节mRNA的稳定与降解及其所引起的基因表达。现在可以肯定在真核细胞中至少存在着三种mRNA的降解方式：依赖于脱腺苷酸的降解,无义密码介导的mRNA的降解和核酸内切酶的水解。其中依赖于脱腺苷酸的降解方式是细胞内大多数mRNA降解的主要途径。 Abstract　The half-lives of different mRNAs in Eukaryotic cells vary greatly. There are many elements can influence mRNA stability, including cis-acting factors and trans-acting factors. Evidences show that there exist complicated mechanisms in cells that regulate mRNA stability, degradation and expression. Recent results have defined three mRNA degradation pathways in Eukaryotic cells: deadenylation-dependent mRNA decay, nonsense-mediated mRNA decay and endonuclolytic cleavage. Among these pathways deadenylation-dependent decay is the most general pathway.     

真核细胞中无义介导的mRNA降解

无义介导的mRNA降解(NMD)作为一种有效的细胞监控机制,主要监测细胞转录产物的提前终止密码子(PTC),并使得含有PTC的mRNA被迅速降解,从而防止其被翻译成为缺陷性的蛋白质.尽管NMD具有一定的保守性,但在酵母、哺乳动物以及后来的果蝇细胞中都发现有所不同.目前对于NMD的研究已进入了结构领域并发现它与端粒调控和RNAi等机制相互关联.     

荧光标记mRNA差异显示技术

目的：应用荧光标记的ｍＢＮＡ差异显示技术。方法：提取未经过／经过ＩＦＮ－ＬＰＳ处理的三组人单核细胞系Ｕ９３７的总ＲＮＡ并以此为模板,采用荧光标记的锚定引物,通过逆转录、差异显示ＰＣＲ反应,经５．６％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带,回收后将其再扩增。结果：三组样本的ＤＤ－ＰＣＲ产物电泳显示长３００ｂｐ￣２．０ｋｂ不等的扩增片段,条带清晰、明亮,背景低,各样本相互间的差异不仅呈有无的变化,亦表现出     

差别显示mRNA法的改良

本文介绍了一种筛选和克隆差异表达基因的新方法——差别显示mRNA法。并在模板、引物、反应体系、反应条件等方面,对该方法作了深入的探索和改进,与原方法相比,改良法具有高效、可靠性高、经济等优点。实验表明,该方法能有效地筛选到一对细胞或组织在不同状态下表达差异的基因。为新基因的发现和克隆提供了新的手段。     

真核细胞中基因控制水平的变化

真核细胞中基因控制的研究在过去五年中已经成熟,进而成为一个实验生物学中最活跃而丰产的领域。早期关于真核基因控制的结论之所以推迟得出是,因为真核细胞中mRNA的产生并非是一种转录RNA的简单形式。特别是在脊椎动物细胞中,mRNA的转录单位较之最终的mRNA产物更长些。     

真核细胞染色体结构研究的某些进展

生物学中的重要课题之一是真核细胞染色体结构的研究,它涉及到诸如癌变、基因调控、细胞分化、发育等重要和基础课题。目前,关于30nm 染色质纤丝如何压缩形成中期染色体仍存在分歧。其中主要有3种模型:放射环模型、螺旋模型、折叠纤维模型。特别是放射环模型最近引起广泛的注意和争论。该模型认为中期染色体是由约30nm的染色质纤丝以染色体纵轴为中心向外辐射状伸出的环集缩而成。本文拟对这一方面的研究工作进行综述和讨论。1977年,Laemmli 等以中期 Hela 细胞为材料,用硫酸葡聚糖和肝素处理,去除组蛋     

RNA结合蛋白调节mRNA稳定性的作用机制

免疫稳态的维持涉及多种细胞因子的基因表达调控,其中在转录后水平对mRNA稳定性的调控起重要作用。ARE(AU-rich element)位于mRNA 3'UTR(非编码区),富含AU碱基,某些RNA结合蛋白通过识别结合ARE影响mRNA的稳定性。本文综合最新研究,概述了TTP、HUR等RNA结合蛋白对mRNA稳定性的调节机制及其在信号通路中的作用。     

重组蛋白A（RecA）及其真核细胞类似物的研究进展

RecA蛋白在原核生物DNA损伤的修复和同源重组中起关键怍用。近年来人们对其生物学特性.分子结构与功能以及从真核生物探索其结构或功能类似物的研究方面,都有很大的突破。本文就RecA的结构与功能,RecA的分子生物学研究进展以及真核细胞中的RecA类似物的研究现状作一简要综述。     

崔化RNA 寻找真核细胞生物基因组中隐藏的核糖酶

多亏了新的研究工具,我们发现了很多以前认为生物体内少量存在自身催化的RNA酶一核糖酶。现在科学家除了研究这些酶特殊的化学属性之外,还将能够在一些可用的模型动物中找出核糖酶,将这个领域带向更深的层面来探索核搪酶在基因调控中起到的巨大作用。     

背部烫伤大鼠脑及肝脏热休克蛋白70（hsp70）mRNA的诱导

本文首先用α－＾３２Ｐ标记的热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）ｃＤＮＡ为探针,研究了背部烫伤对大鼠脑肝ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的诱导。结果表明,烫伤大鼠脑肝ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的表达明显增加,烫伤后５ｍｉｎ内开始出现,２４ｈ后恢复正常。由于烫伤后脑肝温度的增加不超过１℃。因此温度升高不大可能是该基因表达增加的原因。在此基础上用ｈｓｐ７０的抗体,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ的方法,分析了烫伤大鼠脑肝ｈｓｐ７０的变     

母型mRNAs及其功能

早期的胚胎发育是受母型基因调控(Mat-crnal regulation)的,有关的发育信息按母型mRNAs形式被早期胚胎继承下来,并由这些mRNAs衍生的蛋白质调控发育过程,直至合子型基因被活化,过渡为合子型调控(Zygoticregulation,Paternal regulation)。所以母型信息的存在形式和功能,母型mRNAs的翻译     

白色念球菌与真核细胞的相互作用

白色念球菌表面具有整合素类似物（ｉＣ３ｂ受体）,上皮细胞上则有ｉＣ３ｂ分子。白色念球菌的整合素类似物识别ｉＣ３ｂ分子上的ＲＧＤ序列,从而发生粘附,故与酵母型真菌的致病力密切相关,即整合素类似物蛋白的表达愈高,其致病力愈强,反之则弱。酵母型真菌的整合素类似物也可能是哺乳动物整合素蛋白的前身。     

降钙素基因相关肽(CGRP)mRNA在大鼠淋巴细胞中的表达

最近,我们研究发现大鼠胸腺和淋巴结淋巴细胞中存在降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）样免疫反应活性。应用人工合成的可特异扩增降钙素／降钙素基因相关肽基因部分片断的寡核苷酸引物,通过逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,检测在大鼠脊髓背根神经节、胸腺细胞及肠系膜淋巴结淋巴细胞中是否存在ＣＧＲＰ ｍＲＮＡ,进一步研究大鼠淋巴细胞能否合成ＣＧＲＰ。结果显示,通过ＲＴ－ＰＣＲ从脊髓背根神经节（阳性对照）、胸腺和淋     

原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究

将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7RNA聚合酶 启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞。通过转染真核细胞实验表明 ,采用真核启动子CMV调控T7RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCVIRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因 ,且能适应不同的真核细胞环境 ,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系。     

真核细胞重复顺序DNA研究的一些进展

本文从如下几方面介绍了真核细胞重复顺序DNA结构功能研究的一些进展:(1)串联重复顺序是构成基因多态性的分子基础,基因多态性分析已用于家系分析;(2)一些短的重复顺序如LTR上具有转录调节信号,对基因表达起调控作用;(3)一些重复顺序的表达,与细胞生长分化有一定的相关性;(4)重复顺序在种属演化中具有一定的意义。     

原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究

将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7 RNA聚合酶/启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞.通过转染真核细胞实验表明,采用真核启动子CMV调控T7 RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCV IRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因,且能适应不同的真核细胞环境,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系.     

真核细胞的核纤层及其相关结构的研究

核纤层由A和B两种核纤层蛋白及核纤层蛋白结合蛋白组成。越来越多的证据显示：A、B两种核纤层蛋白与内核膜蛋白在细胞完成各项生理功能过程中发挥着重要的作用,如：细胞核的装配、遗传物质的复制、转录以及维持细胞结构和功能的完整性等。本综述了近几年的最新研究成果,其中包括：对新发现的大量的内核膜蛋白的鉴定,核纤层蛋白和内核膜蛋白在细胞核的装配和间期细胞中的独特作用,同时从细胞生物学角度探讨了核纤层蛋白的突变与疾病的关系,为真核细胞核纤层及其相关结构的进一步研究提供了重要线索。