谷氨酰胺衍生物对于肿瘤组织中谷氨酰胺酶活性的抑制作用

本文报告了45种谷氨酰胺衍生物对肉瘤180、L_(11)(脾)网织细胞肉瘤、肝癌及大鼠肝组织中谷氨酰胺酶活性的抑制作用。结果表明,化合物的结构与对酶的抑制似有一定关系。其中以α-N-邻苯二甲酰基较为重要,如将其去除,或将其环打开或缩小,都会导致对原来抑制作用的降低。但如在有此基的同时改变γ-酰胺基的结构,则又可能提高对酶的抑制作用。目前发现以化合物45对肿瘤及肝谷氨酰胺酶的抑制作用最好。动力学试验结果表明,化合物7及42对肉瘤180谷氨酰胺酶活性的抑制是可逆的。化合物7及45的作用可能不是通过与酶的活性中心相结合,而是通过对酶或酶与底物复合物的影响所致。化合物45对肝酶活性的抑制则可能是由于影响了酶与底物复合物的分解速度,而不是由于与酶或酶与底物复合物相结合所致。     

肿瘤组织中谷氨酰胺酶的活性

(1) 本实验比较了一些正常组织与癌瘤组织中谷氨酰胺酶活性。结果发现移植性癌瘤的酶活性以淋巴肉瘤最高。肿瘤间酶活性的变动范围不如正常组织间的变动范围大。诱发性淋巴肉瘤的酶活性较其来源组织为高,但皮肤癌则较正常表皮低。(2) 在肿瘤生长过程中,谷氨酰胺酶活性随肿瘤的重量而有所变化,如艾氏腹水癌(实质型)、脑瘤22、胸腺淋巴肉瘤等的谷氨酰胺酶活性有随肿瘤生长而升高的趋势,但这并不是肿瘤的一般规律,如脑瘤53、Walker癌、肉瘤180等则无此现象。(3) 再生肝的谷氨酰胺酶活性较正常肝低。(4) 讨论了谷氨酰胺酶与某些肿瘤生长的可能关系。     

N-酰化低聚壳聚糖衍生物还原能力的研究

对低聚壳聚糖进行N-酰化改性,制得取代度相同的N-马来酰低聚壳聚糖(NMCOS),N-琥珀酰低聚壳聚糖(NSCOS),N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖(NPCOS),其中NMCOS1、NSCOS1、NPCOS1的取代度均为0.25;NMCOS2、NSCOS2、NPCOS2的取代度均为0.49。考察了6种N-酰化低聚壳聚糖衍生物的还原能力。结果表明:当取代度相同时,N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖的还原能力最强,其次是N-马来酰低聚壳聚糖,N-琥珀酰低聚壳聚糖的还原能力最差。这可能是由取代基的性质不同所致。     

κ-卡拉胶邻苯二甲酰基化衍生物的抗氧化活性研究

对κ-卡拉胶进行酸降解得到三种卡拉胶低聚糖,并进一步与苯二甲酰基合成制得三种分子量分别为1450、2520和3430的κ-卡拉胶邻苯二甲酰衍生物(LA、LB和LC)。对产物进行IR表征并对其取代度(DS)进行测定,并检测了产物对羟基自由基.OH、DPPH自由基和过氧化氢的清除活性以及还原能力。结果表明,上述三种κ-卡拉胶邻苯二甲酰衍生物的抗氧化能力强弱顺序依次为:LC>LA>LB,这可能与衍生物的羟基含量、取代基团的性质以及取代度等因素有关。     

具液晶性的天然高分子—N—邻苯二甲酰化壳聚糖的合成与表征

本文在不同条件下制备了一种液晶性天然高分子——N-邻苯二甲酰化壳聚糖,定性讨论了反应条件对壳聚糖的N-邻苯二甲酰化反应的影响。研究了N一邻苯二甲酰化壳聚糖的溶解性、成膜性、结晶性,并重点研究了其液晶性,测定出室温下它在二氯乙酸和二甲亚砜溶液中的临界浓度都为24wt％,在三氟乙酸溶液中的临界浓度为14wt％。     

关于抗肿瘤药物的研究 Ⅵ.几种抗肿瘤药物对瘤细胞糖代谢的影响

(一) 用瓦氏呼吸器观察了五种抗肿瘤药(氧化氮芥、溶肉瘤素、N-甲酰溶肉瘤素、FSPA及6-巰基嘌呤)对瘤細胞呼吸、有氧及无氧酵解的影响。同时观察了药物对吉田腹水肉瘤大鼠的疗效,并且討論了药物对代谢的影响与疗效間的相关問题。 (二) 氧化氮芥体外給药时对艾氏腹水癌細胞的呼吸有明显抑制作用,而对吉田腹水肉瘤細胞的呼吸及酵解皆无明显影响。 (三) 溶肉瘤素无論体内或体外給药对上述两种瘤细胞的呼吸及酵解皆无明显作用。N-甲酰溶肉瘤素与溶肉瘤素不同,体内一次給葯可显著促进吉田腹水肉瘤細胞的呼吸,而对酵解无明显影响。FSPA不論大剂量还是小剂量对瘤細胞的呼吸及有氧酵解皆无显著抑制作用,但大剂量时可显著抑制无氧酵解。 (四) 6-巯基嘌呤体内給药时显著抑制吉田腹水肉瘤細胞的无氧酵解,对呼吸及有氧酵解却无影响。     

手性高效液相色谱法测定S(+)-布洛芬对映体过量

用手性固定相高效液相色谱法(CSP-HPLC)测定了样品或微生物酶不对称水解反应液中S(+)-布洛芬对映体过量(ee)。该法首先将布洛芬转化为二苯酰胺衍生物,然后在N-3,5-二硝基苯甲酰-?-苯甘氨酸[?-DNB-PG]的共价型CSP柱上进行对映体HPLC分离。流动相选择正已烷-异丙醇(98:2),流速1ml/min,对映体分离度1.47。按相同方法同时进行消旋布洛芬的二苯酰胺衍生物的分离,由其对映体峰高比可测定S(+)-布洛芬ee(%)。测定加量回收率相对标准偏差为3.3%。     

北京棒状杆菌AS1.299谷氨酰胺合成酶活力调节的研究

北京棒状杆菌(Corynebacterium pekinense AS1.299)谷氨酰胺合成酶的转移酶活性依赖于Mn~(++),酶的生物合成酶活性依赖于Mg~(++),其他二价金属离子只能部分代替Mn~(++)和Mg~(++)的作用。Mn~(++)对ATP或ADP的克分子比对酶活力起调节作用。ATP、CTP,丙氨酸和甘氨酸对谷氨酰胺合成酶有较强的抑制作用;丝氨酸、谷氨酸和6-磷酸葡萄糖胺对酶活力的抑制作用分别是24,15和21％。效应物混合物对酶的作用被证明是累积性的抑制作用。     

N-[C~(14)]甲酰溶肉瘤素代谢产物的研究

正常大鼠或吉田肉瘤大鼠腹腔注射N[C~(14)]-甲酰溶肉瘤素后第一次所排尿中,最少含有三个代謝产物。代謝物1为未变的N[C~(14)]-甲酰溶肉瘤素,其含量为尿中放射性的51.5—52.7％。代謝物2为未脫掉甲酰基的含羥基化合物排出量約为尿中放射性的20.2—23.1％。代謝物3可能是C~(14)-甲酸,排出量約为尿中放射性的9.5—12.6％。自梭形細胞肉瘤B_(22)及Krebs-2腹水癌小鼠尿中亦得到相似的結果。溶肉瘤素并非N[C~(14)]-甲酰溶肉瘤素的主要代謝产物,但并不能排除N[C~(14)]-甲酰溶肉瘤素通过溶肉瘤素轉变为溶肉瘤素羟基水解物的可能性。 N[C~(14)]-甲酰溶肉瘤素在正常动物体內的代謝在质与量上与肿瘤动物者并无不同;在对N-甲敏感瘤动物(吉田肉瘤大员、Krebs-2腹水癌小员)与不敏感瘤动物(梭形細胞肉瘤B_(22)小鼠)之間亦无明显差异。     

反相高效液相色谱用于几种氨基酸的定量分析

采用高效液相色谱法等浓度的洗脱天门冬氨酸、谷氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺,分析氮代谢中几个主要氨基酸。由邻苯二甲醛(OPT)和β-巯基乙醇柱前衍生反应,在14分钟内可同时测定四种氨基酸。测试样品经预处理。生成荧光性的衍生物1-硫代烃基-2-烃基异吲哚。反应是瞬时的,其荧光量子     

一种赤霉素的功能类似物--苯邻二甲酰亚胺(phthalimide)

AC-94377是一种人工合成的苯邻二甲酰亚胺类的物质,具有类似赤霉素的生物活性.该文介绍了此物质的化学性质、生物活性(包括:打破种子休眠,促进种子发芽和胚轴/茎的伸长,促进蕨类植物雄性器官发育和某些植物开花及无性结果,提高玉米中酸性磷酸酶、转化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶和大麦中α-淀粉酶的活性)、生理活性的可能机制的研究进展,并对此物质具有这些生理作用的理论意义和实际应用价值进行了讨论.     

几种有机磷杀虫剂使家蝇中毒后对真、假胆碱酯酶的抑制作用

本文用测压法研究了敌百虫、乐果、酰脲磷对家蝇体内外真胆碱脂酶(AChE)、假胆碱酯酶(φChE)的抑制效能与中毒征状的关系,并以N-甲基氨基甲酸苯酯进行了比较。所得结果表明,所用药剂对家蝇的中毒征状与对AChE和φChE的抑制情况紧密相关,而对AChE的抑制作用比对φChE的抑制作用大:其原因可能是由于AChE的磷酸化程度大于φChE。不同药剂对酶的最大抑制作用虽有所不同,但同一种药剂使两种酶受抑制的最高峰出现在同一时间,并且都在家蝇中毒昏迷时出现。 此外,AChE及φChE在被各种药剂在体内抑制后,经一定时间,出现恢复现象,但对于不同药剂,恢复出现的时间不同。恢复现象的产生,可能是由于酶的重新形成,或磷酸化酶的水解。 由体外抑制的结果(pI₅₀)与体内处理结果的比较,表明了体内外的抑制情况非常一致。     

光合细菌Rhodopseudomonas capsulata谷氨酰胺合成酶的某些特性

研究了荚膜红假单孢光合细菌菌株N-3谷氨酰胺合成酶(GS)的腺苷态/脱腺苷态间互相转换和调节方式,对十六烷基三甲基溴化铵添加后的稳定,以及不同氮源对酶量的变化和腺苷态的影响。在光暗的调节上,光强在500～50001x范围内,此酶的活性几乎处于同一水平,其腺苷态和脱腺苷态之比亦不发生显著变化,但一经黑暗处理,GS活性迅速下降,相似于固氮酶活性受光、暗的调节。借助于谷氨酰胺合成酶的抑制剂MSX加入反应系统,消除了氨对固氮酶活性的瞬间抑制,但消除不了暗对固氮酶活性的瞬间抑制,表明谷氨酰胺合成酶参与了氨对固氮酶活性的瞬间调节,但并不参与固氮酶活性的光,暗瞬间调节。     

N-氨甲酰基氨基酸水解酶在毕赤酵母中的表达

N-氨甲酰氨基酸水解酶是乙内酰脲酶系的组成部分,催化N-氨甲酰氨基酸水解为相应氨基酸。节杆菌BT801的N-氨甲酰氨基酸水解酶是该菌乙内酰脲酶系中惟一具立体专一性的酶,也是整个反应体系的限速酶。通过PCR从携带乙内酰脲酶系完整操纵子的亚克隆质粒pUC18-169上扩增得到N-氨甲酰氨基酸水解酶基因(hyuC)片段,连接到载体pPIC3.5K上,经BglⅡ酶切线性化,通过PEG法转化导入毕赤酵母GS115感受态细胞,利用G418抗性筛选得到插入多拷贝目的基因的转化子。酶活性分析表明所得转化子具     

氨甲酰磷酸不同合成途径在大肠杆菌中的比较

【背景】氨甲酰磷酸是生物合成代谢中精氨酸与嘧啶的重要前体物质,在工业微生物生产精氨酸与嘧啶及其衍生物中发挥关键作用。【目的】在大肠杆菌Escherichia coli BW25113中比较氨甲酰磷酸不同合成途径的催化效率。【方法】在大肠杆菌Escherichia coli BW25113中过表达鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)的基础上,分别过表达大肠杆菌自身的氨基甲酸激酶(CK)和氨甲酰磷酸合酶(CPSⅡ)并表征其反应效果。通过优化底物供应(调整底物浓度与引入L-谷氨酰胺合成酶)对CK与CPSⅡ的催化反应进行优化。【结果】在大肠杆菌中过表达OTC,建立细胞水平氨甲酰磷酸检测体系。在此基础上比较不同来源的CK,发现大肠杆菌来源的CK效果最好,50mmol/LNH4HCO3条件下全细胞催化9h得到2.95±0.15mmol/LL-瓜氨酸;过表达CPSⅡ时,50mmol/LL-谷氨酰胺催化9h得到3.16±0.29 mmol/L L-瓜氨酸。通过改变底物NH4HCO3浓度和引入外源L-谷氨酰胺合成酶(GS)等方式对CK与CPSⅡ的催化反应分别进行优化后,100 mmol/L NH4HCO3条件下,L-瓜氨酸浓度分别提高至4.67±0.55mmol/L和6.12±0.38mmol/L,且过表达GS后CPSⅡ途径可以利用NH3,不需要额外添加L-谷氨酰胺。【结论】引入L-谷氨酰胺合成酶后的CPSⅡ途径合成氨甲酰磷酸的能力优于CK途径,为精氨酸、嘧啶及其衍生物的合成提供了一种更加高效的策略。     

海胆黄多糖SEP对S180的体内抑制作用

研究海胆黄多糖SEP对S180肉瘤的抑制作用及初步机制。MTT法检测SEP对体外培养的S180细胞生长的抑制作用;建立小鼠S180肉瘤模型观察SEP抗肿瘤活性;检测SEP协同ConA/LPS刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用;同时,考察SEP对NK细胞和杀伤性T淋巴细胞(cytotoxic T lym-phocyte,CTL)活性的影响;碳粒廓清检测SEP对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响。研究表明,海胆黄多糖SEP高中低剂量(16、8、4 mg/kg)显著抑制小鼠180实体瘤生长,增加小鼠脾指数和胸腺指数,协同ConA/LPS刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,提高小鼠NK细胞和CTL活性,增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能,通过免疫调节提高小鼠免疫功能达到抑制S180作用。     

含硫香料——硫代芳樟醇及其衍生物的合成研究

本文对香叶醇转化为硫代芳樟醇(4)及其衍生物的合成方法进行了研究。香叶醇与N,N-二甲基琉代氨基甲酰氯反应生成N,N—二甲基琉代氨基甲酸-O-香叶基酯(5),(5)通过[3,3]-σ迁移反应转变成N,N-二甲基硫代氨基甲酸-S-芳樟基酯(6),(6)进一步还原得到硫代芳樟醇(4)。(4)转变成衍生物硫代芳樟醇乙酸酯(7a)及芳樟基甲基疏醚(7b)。(4)及(7b)在高度稀释时具有愉快的热带水果香味。     

不同取代度N-邻苯二甲酰壳聚糖抗氧化活性的研究

低聚壳聚糖与邻苯二甲酸酐酰化得到三种取代度不同的N-邻苯二甲酸酐酰低聚壳聚糖NPCOSA、NPCOSB和NPCOSC,取代度分别为0.330、.55和0.65。通过红外光谱对其结构进行表征。并考察了其抗氧化性能。结果表明:COS的抗氧化性能最强;随着取代度的增加,N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖对超氧阴离子的清除能力逐渐升高;而对DPPH的清除能力以及还原能力呈逐渐下降趋势;对羟基自由基的清除顺序大小依次为NPCOSB>NPCOSA>NPCOSC,即NPCOSB清除羟基自由基的的能力最佳。     

N甲酰溶肉瘤素对P~(32)参入正常及肿瘤组织核酸的影响

本文报告 N-甲对 P~(32)参入正常及肿瘤组织(或细胞)中核酸的影响。N-甲在治疗剂量下对 P~(32)参入大鼠吉田肉瘤(腹水及实体型)及小鼠艾氏癌腹水型的肿瘤细胞(或组织)核酸有明显抑制作用,且以对参入 DNA 的影响最强。N-甲对 P~(32)参入小鼠艾氏癌实体型肿瘤组织核酸无影响;在小剂量下对 P~(32)参入小鼠网织细胞肉瘤组织核酸亦无明显影响。N-甲对 P~(32)参入正常及肿瘤动物脾脏核酸有明显抑制作用。N-甲与溶肉瘤素对 P~(32)参入正常及肿瘤组织核酸的影响类似,但在等毒性剂量下其作用较溶肉瘤素稍弱。     

化学结构与生物活性:取代苯基N-甲氨基甲酸酯的合成与活性

用异氰酸甲酯与适当的酸类反应,合成了一系列的取代苯基N-甲氨基甲酸酯类化合物。生物测定表明,在苯基N-甲氨基甲酸酯的苯环上引入取代基,均能增加对胆碱酯酶活性的抑制作用,在苯环上引入甲基增加对淡色库蚊(Culex pipiens pallens)幼虫的毒性。在苯环酯键的邻位上引入取代基时,除2,3-二甲苯基化合物外,均降低对蚊幼虫的毒性。 在各化合物对蚊幼虫的毒性和其对胆碱酯酶活性的抑制作用间,不能看出任何相互关系。