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《生物技术通讯》2017,(5)
目的:建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测新生儿血液标本中肺炎克雷伯菌基因组DNA的方法,并进行初步临床应用。方法:选择肺炎克雷伯菌高度保守的二鸟苷酸环化酶基因作为靶基因,设计特异性引物和TaqMan探针,建立RQ-PCR反应体系;采用含靶基因扩增片段的重组质粒建立标准曲线,提取血液中的基因组DNA,对500份新生儿血液标本进行RQ-PCR检测。结果:设计的引物和探针特异性高,检测限为1个拷贝数;500份新生儿血液标本中,RQ-PCR检测为阳性的有18个病例,阳性率为3.6%,明显高于血培养的阳性率2.4%(12个病例),差异具有统计学意义(P0.01)。结论:RQ-PCR可用于检测新生儿血液标本中的肺炎克雷伯菌,此方法快速、灵敏、特异性强。 相似文献
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目的检测和分析肝硬化患者无菌腹水中真菌DNA存在状况。方法选取118例无菌腹水的肝硬化患者为研究对象,分别采集患者刚入院时的腹水、血液和粪便标本。应用PCR技术直接检测标本的真菌DNA并克隆测序。并收集患者临床资料,对患者临床症状及检验结果进行分析比较。结果1名患者的腹水、血液、粪便中同时检测到真菌DNA,14名患者的腹水和粪便中同时检测到真菌DNA,3名患者的血液和粪便中同时检测到真菌DNA,大部分序列间的相似性高于99%。测序检测到最多的菌种为Candidaalbicans。结论肝硬化患者无菌腹水中能够检测到真菌DNA,并且提示在肝硬化患者腹水和血清中检测到的真菌DNA易位于肠道。 相似文献
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IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本中穿通支原体的分离检出 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本中穿通支原体(Mycoplasma penetrans,Mp)的分离检出率以及与病理型别相关性。方法采用分离培养法,共计从26例IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本及38例正常对照相应标本中进行穿通支原体分离检测,对培养阳性标本用穿通支原体套式PCR进行证实。结果在11例(42.3%)患者血液与尿液或(和)咽拭子中同时分离到穿通支原体,单独尿液或咽拭子标本阳性分别为1例(3.8%)与7例(26.9%)。26例IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子穿通支原体的分离检出率分别为42.3%、23.1%与57.7%;与38例正常对照组血液、尿液及咽拭子检出0例、2例(5.3%)与7例(18.4%)相比较,差异有非常显著性(P〈0.01),在正常对照组中无2种以上标本同时检出穿通支原体。结论穿通支原体在ISA肾病患者的血液、尿液与咽拭子标本中均有较高的检出率且与病理型别有一定的相关性。 相似文献
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用滤纸血片做反向间接血凝检测乙型肝炎表面抗原HBsAg,其结果与血清标本是一致的。为了进行大面积乙肝检测,我们对滤纸血片和血清标本同时进行对比观察其结果如下。一材料与方法 1 标本采集份数:计450份。 2 滤纸血片:滤纸系中国杭州新华造纸厂制。直径11cm,滤纸分四等份,每份滴一人血液两滴,每滴直径>9mm。 相似文献
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目的:对张家口地区无偿献血者中隐匿性乙肝病毒感染情况进行流行病学调查,为当地血液安全筛查提供指导意义.方法:应用HBsAg ELISA检测试剂盒对回库无偿献血者标本进行检测;对血浆标本采用nested-PCR技术进行HBV核酸检测;对阳性标本进行HBVDNA序列分析.结果:在总计5498例次标本的检测中,共有5417例为HBsAg阴性;HBsAg阴性标本中nested-PCR方法检出13例HBV DNA阳性(0.24%,13/5417);测序结果显示隐匿性HBV感染者中C基因型所占的比例为61.5%(10/16),明显高于HBsAg阳性的HBV感染者(28.2%,11/39,P<0.01).结论:张家口地区无偿献血者中存在较高比例的隐匿性乙肝病毒感染. 相似文献
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致病性汉坦病毒的宿主主要为啮齿类动物,其病毒感染状况是人间疫情发生的关键影响因素,可通过检测宿主动物标本中病毒基因组RNA、蛋白抗原及特异性抗体而进行监测。本研究利用367份鼠肺及鼠血标本,对双抗原夹心ELISA(ELISA)、实时荧光RT-PCR(RT-PCR)和免疫荧光(IFA)等三种分别检测抗体、核酸和抗原的方法进行比较评估。ELISA法检出抗体阳性鼠血标本46份,阳性率为12.53%;RT-PCR法检出病毒RNA阳性鼠肺标本28份,阳性率为7.63%;IFA检出抗原阳性鼠肺标本24份,阳性率为6.54%。宿主动物组织标本中检出汉坦病毒RNA和(或)结构蛋白抗原的标本,对应的血液标本中可检出病毒特异性抗体,100%(24/24)IFA检测阳性标本和89.3%(25/28)RT-PCR检测阳性标本对应血标本ELISA抗体检测阳性,反之亦然,检出抗体的标本基本包含了可检出抗原和RNA的标本。RT-PCR与IFA检测结果差异无显著性(χa2=0.64,P0.05),一致性检验Kappa系数为0.71,一致性高(Z=13.66,P0.05),首先对血标本开展基于ELISA的特异性抗体检测,可显著缩小RT-PCR或IFA法检测病毒RNA或抗原的范围(χb2=12.04,χc2=20.05,P0.05)。本研究为宿主动物汉坦病毒感染实验室监测方案优化提供了有益的依据。 相似文献
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评价全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统的应用价值,并与Bactec9120血培养系统相比较。将2005年7~12月临床标本407例分别同时接种于2种不同的血培养系统中进行培养,对其阳性检出率、阳性检出时间、假阳性率及相关因素进行综合性评估。407份标本全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统检测出阳性标本58株,阳性率为14.3%,平均检出时间为(11.58±7.62)h;Bactec9120血培养系统培养阳性菌株61株,阳性率为15.0%,平均检出时间为(18.71±12.89)h。经统计学处理,两种检测方法阳性率无显著性差异(χ2=0.089,P>0.5),但检出时间有显著性差异(t=3.64,P<0.001)。全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统快速、简单、准确、便宜,可在各医院推广使用。 相似文献
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目的 探讨血筛酶免疫试剂的质量以及2次化验试剂的合理搭配,最大限度地避免漏检和减少假阳性。方法 对随机抽取的73份HBsAg和99份抗-HCV检测不合格的献血标本分别采用与常规筛查相同的2种进口试剂和另1种国产酶免试剂进行复检,并对复检中至少1种试剂为反应性的标本进行HBsAg中和试验或抗-HCV重组免疫印迹试验确证。结果 73份HBsAg不合格标本中,20份确证阳性,11份可疑,42份阴性;99份抗-HCV不合格标本中,29份确证阳性,70份阴性。针对研究范围内特定的标本,进口试剂的漏检率可达13.79%~27.59%,且也存在不同程度的假阳性。2种进口试剂间检测结果互补,而国产试剂无法查出进口试剂的漏检。结论 无论是进口还是国产血筛酶免试剂,都存在不同程度的漏检和假阳性情况,应选择2种检测结果互补的试剂对血液进行筛查,以保障血液安全。 相似文献
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目的:评价巢式PCR(nPCR)法在早期梅毒诊断中的临床应用价值,以提高早期梅毒诊断的灵敏度和特异性。方法:选择2010年10月至2011年11月来我院就诊,经临床综合分析为一期梅毒的患者195例和同期就诊的120例非梅毒患者为研究对象,采用nPCR法对棉拭子标本和血液标本中梅毒螺旋体特异性基因tpp47进行扩增检测,所有标本同时做暗视野镜检和Tp—ELISA血清学检测。结果:nPCR法共检测出阳性标本176例,其灵敏度和特异性分别为90.3%和100%,明显高于暗视野镜检和Tp-ELISA法,差异有统计学意义。结论:nPCR法在早期梅毒诊断中具有较高灵敏度和特异性,可以作为暗视野镜检和血清学检测的补充试验。 相似文献
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目的:研究分析溶血反应对临床生化检测结果的影响。方法:收集我院2015年1月至12月120例正常人体检血液标本资料,采用控制变量法,在试管1中放入正常血液,试管2中放入发生溶血反应血液,分别检测两组血液临床生化指标,并比对变化数据。结果:在检测的17项数据中,血糖、总胆红素、直接胆红素、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、总蛋白、甘油三酯、尿酸、总胆固醇、乳酸脱氢酶等11项数据在试管1与试管2中,检测指标变化大,具有统计学意义(P0.05)。白蛋白、肌酐、尿酸氮、血钙、酸性磷酸酶、血磷等六项指标在试管1与试管2中,含量检测基本无变化(P0.05)。结论:溶血反应的发生对临床生化检测结果影响很大,发生溶血反应会直接影响到酶类等指标的检测结果的准确性,临床检测中应尽量避免溶血反应。 相似文献
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蜡样芽胞杆菌又称为坚实芽胞杆菌(Bacillus cereus),在实际工作中每年都能在血液、脑脊液、胸腹水、痰液等标本中检测到多例蜡样芽胞杆菌,而且纯度很高。但由于受教科书的影响,只有在食物中毒患者中检测到蜡样芽胞杆菌有临床意义,因而在临床标本中检测到都把它作为污染菌而漏检。从今年4月份以来,在血液和脑脊液中共检出4例蜡样芽胞杆菌,现将结果报道如下。病例一,男,80岁,职业,干部,2005年4月22日因脑梗死、右下肢淋巴管炎入住心血管内科,白细胞5.78×109/L,中性粒细胞0.74、生化全套、尿常规正常,血培养检出蜡样芽胞杆菌,用左旋氧氟沙星… 相似文献
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《生物技术通讯》2017,(6)
目的:评价Sysmex XN-1000血液分析仪检测血小板(PLT)3种方法的准确性。方法:收集广州总医院2017年1、2月住院病人血液标本共166例,分别用手工法和XN-1000血液分析仪的电阻抗法(PLT-I)、光学法(PLT-O)、荧光染色法(PLT-F)检测同一标本的血小板计数,以手工法为参考标准,比较XN-1000血液分析仪3种方法的准确性。结果:当PLT计数范围为100×10~9~300×10~9/L和300×10~9/L时,3种仪器法与手工法结果比较,差异无统计学意义(P0.05);当PLT100×10~9/L时,仪器法中的PLT-O和PLT-F法与手工法结果比较,差异无统计学意义(P0.05),而PLT-I法与手工法结果比较,差异有统计学意义(P0.05),其与手工法的相关性比较依次为PLT-FPLT-OPLT-I。结论:当PLT100×10~9/L时,仪器检测血小板计数3种方法的准确性均较好;当PLT100×10~9/L时,PLT-F和PLT-O法的检测准确性优于PLT-I法。 相似文献
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目的:提取轻度认知障碍(MCI)、阿尔茨海默型痴呆(DAT)患者血液标本以及PC-12细胞培养基标本中的外吐小体并检测其中miRNA-135a含量。方法:使用超速离心法分离7例MCI、18例DAT患者、健康对照组的血清和血浆及PC-12细胞培养基中的外吐小体,使用实时定量PCR检测外吐小体中miRNA-135a的含量。结果:在PC-12细胞培养基、血清和血浆标本外吐小体中检出了miRNA-135a。MCI和DAT患者血清、血浆外吐小体miRNA-135a水平显著低于健康对照组(P〈0.05),但MCI患者血清、血浆外吐小体miRNA-135a水平与DAT患者相比无显著性差异(P〉0.05)。MCI、DAT和健康对照三者的血清和血浆标本外吐小体miRNA-135a水平均无相关性(P〉0.05)。结论:本研究证实了血液和脑脊液标本外吐小体中存在miRNA-135a,对将外吐小体miRNA作为AD诊疗潜在标志物提供了证据。 相似文献
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目的:随着基础和临床研究的深入开展,拥有完整基因信息的组织标本成为了肿瘤研究工作的基础.建立电子信息化管理的乳腺肿瘤组织标本库和数据库,为临床和科研收集、保存和管理标本资源.方法:标准化收集手术切除的乳腺肿瘤组织、正常腺体组织,以及患者血液标本,预处理后保存于-80℃冰箱中.每3个月从标本库中随机抽取5例标本,提取标本的总RNA,琼脂糖凝胶电泳验证总RNA质量;运用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)检测标本中人表皮生长因子-2(Human epidermal growth factor receptor,HER-2 or c-erbB-2)和Ki67的表达,并与术后免疫组化结果进行比较.同时利用Epidata软件管理乳腺肿瘤组织标本库.结果:收集恶性肿瘤507例,良性肿瘤212例,血液标本9347份,并建立了一套高效的信息化管理系统.总RNA电泳结果显示28 S和18S亚基条带清晰明亮,5S条带很弱,表明标本中的RNA质量较高,无降解.免疫组化结果显示标本中的HER-2和Ki67的表达与术后免疫组化结果情况吻合,存储的标本质量良好.结论:建立的实验标本收集、储存流程是有效可行的,收集的标本质量是可靠的,管理方法是高效实用的,为乳腺肿瘤基础和临床研究提供质量可靠的标本来源,可为乳腺肿瘤研究提供良好的服务平台. 相似文献