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1.
地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质   总被引:9,自引:1,他引:9  
地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和Sephadex G-100离子交换柱层析以及制备PAGE等步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点P1为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最适温度为60℃,稳  相似文献   

2.
地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质   总被引:6,自引:0,他引:6  
地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和SephadexG-100离子交换柱层析以及制备PAGE筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点PI为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最后温度为60℃,稳定pH为6.0—9.0,稳定温度为40℃。金属离子中Mg ̄(2+)、Ca ̄(2+)、Fe ̄(2+)、Ni ̄(2+)对该酶有一定的激活作用;而Sn ̄(2+)、Zn ̄(2+)、Al ̄(3+)、Ag ̄+和Hg ̄(2+)对该酶有强烈的抑制作用。NK-27菌株的β-甘露聚糖酶对魔芋葡萄甘露聚糖和角豆胶半乳甘露聚糖的Km值分别为7.14和5.56mg·ml ̄(-1);V_(max)分别为200.53和157.45μmol·mg ̄(-1)·min ̄(-1)。  相似文献   

3.
地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(βmannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和SephadexG-100离子交换柱层析以及制备PAGE筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点PI为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最后温度为60℃,稳定pH为6.0—9.0,稳定温度为40℃。金  相似文献   

4.
枯草芽孢杆菌中性内切β-甘露聚糖酶的纯化及性质   总被引:14,自引:0,他引:14  
三草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM9602产生的中性内切β-甘露聚糖酶(endo-β-1,4-D-mannan mannanohydrolaes,EC,3.2.1.78)经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素(DE22)离子交换柱层析,得到电泳纯的样品,提纯了45.5倍,收率为5.9%。用SDS-PAGE测得该酶的分子量为35kD。用PAGEIEF测得其等电点pⅠ为4.5。酶反应的  相似文献   

5.
诺卡氏菌形放线菌β-甘露聚糖酶的纯化和性质   总被引:11,自引:0,他引:11  
产β-1,4-D甘露聚糖酶的诺卡氏菌形放线菌(Nocardioform actinomycetes)菌株NA3-540,发酵培养72h,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,95%乙醇沉淀,CM-Sephadex A50柱层析、羟基磷灰石柱层析、DEAE-纤维素离子交换及Sephadex G-100分子凝胶过滤柱等步骤,β-甘露聚糖酶的比活提高了137倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAG  相似文献   

6.
地衣芽孢杆菌1Baciuus Licheniformis)BL-306产生的胞外β-甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素柱层析。Sephadex-G100柱凝胶过滤和DEAE-纤维素柱再层析分离纯化,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后β-甘露聚糖酶分子量为26000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳(PAGEIEF)测得等电点PI为5.0。该酶  相似文献   

7.
枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的纯化及性质研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
经硫酸铵分级沉淀、超滤浓缩、阴离子交换层析和凝胶过滤层析,由枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis)BM9602培养滤液得到了常规凝胶电泳一条带的中性β-甘露聚糖酶.该酶具有与其它已知同类酶相类似的性质,但用SDS-PAGE测得该酶分子量为37kD;用聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测得等电点pI为4.9.  相似文献   

8.
芽孢杆菌A-30产碱性β-1,4-聚糖酶固体发酵研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
筛选得到一株高产β-1,4-聚糖酶的耐碱性芽孢杆菌A-30,其固体发酵(Solid state fermentation SSF)时最适培养条件:起始pH为8.0、培养温度为32℃、10%(v/w)接种量,含水量为66.6%(v/w),以0.5%的NaNO3为无机氮源,发酵96h,木聚糖酶活可达6457IU/g(Drybacterial bran),纤维素酶活(CMCase)可以达到18.66IU  相似文献   

9.
产β-甘露聚糖酶地衣芽孢杆菌的分离筛选及发酵条件   总被引:12,自引:0,他引:12  
从上样中分离筛选出产β-甘露聚糖酶的地衣芽孢杆菌,经紫外线诱变处理后(15W,30cm照射40s)获得高酶活力NK-27菌株,在以魔芋粉、豆饼粉为碳、氮源添加无机盐的发酵培养基中,β-甘露聚糖酶活力达110.49u/ml。初始PH值、装液量、培养温度和培养时间对产酶有一定影响。  相似文献   

10.
筛选得到一株高产β-1,4-聚糖酶的耐碱性芽孢杆菌A-30,其固体发酵(Solid state fermentationSSF)时最适培养条件:起始pH为8.0、培养温度32℃、10%(v/w)接种量,含水量为66.6%(v/w),以0.5%的NaNO_3为无机氮源,发酵96h,木聚糖酶活可达6457IU/g(Dry bacterial bran),纤维素酶活(CMCase)可以达到18.66IU/g。氮源组成、温度、pH及发酵时间等对A-30所产木聚糖酶和纤维素酶比例有较大影响。葡萄糖对A-30的阻遏效  相似文献   

11.
研究了嗜碱芽孢杆菌(alkalophilicBaclussp.)NTT33发酵产生胞外碱性β-甘露聚糖酶的条件,其最佳碳源为1%槐豆角,最佳氮源为1%蛋白胨+0.2%酵母膏,发酵培养36h产酶量最高(达61.3υ/mL)。甘油,葡萄糖,甘露糖等对产酶有强的阻遏作用。该菌株经紫外诱变处理后,采用透明圈法初步筛选出在含葡萄糖和不含葡萄糖的槐豆胶培养基上同时产生透明圈的菌株,进一步测定其产酶进程曲线,最后筛选到一株(NTT33-r6)部分消除葡萄糖代谢阻遏高产β-甘露聚糖酶的菌株,其酶活力比出发菌株提高50%,,达到96.3U/ml;。  相似文献   

12.
诺卡氏菌形放线菌(Nocardioform actinomycetes)NA3-540产生的β-甘露聚糖酶(ManNA)能不同程度地水解槐豆胶、瓜胶、田菁胶和魔芋胶等甘露多聚糖为组分的植物胶,生成系列甘露寡糖;该酶只轻微地水解香豆胶,不能水解β-甘露聚糖、黄原胶、海藻胶;ManNA对槐豆胶、瓜胶和魔芋胶多糖的Km值和Vmax分别为1.75、6.13、3.9mg/mL和2485、1303、853μmol/(min/mg),表明槐豆胶是该酶的理想水解底物。ManNA水解几种植物胶的明显差异,表明甘露聚糖的糖链组成和空间结构明显地影响着β-甘露聚糖酶的水解活性。  相似文献   

13.
研究了搅拌转速、PH控制以及插瓶发酵过程中不同时间硫酸铵的补加对β-1,4聚糖酶形成的影响,优化得到A-30的β01,4-聚糖酶分批发酵操作条件和初步优化了(NH4)2SO4流加发酵条件。研究结果显示麸皮表面有大量A-30菌体细胞的吸附,搅拌转速对菌体吸附和β-1,4-聚糖酶的形成有明显影响;发酵过程中PH下降有利于β-1,4-聚糖酶形成。采用了实期以5ml/h的速率恒速流加,后期测定(NH4)2  相似文献   

14.
β—甘露聚糖酶的研究现状   总被引:11,自引:0,他引:11  
本文主要概述了β-甘露聚糖酶作用底物的方式、不同生物来源的β-甘露聚糖酶的一般特性及其遗传的物质基础和该酶在工业、医药、食品方面的广泛应用。  相似文献   

15.
芽孢杆菌M50产生β—甘露聚糖酶的条件研究   总被引:16,自引:0,他引:16  
从土壤中分离到9株产生β-甘露聚糖酶的芽孢杆菌(Bacillus sp.)。Bacillus sp.M50250mL三角瓶摇瓶培养试验,以4%的魔芋粉为碳源,1.0%(NH4)2SO4为氮源,0.35%Na2CO3,30~34℃培养60h产酶达到高峰。酶活力为180~220u/mL。100L罐发酵,在30~32℃,1:0.75vvm通气量,200r/min条件下,发酵液酶活力高达330u/mL。  相似文献   

16.
芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
从土壤中分离到9 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌( Bacillus sp .) 。Bacillussp . M50250m L三角瓶摇瓶培养试验,以4 % 的魔芋粉为碳源,1-0 % ( NH4)2SO4 为氮源,0-35 %Na2CO3 ,30 ~34 ℃培养60h 产酶达到高峰。酶活力为180 ~200u/m L。100L 罐发酵,在30 ~32 ℃,1∶0 .75vvm 通气量,200r/min 条件下,发酵液酶活力高达330u/m L。酶的最适反应温度和pH 分别为50 ℃和6-0 ,低于50 ℃,pH5 .0 ~7 .0 酶稳定。Fe3+ 、Al3+ 、EDTA、Hg2+ 对酶有抑制作用,而Ba2+ 、Mn2+ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。  相似文献   

17.
产β1 ,4D甘露聚糖酶的诺卡氏菌形放线菌( Nocardioform actinomycetes) 菌株NA3540 ,发酵培养72h ,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,95 % 乙醇沉淀,CMSephadex A50 柱层析、羟基磷灰石柱层析、DEAE纤维素离子交换及Sephadex G100 分子凝胶过滤柱等步骤,β甘露聚糖酶的比活提高了137 倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDSPAGE 和凝胶过滤法分别测定β甘露聚糖酶分子量为41kD和40kD,证明该酶为单聚体;用等电聚焦电泳测得其等电点为4-8 ;经氨基酸组成分析,发现蛋白中有较高含量的Gly、Asp、Ala 及Glu 残基。该酶的最适反应温度为75 ℃,在不超过60 ℃时酶活较稳定;酶反应的最适pH 为8-0 ,pH 稳定范围为6-5~11-0 。重金属离子Hg2+ 、Cu2+ 、Pb2+ 、Fe3+ 、Co2+ 、Zn2+ 能强烈抑制该酶活性,而Mn2+ 、Fe2+ 、Ag 对该酶有部分的抑制作用,低浓度的Na 、K 、Li 对该酶基本没有影响。  相似文献   

18.
鲁西北平原高产夏玉米生育模式董振国,鲁全国(中国科学院地理研究所,北京100101)DevelopmentMOdelofHighYieldingSummerCornonNortbwestSkandongPlain¥DongZhenguo;LuQuanguo(InstituteofGeography,ChineseAcademyofSciences,Beijing100101),ChineseJournalofE-colegy,1993,12(2):69-72.Erectandplanevarietiesofcornhavealeafinclinationof65°and50°andtheiroptimumplantingdensitiesare75000-82000and52500-60000stems·ha ̄(-1).Theleafareaindexatearsproutingstageandleafareaday(LAD)fortheformerarerespectively5.5-6.0and360-400,whilethoseforthelatterare3.5-4.0and260-300.TheL  相似文献   

19.
枯草芽孢杆菌中性β—甘露聚糖酶的产生及性质   总被引:22,自引:0,他引:22  
由土壤中分离出一株产中性β甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis),编号BM9602。该菌在液体培养条件下,产生中性β甘露聚糖酶。多糖能作为碳源,而单糖不能作为碳源;有机氮源优于无机氮源。产酶最适培养基组成:魔芋粉4%,牛肉蛋白胨和酵母膏各1%。产酶最适培养条件:培养基起始pH85,35℃,振荡培养36h。以槐豆胶为底物,培养滤液中性β甘露聚糖酶活力为96IU/mL。酶在pH50~100和50℃下稳定;作用最适条件为pH60和50℃;水解魔芋粉和槐豆胶均产生寡聚糖。  相似文献   

20.
鼎湖山土壤的微生物及其对酸度的适应特征   总被引:2,自引:0,他引:2  
鼎湖山土壤的微生物及其对酸度的适应特征葛荣盛(广东省土壤研究所广州510650)SoilMicrobcsatDinghushanNaturalReserveandTheirAdaptabilitytoAcidity¥.GeRongsheng(Guang-dongInstituteofSoilSciences,Guangzhou510650).ChineseJournalofEcology,1993,12(3):11-18.ThispaperdiscussesthemicrofloraeinsoilsunderdifferentforesttypesatDinghusannaturalreserveandtheiradaptabilitytoacidity:1.Undermixedforest,ammonifyingBacteria,cellulose-decomposingbacteriaandOligonitrophilesaredominant;underbroadleavedforest,ceIlulose-decomposingfungiaremore;andlittledifferencecanb  相似文献   

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