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几种扩血管多肽对bFGF促血管平滑肌细胞增殖作用的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
姜志胜 《中国应用生理学杂志》2000,16(2):161-164
目的和方法:研究肾上腺髓质素(Adm)、降钙素基因相关肽(CGRP)及C-型心房利太(CNP)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促血管平滑细胞(VSMC)增殖作用的影响及其机制。结果:孵育24h后,bFGF刺激VSMC增殖较对照组增加2.1倍(P〈0.01),细胞内蛋白磷酸化程度增加1.4倍(P〈0.01),PKC及MAPK活性分别增加1.5和2.5倍(P〈0.010;Adm.CGRPt CNP 相似文献
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6—DMAP对小鼠卵母细胞减数分裂启动及孤雌发育作用 总被引:3,自引:0,他引:3
小鼠卵泡卵母细胞体外培养过程中加入2mmol/L6-DMAP可抑制卵母细胞自发的染色持浓缩和生发泡破裂(GVBD)。源自超排的MⅡ期卵母细胞则能为6-DMAP所激活。hCG注射后18-19h的卵母细胞置于2mmol/L6-DMAP的CZB溶液中培养0.5h、1h、2h、3h,卵母细胞的激活率分别为26.1%、75.2%、75.8%、77.3%、卵裂率分别为88.2%、73.2%、67.0%、58. 相似文献
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银王亮丝草的试管微繁殖 总被引:2,自引:0,他引:2
1植物名称银王亮丝草(Aglaonema com-mutatumcv."SilverKing”),又名银王粗肋草、银王万年青、银皇帝。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件以MS为基本培养基。芽诱导培养基附加6-BA2.0~2.5mg·L-1(单位下同);芽增殖培养基附加6-BA4.0~4.5及NAA0.01~0.02;生根培养基采用3/4MS附加IBA3.0~3.5及GA33,0。所有培养基蔗糖及琼脂含量分别为3%和0.75%,pH值均调至5.8。培养温度26~28℃,光照8~10h·d-1,光照… 相似文献
4.
血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心肌肌浆网Ca2+,Mg2+-ATPase基因(SERCA2a)转录调节的影响,评价DMP811对此效应的干预作用.6周龄雄性SD大鼠随机分为3组,每组6只.组1:生理盐水输注;组2:AngⅡ输注+DMP811管饲(3mg·d-1·kg-1);组3:AngⅡ输注(200ng·min-1·kg-1.1周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总RNA后采用Northernblot的方法检测SER-CA2a的转录水平,采用RT-PCR检测AngⅡ1型受体(AT1)mRNA水平.实验后,组3心重(CW)、心重/体重(C/B)、AT1受体转录水平均高于组1(分别增加4.7±0.4%,4.9±0.9%和24.7±3.5%;P<0.01),而SERCA2a基因转录水平显著低于组1(降低20.1±3.0%,P<0.01),并且SERCA2amRNA水平与AT1受体mRNA水平呈负相关(r=-0.74,P<0.01).AngⅡ导致的上述改变能被DMP811完全阻断.AngⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了SERCA2a的转录下调 相似文献
5.
为了研究Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)的基因表达,采用不连续聚蔗糖(Percol)密度梯度法分离15名正常人和25例NIDDM患者外周血的网织红细胞,提取其总RNA,继以Northern斑点杂交观测此两组的红细胞膜GPA基因的表达水平.采用碱性磷酸酶酶联免疫检测完成红细胞膜GP的Western印迹.结果表明,NIDDM患者组红细胞膜GPA的mRNA含量较正常人组显著增加(分别为11.92±10.5和10.18±1.08积分光密度,P<0.01).免疫印迹图谱显示,有6例NIDDM患者的区带3a、3b界限模糊,3例的区带3a、3b和4明显浅染.推测NIDDM患者红细胞膜GPA减少可能引起其基因表达呈代偿性增强,而障碍或许出现在翻译环节上,这些与NIDDM患者红细胞变形能力(RCD)的明显降低甚为相符. 相似文献
6.
在建立大鼠肾小球系膜细胞(MC)体外培养方法的基础上,通过3H-TdR参入实验,RNA印迹分析和斑点杂交观察bFGF对MCDNA合成及原癌基因c-fos和c-myc表达的影响.结果表明,bFGF作用于MC18h,MC的3H-TdR参入率明显增加(P<0.05),24h达到高峰(P<0.01);bFGF显著诱导原癌基因c-fos和c-myc表达,其表达活性分别于30min和1h达到高峰.提示bFGF是MC的强效丝裂原,其对MCDNA合成的促进作用与诱导原癌基因c-fos和c-myc表达有关. 相似文献
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1植物名称紫羊蹄甲(Bauhiniapurpurea)。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件(1)启动培养基:MS+6-BA2.0mg·L-1(单位下同)+NAA0.01;(2)诱导分化培养基:MS+6-BA1.0~2.0+IBA0~0.1;(3)生根培养基:1/2MS+IBA0.5~1.0。上述培养基均入蔗糖30g·L-1,琼脂0.5%,pH值5.8。培养温度25℃,光照度2500~3000lx,每天光照12h。4生长与分化情况4.1启动培养材料取自南京中山植物园温室种植的三年生母树。将带腋芽的… 相似文献
8.
蚕豆叶片下表皮ABA结合蛋白提取及分离条件的选择 总被引:1,自引:0,他引:1
以蚕豆(ViciafabaL.)叶片下表皮为材料,比较TritonX100、冷丙酮和(NH4)2SO4对ABA结合蛋白(简称ABABP)的提取效果。结果表明:0.5%(W/V)TritonX100去垢剂提取的ABABP与ABA特异结合活性较高(0.487nmol/gprotein),维持结合活性的时间较长(4℃下反应40h保持最大结合的60%);而冷丙酮法提取的ABABP特异结合活性只有0.325nmol/gprotein,且容易失活,10h仅保持最大结合的30%左右。实验比较了各种盐离子对ABABP的影响,高盐(>300mmol/LNaCl)不利于ABABP的结合反应,低浓度KCl对ABABP活性略有促进。ABABP的结合活性需要介质中有一定量的Ca2+和Mg2+,用EDTA螯合介质中Mg2+、Ca2+后,ABABP活性大大降低,分别为最大结合的75%和60%。ABABP与ABA反应的最适pH在6.5,这些条件为亲和层析纯化ABABP提供了依据。 相似文献
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肝炎病毒与EB病毒重叠感染 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨肝炎病毒(HV)与EB病毒(EBV)重叠感染的状况和后果,我们用免疫酶法对154例各型病毒性肝炎患者作了EBVIgA抗体检测。结果发现,急性肝炎、慢性轻度肝炎、慢性中度肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎和原发性肝癌VGA-IgA抗体的阳性率分别为24.0%、30.0%、53.3%、63.3%、40.0%和72.7%,与健康人(5.3%)比较,有非常显著升高(P<0.01);原发性肝癌又较急性肝炎和慢性轻度肝炎高,并有非常显著意义差异(P<0.01)。HBV和HAV+HBV感染者比较,前者又较后者低(P<0.01)。重叠感染者的临床表现均为“肝炎型”,未见咽炎、腺热、胃肠、肺炎、肾炎、神经等类型。重叠感染者的CD+3及CD+4T细胞下降,CD+8T细胞及IgG,IgM升高,与健康人比较差异非常显著意义(P<0.01)。结果提示:HV感染,不仅因免疫失调易感EBV,又可因重叠感染而进一步使免疫功能失调;对病毒性肝炎的处理应强调免疫调节治疗。 相似文献
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通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机 相似文献
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根据高效培养鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)时对病毒滴度检测的需要,本文针对BDV的VP4基因的保守序列设计并合成了一对引物,以所构建的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IBDV核酸载量的SYBR Green I荧光定量实时RT-PCR(qRT-PCR)方法,结果表明,其Ct值与标准品模板在4.03×1E1~1E9 拷贝/μL范围内呈良好的线性关系,对IBDV核酸的最低检出量为40拷贝/μL,灵敏度是常规RT-PCR检测方法的1000倍;该方法不与其它禽源病毒发生交叉反应,批内变异系数小于0.05%。应用本方法对DF-1细胞中IBDV的增殖滴度进行了测定,并与经典的TCID50测定方法进行了比较。结果显示两种方法测定的IBDV在微载体悬浮培养和方瓶静态培养条件下DF-1细胞上的增殖曲线都具有一定的平行关系,且qRT-PCR方法比TCID50方法更加快速和敏感,更适合于对IBDV增殖滴度的实时快速测定。 相似文献
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用RT-PCR法快速检测鲤春病毒血症病毒基因 总被引:9,自引:1,他引:8
用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法快速,灵敏、特异地检测鲤春病毒血症病毒(SVCV),根据SVC病毒糖蛋白基因序列设计的引物经过RT-PCR和半嵌套PCR(semi-nested-PCR)引扩增出SVC病毒核酸中的714bp和606bp片段,与其他弹状病毒IHNV、VHSV、PFRV没有交叉,没有特异性,灵敏度检测,表明不小于1000个病毒就可检测出阳性结果。本文还对复性温度、引物、Mg^2 、Tag酶以及反转录酶的浓度对检测结果的影响进行了探讨。 相似文献
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Gai L. McMichael Amanda R. Highet Catherine S. Gibson Paul N. Goldwater Michael E. O'Callaghan Emily R. Alvino Alastair H. MacLennan for the South Australian Cerebral Palsy Research Group 《Journal of biomolecular techniques》2011,22(1):5-9
Reliable detection of viral DNA in stored newborn screening cards (NSC) would give important insight into possible silent infection during pregnancy and around birth. We sought a DNA extraction method with sufficient sensitivity to detect low copy numbers of viral DNA from small punch samples of NSC. Blank NSC were spotted with seronegative EDTA-blood and seropositive EBV EDTA-blood. DNA was extracted with commercial and noncommercial DNA extraction methods and quantified on a spectrofluorometer using a PicoGreen dsDNA quantification kit. Serial dilutions of purified viral DNA controls determined the sensitivity of the amplification protocol, and seropositive EBV EDTA-blood amplified by nested PCR (nPCR) validated the DNA extraction methods. There were considerable differences between the commercial and noncommercial DNA extraction methods (P=0.014; P=0.016). Commercial kits compared favorably, but the QIamp DNA micro kit with an added forensic filter step was marginally more sensitive. The mean DNA yield from this method was 3 ng/μl. The limit of detection was 10 viral genome copies in a 50-μl reaction. EBV nPCR detection in neat and 1:10 diluted DNA extracts could be replicated reliably. We conclude that the QIamp Micro DNA extraction method with the added forensic spin-filter step was suitable for retrospective DNA viral assays from NSC. 相似文献
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分别利用硫氰酸胍(Guanidine thiocyanate,GuScN)抽提法、螯合树脂处理法和蛋白酶K-酚/氯仿抽提法从粪便样品中制备腺病毒DNA(dsDNA)或细小病毒DNA(ssDNA)然后进行PCR检测。结果显示硫氰酸胍抽提法、螯合树脂处理法能有效地去除粪便中影响PCR扩增的抑制物,提高PCR检测的敏感性,而传统蛋白酶K-酚/氯仿抽提法不能有效地去除PCR扩增的抑制物,影响PCR检测结果。在检测粪便中腺病毒时,硫氰酸胍、螯合树脂和蛋白酶-酚/氯仿抽提法分别允许检测5TCID50相似文献
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