胸苷激酶基因治疗胃癌的体外实验

将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）导入恶性肿瘤细胞,随后可应用药物丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ, ＧＣＶ）选择性杀死肿瘤细胞．构建了含胸苷激酶与潮霉素磷酸转移酶（ｈｐｈ）融和基因（ＨｙｔＫ）的真核表达载体ＬＸｐｓｐ－ＨｙｔＫ．以脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）为介导,将这种质粒与仅含潮霉素Ｂ基因的质粒ＬＸＳＨ 分别转染胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,用６０ Ｕ／ｍ ｌ潮霉素Ｂ进行筛选,得到了可稳定传代的阳性克隆,分别命名为ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 和ＢＧＣ－Ｈｙ．三种细胞的生长曲线无明显差别．用不同浓度的ＧＣＶ 分别作用于ＢＧＣ－ＨｙｔＫ, ＢＧＣ－Ｈｙ 及ＢＧＣ－８２３,０．０２～２００ μｇ／ｍ ｌ 的ＧＣＶ 对ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 细胞有明显的杀伤作用（ＩＣ５０＝ ０．０２ μｇ／ｍ ｌ）,而对另外两种细胞几乎无毒性作用（ＩＣ５０＞ ２００μｇ／ｍ ｌ）．２０ μｇ／ｍ ｌＧＣＶ 作用９６ ｈ 后,仅存在２０％ 的ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 就可使周围的大部分ＨＳＶ－ｔｋ－ 的肿瘤细胞死亡,说明存在较显著的“旁观者效应”     

DTP—rHB联合疫苗的研制

本文对制备ＤＴＰ—ｒＨＢ联合疫苗的实验条件进行了初步探索，并优选最佳配方制备的三批连续中试产品经安全、效力试验测定，结果表明，联合疫苗中各组分均能达到相应规程要求，抗原间无干扰作用，相容性好。联合疫苗中的ｒＨＢ免疫应答较单价苗明显提高（Ｐ＜ ０．０５），有增强作用。ＨＢｓＡｇ含量以２０ μｇ／ｍ ｌ为宜，稳定性试验证明，该联合疫苗质量稳定、安全、有效。     

30L生物反应器连续灌注培养重组CHO—C28细胞表达HBsAg的研究

应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术,通过电脑全自动控制,连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度,反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天,细胞的生长形态、ＨＢｓＡｇ 分泌动态和染色体数。研究结果表明,连续培养６０ 天,细胞密度可达７．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ,平均维持在（５．０～６．０）×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ,收液的ＲＰＨＡ 滴度可达１∶５１２,ＨＢｓＡｇ 每天平均产量为３０ ｍ ｇ。     

喹诺酮类药物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

本文以２．２．１５细胞株为模型,以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ、细胞存活率为观察指标,综合评价了喹诺酮类药物吡哌酸（ＰｉｐｅｍｉｄｉｃＡｃｉｄ）、氟哌酸（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、环丙氟哌酸（Ｃｉｐｒｏｆｌｏｓｘａｃｉｎ）、氟嗪酸（Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ）体外抗ＨＢＶ效果。结果表明：吡哌酸、氟哌酸、环丙氟哌酸、氟嗪酸对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ５０％抑制浓度（ＩＤ＿（５０））分别为１１μｇ／ｍｌ、６４μｇ／ｍｌ、９３μｇ／ｍｌ、１０５μｇ／ｍｌ和１９９μｇ／ｍｌ、１１１μｇ／ｍｌ、２４μｇ／ｍｌ、２１７μｇ／ｍｌ,细胞存活率为５０％时的药物浓度（ＣＤ＿（５０））分别为２１９μｇ／ｍｌ、９０μｇ／ｍｌ、１８１μｇ／ｍｌ、１６９μｇ／ｍｌ,在所选定的用药浓度范围内不同程度抑制培养上清液及细胞内ＨＢＶＤＮＡ及其复制中间体的产生。尤其对超螺旋结构ＤＮＡ（ｓｃＤＮＡ）有不完全抑制作用。     

微紫青霉CBHⅠ基因(Cbh1)在体外无细胞系统中的表达

以含Ｃｂｈ１的ｐＵＣ１８－１８１ ＤＮＡ 为模板,经ＰＣＲ扩增得到带有Ｔ７启动子的Ｃｂｈ１片段,随后在缺乏糖基化的兔网织红细胞裂解液中得到成功表达,表达量为２１．７ μｇ／ｍ ｌ．得到的ＣＢＨ Ⅰ虽未经糖基化修饰,却可水解对硝基酚－β－Ｄ－纤维二糖苷（ｐＮＰＣ）,对ｐＮＰＣ的ＫＭ 和Ｖｍ ａｘ分别为０．８２ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和０．０６７ μｍ ｏｌ·ｍ ｉｎ－ １·μｇ－ １,但对羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ－Ｎａ）无酶活力．这表明,糖基化修饰可能不影响胞外纤维素酶的活力．     

杏仁核内注射CCK—8抑制胃运动的机制

应用脑核团内微量注射和核团电刺激方法,观察杏仁基底内侧（ＢＭＡ）对胃运动的影响,分析ＢＭＡ与下丘脑腹内侧核（ＶＭＨ）的机能联系。结果如下：（１）双侧ＢＭＡ内注射八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）（５０ｎｇ／ｌμｌ）,出现胃内压（ＩＧＰ）和胃运动频率（ＧＭＦ）显著下降（Ｐ〈０．０１）。（２）ＢＭＡ内注射ＣＣＫ－Ａ受体阻断剂［Ｌ３６４,７１８］（１００ｎｇ／ｌμｌ）或ＣＣＫ－Ｂ受体阻断剂［Ｌ３６５,２６０］     

刺果番荔枝中的番荔枝内酯

从刺果番荔枝（Ａｎｎｏｎａ ｍ ｕｒｉｃａｔａ Ｌ．）的种子中分离到３ 个单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物,用波谱方法鉴定为海南哥纳香甲素（ｈｏｗ ｉｉｃｉｎ Ａ, Ｓ１３）、乙素（ｈｏｗ ｉｉｃｉｎ Ｂ, Ｓ５）和新化合物４－去氧海南哥纳香乙素（４－ｄｅｓｏｘｙｈｏｗ ｉｉｃｉｎ Ｂ, Ｓ２）。     

肌源性调节蛋白MyoDl和肌球蛋白myosin在横纹肌肉瘤中的表达:免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ＳＰ方法,检测了肌源性调节蛋白ＭｙｏＤｌ和肌球蛋白ｍ ｙｏｓｉｎ 在３８例横纹肌肉瘤（ＲＭＳ） 中的表达。结果显示ＭｙｏＤｌ阳性表达主要定位于ＲＭＳ瘤细胞的胞核中; ｍ ｙｏｓｉｎ 的阳性表达定位于ＲＭＳ瘤细胞的胞浆中, 二者的表达阳性率分别为６５．８％ 和５５．３％ 。在ＲＭＳ不同病理分型中ＭｙｏＤｌ和ｍ ｙｏｓｉｎ 的阳性表达均无显著性差异。但ＲＭＳ分化程度低,ＭｙｏＤｌ阳性表达增强,ｍ ｙｏｓｉｎ 阳性表达下降。Ｍｙｏ－Ｄｌ在Ⅲ级（低分化） 中的表达阳性率显著高于Ⅰ级（高分化）、Ⅱ级（中等分化） 中的表达阳性率（Ｐ＜ ０．０５,Ｐ＜ ０．０５）。ｍ ｙｏｓｉｎ 在Ⅰ级中的阳性率显著高Ⅲ级中的表达阳性率（Ｐ＜ ０．０５）。本文认为, ＭｙｏＤｌ表达增高、ｍ ｙｏｓｉｎ 表达下降,不仅是ＲＭＳ生物学行为的重要特征,也为改进低分化ＲＭＳ的病理诊断和ＲＭＳ早期诊断提供了有益的思路。     

荷兰菊组织培养快繁技术研究

本文利用组织培养技术研究荷兰菊的快速繁殖,为大量培育荷兰菊种苗提供可靠方法。通过多种培养基的试验筛选,找出较满意的培养方法、三种培养基依次使用,可以达到快速繁殖目的。三种培养基分别是：ＭＳ＋ＫＴＯ·ｌｍｇ／ｌ＋糖２０９／１＋琼脂７ｇ／ｌ、ＭＳ＋６—ＢＡ５ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡＯ．０１ｍｇ／ｌ＋糖２０９／ｌ＋琼脂７ｇ／ｌ、１／ＺＭＳ＋ＮＡＡＯ．ｌｍｇ／ｌ＋糖２０ｇ／ｌ＋琼脂７ｇ／ｌ·三种培养基ｐＨ均为６。     

大花蕙兰的快速繁殖技术研究

应用组织培养和快速繁殖技术对大花蕙兰开展了茎尖培养、试管苗微繁和成苗培育的研究,结果表明,有利于原球茎增殖的培养基为ＭＳ＋６ＢＡ１．０ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／ｌ＋２％～３％蔗糖;有利于原球茎分化的培养基为ＭＳ＋６ＢＡ０．４ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋２％～３％蔗糖。四年生以上试管苗可以开花,为其大规模工厂化育苗提供了科学的依据。