水痘一带状疱疹病毒研究进展

水痘－带状疱疹病毒（ＶＺＶ）是致人类疾病的重要疱疹病毒之一。为预防水痘与带状疱疹,日本研制成功水痘减毒活疫苗,并出口到世界一些国家。本文就ＶＺＶ的分子生物学特性、病毒的致病机制与临床特征、病毒感染的体液免疫与细胞免疫,水痘疫苗株病毒与疫苗等的研究情况作一简要综述。     

水痘疫苗原液生产工艺改进

目的: 对现有水痘减毒活疫苗原液生产工艺进行改进,提高水痘疫苗原液产量及疫苗质量。方法: 2BS细胞传代至方瓶37代细胞,感染Oka株水痘-带状疱疹病毒工作种子批,35℃培养24h换病毒培养液(II)继续置35℃培养24h,取出使用Earle’s液洗涤方瓶细胞表面,当细胞病变达70%以上时,按120-360ml/瓶进行收获,置-65℃以下保存。经检定合格后进行合并、冻干制备水痘减毒活疫苗。结果: 使用此方法进行生产的水痘疫苗比较原工艺生产的水痘疫苗原液收获量大幅提升,并且疫苗的牛血清残留量与抗生素残留量则大幅下降,且各项检定指标全部合格。结论: 使用此方法生产水痘疫苗产量及质量比较原工艺有大幅度提升。     

水痘减毒活疫苗的研究进展

水痘是由水痘-带状疱疹病毒( VZV) 引起的一种高传染性疾病。接种疫苗是预防和控制VZV 流行的最有效手段。美国从1995 年开始实施儿童接种水痘疫苗的政策, 显著降低了水痘相关疾病的发病率和病死率。近年来, 水痘疫苗在我国应用越来越广泛。本文就水痘减毒活疫苗Oka 株的研发, 疫苗的有效性、安全性, 病毒减毒的分子生物学特征和免疫策略等方面进行综述, 以期能更全面地认识水痘减毒疫苗在预防和控制VZV 传播方面所起的作用。     

疫苗株病毒引起1例成人水痘的病原分离与鉴定

本文旨在探讨1例由疫苗株病毒引起成人水痘的病例,以提高对水痘疫苗二次传播的认识。从1名23岁女性水痘患者皮肤水疱中采集水疱液,接种至人胚胎成纤维细胞,3d后观察到细胞发生病变效应。用水痘-带状疱疹病毒gE`糖蛋白单克隆抗体间接免疫荧光法鉴定,结果阳性。测序分析显示,分离到的毒株其疫苗相关的单核苷酸多态性位点与Oka疫苗株一致,为疫苗株病毒。回顾性调查显示,患者没有水痘史和疫苗接种史,病毒可能来自1名与患者直接接触的接种疫苗后发生带状疱疹的儿童。     

北京株水痘疫苗生产工艺的建立

目的:建立北京株水痘疫苗生产工艺,采用此生产工艺生产水痘减毒活疫苗。方法:采用细胞工厂培养2BS细胞,感染北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批,同时感染Oka株水痘-带状疱疹病毒工作种子批作对照,经洗涤、离心、收获、原液合并、冻干制备水痘减毒活疫苗,并进行各项检定。结果:对照两种不同毒株生产的水痘减毒活疫苗无明显差异,且各项检测指标均符合要求。结论:根据结果显示,可使用此毒株生产工艺大规模生产北京株水痘疫苗,与Oka株生产水痘疫苗无差异。如果用此毒株生产水痘疫苗供应市场,将会打破Oka株水痘疫苗国内市场的垄断。     

水痘疫苗市场分析

随着我国经济的快速发展和提高,水痘疫苗市场面临着前所未有的机遇与挑战。由于生产水痘疫苗企业的数量增加,导致市场供需失衡。对目前市场的分析,发现水痘疫苗市场的调控对策,找到适合水痘疫苗健康发展市场结构。通过分析水痘疫苗的市场现状、影响因素、市场结构等方面,了解水痘疫苗的发展状况,为水痘企业的发展提供参考价值。     

水痘疫苗研制进展

<正>水痘是常见的儿童疾病。预防水痘的理想方法是接种安全有效的水痘疫苗。自水痘疫苗应用于人类以来,各国学者作了大量研究。随着研究的逐渐深入,对水痘疫苗亦有了新的认识。现将近年来水痘疫苗研制进展综合如下。     

水痘-带状疱疹病毒疫苗的评价与研究进展

水痘-带状疱疹病毒(VZV)属疱疹病毒α亚科,即人类疱疹病毒3型,为双链DNA病毒。原发感染可引起具有高度传染性的全球流行性疾病——水痘;潜伏病毒的再激活感染可引发典型的疼痛性皮肤病——带状疱疹及不典型的内脏器官感染。日本和美国分别自1987年和1995年开始实行给全体儿童预防接种水痘减毒活疫苗(vOka)后,两国儿童的水痘发病率和病死率显著降低。但VZV疫苗的不良反应,包括二次传播和突破感染等时有发生,因此有必要研发更为有效、安全的新型疫苗。本文就VZV相关疫苗的有效性、安全性及其新型疫苗的研究进展进行综述。     

人体对水痘疫苗的免疫反应

水痘疫苗是预防水痘的重要手段。本文简要介绍了不同人群应用水痘疫苗的现状，并对其免疫反应的特点作了讨论。     

微量板细胞病变法滴定水痘疫苗的研究

建立了用微量板细胞病变法滴定水痘疫苗的实验方法。将适宜稀释度的病毒与2BS细胞混种于96孔板培养,种毒后第7天观察孔内细胞病变情况,以karber法计算疫苗滴度,并与蚀斑法进行比较。实验表明,微量板细胞病变法滴定水痘疫苗,结果稳定性好,精密度高,较现行的蚀斑法操作简便、误差小,能够较好的反映出水痘的真实滴度,可作为一种较为简便的滴定水痘疫苗的方法。     

冻干水痘减毒活疫苗转瓶生产工艺的建立

应用旋转培养的方法,建立冻干水痘减毒活疫苗的生产工艺。选择长成致密单层的2BS细胞,接种带状疱疹病毒Oka株,待细胞病变达75％以上时,收获病毒液,经超声破碎、离心、澄清,冻干后,按常规检定,疫苗各项检定符合《WHO水痘活疫苗规程》及《冻干水痘减毒活疫苗制造及检定试行规程》要求。与克氏瓶相比,应用旋转培养,不但提高了疫苗单产,降低了牛血清蛋白残留量,而且疫苗质量也保持稳定。     

国产冻干水痘减毒活疫苗免疫原性研究与应用

对１２９名４岁儿童采用国产、进口水痘减毒活疫苗进行免疫,对疫苗的安全性和免疫原性进行研究,用ＥＬＩＳＡ进行免前、免后水痘抗体测定。结果表明国产水痘疫苗接种后无明显副反应,国产、进口疫苗血清的阳转率相似,达８５％以上,证明国产ＯＫａ株水痘减毒活疫苗具有良好的安全性和免疫性,可以推广使用。     

广州市荔湾区2015年水痘突破病例的流行特征分析

目的分析广州市荔湾区2015年水痘突破病例的流行病学特征,为探讨水痘疫苗的免疫策略提供依据。方法收集中国疾病预防控制信息系统中广州市荔湾区2015年1~15岁儿童水痘突破病例的疫情数据及广州市免疫规划信息管理系统中接种1剂次水痘疫苗的数据,并对其进行流行病学分析。结果广州市荔湾区2015年共报告水痘突破病例176例,发生率1.20%,全年12个月均有报告病例,冬季高发,全区均有报告,以南源街道位居首位(14.20%),男女比例为1.63∶1,主要集中在5~<10岁儿童,以小学生为主(64.20%)。突破病例发病与接种疫苗最短间隔64 d,最长11年,平均发病间隔为(4.57±3.49)年,发病间隔分布呈正态分布(P=0.200,偏度=0.203,峰度=-1.576),发病高峰为接种疫苗后2~7年间。结论广州市荔湾区2015年水痘突破病例发生率较高,5~<10岁儿童为高发人群;为形成有效的免疫屏障,有效控制水痘突破性病例,建议4岁儿童接种第2剂次水痘疫苗。     

水痘减毒活疫苗生产场地变更质量可比性研究

目的通过可比性研究证明水痘减毒活疫苗生产场地变更后质量的产品一致性。方法从生产用原材料、生产工艺、产品质量和稳定性等几个方面进行可比性分析,比较水痘减毒活疫苗生产场地变更前后产品质量特性。结果确认水痘疫苗生产车间场地变更前后原材料未发生改变;生产工艺未发生变化,部分工艺参数由于设备更新进行了调整但未对工艺控制造成影响;对工艺用水、疫苗质量、疫苗稳定性的关键质量指标进行统计分析,其中新车间生产的原液病毒滴度为5.0 lgPFU/mL、半成品病毒滴度为4.6 lgPFU/mL,成品中水分含量为1.0%~1.4%、病毒滴度为7.8~8.0 lgPFU/mL、热稳定性试验为6.8 lgPFU/mL与老车间同步生产的成品结果(原液病毒滴度为4.9~5.0 lgPFU/mL,半成品病毒滴度为4.5~4.6 lgPFU/mL,成品中水分含量为1.1%~1.3%、病毒滴度为7.8~8.0 lgPFU/mL、热稳定性试验为6.8 lgPFU/mL)相似,且均在2014年老车间相对应检测项目均值±3 SD范围内,新老车间成品中的牛血清白蛋白残留量和乳糖酸红霉素残留量差异均无统计学意义(t=1.50,P0.05;t=1.00,P0.05);加速稳定性试验和长期稳定性试验结果显示,新老车间同步生产的各3批水痘疫苗成品的数据稳定性一致,各项检测指标均符合相关规定要求;疫苗安全性均符合相关要求,新老车间同步生产的疫苗试验结果一致。结论水痘减毒活疫苗生产场地变更前后产品质量特性高度相似,场地变更未对产品的安全性和有效性产生不良影响。     

二代测序法深度分析水痘疫苗Oka株病毒基因特征

采用二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术,对上海生物制品研究所有限责任公司(简称SIBP)2015-2017这3个年度生产的Oka株水痘疫苗进行深度测序,从分子水平分析疫苗质量的一致性,并与不同厂家疫苗/毒种进行比较,分析它们之间的遗传特征相关性。结果显示,3个年度生产的水痘疫苗中平均有77个位点的疫苗型位点检出频率(proportion of vaccine-type allele,Pv)≥10%,至少在两批疫苗中出现Pv≥10%的位点数共76个,两两之间Pv最大差值<10%,与平均值的最大差值为<5%。共有40个位点的Pv均值≥30%,其中19个位点导致氨基酸残基变异;15个位于ORF62区域。筛选出35个位点,比较5个公司水痘疫苗/毒种的Oka株病毒基因序列,结果显示它们之间存在相关性,同时存在一定的差异。研究表明,SIBP不同年度生产的水痘疫苗Oka株病毒具有良好的分子水平上的一致性,为疫苗质量管理与市场监督提供了方法和基础数据。     

水痘疫苗在学校暴发疫情中保护效果的回顾性队列研究

目的了解水痘疫苗在学校等集体单位水痘暴发疫情中的保护效果。方法选择佛山市2012年水痘暴发疫情的学校,按年龄分层,以接种水痘疫苗作为暴露因素,采用回顾性队列研究方法,评价水痘疫苗的保护效果。结果共有143名学生纳入研究对象,水痘疫苗的保护率为69.18%。按年龄分层分析发现,6～7岁组水痘疫苗保护率为86.12%,而9～11岁组水痘疫苗未显示保护作用。结论水痘疫苗对学校等集体单位水痘暴发疫情的控制具有良好的效果。但由于疫苗免疫机体后所产生的抗体衰减,小学高年级学生应适时加强接种一剂次水痘疫苗。     

7例水痘患者水痘带状疱疹病毒的分离与鉴定分析

目的对7例临床水痘患者的疱疹液样本,进行水痘带状疱疹病毒(varicella-herpes zoster virus,VZV)的分离及鉴定分析。方法对7例临床水痘患者的疱疹液,用2BS细胞进行病毒分离及病毒滴度检测;用特异性引物分别对病毒分离株及疫苗株(Oka株)的ORF68、ORF54、ORF38进行聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增及测序,用DNAMAN软件对病毒分离株的ORF68序列与Dumas株序列进行比对鉴定,并对病毒分离株和Oka株的ORF54、ORF38进行限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析。结果从7例临床水痘患者的疱疹液样本中,分离到4株VZV病毒株;病毒分离株的细胞病变(cytopathic effect,CPE)及病毒滴度随传代次数的增加而增强;4株病毒分离株的ORF68序列与Dumas株完全一致;ORF54、ORF38的RFLP结果显示,4株病毒分离株均为BglⅠ+PstⅠ+型,Oka株为BglⅠ+PstⅠ-型。结论成功分离的4株病毒分离株均为VZV野生毒株。     

冻干水痘活疫苗的研制

Oka株水痘病毒是唯一被WHO椎荐用于生产水痘活疫苗的减毒株,1974年由日本大呢大学微生物病研究会（BIKEN）高桥博士培养成功的【人1996年从BIKEN引进o财株病毒,MRC－5人H倍体细胞在本所进行水造活疫苗研制。1材料与方法1．1细胞株24代MRC－5人H倍体细胞由BIKEN提供1．2病毒株BIKEN提供的Oka病毒减毒株母种子,批号为M2001。1．3水疡病毒标准抗血清BIKEN提供批号OAKK39－4,中和抗体滴度为1：74o000豆．4培养液细胞培养液为9％股牛血清的MEM液,维持液为3％股牛血清MEM液,疫苗液为5％蔗糖,O．5％明胶,0．1％谷氨酸…     

建立膜抗原荧光抗体试验评价北京株冻干水痘疫苗免疫效果

为了建立用于水痘疫苗接种后血清中特异性抗体检测的膜抗原荧光抗体(FAMA)法,并对接种水痘疫苗后儿童血清中水痘特异性抗体进行检测,评价北京株水痘疫苗的免疫效果。以水痘带状疱疹病毒(VZV)感染细胞作为抗原制备成固定抗原玻片,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗建立FAMA法,并对该法的敏感性、特异性进行验证。运用此法对不同剂量北京株水痘疫苗接种后儿童血清中特异性抗体进行检测,分析儿童血清中水痘特异性抗体水平以及免后抗体阳转率,并与Oka株水痘疫苗进行比较。结果显示,FAMA法敏感性可达0.0196IU/ml,特异性好。应用此法检测300名观察者免前免后双份血清样本中抗VZVIgG,易感者中北京株水痘疫苗原苗(39810PFU/0.5ml)、2000PFU/0.5ml、500PFU/0.5ml接种组儿童血清免后抗体阳转率分别为100%、98.77%、85.42%,抗体几何平均滴度(GMT)分别为36.4、34.3、18.6,原苗与2000PFU间的抗体阳转率和GMT均无显著性差异(P>0.05),但原苗与500PFU、2000PFU与500PFU间的抗体阳转率和GMT均有显著性差异(P<0.05)。对照国产、进口Oka株水痘疫苗接种后抗体阳转率分别为95.35%、96.97%,抗体GMT分别为13.3、16.0,不同剂量北京株疫苗抗体阳转率与国产、进口Oka株疫苗相比,差别无显著性(P>0.05),但北京株疫苗原?     

城关社区成人水痘并发症76例诊治分析

目的了解成人水痘并发症的临床特点,为成人水痘的预防和临床诊治提供依据。方法回顾性分析2011~2015年我院收治的76例成人水痘并发症患者的临床资料,对临床流行特征和并发症发生情况及预后进行分析。结果 76例成人水痘并发症患者继发皮肤感染占84.21%,肝功能损害占55.26%,呼吸道感染占47.37%;发病比例男性高于女性,且以冬春季节发病为主。76例患者经临床应用阿昔洛韦联合麻疹减毒活疫苗治疗,均治愈。结论成人水痘发病率有增高趋势,而且成人水痘并发症有发热程度和热程、全身毒血症状以及皮疹数量、各种并发症发生比例均较儿童高且严重,无疫苗免疫史患者病情较重。临床上应尽早明确诊断,及时治疗;可通过接种水痘减毒活疫苗(VarV)(建议推行2剂次接种的免疫策略)来控制发病率和减少并发症发生。