银杏叶提取物对自由基所致脑神经细胞损伤的保护作用研究

从细胞分子水平,采用大脑皮层神经细胞分离技术,自旋标记技术,酶学方法及细胞染色技术探讨自由基对神经细胞的损伤及ＥＧｂ保护作用。结果显示,用自由基攻击的细胞其自旋标记膜的序参数Ｓ,旋转相关时间τｃ及膜蛋白巯基的Ｓ／Ｗ比对照组高（Ｐ＜０．０５）,提示：受自由基攻击的细胞膜,其流动性比正常减低,且蛋白质构象发生了改变。加ＥＧｂ保护后,可减少自由基引起的膜流动性及蛋白质构象改变,起到保护神经细胞的作用。经·ＯＨ攻击的神经细胞,其ＬＤＨ活性及死细胞比率都比对照组高,而ＥＧｂ对此有保护作用。本文结果说明一定浓度ＥＧｂ可保护大脑皮层神经细胞免受自由基的损伤。     

人体上的数字

神经系统成年人的脑不过1300克到1500克,占人体总重量的2.5％左右,但它却有140亿个神经细胞,而每一个神经细胞又与一万多细胞相联系,形成一个神经细胞网络的世界。神经细胞的直径很小,只有10万分之一厘米,然而其神经脉冲的传递速度最快时竟达到每秒钟一万厘米左右。正是这个原因,大脑才成了思维和意识的源泉。     

Tau蛋白在阿尔茨海默病神经细胞退行性变性中的作用

Tau是神经细胞中含量最高的微管相关蛋白质,其主要生物学功能是促进微管组装和维持微管的稳定性。已发现tau蛋白异常与20余种神经退行性疾病有关。该结合作研究组近年来的工作,介绍tau蛋白在阿尔茨海默病神经细胞退行性变性中的可能作用及其机制,并对神经细胞退行性变性的本质提出了一些新见解。     

MSG-肝再生-大鼠下丘脑神经细胞凋亡及相关基因TGF-β1的表达

目的：探讨MSG－肝再生－大鼠下丘脑神经细胞凋亡的机理。方法：光镜、电镜及原位末端标记技术观察MSG－肝再生－大鼠下丘脑弓状核神经细胞凋亡;免疫组织化学方法观察ARN的TGF－β1的表达。结果：随着ARN神经细胞凋亡指数（AI）增高,其TGF－β1表达亦相应增强。结论：神经元胞浆钙离子过度负荷和TGF－β1蛋白共同参与了MSG－肝再生－大鼠ARN神经细胞凋亡的调控。     

参环毛蚓神经组织的NSE、NF200、ED1、GFAP和NO细胞化学特性

为研究环节动物的神经组织学特性,我们选择生活在我国的环节动物门典型代表参环毛蚓（Pheretima aspergillum)为研究对象,使用若干种兔抗鼠抗体,进行了免疫细胞化学与细胞化学染色,在光学显微镜下观察反应阳性细胞的形态与分布。研究发现,在参环毛蚓脑,咽下神经节,腹神经节所有神经细胞呈NSE阴性;在参环毛蚓脑,部分神经细胞呈NF200阳性,在咽下神经节,腹神经节未观察到NF200阳性神经细胞;在参环毛蚓脑观察到较多ED1阳性细胞;在参环毛蚓脑,咽下神经节,腹神经节均未观察到GFAP阳性细胞;在参环毛蚓脑未观察到NADPH－d阳性神经细胞,而在咽下神经节和腹神经节部分神经细胞及纤维NADPH－d阳性。结果表明,参环毛蚓神经细胞的神经细胞特异的烯醇化酶特性,神经微丝蛋白特性与呈型胶质细胞的GFAP特性不同于哺乳动物;其神经组织存在有数量较多的吞噬功能的类似于哺乳动物小胶质细胞的细胞; 参环毛蚓的脑不含有NO能神经细胞,而咽下神经节和腹神经节含有NO能神经细胞。     

多巴胺能神经细胞损伤过程中NCAM-140的表达变化

目的:检测NCAM.140在多巴胺能神经细胞损伤过程中中脑黑质部位的表达变化,探索其在多巴胺能神经细胞损伤中的可能作用.方法:采用MPTP腹腔注射建立小鼠中脑黑质多巴胺能神经细胞慢性损伤模型,采用免疫荧光染色和westernblotting检测中脑黑质部酪氨酸羟化酶(TH)和NCAM-140的表达情况.结果:在小鼠中脑黑质一直有NCAM-140阳性细胞存在,且与TH阳性细胞共表达;TH在给予MPTP后第三周表达开始降低,NCAM-140在给予MPTP后第一周至第三周持续高表达,并且从第四周开始,其表达量明显降低.结论:NCAM-140的表达与多巴胺能神经细胞损伤有关.     

十三种神经递质和神经肽在参环毛蚓神经系统的分布:免疫细胞化学研究

选择生活在我国的环节动物门典型代表参环毛蚓（Pheretima aspergillum)的研究对象,使用13种抗体,运用免疫细胞化学染色技术,在光学显微镜下观察神经递质和神经肽阳性细胞的形态与分布。研究发现在参环毛蚓脑,ACTH阳性神经细胞、AVP阳性神经细胞、calcitonin阳性神经细胞、CCK阳性神经细胞、glutamate阳性神经细胞和NPY阳性神经细胞染色浓重,分布密集,位于脑的后侧半,尤其特别的是在calcitonin阳性大神经细胞内含有粗大密集的分泌颗粒。β－EP阳性神经细胞染色较谈,OT阳性神经细胞染色也较深,但分布稀疏, calbindi-D、CGRP、GABA、SOM、VIP呈阴性反应;在咽下神经节与腹神经节,仅有少量AVP阳性神经细胞、glutamate阳性神经细胞和NPY阳性神经细胞散在分布;在肠神经系统,β－EP阳性神经细胞、CGRP阳性神经细胞、SOM阳性神经细胞、VIP阳性神经细胞染色较深,分布散在;另外,在肠上皮,CGRP阳性上皮细胞、calcitonin上皮细胞和VIP阳性上皮细胞呈强阳性反应,分布于阴性上皮细胞之间。表明表明参环毛蚓神经系统存在着在其它环节动物所观察到的神经递质和神经肽：ACTH、VIP、β-endorphin、CCK、NPY、CGRP,亦存在着文献从未报道过的神经递质和神经肽：calcitonin、AVP、OT、glutamate、SOM,其中calcitonin、CGRP、VIP双重分布于神经细胞和非神经组织的肠上皮细胞,本文首次提供了形态学的证据。     

人参皂甙Rb3对大鼠海马神经细胞谷氨酸损伤作用及相关机制的研究

目的：利用原代培养的海马神经细胞,研究人参皂甙Rb3对谷氨酸兴奋性神经毒性的保护作用及有关机制。方法：采用原代培养的胚胎大鼠海马神经细胞谷氨酸毒性模型,观察人参皂甙Rb3对神经细胞形态、神经细胞活性、细胞外液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）的漏出率及总一氧化氮合酶（nitrogen oxide synthase,NOS）、结构型N0s、诱导型NOS活性等的影响。结果：人参皂甙Rb3对神经细胞的谷氨酸毒性损伤具有保护作用。使细胞形态保持完整,活力增加,细胞膜损伤减轻;而且人参皂甙Rb3能增加神经细胞的结构型NOS活性。降低诱导型NOS的活性。结论：人参皂甙Rb,具有抗谷氨酸兴奋性毒性作用,其作用机制可能与降低诱导型NOS活性。增加结构型NOS的活性有关。     

体外培养新生大鼠皮层神经细胞的形态及电学特性的演变

体外培养新生大鼠皮层神经细胞按形态特点分为三类:锥体形神经细胞、星形神经细胞和双极神经细胞.胞内微电极记录结果表明:随着培龄的增加,星形神经细胞的静息膜电位显著增加,从Ⅱ期(7-10DIV,DIV=Days In Vitro)开始膜输入阻抗显著下降.胞外微电极压力注射L-谷氨酸(10—25μmol/L),引起星形神经细胞去极化;随着培龄的增加,星形神经细胞对L-谷氨酸的反应率增大.     

NGF 对大鼠胚胎中脑神经细胞体外增殖和分化的影响

目的:探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对大鼠胚胎中脑神经细胞体外增殖和分化的影响。方法:在体外分离培养大鼠胚胎中脑神经细胞的培养液中加入不同浓度(10、50、100、200ng/ml)的NGF,培养不同时间,以不加神经营养因子的细胞为对照组,通过MTT法检测细胞活性,神经元特异性烯醇化酶免疫细胞荧光技术鉴定神经细胞,光镜下形态学观察各组大鼠中脑神经细胞体外增殖和分化情况。结果:胚胎中脑神经细胞胞体增大、突起延长且有丰富的神经纤维连结成网络状,细胞集落数增加,显示出剂量-效应关系。结论:一定剂量的NGF能促进大鼠中脑神经细胞分化和增殖,增强其活性。     

胚胎神经细胞的培养方法及应用

体外胚胎神经细胞培养与在体神经细胞在神经发育生物学的研究中相辅相承,不断推动神经科学的发展.神经细胞原代培养涉及神经细胞的分离纯化、培养基的成分及观测方法等.本文对国内外近年来胚胎神经细胞的培养方法及应用进行了简单的综述.     

大鼠脑缺血再灌注后海马神经细胞NOS表达与细胞凋亡及复方丹参的保护作用

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马神经细胞一氧化氮合酶(NOS)的表达与神经细胞凋亡的关系及中药复方丹参的保护作用。方法采用大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)造成局灶性脑缺血再灌注模型。用原位细胞凋亡检测方法观察海马神经细胞凋亡;用免疫组织化学方法检测大鼠海马神经细胞(nNOS、iNOS)的表达并做图像分析。结果与假手术对照组比较,脑缺血再灌注2h后缺血侧海马CA1、CA3区神经细胞nNOS、iNOS表达升高,并出现神经细胞凋亡,随着再灌注时间的延长,神经细胞iNOS的表达明显增强,凋亡神经细胞数逐渐增多,至24h达高峰,但神经细胞nNOS的表达并未见明显增强。复方丹参保护组神经细胞nNOS、iNOS的表达和凋亡神经细胞数明显低于缺血再灌组(P<0.01)。结论脑缺血再灌注后缺血侧海马CA1、CA3区神经细胞nNOS的表达增强,iNOS的表达显著升高,使NO的形成增加,这可能是介导脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一。复方丹参具有下调神经细胞nNOS、iNOS的表达,减少NO的生成,抑制细胞凋亡,减轻缺血再灌注对大鼠海马损伤的作用。     

载脂蛋白E在神经系统中的作用

载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）在中枢神经系统（ＣＮＳ）生长发育,成熟衰老和损伤修复过程中发挥重要作用。其分子机制是：（１）稳定神经细胞骨架系统;（２）通过ａｐｏＥ受体途径调节神经细胞中胆固醇脂的运输和突触末梢的再生;（３）调控神经元之间及神经细胞与介质之间的相互作用;（４）调节神经细胞的Ｃａ＾２＋离子的平衡。     

麝香、麝香酮对大鼠视网膜神经细胞毒性的对比考察

为考察麝香、麝香酮对体外培养大鼠视网膜神经细胞的最大无毒浓度(TC0),比较两者的细胞毒性,分别将倍比稀释的麝香、麝香酮试液加入大鼠视网膜神经细胞中培养观察,用MTT法测得存活细胞OD值,经公式计算麝香与麝香酮对细胞的最大无毒浓度(TC0)及对50%细胞产生毒性的浓度(TC50)。结果表明,麝香、麝香酮对大鼠视网膜神经细胞的TC0分别为1.29、7 mg/mL;麝香对其的TC50为8.7 mg/mL。说明麝香对体外培养大鼠视网膜神经细胞的毒性高于麝香酮。     

胚胎神经细胞的培养方法与应用

体外胚胎神经细胞培养与在体神经细胞在神经发育生物学的研究中相辅相承，不断推动神经科学的发展。神经细胞原代培养涉及神经细胞的分离纯化、培养基的成分及观测方法等。本文对国内外近年来胚胎神经细胞的培养方法及应用进行了简单的综述。     

神经系统中的微小环路——树-树式突触的存在及其机能意义

近一个世纪以来,生理学研究表明神经系统由许多中枢及其通路组成,这些中枢神经细胞进行着感觉信息的处理和运动机能的控制。传统的观念认为,信息是由神经细胞的短突起即树突传入,由其细长的轴突传出,而细胞与细胞间的信息传递是以电化学形式进行的。近年来,在中枢神经细胞的接触和相互作用方面有了一些新进展,主要是肯定了一些只与神经细胞的短突起即树突有关的微小环路,这给进一步深入了解行为的神经机制提供了依据。每个中枢神经细胞具有不同长度和型式的树突分支。五十年代电镜显示神经细胞间机能联系的部位为突     

牛磺酸对大鼠脑神经细胞内钙稳态的影响

目的和方法 :利用激光扫描共聚焦显微镜和双波长荧光分光光度计 ,分别观察牛磺酸对无血清培养的单个海马神经细胞和分散的新生大鼠脑神经细胞内Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)的影响 ,并探讨牛磺酸调节神经细胞内钙稳态的作用机理。结果 :牛磺酸主要通过刺激细胞内钙库释放 ,在一定剂量范围内 (0 .0 2～ 6 .4mmol/L)使神经细胞[Ca2 ]i 轻微升高 ,在 0 .4mmol/L时的升钙作用最大 (升钙百分率为 12 .2 0 %± 1.2 4% )。在测定介质中加入钙离子载体A2 3187(10 μmol/L) ,使神经细胞内的钙离子浓度升高 ,若此时加入牛磺酸 (1.6mmol/L) ,则神经细胞内钙离子的浓度下降。结论 :牛磺酸对细胞内钙离子有双向调节作用 ,牛磺酸可能是通过对钙稳态的调节作用来阻止细胞内钙超载 ,保护神经细胞、并发挥其增强动物学习记忆等方面功能的。     

诱导胚胎干细胞向神经细胞分化方法的研究与探讨

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,分析了一些方法的原理并初步探讨其相关的分子机制,并提出一些可行性新方法。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化因其体外的可操作性、来源的广泛性及质量可控性将有可能成为临床上治疗神经系统疾病的有效方法。     

神经元和胶质细胞上的Ang Ⅱ受体的作用有所不同

过去推测,AngⅡ在中枢神经系统的生理和药理作用只是它同神经细胞上特异性AngⅡ受体作用的结果。而Sumners等的实验结果显示在神经细胞及星状胶质细胞上均有AngⅡ受体。虽然在这两种细胞上的AngⅡ受体有许多相同的动力学与药理学特性,但它们在细胞内与受体偶联的信使物质并不相同,从而在功能上以不同的方式对儿茶酚氨(CA)的代谢进行调节。在神经细胞上,AngⅡ与其受体的特异性结合引起     

配对螺旋样纤维(PHF)-Tau与神经细胞的死亡

神经纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFT)是老年性痴呆病的重要病理特征,人类神经tau分子聚集形成的配对螺旋样纤维(paired helical filaments, PHF)是NFT的主要成分.最近研究表明,PHF与神经细胞的坏死和程序化死亡密切相关,其作用机理可能是诱发细胞内氧化自由基系统的启动而导致神经细胞死亡的.