二维荧光光谱与多道光检测器

荧光光谱技术有很高的灵敏度和特异性,被广泛用于物质成份分析,发展很快。对荧光光谱术的要求是不断提高灵敏度、准确度和分析速度,特别是增强荧光分析法的选择性,提高对多成份复杂物质的分析能力。在使用激光器作为激发光后,灵敏度大为提高。但是在室温下荧光谱比质谱或红外谱的谱带要宽,在分析复杂的混合物中某一成份、尤其是含量比例较低的成份时,苦于荧光谱带之重叠,常需要用化学或物理方法预先将样品分离或提纯。     

时间分辨荧光免疫分析仪的临床实验方法和评价方案

时间分辨荧光免疫分析技术是一种利用稀土离子及其螯合物作为示踪剂的灵敏度高、线性范围宽、应用范围广的非放射性标记免疫分析技术。研制了一种性能稳定的时间分辨荧光免疫分析仪,为了进一步将这一先进超微量物质检验技术推广于临床应用,根据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）制订的临床评价方案,选择放射免疫分析法、化学发光免疫分析法以及Perkin Eimer Life Sciences公司的Auto DFLFIA-1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪作为比较方法,提出了三套检验时间分辨荧光免疫分析仪性能的临床实验方法和评价方案。并利用其中的一套方案进行了实验,结果表明这些方案可操作性强,结果可信,经济适用,可作为同类医疗检验仪器进行临床实验的参考。     

时间分辨荧光免疫分析法确定血痕种属

采时时间分辨荧光免疫分析法（ＴＲＦＩＡ）鉴定微量血痕种属。固相和铕标记抗体均采用抗人ＩｇＧ抗体。通过检测可确定血痕是否来源于人体。使用本法检测血清样品的灵敏度达５０万倍稀释度,检测血痕样品达２０万倍稀释度,时间分辨荧光免疫分析法具有无放射性污染,标记物保存期长,特异性好,结果稳定,操作简便等优点,适于法医学的常规检测。     

2种方法在血清β2-微球蛋白检测中的效果对比

目的:探讨散射免疫法和荧光免疫层析法在血清β2-微球蛋白中的检测效果对比观察及精确度。方法:选取2016年10月-2017年8月我院收治的肝肾功能损伤患者88例,对患者分别应用散射免疫法以及荧光免疫层析法进行检测。对比两组方法血清β2-微球蛋白的检测结果、灵敏度、特异性以及精确度。结果:检测结果方面,荧光免疫分析法患者的检测率明显高于散射免疫法,漏检率明显低于散射免疫法(P0.05);荧光免疫层析法的灵敏度、特异性以及诊断符合率明显高于散射免疫法(P0.05);各项指标水平方面,患者血清β2-微球蛋白、肌酐、尿酸以及尿素等指标的水平明显高于正常水平(P0.05);精确度方面,荧光免疫层析法批间、批内的精确度明显高于散射免疫法(P0.05)。结论:对患者应用荧光免疫层析法检测血清β2-微球蛋白,有较高的检测符合率、灵敏度以及准确度,能够满足临床检测过程中的要求,进而有利于患者的诊断和治疗,临床上应当进一步推广应用。     

DABITC／PITC双偶合法在蛋白质手工固相顺序分析中的应用

Edman化学降解法迄今仍然是蛋白质(或多肽)顺序分析中最基本和最有效的方法。根据蛋白质(或多肽)在反应中的状态不同,可分液相顺序分析法和固相顺序分析法。固相顺序方法,由于操作方便,洗涤干净,肽不会因洗涤和抽提而受损失等优点而迅速发展。但是由于Edman降解反应产物PTH-氨基酸检出的局限性,影响了Edman液相和固相顺序法的灵敏度和精确度。近十年来,发展的高灵敏的顺序方法,主要集中于二点:一是采用放射性同位素,荧光基团或有色Edman试剂;二是     

时间分辨免疫荧光分析测定人血清铁蛋白

用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8％和10.0±1.3％(x±SD);回收率为98.4±7.4％。测定值与RIA法测定值比较,相关性良好。     

定量PCR的荧光技术

荧光定量PCR是在普通PCR基础上,利用荧光技术对核酸进行绝对定量的一项新兴技术,其灵敏度高、特异性高、操作简便和定量准确,已被广泛应用于临床和科研中。为更好地发挥荧光定量PCR的优点,荧光技术领域的研发工作十分活跃。     

荧光分析及其应用

由于六十年代后期荧光仪器技术的发展,使荧光分析方法日趋完善。目前荧光分析方法已广泛地应用到工农业、环境保护、粮食保存、临床化验、药物分析、食品分析、医学和生物学基础研究等各个领域,分析对象有无机离子和化合物、有机化合物、氨基酸、蛋白质、酶、核酸、糖、维生素和甾族化合物等等。近年来,我国各个研究领域对荧光分析法比较重视,在这方面做了不少工作,取得一定的成绩。本文就荧光分析法和它的应用作一简单的介绍。     

适用于细胞荧光测量的多道显微荧光计

建立了由倒置荧光显微镜和光学多道分析仪(OMA)连接而组成的适用于细胞荧光测量的多道显微荧光计,编制了数据处理程序。利用这一装置测量了单个细胞,多细胞的荧光光谱和拓扑(topography)。和传统的显微荧光计相比,该装置具有测量灵敏度和精度高、速度快等特点,可用来进行活细胞动态过程的研究。     

卫氏并殖吸虫PCR和实时荧光PCR快速检测方法的建立

目的建立快速、灵敏、特异的分子生物学检测卫氏并殖吸虫的方法。方法根据卫氏并殖吸虫的特异性基因序列,设计适合于PCR检测的特异性引物及实时荧光PCR特异性引物和探针,并进行灵敏性和特异性试验。结果设计的引物和探针特异性强,所建立的检测方法灵敏度高。应用实时荧光PCR方法的检测灵敏度可达到0.1 pg/μL,比PCR方法的灵敏度高三个数量级。结论本研究所建立的PCR和实时荧光PCR技术检测卫氏并殖吸虫方法的特异性强,灵敏度高,为卫氏并殖吸虫感染的诊治提供了快速的检测技术手段。     

高灵敏荧光探针用于肿瘤 Ramos 细胞的快速检测

本文以聚苯乙烯纳米微球为载体,基于适体特异性识别和 DNA 杂交原理,组装了一种 DNA-CdTe 量子点纳米线,制备了具有较高荧光强度的复合型荧光探针,并成功用于 Ramos 细胞的荧光成像。该探针可以用于特异性识别肿瘤细胞,在荧光成像中信号强灵敏度高,为肿瘤细胞的检测提供一种新方法。     

尼罗红在测定细菌细胞中聚-β-羟基丁酸和其他脂类贮藏物质中的应用

通过对含有PHB和非PHB(脂类贮存物质(NPLD)的细菌细胞的尼罗红染色和荧光显微观察,证实尼罗红是一种很好的细菌细胞内贮存的脂类物质的荧光染色剂,灵敏度较高.可用于PHB和非PHB脂类贮藏物质荧光显微观察,并能在一定程度上将两者区分开来.     

PLS-ANN判别分析自体荧光光谱识别胃癌

本文对58例胃癌病人离体标本的癌浆膜和正常浆膜进行以308nm为激发光的自体荧光光谱检测,采用多因素分析法进行光谱信息提取,以识别胃癌。研究表明偏最小二乘法结合神经网络法（简称PLS—ANN）进行判别分析,诊断胃癌的灵敏度为86％,特异度为100％,准确率为93％,有望成为手术中快速识别胃癌在胃壁的浸润范围的有效方法。     

尼罗红在测定细菌细胞中聚-β-羟基丁酸和其他脂类贮藏物质中的应用

通过对含有PHB和非PHB(脂类贮存物质(NPLD)的细菌细胞的尼罗红染色和荧光显微观察,证实尼罗红是一种很好的细菌细胞内贮存的脂类物质的荧光染色剂,灵敏度较高.可用于PHB和非PHB脂类贮藏物质荧光显微观察,并能在一定程度上将两者区分开来.     

高灵敏荧光探针用于肿瘤Ramos细胞的快速检测

本文以聚苯乙烯纳米微球为载体,基于适体特异性识别和DNA杂交原理,组装了一种DNA-CdTe量子点纳米线,制备了具有较高荧光强度的复合型荧光探针,并成功用于Ramos细胞的荧光成像。该探针可以用于特异性识别肿瘤细胞,在荧光成像中信号强灵敏度高,为肿瘤细胞的检测提供一种新方法。     

植物油的荧光光谱法研究

荧光光谱技术具有灵敏度高,选择性好等优点。植物油中含有各种荧光成分,对食用油中菜籽油、玉米油、芝麻油、葵花仁油、花生油的同步荧光光谱和三维荧光光图谱进行了分析研究,结果表明：利用同步荧光光谱和三维荧光图谱的特征,可以区分植物油的品种,可用于植物油的鉴别和质量监控,该法提供了一种油定性分析的方法,同时也扩展了荧光法在食用油鉴别中的应用。     

一种检测马尔尼菲青霉菌实时荧光定量PCR方法的建立和应用

目的:建立一种检测马尔尼菲青霉菌的实时荧光定量PCR的方法。方法:针对马尔尼菲青霉菌5.8S rRNA设计特异性PCR引物,采用核酸荧光染料SYBR GreenⅠ进行实时荧光定量PCR检测,探讨该方法的灵敏度和特异性,并进行临床样品检测验证。结果:该方法的特异性较好,与该菌属内的其他细菌间无交叉反应;灵敏度可检测出10个细胞/mL全血,在检测范围内线性良好,相关系数R2=0.981。临床样品检测和传统的培养方法结果完全相符。结论:该方法特异性好,灵敏度高,操作简单,检测时间短;临床样品检测具有很好的准确性,从本研究的结果显示实时荧光定量PCR方法在检测马尔尼菲青霉菌中的应用可以大大缩短临床的诊断时间,提高临床诊断的准确度和效率。     

腐皮镰刀菌SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

目的建立一种能够快速、灵敏、特异的鉴定腐皮镰刀菌的SYBR Green实时荧光定量PCR。方法运用SYBR Green实时荧光定量PCR反应体系检测腐皮镰刀菌,并对此方法的特异性、灵敏度和稳定性进行评价。结果通过对45例样品的检测,结果显示SYBR Green实时荧光定量PCR特异性好,其检出率高于普通PCR;灵敏度高,对重组质粒标准品的检测灵敏度为1.0×10~2copies/μL;稳定性好,对质粒为1.0×10~7copies/μL、1.0×10~5copies/μL、1.0×10~3copies/μL的标准品重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数为0.96%~1.68%。结论SYBR Green实时荧光定量PCR检测腐皮镰刀菌,不仅特异性好,灵敏度高,稳定性好,而且简便、快速、易操作。     

一种简易的picomole水平的氨基酸定量测定法

茚三酮显色法,是氨基酸分析仪最早使用和经常使用的检测方法,但是用此法检测,氨基酸分析仪,灵敏度通常限制在nanomole水平。Beckmen 121M和D-500型氨基酸分析仪的比色分析据称能在100p mol水平进行,但这已是灵敏度的极限。随着荧光技术的应用和发展,荧光检测技术与氨基酸分析仪相结合,与高效液相色谱相结合,使氨基酸、多肽和蛋白质的检测灵敏度达到Pmol水平。本文介绍一种简单易行的改进方法,即用邻苯二甲醛/β-巯基乙醇(OPA/ME)试剂代替     

荧光定量PCR 方法及分子标志物在海洋污染监测中的应用进展

荧光定量PCR 作为一种核酸定量技术, 可在PCR 扩增时在体系中加入荧光染料或荧光基团, 实时监测荧光信号从而对PCR 扩增产物进行实时准确定量, 技术灵敏度高, 特异性强。通过对荧光定量PCR 的原理、分类、优缺点及几种定量分析方法对比进行简述, 并对其在国内外海洋环境污染监测中的广泛应用和研究进行了全面综述, 从而对荧光定量PCR 和分子标志物在海洋监测中的应用前景做进一步的展望。