甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

白桦愈伤组织化学诱变

用不同浓度的甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate, EMS)对白桦(Betula platyphalla Sak.)愈伤组织进行化学诱变处理。结果表明: EMS诱变剂的浓度和处理时间对愈伤组织的存活率有很大影响。在高浓度EMS短时间处理和低浓度EMS长时间处理条件下得到叶柄、叶片愈伤组织的半致死剂量。通过观察半致死剂量下愈伤组织的染色体发现, 诱变后细胞中单倍体、非整倍体及多倍体比例均高于对照, 这说明EMS的诱变处理引起了愈伤组织细胞中染色体数量的变化。     

白桦愈伤组织化学诱变

用不同浓度的甲基磺酸乙酯（ethyl methane sulfonate,EMS）对白桦（Betula platyphalla Sak.）愈伤组织进行化学诱变处理。结果表明：EMS诱变剂的浓度和处理时间对愈伤组织的存活率有很大影响。在高浓度EMS短时间处理和低浓度EMS长时间处理条件下得到叶柄、叶片愈伤组织的半致死剂量。通过观察半致死剂量下愈伤组织的染色体发现,诱变后细胞中单倍体、非整倍体及多倍体比例均高于对照,这说明EMS的诱变处理引起了愈伤组织细胞中染色体数量的变化。     

高皂苷轮叶党参EMS诱变突变体研究

以轮叶党参为材料,采用甲基磺酸乙酯(EMS)处理离体叶片和愈伤组织对轮叶党参进行诱变,选择最佳诱变组合,并对诱变再生群体进行遗传分析。结果表明:(1)轮叶党参叶片和愈伤组织经EMS处理的存活率和分化率均低于对照,并且随EMS浓度的升高和处理时间的延长而下降。(2)叶片和愈伤组织的致死处理组合分别是0.4%EMS处理4h和0.3%EMS处理4h,半致死组合分别为0.3%EMS处理2h和0.2%EMS处理2h,愈伤组织是EMS诱变轮叶党参的的最佳材料。(3)筛选出的6号变异株皂苷含量为5.061mg/g,较对照平均值提高了5.48%。(4)对诱变再生苗进行遗传分析,8个特异引物对10个供试材料共扩增出59条带,具有多态性的谱带数为44条,占74.6%。材料间的相似系数变化范围0.453～0.912,其中3号、7号株与其他8株达到了品种间遗传差异。研究认为,EMS处理可应用于轮叶党参无性变异系的诱变,3号、6号、7号植株为诱变产生的具有较高皂苷含量的初选植株。     

源于小孢子培养的大麦耐盐变异体获取

以大麦品种‘花30’作为供试材料,比较了甲基磺酸乙酯（EMS）和平阳霉素处理小孢子60Co γ-射线辐照处理离体穗和干种子,对300mg·L-1NaCl胁迫培养下游离小孢子的愈伤组织产量和愈伤组织在0.3％NaCl胁迫筛选下的绿苗产量的影响。结果表明,EMS处理离体小孢子和60Co γ-射线辐照千种子的愈伤组织产量和绿苗产量明显优于平阳霉素处理小孢子和60Co γ-射线辐照离体穗。以16份源于种子辐照处理的再生植株自交一代种子为供试材料,比较了在0．3％NaCl胁迫下种子的发芽率和幼苗的成活率以及植株的分蘖数、株高和单株产量。结果表明,‘花30’发芽率为0,供试的16份耐盐变异体中,有14份材料在NaCl胁迫下的发芽率优于‘花30’,鉴定出4份耐盐性明显优于‘花30’的变异体材料。选择耐盐变异体作为供试材料,测定了变异体中Na＋／H＋逆向转运蛋白基因NHXl、NHX2和NHX3和编码甜菜碱醛脱氢酶（BADH）的两个同工酶基因曰肋,和BBD2的表达模式和表达量,结果表明变异体耐盐性的提高与这些基因的表达量存在联系。     

芦苇耐盐变异植株及其细胞学鉴定

用甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）处理芦苇（Ｐｈｒａｇｍ ｉｔｅｓｃｏｍ ｍ ｕｎｉｓ Ｔｒｉｎ．）胚性愈伤组织。从处理后的愈伤组织诱导获得芦苇耐盐变异植株Ｒ５００２－１２。变异植株能在含有１％ ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上生长。细胞学检查变异植株是混倍体,染色体数目变异范围在１００至３３ 之间。分蘖植株具有相似的形态学及染色体变异特性     

化学诱变剂对粳稻花粉愈伤组织的诱导和分化以及花粉植株性状变异的影响

用甲基磺酸乙酯(EMS)、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)和乙烯亚胺(EI)在3～4种不同浓度(EMS:2.5,3.5,4.5ml/1;MNNG:25,50,100mg/1;EI:0.25,0.5,0.75,1.0ml/1),不同温度(8,18,27℃)和不同时间(2,4,8,10,20,30小时)水平上处理离体培养早期的粳稻花药,观察到诱变剂在低剂量和较低温度下处理,明显提高花粉愈伤组织的诱导率;随着诱变剂剂量增加和温度增高,愈伤组织诱导率下降,在这种情况下,虽对愈伤组织总的分化率未见明显影响,但白苗所占百分数显著增加。 在所诱导的120个花粉植株H_2株系中,观察到有6个株系出现性状大突变,主要是株高、成熟期和结实率的变异,变异的性状基本是稳定的并能够遗传。未经诱变剂处理所培养的花粉植株H_2株系,未见性状大突变出现。     

枸杞抗羟脯氨酸细胞变异系筛选及其耐盐特性的研究

试验以枸杞(Lycium barbarum L.)成熟胚诱导的胚性愈伤组织为材料研究了：(1)^60Co—γ射线诱变处理对愈伤组织的影响;(2)耐羟脯氨酸(HYP)愈伤组织变异系的筛选;(3)耐HYP愈伤组织变异系的耐盐性及稳定性分析;(4)耐HYP愈伤组织变异系生理生化特性;(5)变异系的分化和再生苗的生理生化特性。初究结果表明：由胚性愈伤组织经30Gy的^60Co—γ辐射处理,在含16mmol／L HYP选择培养基和无HYP培养基上交替培养4代,分离出耐HYP的愈伤组织变异体;该变异体游离脯氨酸含量比对照高3．3倍,其再生植株叶片游离脯氨酸比对照高13．5倍。     

γ射线对烟草愈伤组织生长和变异的作用

由于高等植物细胞具有全能性,研究电离辐射对高等植物离体组织的作用,有助于了解射线对植物伤害作用的原理,更重要的是希望找到辐射育种的更有效的新途径。本文报道γ射线对烟草(Nicotiana tabacum L.)愈伤组织生长和变异的作用。其主要结果如下: (1)3千伦以上的γ射线就能抑制烟草愈伤组织的生长,10千伦以上明显抑制生长,不久就变黑而死亡。比较了烟草干种子及愈伤组织的辐射敏感性,40千伦处理的愈伤组织不能存活,而同样剂量处理的干种子却能正常萌发和生长。和Bajaj用菜豆做的工作相反,证明愈伤组织比干种子更敏感。 (2)γ射线处理愈伤组织后能引起巨型细胞的产生。 (3)将照射过的愈伤组织转移到分化培养基上,8千伦以下的处理都能诱导出烟草小植株,得到了一些畸形的植株。证明愈伤组织能在较低剂量射线作用下发生变异。     

芦苇变异植株的细胞学鉴定

芦苇变异植株是从EMS处理的愈伤组织再生的。植株是混倍体·染色体数目变异范围在100—33之间。在它们的分蘖植株中,存在类似的染色体数目变异。     

芦苇变异植株的细胞学鉴定

芦苇变异植株是从 EMS 处理的愈伤组织再生的。植株是混倍体·染色体数目变异范围在100—33之间。在它们的分蘖植株中,存在类似的染色体数目变异。     

木霉纤维素酶高产变异菌株9023的选育

1.用γ-射线、甲基磺酸乙酯和亚硝基胍反复处理木霉野生菌株1323,选得变异菌株9023,纤维素酶产量提高两倍以上。 2.这几种诱变因素对提高木霉纤维素酶产量的作用,甲基磺酸乙酯和亚硝基胍的效果甚好,而γ-射线效果甚差。     

γ辐照与模拟微重力效应对大鼠终末分化PC12细胞损伤的研究

目的:通过研究γ60Co-射线辐照与模拟微重力效应对大鼠终末分化PC12细胞的损伤,分析空间环境对哺乳动物细胞的损伤。方法:利用大鼠终末分化PC12细胞为材料,通过检测地面对照组、γ~(60)Co-射线辐照组、模拟微重力效应对照组、γ~(60)Co-射线辐照复合模拟微重力效应组的微核率、微核细胞率及HPRT基因突变频率,分析模拟空间环境对哺乳动物细胞的损伤。结果:随着γ~(60)Co-射线辐照剂量的增加,微核率、微核细胞率及HPRT基因突变频率均增加,呈现比较良好的效应关系,而γ~(60)Co-射线辐照复合模拟微重力效应组各项指标均低于γ~(60)Co-射线辐照组。结论:γ~(60)Co-射线辐照及模拟微重力效应均能诱发大鼠终末分化PC12细胞染色体的损伤和HPRT基因的突变,而模拟微重力效应降低PC12细胞损伤的机制还有待进一步研究。     

葡萄耐羟脯氨酸变异细胞系的筛选及其特性研究（简报）

葡萄愈伤组织经甲基磺酸乙酯（EMS）诱变处理后,用羟脯氨酸（HMP）作为选择压力,筛选出耐HYP的变异细胞系。该变异系游离脯氨酸含量比正常细胞系高4．7倍,并且表现出很强的耐NaCl和PEG能力。在盐胁迫下,变异系吸收的K 和Na 含量均高于正常系,而K ／Na 比值仍与正常系相近。     

甘蔗幼叶切段培养中的体细胞胚胎发生

本文从形态学和组织学方面研究了甘蔗幼叶胚性愈伤组织发生及体细胞胚胎的形成过程。甘蔗幼叶片切段培养于含2.4—D1.5mg/1的MS培养基上,4—6天后切段开始形成愈伤组织,约10天后愈伤组织表面出现白色颗粒状结构。将含有白色颗粒状结构的愈伤组织转移至不含激素的培养基中,7—10天后可见有小植株长出。组织学和形态学观察表明,甘蔗离体再生植株是通过体细胞胚胎发生途径。     

普通小麦与簇毛麦不对称体细胞杂交的研究

以不同浓度(0～2.5mmol/L)碘乙酰胺(IOA)处理的小麦(Triticum aestivum L.)原生质体为受体,以经6krad(130rad/min)⁶⁰Co-γ射线处理的继代后4～5d期簇毛麦(Haynaldia villosa)愈伤组织原生质体为供体,使用PEG法诱导细胞融合。融合细胞经培养形成细胞团、愈伤组织或植株。通过形态学比较、染色体检查及同工酶分析,确认了得到的愈伤组织和再生植株为体细胞杂种。     

60Co-γ射线辐射对柞蚕生物学特性的影响

利用~(60)Co-γ射线对柞蚕卵进行辐射,探讨了~(60)Co-γ射线辐射对柞蚕生物学特征的影响.结果表明:120 Gy以下辐射剂量对柞蚕卵孵化率及柞蚕死亡率影响不大,但随着~(60)Co-γ射线辐射剂量的增加,孵化率明显降低而死亡率显著升高;血液蛋白质图谱和相关基因序列在辐射前后亦存在差异.这些生物性状的改变说明~(60)Co-γ射线对柞蚕生长发育具有重要的影响.     

从簇毛麦和摄威大麦草幼穗愈伤组织诱导植株再生

禾本科植物的组织培养和植株再生是一个比较困难的研究课题。除甘蔗等少数物种外,禾本科大部分种的幼叶愈伤组织不能或只能偶尔分化再生植株。近年来陆续报道来源于玉米(Zeamays)、Sorghum bicolor和黍属(Panicum)的一些种的胚的愈伤组织长期保存着胚胎发生和植株再生的能力。同时来源于水稻(Oryza sativa)、粗厚山羊草和大麦的杂种(Triticum     

提高小麦原生质体再生植株频率的研究

从小麦徐州211的成熟种子诱导愈伤组织,建立了胚性悬浮细胞系。酶解悬浮细胞获得原生质体,用含o．8％琼脂糖的改良Ms培葬基进行琼脂糖珠培养,再生细胞分裂,并形成愈伤组织。诱导再生愈伤组织分化．得到了完整的再生植株。原生质体培养两周后,加入降渗培养液可促进克隆的形成。在分化培养基中,低浓度蔗糖可提高植株分化率。高浓度的激动索和玉米素对芽的分化有效并能抑制愈伤化。再生愈伤组织诱导分化时期的早晚影响植林分化频率。     

芦笋抗S—（2—氨乙基）—L—半胱氨酸（AEC）变异体的筛选

S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸(AEC)可抑制芦笋愈伤组织的生长,此抑制作用可被赖氨酸或甲硫氨酸部分解除。用0.5mmol/L的AEC进行筛选,得到抗性愈伤组织AR10并再生植株。AR10愈伤组织经一年多的继代培养,在离开选择剂组培继代两代后仍保持对AEC的抗性。抗性系愈伤组织还表现出对2mmol/L的半胱氨酸具交叉抗性,对1mmol/L的赖氨酸加苏氨酸表现部分交叉抗性。AR10再生植株一部分保持对AEC的抗性,而一部分则无抗性。对抗性愈伤组织及其再生植株的氨基酸分析表明,愈伤组织内游离赖氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸都有增加,而在再生植株内却发现半胱氨酸和赖氨酸的特异性增加,分别是对照植株的5.4和4.6倍。