瑞丽茜树快速繁殖和离体保存(简报)

对极小种群物种瑞丽茜树Fosbergia shweliensis的组织培养和离体保存技术进行研究。结果表明,以种子苗茎尖和成年植株幼嫩茎段为外植体均能诱导无菌苗,适宜的启动培养基分别为MS+2 mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA+3%蔗糖和MS+3 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA+3%蔗糖,增殖率达3~4倍。诱导生根的适宜培养基为1/2MS+1 mg·L-1 IBA+2%蔗糖,生根率100%,移栽成活率90%以上。完整试管苗在培养基1/2MS+3%蔗糖,12~15℃条件下可缓慢生长,继代时间可延长为18~24个月一次,实现了该物种的离体保存。     

盾叶薯蓣类原球茎的离体诱导及快繁体系的建立

为解决盾叶薯蓣离体培养中试管苗移栽困难的难题,以盾叶薯蓣带腋芽的茎段为外植体,借助正交试验设计方法,离体诱导出类原球茎并建立了类原球茎微繁殖技术体系。结果表明:以带腋芽茎段为外植体诱导致密愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L+KT0.6mg/L+蔗糖3%;类原球茎诱导和增殖培养基为:MS+6-BA4.0mg/L+KT1.0mg/L+蔗糖6%;类原球茎生根培养基:1/2MS+NAA 0.3mg/L+IAA 0.8mg/L+活性炭0.3%+蔗糖1.5%。经该途径诱导得到的生根类原球茎植株经炼苗后移栽的成活率可达到90%以上。     

紫花亚菊（Ajania purpurea）的组织培养与快速繁殖

以紫花亚菊茎段为外植体对其进行组织培养,MS为基本培养基,设置不同激素浓度配比,对试验结果进行观察分析,筛选出适合的配方：启动培养基为MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.01mg·L-1;继代培养基MS＋6-BA0.3mg·L-1＋NAA0.05mg·L-1,组培苗分化率高;不定根最适诱导培养基为：1/2MS＋IBA0.15mg·L-1,生根率达90%以上,组培苗移栽成活率达95%。     

菊芋组织培养快繁技术的建立

以菊芋带芽点的薯盘及带节的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的生长调节物质,研究菊芋组织培养和快速繁殖的技术环节,最终筛选出最优技术参数组合,建立菊芋再生体系。试验结果表明：茎段外植体是理想的快速繁殖材料,正接（形态学下端向下）是最佳的接种方式。芽诱导最佳培养基为MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.2mg·L-1IBA,诱导率为95%;继代增殖最适宜培养基为MS＋2.0mg·L-16-BA;壮苗培养最佳培养基为MS＋0.1mg·L-16-BA;生根适宜培养基为MS＋0.2mg·L-1NAA,生根率达100%;移栽成活率达95%,大田种植成活率达95%以上。     

盐生植物海马齿离体再生

建立盐生植物海马齿（Sesuvium portulacastrum）的离体再生体系,为其生物技术改良奠定基础。以海马齿叶片、茎和腋芽为外植体, 在不同激素配比的培养基上进行愈伤组织诱导、继代培养以及不定芽的分化和生根培养。结果表明： 最适愈伤组织诱导的外植体为叶片, 其次为幼嫩的茎段和腋芽。以叶片为外植体, 愈伤组织诱导率最高的培养基为MS＋2.0mg·L^–12, 4-D ＋ 0.5 mg·L^–16-BA ＋ 3%sucrose; 芽分化最适培养基为MS ＋ 1.0 mg·L^–1 2, 4-D ＋ 0.2 mg·L^–1 6-BA ＋ 3% sucrose;生根最适培养基为MS ＋ 3%sucrose ＋ 0.1%AC。炼苗移栽后, 成活率可达80%。     

血叶兰的组织培养与快速繁殖

以血叶兰的嫩茎段为外植体, 建立了血叶兰的组培快繁体系。结果表明： 芽诱导最适宜的培养基是MS＋6-BA 5.0 mg·L-1; 最适芽增殖培养基为MS＋6-BA 5.0 mg·L-1＋NAA 0.5 mg·L-1＋TDZ 0.3 mg·L-1, 芽增殖率达4.92倍; 最佳壮苗培养基为MS＋NAA 0.3 mg·L-1＋GA3 1.0 mg·L-1＋15%椰汁, 芽苗高度达到4.33 cm, 芽粗为0.61 cm; 生根最适培养基为1/2MS＋IBA 1.0 mg·L-1＋15%香蕉＋0.5 g·L-1活性炭, 生根率在93.0%以上; 炼苗后, 移栽在泥炭土＋珍珠岩＋松树皮（3：1：1, V/V/V）混合基质中, 存活率高于87.0%。     

乌桕不同外植体高效再生探索

以乌桕的成熟胚、胚乳、叶片和茎段为外植体,建立高效、稳定的组培快繁再生体系,并成功获得其再生苗.结果表明:(1)全胚乳带胚的愈伤组织诱导率达90%,其愈伤组织继续在MS+1.0 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA培养基上培养,不定芽最多达15个/外植体.(2)去胚乳的胚不加调节剂则胚直接萌动成苗,萌动率和成苗率可达100%;去胚乳的胚在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 6-BA最佳培养基中培养,其胚轴处可直接诱导不定芽,最多达6个/外植体.(3)无菌苗叶片在MS+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA培养基中诱导的有效不定芽数最高达18个/外植体,诱导率达90%.(4)茎段在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.1~0.3 mg·L-1 6-BA培养基上不定芽的诱导率较高(100%),直接诱导的不定芽数最多达17个/外植体.(5)芽苗在1/2MS+0.5 mg·L-1 IBA上生根率达到100%,但根系较细弱,而在MS+1.0 mg·L-1镧稀土中的生根率达100%,且根系粗壮;生根的小苗练苗移栽后温室内成活率为89.2%,移栽到室外沙质土壤中的成活率为68.9%.     

蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖

通过诱导残败花梗上的休眠芽萌发,以萌发的幼叶和去茎尖的茎段为外植体进行组织培养,建立了蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis Bl.)的无菌繁殖体系,并筛选出最佳培养基组成.诱导休眠芽萌发的最佳培养基为不加任何激素的MS0培养基;原球茎诱导的适宜培养基为MS 3.0 mg·L-1 6-BA 0.5 mg·L-1 ZT 30 mg·L-1柠檬酸和MS 5.0 mg·L-1 6-BA 30 mg·L-1柠檬酸 30%椰乳(CM),其中茎段的诱导效果明显优于叶片,诱导率达95%;诱导无菌苗生根的最适培养基为1/4 MS 1.0 mg·L-1 6-BA 0.1 mg·L-1 NAA,生根率可达79%.     

三倍体枇杷的茎尖培养及诱导生根

以三倍体枇杷为材料, 研究了不同消毒方式、MS培养基浓度、植物生长调节剂及浓度配比对茎尖培养及诱导生根的影响。结果表明, 初代培养时, 选择生长饱满、健壮的顶芽及适宜的消毒方式, 外植体剥离长度0.5-0.8 cm, 能显著提高茎尖培养的成活率; MS培养基浓度的变化对外植体的褐化没有明显的影响; 最适茎尖的启动培养基为MS＋1.0 mg·L-1 6-BA＋0.5 mg·L-1 NAA, 成活率高达84.8%; 最适组培苗生根培养基为1/2MS＋0.1 mg·L-1 NAA＋0.01 mg·L-1 IAA＋0.3%活性炭, 生根率达66.7%, 每株平均生根2.83条。该研究结果将为三倍体枇杷再生体系的建立及利用转基因技术对三倍体无籽枇杷进行遗传改良奠定基础。     

皱皮木瓜愈伤组织诱导与快速繁殖

以皱皮木瓜（Chaenomeles speciosa）当年生枝条的茎尖和茎段为外植体进行离体培养与快速繁殖。结果表明：芽萌发及愈伤组织诱导的最佳培养基是MS＋2.0mg·L^-1 6-BA＋1.0mg·L^-1NAA;愈伤组织分化最佳培养基是MS＋1.0mg·L^-1 6-BA＋0.05mg·L^-1NAA;芽增殖最佳培养基是MS＋1.0mg·L^-1 6-BA＋0.05-0.1mg·L^-1NAA,其增殖系数为6.59;最佳生根培养基是1/2MS＋1.0mg·L^-1IAA,生根率为86.7%;采用珍珠岩二步移栽,成活率可达90%以上。     

松潘乌头块根愈伤组织诱导及再生体系的建立

以野生松潘乌头块根为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生培养。由于松潘乌头离体培养时,组织褐变严重,因此在愈伤组织诱导前须进行除褐培养,培养基以MS＋6-BA 1.0 mg·L^-1＋VC 300 mg·L^-1＋PVP 200 mg·L^-1效果较好,连续转移3次后褐变率显著降低到10%。适宜的愈伤组织诱导培养基为MS＋2,4-D 3.0 mg·L-1＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋LH 500 mg·L^-1,诱导率100%;不定芽分化培养基为MS＋ZT 1.0 mg·L^-1＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93%;不定芽增殖培养基为MS＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.3 mg·L^-1,平均增殖倍数为6.0左右;生根培养基为1/2MS＋IAA 0.3 mg·L^-1＋VC 100 mg·L^-1（或PVP 300 mg·L^-1）,平均生根数10条左右,生根率为96%以上。将瓶苗移栽于森林土和蛭石以1：1（V/V）混合的基质中,生长良好,成活率达90%以上。     

桂林小花苣苔离体快速繁殖技术

对抗结核植物桂林小花苣苔（Chiritopsis repanda var.guilinensis）进行离体培养与快速繁殖技术研究。结果表明：桂林小花苣苔叶片外植体的最适初代诱导培养基为MS＋0.5mg·L^-16-BA＋0.05mg·L^-1IBA,pH8.0;最适继代增殖培养基为MS＋0.1mg·L^-16-BA＋0.05mg·L^-1IBA,pH6.0,繁殖系数7.0/35天;最适生根培养基为1/2MS＋0.2mg·L^-1NAA,pH6.0,生根率为93.6%。模拟桂林小花苣苔自然生境,在春季对生根试管苗进行大棚移栽,成活率达90%。根据上述快繁技术,理论上每株试管苗每年可繁殖桂林小花苣苔种苗46万株。     

狭叶小金梅草组织培养与快速繁殖

以狭叶小金梅草(Hypoxis angustifolia)当年花苞为材料进行离体快速繁殖体系研究。结果表明,花苞的愈伤诱导适宜培养基为MS+6-BA 0.8 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1;诱导芽培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.02 mg·L^-1+AC(活性碳)0.2 g·L^-1;芽继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+花宝1号1 g·L^-1+AC 0.2 g·L^-1,30 d为一个继代周期,增殖系数达10~20倍;壮苗生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.02 mg·L^-1+AC 0.5 g·L^-1。将生根苗移栽至泥土:蛭石按3:1配制旳基质中,盖膜保湿,成活率达80%。     

文采唇柱苣苔的组织培养与快速繁殖

以肉质叶为外植体,研究文采唇柱苣苔的组织培养和快速繁殖。结果表明：培养基MS＋6-BA 0.1 mg？L-1＋NAA 0.1mg？L-1适用于初代培养时的愈伤组织诱导和植株再生;MS＋6-BA 0.5 mg？L-1＋NAA 0.2 mg？L-1＋10%香蕉泥和MS＋6-BA 0.5mg？L-1＋NAA 0.5 mg？L-1＋10%香蕉泥分别适用于继代增殖及壮苗培养,60 d后的增殖系数分别为6.7和4.8;培养基MS适用于生根培养,培养30 d,生根率达100%。另外,对文采唇柱苣苔生根试管苗进行大棚移栽,移栽成活率约为94%。     

珍贵用材树种红椿的组培育苗技术初探

以红椿种子为外植体材料,对其组织培养技术进行初步研究。结果表明,适宜红椿种子无菌苗芽诱导的培养基为MS＋6-BA 0.5 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1,适宜的芽继代增殖培养基为2/3MS＋6-BA 0.5 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1＋GA3 1.0 mg·L^-1,适宜生根培养基为1/2MS＋IBA 0.5 mg·L^-1,以泥炭土、黄心土、河沙按1∶1∶1混合作为基质,移栽成活率达85%以上。     

油茶良种‘华硕’的组织培养及高效生根

以油茶‘华硕’带芽茎段为外植体,研究植物生长调节剂、珍珠岩对其快速繁殖及试管苗生根的影响。结果表明：茎段腋芽萌发的最佳培养基为：MS＋2.0 mg·L^-1 6-BA＋0.1 mg·L^-1 IAA,萌发率达88.68%;最佳继代增殖培养基为：WPM＋3.0 mg·L^-1 6-BA＋0.01 mg·L^-1 IBA＋6.0 mg·L^-1 GA3,增殖系数可达11.27;最佳壮苗伸长培养基为：WPM＋0.05 mg·L^-1 IAA＋6.0 mg·L-1GA3;最佳生根培养基为：1/2MS＋1.0 mg·L^-1 IBA＋50 g·L^-1珍珠岩,生根率95.83%。炼苗后移栽到泥炭土、珍珠岩、黄土（1：1：1,V/V/V）混合基质中,成活率达85%以上。     

亚麻胚性细胞悬浮培养体系的建立和影响因素

亚麻品种‘双亚五号’的胚性愈伤组织诱导最佳培养基为MB（MS无机盐加B5维生素）＋1.0mg·L^-12,4-D;细胞初始悬浮培养的最佳培养基为MB＋0.2mg·L-16-BA;细胞继代悬浮培养的最佳培养基为改良的MB（NH4NO3减半,KNO3加倍）＋0.02mg·L^-12,4-D＋0.2mg·L^-16-BA;适宜的蔗糖量为50g·L^-1;适宜的继代接种量为1.0～1.5g·（25mL）^-1;继代间隔为5～7d。     

火龙果愈伤组织诱导与植株再生

为了建立火龙果愈伤组织诱导与植株再生体系,以火龙果茎段、幼苗和子叶为外植体进行离体培养试验。结果表明：茎段诱导愈伤组织的最优培养基为1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BAO．5mg·L^-1,诱导子叶愈伤组织的最适培养基是1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1,诱导愈伤组织分化的最优培养基为1／2MS＋6-BA4．0mg·L^-1＋NAA0．5mg·L^-1,最佳生根培养基为1／2MS＋6．BA1mg·L^-1＋NAA0-3mg·L^-1。     

龙凤竹的组织培养

以龙风竹[Pedilanthus tithymaloides（L.）Poit．var．nartus Dressler]茎段为外植体,研究了龙凤竹愈伤组织诱导、植株再生以及试管苗继代保存培养的培养条件。结果表明,龙风竹茎段灭菌的最佳方法是用1．0g·L^-1HgCl2处理4～10min;愈伤组织诱导与分化的最佳培养基为添加1．5mg·L^-1 6-BA和0．10～0．15mg·L^-1 NAA的MS培养基（含有30g·L^-1蔗糖和6g·L^-1琼脂粉,pH5．78～pH5．80）;试管苗生根的最佳培养基为含有0．2mg·L^-1 NAA的生根培养基（1／2MS,含有15g·L^-1蔗糖和6g·L^-1琼脂粉,pH5．78-pH5．80）,试管苗生根率可以达到93．3％;经过炼苗并移栽后,龙风竹试管苗的成活率可达95．0％以上;龙凤竹试管苗的最佳继代保存培养条件为：在含有0．1mg·L^-1 NAA的生根培养基中,于温度15℃、光照强度20μmol·m^-2·s^-1的条件下继代保存。此外,龙凤竹愈伤组织可以直接分化产生大量丛生芽,达到龙凤竹试管苗增殖的目的。     

春石斛优良品种‘森禾2006’组培快繁体系的建立

本文研究了春石斛‘森禾2006’的拟原球（PLBs）诱导、增殖、分化及壮苗和生根,建立了其组培快繁体系。结果表明：‘森禾2006’PLBs最适诱导培养基为1／2MS＋TDZ0．5mg·L-1＋水解酪蛋白2．0gL-1;PLBs增殖培养基为1／2Ms＋水解酪蛋白2．0gL-1;PLBs分化培养基为1／2MS＋KT1．0mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1;壮苗生根培养基为Ms＋IBA0．5mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1＋香蕉泥100．0g．L-1。