苏芸金杆菌伴孢晶体和芽孢孢衣的蛋白质组分及其与毒力的关系

研究了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)3个变种6个菌株的提纯伴孢晶体和芽孢对大蜡螟(Galleria mellonella)和大菜粉蝶(Pieris brassicae)的毒力、晶体的蛋白质和多肽成分及芽孢衣中的类晶体蛋白质成分.生物测定表明,晶体毒力高于芽孢,在总数量相同的情况下,晶体和芽孢近1:1的混合物的毒力高于单独的晶体或芽孢.芽孢衣中存在一种类似晶体蛋白质的成分,无晶体突变株及无效野生株的芽孢则无此种蛋白质且对两种昆虫无毒.变种wuhanensis和变种galleriae的晶体含MW138000的主要蛋白质和63000的次要蛋白质,经碱性缓冲液溶解后,上清液含MW138000的蛋白质,沉淀中含MW63000的蛋白质;变种aizawai的晶体中仅含138000的蛋白质.对大蜡螟无毒的HD-11(var.aizawai)晶体的蛋白质成分有别于上述晶体,其胰蛋白酶消化物的SDS凝胶电泳图型显示少2条多肽带,但对大菜粉蝶仍有效.结果表明,苏芸金杆菌的芽孢在昆虫病理中有重要作用,伴孢晶体的蛋白质和多肽成分与它们对昆虫的毒力特性之间有密切关系.     

苏芸金杆菌高毒力菌株筛选方法研究

通过对36株苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株孢晶混合物的蛋白图谱和其对小菜蛾(Plutella xylostella)。致倦库蚊(culex pipens)二十八星瓢虫(Epjlachna vigintioctopunctata)三种昆虫幼虫的致死率研究,我们建立了一套快速高效的苏芸金杆菌内毒素高毒力菌株筛选程序。该程序是将蛋白电泳方法引入苏芸金杆菌菌株筛选,经过一个简单的苏芸金杆菌孢品混合物的蛋白电泳后,可以迅速辩别出对所有试虫毒力均很低的菌株,这一类菌株在苏芸金杆菌分离物中的比例可高达80％以上。除此之外,根据电泳的结果还可以预测该菌株大概的宿主范围和发现新的杀虫晶体蛋白类型。运用该方法,可以大大提高苏芸金杆菌菌株筛选的效率并降低筛选所需的费用。     

亚硝基胍对苏芸金杆菌晶体和芽孢的影响

苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)作为高效、无公害农药用于防治农、林、果、蔬害虫取得了良好的效果。近年来,为了提高苏芸金杆菌对昆虫的致病力,国内外不少学者研究了苏芸金杆菌的伴孢晶体与杀虫毒力的密切关系,并通过自然筛选或遗传育种方法不断获     

苏芸金杆菌的一个新血清型

从土壤中分离出一株产生伴孢晶体的芽孢杆菌。该菌株具有苏芸金杆菌的典型特征,严生不规则型晶体,鞭毛抗原及生化反应与已知的苏芸金杆菌21个血清型不㈤,不产生β-外毒素。对棉铃虫、粘虫、大蜡螟及尖音库蚊幼虫均无毒性,是一个新血清型(H22),定名为苏芸金杆菌山东变种(Bacillus thuringiensis serovar shandongiensis, H22)。     

我国部分地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌

从云南、贵州、四川和陕西4省的土壤中分离到大量苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringie—nsis)和球形芽孢杆菌(Bacillus sphaeticus)菌株。血清型分析表明,苏芸金芽孢杆菌分离株分属于23个血清型中的13个血清型,另有近20％的自凝型菌株及部分与所有标准菌抗血清无反应的菌株。对该两种昆虫病原细菌的生态分布规律进行了分析。研究了全部苏芸金芽孢杆菌分离株对鳞翅目、鞘翅目及双翅目的6种昆虫的毒力特性、伴孢晶体与芽孢的形态,以及晶体蛋白质成分。观察和测定了球形芽孢杆菌分离株的形态和毒力,并分析了部分菌株的晶体蛋白质成分。得到22株高效苏芸金芽孢杆菌和2株高效球形芽孢杆菌。证明苏芸金芽孢杆菌是典型的土壤微生物类群,我国西南地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌资源十分丰富。     

蜡螟杆菌“010”抗噬菌体菌株的选育和苏芸金杆菌类噬菌体的研究

苏芸金杆菌作为微生物农药,已在国内外广泛生产应用。但在生产中往往受到噬菌体的侵染,严重地影响这种微生物农药的应用和发展。蜡螟杆菌“010”(简称“010”)是我组于1964年自蜜蜂死亡幼虫体内分离出的一种对人畜无害的中温好气性芽孢杆菌。北京动物研究所(1973)鉴定为苏芸金杆菌蜡螟变种(Bacillus thuringiensis var.galleriae)。它对多种鳞翅目害虫有高效的毒杀作用,田间防治菜青虫(Pieris rapae)、稻苞虫(Parnara guttata)、松毛虫(Dendrolimus punctatus)、稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)、杨天社蛾(Melalopha(Pygaera)anachoreta)等试验效果显著。死亡率一般都在90—95％,个     

三株苏芸金杆菌的鉴定

利用苏芸金杆菌鞭毛抗原(H抗原)的血清学反应及生理生化反应对三株苏芸金杆菌Tt-1、Tt-4及Tt-5进行了分类研究,结果表明它们分别属于血清型H_(10)、H_(13),H_(21),其亚种     

亚硝基呱对苏芸金杆菌晶体和芽抱的影响

苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis）作为高 效、无公害农药用于防治农、林、果、蔬害虫取得 了良好的效果^[1]。近年来,为了提高苏芸金杆 菌对昆虫的致病力,国内外不少学者研究了 苏芸金杆菌的伴袍晶体与杀虫毒力的密切关 系^[2],并通过自然筛选或遗传育种方法不断获 得了新的变种和高毒效菌株^[3,4,10,11]。我国1975 年从美国引进B. thuringiensis var. kurstaki (HD-1)以来,已较广泛地应用于生产^[5],但对 原有菌种进行改良尚无报道。我们用化学诱变 剂亚硝基孤(NTG）处理HD-1菌种,获得了一 些诱变菌株,并研究了NTG 对苏芸金杆菌晶 体、芽抱以及诱变后对昆虫毒力     

几种苏芸金杆菌晶体的毒力及形态结构

研究了苏芸金杆菌(Bacillus thurin&itntis)6个变种的7个菌株的提纯晶体对家蚕(Bombyx mori)和棉铃虫(Heliothis armigera)的毒力及其在电镜下的形态与结构。证明7种晶体对两种昆虫的毒力大小有不同的顺序。方形晶体和具镶嵌形的菱形晶体对两种昆虫皆有较高毒力,细小菱形晶体的毒力皆很低,不规则的颗粒状晶体和六角彤晶体不显示毒性或仅具很低毒件。不同晶体的表面结构亦有差异。并证明方形晶体和两种具镶嵌型构造的菱形晶体易受超声波破坏,小菱形及其它两种非菱形晶体对超声波有较大抗性。认为苏芸金杆菌晶体的形态结构及其对超声波的抗性与它们对鳞翅目昆虫的毒力之间有一定关系。     

苏芸金杆菌以色列变种在不同培养基上的产毒能力

苏芸金杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis)对蚊幼虫的杀虫活性,主要在于蛋白质晶体,而营养条件对晶体的合成有着重要影响。据研究,苏芸金杆菌不同血清型对培养基的要求各有差异。关于适合苏芸金杆菌以色列变种产生毒力的培养基,特别是     

关于我国苏芸金杆菌制剂毒力标准化问题的探讨

一、加强毒力标准化的研究已成为我国发展苏芸金杆菌制剂的当务之急。苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)制剂毒力标准化是指以生物测定为基础,采用某种合适的单位来表示某种苏芸金杆菌制剂杀虫活性的大小,其目的是为了控制产品质量。自从     

乳化剂和保存条件对两种苏芸金杆菌杀蚊δ—内毒素的形响

我们已研究过有关化学物质及保存条件对苏芸金杆菌杀鳞翅目δ-内毒素的影响,本研究的目的在于考查乳化剂及保存温度与时间对两种杀蚊δ-内毒素毒力的影响。一、材料与方法 1、供试昆虫致倦库蚊(Culex fatigans)。 2、苏芸金杆菌菌株IPS—82(Bcillus thuringiensis var israelensis)L14(未鉴定)。 3、伴孢晶体的分离提纯以液体双相法结合蔗糖密度梯度法进行,提纯的晶体悬液于-20℃保存备用。     

苏芸金杆菌浓缩液的保存和不用二甲苯的防腐剂配方

在苏芸金杆菌浓缩商品制剂中,通常含有3—4％的二甲苯以防止芽孢的萌发。除此以外,二甲苯还能防止各种腐生微生物污染,尤其是肠杆菌和真菌。最近,一种用苏芸金杆菌血清型H3a3b制备的称为Futufa的超浓缩液已经问世,其中不含二甲苯,用于防治枞色卷蛾(属鳞     

四株昆虫病原芽孢杆菌的鉴定和毒效测定

1973年,我们在广州市郊区、广东省德庆县、高要县等地进行马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus)的天敌调查吋,从分离到的50余个菌株中,得到4株含伴孢晶体的芽孢杆菌,编号为1-(1)、6-(2)、11-(5)、9-(2)。经生化鉴定初步表明:1-(1)菌株属于苏芸金杆菌蜡螟变     

几种苏芸金杆菌晶体的超微结构

观察了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)7个菌株晶体的超薄切片,不同来源的晶体内部超微结构有明显差异。 6种晶体具有晶格构造,但1897菌株的晶体内部具有非均一构造。无鞭毛菌株H0的晶体具有极易碎裂的特点。HD-1的晶体的镶嵌型构造进一步被证实。血清8型006菌株的晶体不具有任何蛋白质晶格结构。讨论了苏芸金杆菌晶体的超微结构与其对昆虫毒力的关系。     

苏芸金杆菌生长的氨基酸需求

苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)在葡萄糖无机盐合成培养基上生长不好,很少形成芽孢。Angus和Norris Dulmage发现,苏芸金杆菌在不同培养基上获得的苏芸金杆菌制备物的杀虫活性不同,表明营养条件对苏芸金杆菌生长、芽孢晶体合成有重大影响。本研究用苏芸     

苏芸金杆菌以色列变种灭蚊的有效成份

苏芸金杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis var. israelensis)对双翅目的蚊幼虫具有较高的毒杀力,而对鳞翅目昆虫无效。为探讨其毒杀机理及其与其它苏芸金杆菌的差异,我们做了如下一些试验。一、菌液上清液与沉淀物的毒效比较苏芸金杆菌以色列变种1897菌株(引自中国科学院动物研究所),以含糖肉汤培养基摇瓶培养,将培养24及48小时的菌液,离心(3000转/分)20分钟。分出上清液及沉淀物。上清液用     

MS07A菌株生物学特性

1981年从松毛虫(Dendrolimus)的死蛹体内分离出一株能形成拌孢晶体的芽孢杆菌。该菌具有苏芸金杆菌(Bacillus thuningiensis)的典型特征,血清型属于H_3a_3b,又根据其生化特性和培养特征,被确认为属于B.teuringiensis var.Kurstaki中的一个菌株,代号MS07A简称7A。     

柞蚕滞育蛹的体液防卫反应

本文对柞蚕Antheraea pernyi滞育蛹体液防卫的某些特性做了报道。结果表明：(1)经注射大肠杆菌诱导6h后,体液中出现了抗菌活性物质。诱导7d后,抗菌活力达到峰值,15d后活力消失。用生理盐水诱导的反应较快,4d后达到峰值,10d后活力消失。(2)经大肠杆菌诱导后的体液对苏芸金杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌及金黄葡萄球菌均有杀菌效应。在最初5min内杀菌效率较高。注射生理盐水诱导的体液较大肠杆菌诱导的杀菌效果低。(3)用昆虫病原菌苏芸金杆菌及非病原菌大肠杆菌作不同的诱导源,诱导1d后的体液对大肠杆菌的抗菌活力差别不显著,但对柞蚕蛹的生活力及发育有明显影响;用苏芸金杆菌诱导的柞蚕滞育蛹3d后死亡,用大肠杆菌诱导的蛹能正常羽化。(4)在一定范围内用不同剂量的大肠杆菌进行诱导,其抗菌活力不受影响,但超过一定限度,既使是非病原菌也可以突破昆虫的防卫功能。     

用三种不同方法生产的BT(库斯塔克变种)制剂及其对家蚕的毒力

一前言在微生物杀虫剂中,苏芸金杆菌是最成功的商品制剂。活孢子和足量的σ-內毒素是该产品主要的毒素成分。众所周知,产品的毒力是根据菌株(不同菌株及同一菌株的不同株系)、培养基和生长条件的不同而异(Dulmage and Rhodes,1971)。但是,使用相同菌株在体外和体内条件下的培养物所进行的毒性比较尚未见报道。最近,我们用苏芸金杆菌(简称