伤寒菌液与布鲁氏菌病人血清交叉凝集的实验报告

本文用伤寒菌液与布告氏菌病人血清计３５份,做交叉凝集实验的结果是：Ｗｉｄａｌ＇ｓ菌体“Ｏ”抗原１６０ｘ（艹）和１２８０ｘ（艹）各检出一份,检出率５．７１％;鞭毛“Ｈ”抗原检出１２８０ｘ（艹）１份,检出率为２．８６％。在２２份布病血清抗体１００ｘ（艹）中,未检出有临床诊断意义的交叉凝集效价。在８份２００ｘ（艹）布病血清中,仅检出１份“Ｏ”抗原,凝集达１６０ｘ（艹）。在５份４００ｘ（艹）布病血清中,分别检出“Ｏ”和“Ｈ”抗原,凝集价达１２８０ｘ（艹）各１份。本实验结果提示,布病血清抗体效价越高,则与伤寒菌液发生交叉凝集价随之增高。本实验检出的交叉凝集率为２．８６％。     

人感染钩体菌群与免疫血清群及交叉凝集关系研究

为了解人间自然感染各群钩端螺旋体（钩体）后产生的免疫抗体血清群、交叉凝集（交凝）、效价及相互关系,作者对病原学阳性并做过双份血清ＭＡＴ的６４份资料作了综合分析,结果表明：６４株钩体属于１２个群,其中１３株菌的感染者血清呈阴性反应,占２０．３１％;５１例呈阳性,占７９．６９％,有１４个血清群,效价１∶１００～１∶６４００;１２个菌群感染者的血清交凝反应较为普遍,效价１∶１００～１∶３２００;效价高低及交凝群数,因感染菌群而异。较为特殊的是１１个菌群感染者的血清中均不见与流感伤寒群钩体的交凝现象。本文对人间分离钩体菌群与免疫血清群构成比例互不吻合的问题作了解释,为钩体病的免疫及血清流行病学补充了新论据     

结核病对布鲁氏菌液血清学交叉反应的实验报告

结核病对布鲁氏菌液血清学交叉反应的实验报告大连市卫生防疫站大连１１６０２１顾聘兰,葛丽敏大连市结核病防治所马金环为进一步验证结核病人血清与布氏菌发生交叉反应之间关系。作者用结核病人血清与布氏奋液进行ＳＡＴ方法检验１１３例病人,１６例结核病人对布氏菌Ｓ...     

无动物源成分伤寒沙门菌Ty2株种子批传代稳定性研究

目的 检定无动物源成分伤寒沙门菌Ty2株主代种子及工作种子,验证工作种子连续传代30代次的传代稳定性,为伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗无动物源工艺的建立提供前期研究数据。方法 无动物源成分伤寒主代种子、工作种子及脱脂牛奶工作种子分别连续传代至第30代次,在《中华人民共和国药典》2020版(三部)(简称《中国药典》)伤寒沙门菌检定要求的基础上,进一步应用16S rRNA基因序列分析、多位点序列分型(multilocus sequence type, MLST),并以伤寒主要抗原表位Vi抗原片段中毒力基因viaB区域为参考基因组,比对连续传代伤寒工作种子基因序列的遗传稳定性。结果 无动物源成分伤寒主代种子、工作种子及脱脂牛奶工作种子分别连续传代至第30代次种子,表型鉴定结果均符合《中国药典》伤寒沙门菌检定要求;连续传代至第30代次,Vi抗原血清凝集效价、O抗原血清凝集效价均未发生明显变化;16S rRNA基因序列鉴定PCR产物大小在1 474～1 478 bp之间,与NCBI数据库比对鉴定均为肠沙门菌肠亚种伤寒血清型;MLST分型结果表明,疫苗用伤寒沙门菌Ty2株为ST1型,连续传代30代次ML...     

伤寒沙门菌与甲、乙、丙副伤寒沙门菌质控血清的制备

应用免疫学原理,将伤寒沙门菌O901、H901和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌分别制成全菌体抗原,免疫实验兔获取免疫血清。依据伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌的抗原成分的异同性,选择适当的吸收菌除去免疫血清中的交叉反应抗体和类属凝集素,而保留其特异性的抗体。通过对诊断菌液的验证试验,证实吸收充分的免疫血清具有质控血清的特性。具备可靠性能的质控血清,适用于伤寒沙门菌与副伤寒沙门菌的菌种检定及其效价检测;亦有利于肥达氏诊断菌液的质量控制。     

食源性相关腹泻肠炎沙门菌感染抗菌药物敏感性

目的了解食源性相关腹泻非伤寒沙门菌感染的菌种分布及其对抗菌药物敏感性,为控制该类细菌的感染及传播提供技术支持。方法对2015-2017年本系统2家社区卫生服务中心就诊的食源性相关腹泻患者粪便(或肛拭子)标本采用直接分离与增菌分离相结合的方法常规培养分离获得42株沙门菌;采用血清凝集法进行快速血清分型,并进行自动化生化鉴定及抗菌药物敏感性试验;通过现况调查进行流行病学危险因素分析。结果自动化生化鉴定结果能够覆盖常规血清学快速鉴定结果,同属沙门菌群;42株沙门菌以肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和斯坦利沙门菌为主,其中肠炎沙门菌占全部菌株的23.81%,鼠伤寒沙门菌占19.06%,斯坦利沙门菌占14.29%;其中肠炎沙门菌可对氟喹诺酮类、三四代头孢菌素类与碳青霉烯类等敏感(敏感率可达97.00%以上),而对氨基糖苷类可产生双向耐药。通过现况调查,发现患者有腹痛、腹泻等胃肠道症状,可伴有发热,所有患者48h内有可疑食物暴露史,无水源性案例,均为散发。结论菌种鉴定应以常规快速血清学凝集结果为准,自动化生化鉴定仅供参考,并将鉴定菌种与药敏报告相关联,可根据药敏结果合理选用敏感抗菌药物;应对社区居民开展针对性的健康宣教。     

一株有争议的志贺氏菌的抗原分析与血清型检定

对中国医学细菌保藏管理中心所存,1935年国外分离,国内检定结果不一的一株志贺氏菌51331进行了详细的抗原分析,确定为福氏志贺氏菌X变种。 该菌能与国内外出品的福氏3型特异血清发生交叉凝集的原因,主要是由于上述诊断用血清中交叉反应性抗体尚未吸收纯净,至少没用类似51331这样的菌株参与成品血清检定的缘故。因此,建议在生产福氏3型特异血清时,应用本菌种参与检定以提高制品质量。本菌种作为诊断血清检定时用的菌种是十分有价值的。     

金黄色葡萄球菌荚膜分型血清研制及初步应用

为了解中国金葡菌荚膜流行型,用5型和8型国际标准菌株的菌悬液免疫家兔,吸收除去交叉凝集素研制出金葡菌5型和8型荚膜分型血清,并应用于333株临床菌株荚膜分型。该血清效价为1：1280和1：640,与本菌及其它同型菌株玻片凝集反应呈强凝集,与其它型菌株不凝集,且与美国标准血清同时对333株临床分离菌株进行分型比较的符合率为100％。333株金葡地方菌株荚膜分型结果显示,8型菌株占绝对优势,所占百分率为70．9％;5型占6．3％,5型和8型菌株共占77．2％。这与国外金葡菌荚膜5型和8型占70％-80％的报道相似。试验为金葡菌疫苗株选择提供了流行病学依据。     

伤寒杆菌感染后IgG和IgM抗体消长规律的初步观察

本文报道了以试管凝集、SpA菌体吸收和2ME处理血清的方法对感染动物和部分伤寒病人血清中的IgG和IgM抗体的消长规律的观察结果。初次注射伤寒杆菌在3～30天中均为IgM抗体,再次注射后仍然以IgM抗体首先回升,然后才有IgG抗体的出现。在再次注射后所观察的期间,IgM抗体仍然维持较高的滴度。在观察的10例伤寒病人(6至30日病程)中,其抗体类型也是IgM。伤寒病人的血清学诊断,目前主要用肥达氏反应。本文以试管凝集、SpA菌体吸收和2ME处理血清的方法对感染动物血清和部分伤寒病人血清中的IgG和IgM抗体的消长规律进行了初步观察。     

两株发酵乳糖的伤寒沙门氏菌

我站于1983年分离的201株伤寒沙门氏菌中有两株从临床诊断为沙感的高烧病人血液中分离获得,此两株菌除对1、3和5%的乳糖迟缓发酵外,其余生化反应符合考夫曼沙门氏菌属定义;曾和标准伤寒沙门氏菌作交叉凝集吸收试验,两者抗原一致;尽管这类菌株很少见,但仍可能在日常实际工作中碰到,因而还是值得注意的问题。一个菌株若具有典型的沙门氏菌血清学特征,而个别生化反应异常。仍不能排除为沙门氏菌。     

布鲁氏菌ery操纵子突变株生物学特性分析

布鲁氏菌ery操纵子参与赤藓醇代谢. 赤藓醇能够促进布鲁氏菌的生长.为进一步研究布鲁氏菌引发宿主流产的分子机制,采用基因重组技术构建布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株（△ery）,通过体内外实验探讨布鲁氏菌ery操纵子的生物学功能. 研究结果显示,获得了布鲁氏菌ery操纵子缺失株;布鲁氏菌ery操纵子缺失株侵染胚 胎滋养层细胞脱落较亲本株明显下降;巨噬细胞CFU计数缺失株作用组和亲本株作用组差异显著（P<0.05）.试管凝集和虎红平板实验结果显示均出现凝集现象;检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平,△ery诱导机体产生的IL-10和TNF-α明显低于亲本株（P<0.05）.小鼠脾脏细菌CFU计数结果显示,△ery较亲本株毒力明显下降.本研究表明,布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株毒力较亲本株明显下降,为进 一步揭示布鲁氏菌引起流产的致病机制提供了一定的理论依据.     

鱼类三种致病菌的粗脂多糖对异育银鲫的免疫原性

用温酚法从柱状嗜纤维菌、嗜水气单胞菌和鳗弧菌中提取的粗脂多糖（LPS）作为免疫原,分别接种异育银鲫后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价,头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性和用A.hydrophila活菌攻毒的方法,探讨鱼类3种致病菌的粗LPS对异育银鲫免疫原性的试验结果,结果表明,从3种致病菌中提取的粗LPS对异育银鲫均具有较强的免疫原性,受免鱼的血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体;与对照鱼相比,头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性明显上升,受免鱼的A.hydrophila活菌攻毒均产生了较强的免疫保护力,说明在每种供试菌的粗LPS上都不同程度地存在3种致病菌的共同保护性抗原。     

6种沙门菌单克隆抗体的制备和效能评价

目的：制备稳定、特异、高亲和性的分别针对甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的单克隆抗体。方法：用甲醛灭活的菌液抗原免疫BALB／c小鼠,取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合;用灭活的菌液包被酶标板,ELISA筛选阳性克隆株,建立细胞系;选取高效分泌杂交瘤细胞,常规制备腹水并纯化,进行单抗特异性与亲和性评价。结果：筛选得到分泌6种沙门菌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞株,获得高亲和性单抗;所有单抗与大部分病原菌（包括7种沙门菌、3株志贺菌、2株李斯特菌、4株致病性大肠杆菌、2株霍乱弧菌）无交叉反应,但由于同类型O抗原的广泛分布,抗乙型副伤寒沙门菌单抗与鼠伤寒沙门菌、抗伤寒沙门菌单抗与肠炎沙门菌有明显的交叉反应。结论：沙门菌单抗的制备,为感染性腹泻的监测、诊断奠定了基础。     

2308、M28、S1330、16M四株布鲁氏菌灭活参数研究

【目的】比较不同灭活方法对布鲁氏菌灭活的效果,确定灭活参数,为制备布鲁氏菌灭活抗原提供参考。【方法】将4株布鲁氏菌参考强毒株2308(牛种)、M28(羊种)、S1330(猪种)以及16M(羊种)分别经大豆酶消化蛋白胨(TSA)培养基培养繁殖后,用生理盐水制成(4-8)×1010 CFU/m L的菌悬液,分成等份于80 oC灭活不同时间,另将同样浓度的菌悬液分别用不同浓度甲醛于37 oC灭活不同时间,通过灭活检验,确定灭活效果。取经甲醛和热灭活的16M抗原,分别以1×1010 CFU/只剂量皮下注射1.5-2.0 kg家兔2只,免疫6周内,每周采血用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)测定抗体效价。【结果】80 oC、5 min可灭活2308、S1330和16M三种菌株,80 oC、10 min可灭活全部4种菌株。0.2%甲醛灭活7 d,4种试验菌株均不能被彻底灭活;0.4%甲醛在12 h内只能灭活16M,72 h可灭活M28;0.4%甲醛灭活2308和S1330两次试验结果差异较大。0.6%甲醛可在72 h内灭活4种试验菌。不同方法灭活的16M抗原免疫家兔后,其血清抗体虎红平板凝集和试管凝集效价消长趋势基本一致,甲醛灭活的抗原免疫原性略高于热灭活抗原。【结论】80 oC热灭活和0.6%甲醛灭活均可用于对布鲁氏菌的灭活,且不影响布鲁氏菌的免疫原性。     

感染伤寒期间抗体对沙门氏伤寒菌脂多糖和蛋白质抗原的反应——Ⅰ、放射免疫测定血清抗体

作者收集24名成人血培养伤寒菌阳性病人血清及20名健康成人对照血清,用固相放射免疫测定对伤寒菌脂多糖和蛋白质抗原的反应,并用传统的肥达氏试验进行了比较。抗原为新分离伤寒菌培养于心脑浸液琼脂上一夜,用盐水洗下培养物,加     

肠炎沙门菌SPI1缺陷突变体诱导抗鼠伤寒和肠炎沙门菌攻击的交叉免疫

<正>本论文作者研究了疫苗接种过的小鸡对沙门菌感染的免疫应答,研究了沙门菌致病岛1(SPI1)减毒的肠炎和鼠伤寒沙门菌疫苗株的血清交叉保护能力。运用实时PCR定量白细胞介素IL1β、IL17、IL22,干扰素γ(IFNγ),诱导性一氧化氮合成酶(iNOS),免疫球蛋白IgM、IgA、IgY和Ig轻链的转录物,以及急性期应答包括生物素蛋白、血清淀粉样蛋白A、细胞外脂肪酸结合蛋白(Ex-FABP)、免疫应答     

032 布鲁菌病和伤寒血清学试验试剂条的评价

伤寒和布鲁菌病常引起血液感染。血及骨髓培养是最准确的诊断方法,在许多发展中国家,这两种疾病的诊断常凭临床表现和经验。血清学试验常被作为一种诊断工具,但肥达反应和布鲁菌试管凝集……     

犬体200株布氏菌的判定与特性

先后收到我国一些地区从犬体分离的待检布氏菌200株,经细菌形态、生长特性和血清凝集等初步检查,其中176株疑似布氏菌(85．59％).用单相和粗糙血清检测、s和R群噬菌体裂解试验,证明均为犬种布氏菌。部分菌种作DNA同源性测定与电镜形态观察,发现其基因系列和电镜图像与国际参考菌一致。在R血清反应中,有4.75％菌株无凝集原性。在硫堇和复红染料抑菌试验中,典型株占72．49％;对两种染料均不被抑制者占22．75％。这部分菌和被R／C噬菌体裂解的粗糙羊种菌难以鉴别。     

绿脓杆菌血清型的研究

在全国16个主要省市100多所医院里,收集了869株绿脓杆菌,并进行了血清型分类。分型率达98.7％。从血清型分布规律看,前4个型分布的最多(占59％),其次是7、8、9型(占31．3％),5、6、10和11型分布极少。Fisher的7个免疫型株中I、II、IV、VI和VII型菌各与我国血清型株有交叉凝集,而III和V型菌没有交叉凝集。本文还叙述了血清型的分型方法。并用此方法对本菌的流行病学和生态学研究的意义进行了讨论。     

布鲁氏菌BP26抗原制备及基于BP26的金标检测试纸的初步研究

目的 制备布鲁氏菌血清学优势抗原BP26的原核表达,对其进行鉴定,且进行基于BP26重组蛋白的布鲁氏菌抗体金标检测试纸的研究。方法 检索人用疫苗株布鲁氏菌bp26基因序列进行基因合成,克隆至pET30a(+)载体,构建重组质粒pET30a(+)-bp26,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析纯化BP26重组蛋白,纯化后重组蛋白进行蛋白免疫印迹鉴定。胶体金标记BP26,以BP26重组蛋白和BP26兔多抗血清分别包被检测线和质控线,制成布鲁氏菌抗体金标检测试纸。结果 BP26重组蛋白在大肠埃希菌中成功表达,相对分子质量约为26 000,与预期相符。亲和层析纯化后得到纯度较高的BP26重组蛋白。Western blot实验证明,该蛋白可与布鲁氏菌抗体阳性兔血清产生特异性结合。用布鲁氏菌抗体金标检测试纸检测兔阳性血清,检测线和质控线均显色明显。结论 成功获得BP26重组蛋白,Western blot实验证明该蛋白具有良好的免疫反应性。研制的检测试纸成功检测出布鲁氏菌抗体阳性兔血清。该蛋白为布鲁氏菌病诊断试剂盒研制及疫苗研发奠定了基础。