S/D处理人纤维蛋白原的病毒灭活验证

在人纤维蛋白原制备工艺中增加Ｓ／Ｄ处理灭活病毒步骤,ＴＮＢＰ和Ｔｗｅｅｎ８０终浓度分别为０．３％和１％,在２５℃处理６小时能有效灭活指示病毒ＶＳＶ（〉３．７５Ｌｏｇ）、Ｓｉｎｄｂｉｓ（〉４．４６Ｌｏｇ）、ＨＩＶ（〉３．６７Ｌｏｇ）,盲传三代未检出病毒     

S／D处理血浆过程中的脂包膜病毒灭活试验观察

通过有机溶剂/去污剂对血浆中指示病毒VSV灭活的观察评估有机溶剂/去污剂对脂包膜病毒死活的效果。血浆样品与VSV病毒按9:1混合,然后用1％TNBP/1％ Triton X-100在30℃处理4h,测定开始样品中的病毒总量和S/D处理后不同时间取样内的病毒总量。实验中样品内加入1％TNBP/1％ Triton X-10015min后VSV病毒已全部灭活,灭活效果≥6.0log。按所述S/D处理方法可以完全灭活血浆内所有的脂包膜病毒而没有主要血浆蛋白的损失。     

S／D法处理凝血因子浓缩物类制品的病毒灭活验证

以水泡性口炎病毒 (VSV)为指示病毒 ,验证应用有机溶剂 /去污剂 (简称S/D)法灭活血液制品中病毒的生产工艺 ,并对不同厂家不同批号的四种凝血因子浓缩物类制品 (中间品 )的病毒灭活效果进行了分析总结。结果表明当制品中TNBP和Tween80终浓度为 0 3%和 1 0 % ,在 2 5± 1℃处理 6小时后对于包膜病毒确有显著的灭活效果。     

S/D处理结合低pH放孵灭活静注人免疫球蛋白

在低ｐＨ静脉注射用人免疫球蛋白（ＩＶＩＧ）的制备中,采用有机溶剂／表面活性剂处理和低ｐＨ放孵（２３°Ｃ～２５°Ｃ,２１天）进行病毒灭活,以提高ＩＶＩＧ的安全性,两法累积灭活效果为：＞８ｌｏｇＨＩＶ－Ⅰ;＞１１．３ＬｏｇＶＳＶ和＞１０．８ＬｏｇＳｉｎｄｂｉｓ。     

S/D灭活血浆内脂包膜病毒及病毒灭活血浆的研究

研究磷酸三丁酯(TNBP)／Triton X-100对血浆内脂包膜病毒的灭活效果。用VSV病毒和Sindbis病毒作指示病毒,加入血浆后再加磷酸三丁酯／Triton X-100,观察病毒的滴度变化及对血浆蛋白的影响。结果发现终浓度各为1％的磷酸三丁酯／Triton X-100在60min内可以灭活血浆内的两种指示病毒,而血浆蛋白的组成和功能变化很小。经层折、超滤后血浆内磷酸三丁酯和Triton X-100的残余量分别低于5μg/ml,表明S／D处理血浆的安全性和治疗作用都很好,其制剂冰冻血浆或冻干血浆可用于临床治疗凝血因子缺乏症,或用作血容量扩张剂。     

破伤风抗毒素渗透压的质量控制标准

目的：通过对不同厂家破伤风抗毒素产品的渗透压浓度的调查,了解国内该产品的渗透压浓度的波动范围,为生产过程中渗透压浓度质量控制提供依据。方法采用Advanced 3250型冰点渗透压仪检测破伤风抗毒素的渗透压浓度。结果不同厂家破伤风抗毒素制品的渗透压浓度均不低于240 mOsmol/L。结论破伤风抗毒素渗透压浓度波动范围均与国外同类制品基本一致,符合欧洲药典规定。     

有机溶剂/去污剂处理血浆的研究进展

有机溶剂/去污剂处理技术已广泛用于血液制剂的病毒灭活。本文对此项技术用于血浆中病毒灭活的可靠性、处理血液制剂的安全性以及处理血浆的临床应用作了简要介绍。     

S/D法灭活血液制剂中脂包膜病毒效果验证的研究

选用不同核酸的脂包膜病毒,其中RNA病毒为水疱性口炎病毒(VSV),DNA病毒为伪狂犬病毒(PRV),将两种指示病毒分别用于验证S/D法处理对纤维蛋白原、凝血酶原复合物、凝血因子Ⅷ、静注丙种球蛋白、免疫血浆等血液制剂的病毒灭活效果。结果该法对所有被处理的血液制剂中的PRV及VSV灭活能力分别为≥3.38~5.88和≥3.50~4.75logTCID50/0.1ml,表明S/D法对两种病毒核酸类型的脂包膜病毒有良好的灭活效果。     

低pH孵放病毒灭活处理对马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2质量的影响

目的考察低pH孵放病毒灭活处理对马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2质量的影响。方法取马破伤风免疫球蛋白F(ab')_24份,分别调整pH至3.8、4.1、4.4及6.5,于(25±1)℃条件下放置21 d后取样测定抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量,评估低pH孵放病毒灭活法对上述质量指标的影响;以1 mL/瓶的规格分装经低pH孵放病毒灭活处理的马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2,于(25±1)℃条件下存放6个月,定期取样并进行抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量检测,评估其稳定性。结果马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2经低pH孵放病毒灭活后,其抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量未发生明显变化;样品于(25±1)℃条件下存放6个月后,抗体效价和F(ab')_2含量均符合《中华人民共和国药典》2015版(三部)的要求。结论低pH孵放病毒灭活法适用于马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2病毒的灭活。     

冻干加热处理凝血因子类制剂的病毒灭活验证

在病毒灭活验证过程中,比较了冻干后不同加热方法对凝血因子类制剂中伪狂犬病毒(PRV)的灭活效果,包括80℃干烤72h、100℃水浴加热30min以及100℃蒸汽加热30min方法。结果表明80℃干烤72h对制品中PRV灭活较彻底,另外两种方法对制品中PRV的灭活效果均不理想。     

Assessment of the impact of solvent/detergent treatment on the quality and potency of a whole IgG equine antivenom

We have evaluated for the first time the impact of a solvent/detergent (S/D) treatment on the quality and in vivo neutralization potency of horse-derived whole IgG antivenom used in the treatment of viperid snake bite envenoming in Central America. The S/D treatment by 1% tri (n-butyl) phosphate (TnBP) – 1% Triton X-45 at 22–25 °C was applied either on starting plasma or on purified immunoglobulins. The S/D agents were removed from both fractions by extractions with oil. S/D-treated plasma was subjected to caprylic acid precipitation to purify the immunoglobulins. Products were formulated, sterile-filtered, and filled into 10-mL vials, stored at 5 ± 3 °C, and subjected to routine quality controls, SDS-PAGE, determination of anti-Bothrops asper venom antibody titre by ELISA, in vivo B. asper venom-neutralization potency tests, and safety test, comparatively with an antivenom manufactured by caprylic acid fractionation without S/D treatment. Results indicate that these conditions of S/D treatment on purified immunoglobulin yielded an antivenom of high turbidity that induced weight loss in animals. In contrast, antivenom fractionated from the S/D-treated plasma had physico-chemical and biological characteristics indistinguishable from those of the non-S/D-treated antivenom. S/D treatment of horse plasma may be considered to increase the viral safety of antivenoms.