李斯特菌病既往中国文献报告病例分析

目的总结中国大陆1964年至2013年报道的李斯特菌病(LD)病例,分析其临床与流行病学特征。方法通过计算机结合手工检索我国1964年至2013年来报道李斯特菌病的文献资料,统计各李斯特菌病例的临床与流行病学信息,并进行分析。结果总结中国大陆1964年至2013年报道的LD相关文献121篇,LD病例256例,其中非围生期病例122例,新生儿86例,围生期孕妇48例;局灶感染39例,血液系统感染103例,中枢神经系统感染103例,11例未提供感染部位信息。多为散发(252例),仅1起爆发引起4例患者感染。青霉素耐药率18.9%,总体死亡率30.8%,新生儿组死亡率52.6%,中枢神经系统感染者死亡率39.1%。结论李斯特菌病特别是新生儿感染者或中枢神经系统感染者病情严重,死亡率较高,应加强预防治疗。     

新生儿及产妇感染单核细胞增生李斯特菌分离株的血清型、耐药性及分子特征研究

为探讨广西南宁地区新生儿及产妇感染的单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, Lm)的血清型、药物敏感性及其分子流行病学特征,本研究回顾性收集2015-2017年广西壮族自治区妇幼保健院新生儿科及产科送检标本中分离的Lm,对其进行体外药物敏感性检测、血清学分型以及多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)分析菌株间的同源性;同时分析患儿及其母亲的临床特征及危险因素。结果显示,广西南宁地区新生儿感染Lm发病率较低,2015-2017年发病率为0.091‰;所有分离的Lm分属4b(83.3%)和1/2a(16.7%)2个血清型;药物敏感性试验结果显示,Lm对青霉素、氨苄西林、复方新诺明及美罗培南均100%敏感,暂未发现耐药菌株;MLST分型共获得2个序列型(sequence types,ST),以ST­1型(83.3%)为主。其中分离自同一新生儿患者(Case 2)外周血(Lm2)、耳拭子(Lm3)及其母亲羊水(Lm4)、宫颈分泌物(Lm5)的4株菌具有相同的血清型、药物敏感性表型以及MLST分型。感染Lm的患儿主要表现为发热、肺炎、发绀、败血症及脑膜炎;而产妇感染则具有非特异性的临床特征。结果提示,广西南宁地区存在的Lm菌株为致病性较强的4b、1/2a血清型菌株;Lm可通过母婴垂直传播引起新生儿感染。因此,临床医师应重视孕产妇及新生儿Lm病原学检查、早期诊断和及时合理地使用抗生素预防、治疗,从而减少Lm引起的母婴感染。     

1964-2009年中国文献报告非围产期李斯特菌病例分析

目的描述我国1964-2009年文献报告的非围产期李斯特菌病的临床与流行病学特征,为李斯特菌病的防治提供科学依据。方法计算机检索与手工检索结合收集我国1964.1-2009.12非围产期李斯特菌病的文献报告资料,从中提取各非围产期李斯特菌病例的临床与流行病学信息并进行统计分析。结果共纳入66例非围产期李斯特菌病例,其中以男性、年龄35岁者居多。患者的临床表现以CNS感染(42%)、败血症(41%)为主。免疫缺陷患者多表现为CNS感染,非免疫缺陷患者多表现为败血症。报告病例总死亡率为19%(11/57),其中免疫缺陷患者的死亡率高达28%(5/18)。结论我国非围产期李斯特菌病的临床特点与国外报告相符,报告死亡率与国外类似。     

新生儿需氧菌败血症88例临床分析

我院１９８８年１月至１９９８年１１月收治经血培养出需氧菌阳性的新生儿败血症８８例，现报告如下。１临床资料１．１一般资料根据新生儿败血症的诊断标准［１］，经血培养确诊为需氧菌感染的败血症患儿８８例。其中男５６例，女３２例，男∶女＝１．７５∶１；足月儿７...     

单增李斯特菌溶血素O的功能研究进展

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, Lm,简称单增李斯特菌)是一种普遍存在的革兰阳性食源性病原体,可引起人类和一些动物的李斯特菌病。侵袭性李斯特菌病通常很严重,临床上表现为自然流产、败血症和脑膜脑炎,也可表现为发热性胃肠炎综合症。成孔蛋白单增李斯特菌溶血素O(Listeriolysin O,LLO,由hly基因编码)是一种重要的毒力因子,属于胆固醇依赖性细胞溶解素(cholesterol-dependent cytolysins,CDC)毒素,其通过膜穿孔机制介导Lm从吞噬体逃逸并引起李斯特菌病。最近的研究表明LLO除了主要的膜穿孔作用,还存在其他功能,在Lm感染过程中扮演了重要的角色。从LLO的功能和作用机制等方面综述了近些年对该毒素的研究进展,以便更好地理解单增李斯特菌的感染机制,为防治李斯特病的相关研究提供参考。     

李斯特菌溶血素基因的原核表达及其生物学特性

李斯特菌溶血素(LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,利用PCR技术从血清型4b的产单核细胞李斯特菌菌株中扩增出编码LLO的hly基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达质粒pGEX6P1hly,SDSPAGE结果表明：LLO与谷胱甘肽在大肠杆菌中已融合表达,融合蛋白的分子量为82kD;溶血实验证明融合蛋白具有较强的裂解真核细胞膜的作用,表明表达产物LLO具有生物活性,其溶血效价达2.26×101.4 HU/mg,这为进一步研究其致病与免疫机理、单抗研制和疫苗设计提供了条件。     

History and epidemiology of listeriosis

Listeriae are used as a tool by different specialities in biomedical research. There are now at least four major fields of interest in LISTERIA: (1). the role in medical microbiology: Listeria monocytogenes causes severe diseases of men and animals and is difficult to treat; (2). the role in food microbiology: Listeria is a food-borne pathogen and is found in various food items; (3). the role in cell biology: L. monocytogenes is a facultative intracellular parasite having an intense cross-talk and interactions with the host cell; (4). the role in immunology: basic knowledge on cell-mediated immunity has been acquired through the model of listeriosis. This paper presents information on the past and the actual situation in research on Listeria and listeriosis.     

Molecular and experimental virulence of Listeria monocytogenes strains isolated from cases with invasive listeriosis and febrile gastroenteritis

We analyzed 27 Listeria monocytogenes strains of serotypes 1/2b and 4b, from invasive and gastroenteric listeriosis, for molecular and experimental virulence. Molecular virulence was tested by PCR for the presence of 8 major virulence-associated genes and genetic polymorphisms through restriction enzyme analysis; genomic DNA typing using pulsed-field gel electrophoresis was also performed. Experimental virulence was evaluated through intra-peritoneal and intra-gastric mouse virulence assays. Our results showed no significant differences in the virulence-related molecular properties of the strains analyzed. All strains were equally pathogenic following intra-peritoneal inoculation of mice. In mice inoculated intra-gastric with 4 representative strains of the 2 types of listeriosis, there were no significant differences in the bacterial count when comparing invasive and gastroenteric strains, suggesting that the strains were comparable in terms of mean oral infectivity.     

凝固酶阴性葡萄球菌致新生儿败血症临床分析

目的了解本地区凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）致新生儿败血症的病原学及耐药性状况,用以指导临床治疗。方法回顾性分析64株CNS致新生儿败血症血培养的病原学及耐药性。结果64株CNS中以表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌为主;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）39株,分离率为60．9％,β-内酰胺酶检出率达100％,MRCNS对青霉素、红霉素、苯唑西林耐药率最高,对利福平、呋西地酸、替考拉宁、喹奴普汀／达福普汀等耐药率均较低;甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）25株,分离率为39．1％,13-内酰胺酶检出率为44％,MSCNS对大多数抗生素敏感;64株CNS中未检测到万古霉素耐药株。结论新生儿败血症中CNS以表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌为主,MRCNS检出率高且呈多重耐药,应重视对其监测与控制。     

影响新生儿肠道细菌定植相关因素的研究进展

胃肠道内源菌群组成了人体内最大的微生物环境,它构成复杂,种类繁多,并且与人类的疾病和健康息息相关。同时新生儿阶段是建立肠道微生态系统的关键时期。对于新生儿来讲,肠道细菌定植过程中发生的异常可以提高许多疾病的发病风险。近年来国内外学者对新生儿肠道细菌定植状况及其影响因素进行了深入的临床和基础研究并取得了一定的进展。本文对影响生命早期肠道微生态系统建立和发展的主要因素进行系统地阐述,这些影响因素包括孕妇的口腔卫生、分娩时间、喂养方式、分娩方式、抗生素的使用以及益生菌的应用等。     

Endotoxin-challenges precocial neonates and iron changes

In adult mammals fever is associated with the reduction of blood plasma iron level. Immature mammals, however, show either a decrease (precocial animals such as guinea pig neonates) or a lack of reduction (altricial animals such as human neonates) of plasma iron in response to endotoxin. In order to determine whether this difference is connected with maturity just after delivery, plasma iron concentration, hematocrit, body temperature and body mass were measured in rat pups injected with E. coli endotoxin in doses of 50 or 200 μg kg⁻¹. Rat pups, like human neonates, are altricial animals. In 7-day-old rats injection of LPS led to a dose-dependent decrease in plasma iron level. The fall in plasma iron was accompanied by changes in body temperature and body mass. The results showed that plasma iron response to endotoxin in altricial rat neonates is similar to that observed in precocial guinea pig pups. Accepted: 4 October 1996     

18例肺曲霉病临床分析

目的提高对肺曲霉病的认识。方法对诊断为肺曲霉病的18例病例的临床资料进行回顾性分析。结果83%的肺曲霉病患者伴有基础疾病;有临床症状者占89%;胸部影像表现为：以右肺为主,多见于上叶,且多分布于外周;大叶性肺炎型占17%,肺曲霉球型占50%,结节或肿块型占33%,支气管肺炎型占6%,双肺弥漫病变型占22%,且有22%合并胸腔积液;组织病理学发现呈约45°分支和有隔膜的曲霉菌丝;50%患者行肺叶切除术,术后应用抗真菌药物,50%患者仅接受抗真菌药物治疗;89%的患者治愈或好转,11%死亡。结论肺曲霉病患者多有基础疾病;部分类型有典型影像学改变;诊断需结合既往病史、临床表现和胸部影像表现及相关实验室检查,确诊有赖于组织病理学检查;治疗主要是药物,部分可手术。     

新生儿院内获得性肺炎患者病原体特征及危险因素分析

目的 分析院内新生儿获得性肺炎患者病原体分布、药敏情况和相关危险因素,并探讨其临床意义。方法 收集2015年10月至2017年4月于我院接受治疗的100例院内获得性肺炎新生儿为观察组。选择同期于我院出生的未发生院内获得性肺炎的新生儿100例为对照组。采集观察组患儿下呼吸道分泌物,利用全自动微生物分析仪进行菌株种类和数量鉴定,利用K-B纸片扩散法进行药敏试验。对院内获得性肺炎的危险因素进行单因素回归分析。结果 100例院内获得性肺炎新生儿下呼吸道分泌物共检测出病原微生物168株,其中细菌135株（80.36%）,病毒30株（17.86%）,真菌3株（1.78%）。细菌中革兰阴性菌116株（69.05%）,以大肠埃希菌（49株,29.17%）及肺炎克雷伯菌（42株,25.00%）为主;革兰阳性菌19株（11.31%）,以金黄色葡萄球菌（10株,5.95%）为主。病毒以呼吸道合胞病毒（23株,13.69%）为主。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌均对常用抗生素具有极高的耐药性,包括氨苄西林、头孢哌酮、头孢曲松及头孢唑林等;对氨基糖苷类、喹诺酮类、碳青霉烯类抗生素高度敏感。新生儿的住院天数、分娩方式及吸痰均与院内获得性肺炎的发生有密切联系,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 新生儿院内获得性肺炎的致病菌以革兰阴性菌为主,临床治疗时可适当选用氨基糖苷类、喹诺酮类、碳青霉烯类抗生素。住院天数、剖腹产及吸痰均为新生儿院内获得性肺炎的危险因素,应加强对上述危险因素的保护。     

Oxidative stress in neonates: evaluation using specific biomarkers

Increased oxidative stress has been implicated in pathogenesis of serious diseases in neonates. We measured urinary levels of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (a marker of oxidative DNA damage), acrolein-lysine adduct (a marker of lipid peroxidation and oxidative protein damage), and nitrite/nitrate (a marker of endogenous nitric oxide formation) in one-month-old neonates to examine the status of oxidative stress and its relationship to the degree of prematurity and clinical condition in neonates. Study subjects comprised three groups: healthy term neonates, clinically stable preterm neonates requiring no supplemental oxygen, and clinically sick preterm neonates requiring supplemental oxygen and ventilator support. Urinary levels of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine and acrolein-lysine adduct were significantly higher in sick preterm neonates than those of stable preterm and healthy term neonates. In the sick preterm group, neonates developing active retinopathy showed significantly higher levels of acrolein-lysine adduct than the other neonates without retinopathy. There were no significant differences in both urinary markers of oxidative stress between stable preterm and healthy term neonates. The urinary nitrite/nitrate levels were not significantly different among the three groups, suggesting no difference in endogenous nitric oxide formation. Collectively, these results provide evidence of augmentation of oxidative damage to DNA, lipids and proteins, especially in clinically sick preterm neonates.     

重症肺炎新生儿支气管肺泡灌洗液病原菌分布及耐药性

目的 研究重症肺炎新生儿支气管肺泡灌洗液的病原菌分布和耐药性。方法 选择2016年4月至2018年4月在本院呼吸科治疗的新生儿268例,其中符合重症肺炎诊断标准的患儿142例,归为重症肺炎组;不符合重症肺炎诊断标准的患儿126例,归为对照组。检测患儿肺泡灌洗液病原菌分布情况和耐药情况。结果 重症肺炎组患儿肺炎克雷伯菌、流感嗜血菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、金黄葡萄球菌、溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、草绿链球菌检出率明显高于对照组。肺炎克雷伯菌对亚胺培南,美罗培南的耐药性为0.0%,大肠埃希菌对亚胺培南,美罗培南,阿米卡星的耐药性为0.0%,阴沟肠杆菌对亚胺培南,美罗培南,左氧氟沙星的耐药性为0.0%,肺炎链球菌对万古霉素的耐药性为0.0%,金黄葡萄球菌对万古霉素的耐药性为0.0%。结论 新生儿重症肺炎患者病原菌以革兰阴性菌为主,亚胺培南、美罗培南、万古霉素可以用于治疗新生儿重症肺炎,但由于其毒副作用较大,应严格把握适应症。