微波在Cajal染色中的应用

在Cajal氨酒精去神经组织块镀银染色过程中,对固定、浸银、还原等过程进行微波辐射处理,结果表明微波辐射能明显促进固定、浸银、还原作用,使组织块镀银染色时程大大缩短。     

一种改进的观察植物细胞微管的免疫荧光染色方法

植物微管体积小,而且始终处于动态变化之中,因此观察到清晰的微管形态有一定的难度。本文以拟南芥为实验材料,介绍了一种改进的植物细胞微管免疫荧光染色方法,用此方法可以观察到清晰、完整的植物微管形态,此法对其他植物细胞微管观察可能也有借鉴和参考价值。     

应用微波辐射促进组织块浸银染色

目的：探索微波辐射对组织块浸银染色各步骤的作用及微波在其中的应用方法。方法：在组织块浸银染色过程中,对组织块的固定,浸银,还原等步骤进行不同强度的微波辐射处理。结果：微波辐射明显促进了浸银,还原作用,应用适宜强度的微波辐射染色效果比常规染色有更多的优点。结论：恰当地应用微波辐射缩短组织块浸银染色时程,切实可行。     

标记减数分裂遗传重组的免疫荧光染色方法

联会复合体免疫荧光技术在全基因减数分裂遗传重组研究中具有精确和直观的优势.本研究通过免疫荧光染色方法制备小鼠精母细胞联会复合体,研究其形态组成与遗传重组特征,展示雄性小鼠遗传重组图谱并分析其重组位点(MLH1位点)的分布特征.4只小鼠共145个精母细胞在平均每个细胞的MLH1位点数为23.3±2.4;在常染色体联会复合体中,未发现有3个MLH1位点的联会复合体,具有1个MLH1位点的联会复合体较多,平均为14.2;无XY联会复合体的细胞占所有细胞的4.1%,XY联会复合体上有MLH1位点的细胞占30.2%;联会复合体上有裂缝的细胞占0.7%.通过联会复合体免疫荧光染色可以清晰地分辨出联会复合体(红色)、着丝粒(蓝色)和MLH1位点(绿色),是遗传重组分析的一种强有力工具.     

酶组织化学最佳染色方法的探讨

酶组织化学用来显示酶在组织或细胞内的活性及定位,酶组织化学能否成功很大程度取决于材料的制备,固定液能很好的保存组织的形态结构,使酶的活动保持在生活时的位置,定位准确。但实验室常用固定液可导致酶部分或完全失活。故酶组织化学染色几乎全使用冰冻切片。但冰冻切片存在三方面不足：①损伤结构的完整性,使酶不能很好定位,②可溶性酶可因弥散而失活,③不能做回归性研究。且作经多年研究发现：因各种酶有其特定的生物学特性,对化学试剂的敏感性不同,一种实验方案不能适用于所有的酶。     

微波辐射加热对潘氏细胞染色的影响

潘氏细胞(Paneth Cell)是小肠腺的特征细胞,该细胞有合成分泌蛋白质的特点,其分泌颗粒含有防御素(defensin,又称隐窝素Chyntdin)、溶菌酶,释放后对肠道微生物有杀灭作用[1];同时亦有吞噬功能.潘氏细胞含有的分泌颗粒通常可用酸性染料如焰红(Phloxine)、伊红或橘黄G染色[2],其中以焰红染色效果最佳.     

人H组轮状病毒免疫荧光检测方法的建立

轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿病毒性胃肠炎的主要病原体。目前,尚没有人H组轮状病毒(Rotavirus H,RVH)的免疫荧光(Immunofluorescence,IF)检测方法。本研究建立了检测人H组轮状病毒的免疫荧光方法,为研究轮状病毒感染以及与宿主免疫反应之间的作用机制提供技术支撑。本研究首先培养MA104恒河猴肾细胞,感染人H组轮状病毒J19毒株,对病毒进行培养;原核表达纯化病毒VP6蛋白,用纯化的VP6蛋白制备antiVP6抗体;以anti-VP6作为检测抗体,应用免疫荧光检测技术检测J19病毒在MA104细胞中的定位;并利用免疫荧光方法检测J19病毒的荧光灶形成单位(Fluorescence focus units,FFU),对病毒进行定量。本方法为进一步检测和研究人H组轮状病毒感染机制提供技术条件。     

微波在抗酸染色中的应用改进

抗酸染色以Ziehe—Neelsen抗酸杆菌法的应用最为广泛,但操作过程中温度及复染背景难以控制,在总结了我科10例麻风活检标本抗酸染色基础上,我们对抗酸染色法进行改良,效果显著,现介绍如下。     

盐酸酸化可改善核抗原免疫荧光染色

免疫荧光染色(immunofluorescent staining, IF)技术广泛用于细胞或组织内抗原定性、定量或定位检测。然而,依常规染色步骤操作,在有些胞核抗原的检测中很难得到令人满意的结果。有研究者采用盐酸酸化预处理用于细胞增殖标记物5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)的荧光染色并获得良好效果。但此方法是否也适用于其他类型的胞核抗原,尚不清楚。为系统全面分析盐酸酸化在胞核抗原免疫荧光染色中的作用,本文以成年C57BL小鼠主要嗅觉表皮(MOE)为材料,分别对Ki-67、5-甲基胞嘧啶(5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)三种不同类型的胞核抗原进行盐酸酸化处理免疫荧光染色。结果显示,当血清封闭和抗体浓度等条件一致时,室温下盐酸酸化2 h,Ki-67的染色效果最佳,而阴性对照与未酸化组均未出现阳性信号;同样经过盐酸处理2 h,5mC和5hmC染色也呈现较强的阳性信号。该研究表明,在一些胞核抗原免疫荧光染色中,使用盐酸酸化处理可显著提高染色效果。     

微波技术在骨骼肌染色中的应用

均高于对照组;在形态学的实验教学中,骨骼肌纤维的铁苏木精染色是观察骨骼肌横纹的经典方法,传统的铁苏木精染色方法存在着耗时较长且染色不够均匀等不足。近几十年来,微波照射（Microwave irradiation,MWI）被成功地引用到组织固定、组织化学、免疫组织化学等研究中。MWI具有波长短、频率高,能使微波场内某些化学物质迅速地穿透物体,促进液体浸入标本等特点。本实验将微波辐射应用于骨骼肌纤维染色,并与常规室温下的染色进行对照,经反复探索得到较为满意的效果。     

利用改进的荧光染色法对宫颈涂片脱落细胞学诊断的探讨

吖啶橙（ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅ,简称ＡＯ）荧光染色法能显示细胞和病原微生物的形态结构及微生物的大小和分布,又能观察细胞内两种核酸（ＤＮＡ和ＲＮＡ）的含量变化,从而可以清楚地了解细胞的增生状态。根据细胞的形态学和细胞化学两方面的变化进行脱落细胞学观察,有利于较早期地发现癌细胞。本文应甩改进的ＡＯ荧光染色法对２０Ｄ００例宫颈涂片进行了脱落细胞学诊断,并对天津市各种妇科疾病所占的百分率进行了统计。该染色法染色结果稳定可靠、速度快、图象鲜明。     

微波在免疫组化双重染色的抗体洗脱中的应用

本文介绍一种新技术──微波加强抗体洗脱法。在酸洗脱液中微波辐射（最低能量档）３分钟．完全除去经ＰＡＰ法染色后的垂体前叶切片上的抗体复合物;双重染色显示两种形态和颜色不同的细胞。切片在Ｔｒｉｓ缓冲盐液中微波辐射３分钟,或分别浸入室温和约５０℃的酸洗脱液中２小时和３分钟,抗体复合物不能被洗脱,或洗脱不完全;双重染色时出现假性双标记细胞。结果表明微波具有加强抗体洗脱的作用,是一种快速、有效的除去免疫酶双重染色中抗体复合物的方法。     

赖夫生鞭毛染色法的改进

赖夫生染色法是细菌鞭毛染色的一种常用方法,最近发现了延长赖失生染剂使用寿命及改进染色效果的方法,并在此基础上进一步论证了乙醇在染色过程中所起的作用。     

微波对小白鼠超氧化物歧化酶和脂质过氧化物的影响

低剂量（９１５兆赫）的微波照射小白鼠后，用ＮＢＴ光化还原法测知脾脏的ＳＯＤ活性降低；聚丙烯酰胺凝胶电泳ＰＡＧＥ测知ＳＯＤ的电泳图谱发生了变化；脂质过氧化物增加。经恢复饲养，ＳＯＤ的活性持续下降，脂质过氧化物含量持续增高，但降低和增加的趋势于第１１天后趋于稳定，而ＳＯＤ的电泳酶谱却不能恢复到对照水平。本研究表明低剂量的微波照射对小白鼠的ＳＯＤ具有明显的损伤作用，并使有害于机体的脂质过氧化物增加。     

微波照射对大鼠在体海马诱发电位长时程增强的影响

海马诱发电位长时程增强现象（Long- term potentiatio,LTP),常被用来研究与突触可塑性密切相关的学习与记忆过程的分子机制。为了研究微波照射对海马突触可塑性的影响,采用海马齿状回诱发电位的群峰电位幅度（the amplitude of population spikes ,PS amplitude)和群体兴奋性突触后电位的始终上升斜率（the initial slope of the population excitatory postsynaptic potentials,pEPSP slope)两个观察指标。观察10mW/cm^2,15mW/cm^2和25mW/cm^2三个强度,2450MHz微波照射对乌拦坦麻醉在大鼠在体海马齿状回诱发电位和LTP的影响。结果表明,每天1小时,连续7天的慢性连续型2450MHz微波照射阻碍麻醉大鼠在体海马齿状回LTP的产生,并使LTP的幅度减小。提示 微波照射造成学习记忆的损害,可能是通过阻碍海马LTP的产生来实现的。     

用荧光染色技术标记生活花粉管的研究

在金鱼草和(或)烟草上试验了三种荧光染料对花粉管进行荧光活体染色与标记的效果。花粉管在异硫氰酸荧光素(FITC,12.5μg/ml)中染色5—6小时,原生质呈绿黄色荧光;换入无染料的培养基后可继续生长并保持荧光标记,但后期生长受抑。罗丹明B(RB,10μg/nl)染色的效果与上相近,花粉管呈红色荧光;换入无染料培养基后生长正常,唯后期荧光减弱。荧光素二醋酸酯(FDA,10μg/ml)染花粉粒40分钟,换入无染料培养基后正常萌发与生长,花粉管原生质呈明亮的绿色荧光。FDA方法具有染色时间短,荧光明亮,兼有活染与生活力鉴定双重功效等优点。     

比较几种组织化学显色法在肺内毛细淋巴管的应用

目的 为肺内毛细血管和毛细淋巴管的鉴别提供更好的技术方法。方法 采用5’-核苷酸酶一碱性磷酸酶双重显色法（5′-Nase-ALP）、针对基底膜的免疫组化显色法及特殊染色法。结果 5′-Nase-ALP显色法能够较客观、较清楚地区分肺内毛细血管和毛细淋巴管。结论 针对基底膜的免疫组化显色法及特殊染色法不够准确或受器官结构特点限制,但对于部分实质性或空腔性器官及肿瘤淋巴管的研究仍不为是一种客观、可靠、经济、实用的方法,值得进一步尝试推广。     

微波辐射在十二种抗原ABC染色中的应用

我们用十二种抗原染色反复证实微波辐射可以加速和增强 ABC 染色。辐射时间约1min,一些抗原仅需15S.全部染色过程1.5h.实验与传统方法比较结果相同.     

半干法微波处理制备壳聚糖

本文报导了采用微波处理半干法由甲壳素脱乙酰制备壳聚糖。与传统方法相比,反应时间大大缩短,降低了生产成本。并讨论了影响壳聚糖脱乙酰度和粘度的因素,例如,反应时间,碱浓度,料比。在较适宜的条件下,7分钟内脱乙酰度可大于75％。     

微波Envision免疫组织化学标记的特异性和敏感性研究

本文应用新建立的快速微波－Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法免疫组织化学技术,分别对福尔马林固定和石蜡包埋切片的良恶性肿瘤进行免疫组织化学标记,观察该法的敏感性和特异性。所有２３种抗原均获得强阳性、低背景。整个程序在１８分钟内完成。结果表明：该法是一种特异性强、敏感性高、背景染色轻、快速和简便的新方法,可用于常规病理诊断。