昆虫对转Bt杀虫蛋白基因植物的抗性及其对策

1　引言苏云金杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ简称Ｂｔ)是目前世界上产量最大、应用最为成功的微生物杀虫剂 ,除了已筛选出多种Ｂｔ菌株直接发酵培养外 ,还培育出转基因工程菌及转基因植物 ,使Ｂｔ的使用范围大为扩大。Ｂｔ在形成芽孢时产生的伴孢晶体是Ｂｔ杀虫活性的主要来源 ,它可能由几种晶体蛋白即δ -内毒素组成 ,包括Ｃｒｙ和Ｃｙｔ两大类。一般认为 ,δ -内毒素的作用过程要经溶解、酶解活化、与受体结合、插入和孔洞或离子通道形成等五个环节[1] ,涉及到多种毒素和作用位点 ,单一因素的改变对其敏感性影响不大 …     

《工业微生物》第24卷总目次

酶高产菌株（43）12.由甲醇生产生物可降解塑料第1期U4。lL利用甲基芽抱杆菌由甲醇生产氨基酸的.——l。-突变型菌株的分离（44）14.甲基芽抱杆菌产L-苏研究报告＊\一一、。、一J＊。—u、一—一—-,-/司·U。二一～一_二;二一下氨酸与L-赖氨酸突变型中其氨基酸生物合成酶的鉴酱油曲霉蛋白酶活力的提高丁—”二一二二二丁.二二”二二_。。。,_二___。定（44）15.利用固定化假单抱菌细胞生产茶氨酸…………………杨俊豪、陈丰英、吴培群等（1）二一.。——、、,、·—一、、-——”‘”””的新方法（45）共生发酵无醇饮料新工艺的研究一…     

烟草细胞乙醇分解代谢能力的离体调控(英文)

报告了一些重要因子对培养在含有乙醇的培养基上的烟草细胞的乙醇分解代谢能力（ＥＣＡ）的调控效果。在供试的５种生长素和２种细胞分裂素中,ＩＢＡ４ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０５ｍｇ／Ｌ最有利于促进ＥＣＡ,而ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ则最有利于支持处在乙醇胁迫下的细胞的增殖。实验中还发现提高维生素浓度有利于细胞的ＥＣＡ。通过将细胞从低乙醇浓度的培养基转移到较高乙醇浓度的培养基中,能够诱导细胞耐受更高浓度的乙醇并增强细胞的ＥＣＡ。研究结果可以应用于制备适合分离乙醇分解代谢途径中的酶的烟草细胞材料。     

烟草细胞乙醇分解代谢能力的离体调控

报告了一些重要因子对培养在含有乙醇的培养基上的烟草细胞的乙醇分解代谢能力（ＥＣＡ）的调控效果。在供试的５种生长毒和２种细胞分裂素中,ＩＢＡ ４ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０５ｍｇ／Ｌ最有地促进ＥＣＡ,而ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ则最有利于支持处在乙醇胁迫下的细胞的增殖。实验中还发现提高维生素浓度有利于细胞的ＥＣＡ。通过将细胞从低乙醇浓度的培养基转移到较高乙醇浓度的培养基中,能够诱导细胞耐受更高     

球形芽孢杆菌C_3－41对致倦库蚊的毒效及在蚊体内的再循环

球形芽抱杆菌Ｃ３－４１菌株（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ　Ｃ３－４１）对致倦库蚊（Ｃｕｌｅｘｑｕｉｎｑｕｅｆａ－ｓｃｉａｔｕｓ）幼虫有很高毒效,对２龄和３—４龄幼虫的半致死剂量（ＬＤ５０）分别为６３．１和８９．７芽孢／蚊幼虫。处理浓度越高,取食时间越长,蚊幼虫取食到的杀蚊活性物质量越多,死亡率越高。当蚊幼虫取食互致死剂量杀蚊活性物质后,球形芽孢杆菌在感染的活幼虫体内不增殖;但当蚊幼虫取食致死剂量杀蚊活性物质后,蚊幼死亡,球形芽抱杆菌在死蚊幼虫体内增殖明显,６天内芽抱从感染初期的１．８６×１０２／蚊幼虫增加到１．５９×１０６／蚊幼虫。芽抱在死蚊幼虫体内能正常荫发、生长、产孢和形成毒素。增殖的芽抱同样对致倦库蚊幼虫有较高毒力。     

序列同源性比较软件Blast的本地化实现及VB接口程序的编制

美国国家生物技术信息中心（ＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ,ＮＣＢＩ）的Ｂｌａｓｔ软件是进行核酸序列和蛋白质序列同源性比较的有力工具［１,２］．通过访问ＮＣＢＩ的主页（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）进行Ｂｌａｓｔ同源性比较是常用的分析方法．然而在很多场合需要在脱机状态下使用Ｂｌａｓｔ进行同源性比较,所以,Ｂｌａｓｔ软件的本地化实现有其必要性．本文介绍实现Ｂｌａｓｔ本地化过程的经验,同时用ＶｉｓｕａｌＢａｓｉｃ５．０（以下…     

固氮菌的孢囊

在特定条件下,自生固氮菌（Ａｚｔ）ｔｏｂａｃｌｅｒｓｐ．）的营养细胞会转变成一卵圆形或球形的休眠体,称为抱囊（Ｃｙｓｔ）。‘ｌ抱羹的形态结构固氮菌的抱囊为球形或卵圆形,大小为１．ＳＸ２．ｏｐｍ［‘］,体积大约为营养细胞的一半,其结构在光学显微镜下至少可分为３部分：中心体（ｃｅｎｔａｌｂｏｄｙ）、内壁层（ｉｎｈｎｅ）和外壁层（ｅｘｉｎｅ）。Ｐｏｐｅ等ｌ’］用钉红染色可见外壁层外还有荚膜．抱囊的中心体是收缩的细胞质部,往往内含数个折射的颗粒,为聚卜羟基丁酸盐（ＰＨＢ）颗粒。紧绕着中心体的为细胞质膜,…     

细胞转化过程中胞内钙离子浓度的变化

使用钙离子荧光探针Ｆｌｕｏ－３ＡＭ和ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２联染细胞的方法,利用显微分光光度计ＭＰＶⅡ测量了两种温度敏感细胞—６Ｍ２和ｔｓＲＳＶＮＩＨ３Ｔ３－ＬＡ９０细胞及Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２和转化Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞在不同细胞周期时相内钙的浓度,发现从Ｇ１期到Ｓ期到Ｇ２期,６ｍ２细胞当在３３℃培养时（转化状态）胞内钙的浓度〔Ｃａ＾２＋〕ｉ分别为８５．０,１３８．４２３９．０ｎｍｏｌ     

硝酸银与脱落酸相配合影响菜心离体培养之植株再生方式的组织学研究

菜心带子叶的子叶柄在培养基中是否添加ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ可导致两种不同的植株再生方式：添加ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ时由外植体直接出芽,而不加ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ则植株再生经过愈伤组织阶段再分化成芽。培养１—３ｄ,子叶柄切口端之皮层及维管束的薄壁细胞开始启动,细胞迅速分裂而形成分生细胞团和少量愈伤组织。第４天,在不含ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ的培养基上,分生细胞团则形成根原基进而发育成根;或者去分化形成愈伤组织。在这种条件下,只有少数芽原基可由培养１５ｄ后的愈伤组织再分化产生．在含ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ的培养基上,分生细胞旺盛增殖而形成大量分生细胞团,并由这种分生细胞团直接形成大量的芽原基．１０ｄ左右即可产生为数众多的丛生不定芽．ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ相配合抑制了不定根及愈伤组织的形成和生长,促进大量增生的分生细胞团直接分化为不定芽的芽原基．     

肾胚细胞瘤原癌基因novC在tTA调控系统中的表达

ｎｏｖ基因与肾甲细胞瘤密切相关,在肾母细胞瘤细胞中大量表达,而在正常的成年肾中不表达。通过将Ｂｕｊａｒｄ′ｓｔＴＡ调控系统引入ＱＴ６细胞系中,同时将ｎｏｖＣ基因克隆到ｐＵＨＤ１０３质粒中,与ｐＵＨＤ＿ｔＴＡ质粒共转染细胞,诱导ｎｏｖＣ大量表达（其分子量约为４８ｋＤ）,建立了使ｎｏｖ基因大量表达的细胞系统,为研究ｎｏｖＣ基因对细胞的调控机制建立了体外细胞模型系统。     

苏云金芽胞杆菌菌株YBT833含不同杀虫晶体蛋白基因转化子的特性

用电脉冲方法将含有苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因ｃｒｙ１Ｃ的重组质粒ｐＢＭＢＬＣ转入野生菌株ＹＢＴ８３３,获得含不同杀虫晶体蛋白基因的４个转化子。质粒检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明它们均为菌株ＹＢＴ８３３含重组质粒ｐＢＭＢＬＣ的转化子。ＰＣＲ扩增表明,转化子ＹＢＴ８３３－１保留了原有的杀虫晶体蛋白基因;转化子ＹＢＴ８３３－２丢失了基因ｃｒｙ１Ａｂ;转化子ＹＢＴ８３３－３则丢失了所有的杀虫晶体蛋白基     

小鼠骨髓内皮细胞分泌的细胞因子对造血干/祖细胞增殖的影响

应用小鼠骨髓内皮细胞株细胞传代培养,收集无血清条件培养液（ｍＢＭＥＣ－ＣＭ）,经超滤分成大于１０ｋＤ和小于１０ｋＤ两组分,分别观察两组分的ｍＢＭＥＣ－ＣＭ对小鼠骨髓造血干／祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ,ＨＰＰ－ＣＦＣ,ＣＦＵ－Ｅ,ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｅｇ的影响。结果表明：含分子量大于１０ｋＤ物质的ｍＢＭＥＣ－ＣＭ的保留液能明显刺激ＣＦＵ－ＧＭ,ＨＰＰ－ＣＦＣ,ＣＦＵ－Ｅ,ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长;     

拟杆菌属的分类现状

拟杆菌属的分类现状赵乃昕（山东潍坊医学院,潍坊２６１０１２）拟杆菌属（ＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓＣａｓｔｅｌｌａｎｉａｎｄＣｈａｌｍｅｒｓ１９１９）原先几乎包括全部人和动物有关的革兰氏阴性专性厌氧无芽抱杆菌。但此属菌种在形态、生理、生化、化学组成及ＤＮＡ...     

肉毒杆菌二元毒素和细胞外酶

对肉毒中毒和肉毒毒蛋白的研究已有近百年历史,肉毒杆菌神经毒素（ＢｏＮＴ）作用机制研究的进展已使它成分为分析神经递质释放的胞吐分子机制和用于临床治疗的有用工具。近年发现,肉毒梭状芽胞杆菌Ｃ和Ｄ型菌株除分泌ＢｏＮＴ外,尚合成另外两类与ＢｏＮＴ结构和生物活必完全不同的蛋白质,肉毒二元毒素和肉毒细胞外酶,它们分别影响细胞骨架和细胞的生长发育,也成为分析相关生命过程的有效工具药,本文综述了这两类蛋白质的有关     

应用流式细胞仪研究抗IL——8单抗对IL——8激活人颗粒细胞活力的中和作用

以ＩＬ－８免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０或６５３小鼠骨髓瘤细胞融合构建了淋巴细胞杂交瘤克隆Ｉ８－Ｓ２和Ｉ８－６３。ＥＬＩＳＡ叠加试验（ＥＬＩＳＡ Ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙ Ｔｅｓｔ）表明这两杂交瘤克隆分泌的单抗分别识别ＩＬ－８分子的不同表位。ＩＬ－８能激活人颗粒细胞,引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度（「Ｃａ＾２＋」）上升。通过流式细胞仪分析「Ｃａ＾２＋」的变化,发现两个克隆单抗对ＩＬ－８激活细胞的活     

牛胚胎在BRL/mTCM199和HECM-6/mTCM199培养体系中发育潜能的探讨

在两种培养体系下对牛胚胎早期发育进行了比较研究。把屠宰场收集的牛卵本外培养至成熟,然后进行体外受精。将受精卵置于下列两种培养体系中进行体外培养：①Ｂｕｆｆａｌｏ ｒａｔ ｌｉｖｅｒ细胞与改进的ＴＣＭ１９９培养液共同培养系统（ＢＲＬ／ｍＴＣＭ１９９）;②半确定培养液两步培养系统「无血清的金黄地鼠培养液与改进的ＴＣＭ１９９培养液（ＨＥＣＭ－６／ｍＴＣＭ１９９）」。结果表明：后者的囊胚率（５０％）明显高     

构建基因工程菌发酵产生维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸

从棒状杆菌ＳＣＢ３０５８克隆得到两个２,５－ＤＫＧ＾＊＊还原酶基因后,构建了两个能够表达２,５－ＤＫＧ还原酶的基因工程大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＰＥＴ９ａⅡ和ＤＨ５α（ｐＢＬ４）和一个基因工程欧文氏菌ＥＲ９７。２,５－ＤＫＧ还原酶基因分别受控于ＰＬ或Ｔ７启动子,通过加入ＩＰＴＧ或提高温度进行诱导,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和酶活测定确定它们在诱导后得到了高表达,用细胞抽提液在加入辅酶ＮＡＤＰＨ的体外实验中转     

CENP——B的基因表达与细胞周期关系的研究

本文以Ｈｅｌａ细胞为材料研究一种有丝粒蛋白ＣＥＮＰ－Ｂ的基因表达与细胞周期及细胞核骨架的关系。将Ｈｅｌａ细胞同频不同周期时相,以流式细胞光度术、同位素掺入和ＡＣＡ着丝粒染色等方法检测细胞同步化效果。我们分别提取了各周期时相细胞的总ＲＮＡ和Ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,用Ｄｏｔ ｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交方法研究ＣＥＮＰ－Ｂ在细胞周期中的表达。结果表明,ＣＥＮＰ－Ｂ基因在细胞周期中的各个时     

我国双价抗虫棉的研究取得突破性进展

中国农业科学院生物技术研究中心郭三堆领导的研究组与国内有关单位密切合作,继成功培育出已在生产上发挥作用的国抗１号、国抗１２号、晋棉２６号单价抗虫棉品种后,在双价抗虫棉的研究中也取得了重要进展。转Ｂｔ抗虫基因的单价抗虫棉只能产生一种杀虫蛋白,主要对棉铃虫等鳞翅目害虫有抗性。据有关研究,在长期的选择压力下,转单一Ｂｔ杀虫基因抗虫棉应用若干年后,棉铃虫有可能产生抗性。而双价抗虫棉能够同时表达出两种杀虫蛋白。其中,ＣｐＴＩ是一种广谱杀虫蛋白,在杀虫机理上与Ｂｔ蛋白不同。因此,双价抗虫棉不仅增强了抗虫棉的…     

tRNA-包埋核酶在HepG2细胞中的抗HBV活性

已知 ｔ Ｒ Ｎ Ａ 包埋核酶比裸露核酶在胎牛血清和 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞抽提液中有较高的稳定性 构建了 ｈ Ｃ Ｍ Ｖ 启动子驱动下的抗 Ｈ Ｂ Ｖ（ａｄｒ 亚型）的 ｔ Ｒ Ｎ Ａ 包埋核酶基因质粒,与携带 Ｈ Ｂ Ｖ 基因的ｐ１２Ⅱ质粒共转染 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞,用 Ｇ４１８ 筛选抗性细胞 分析稳定表达细胞中的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｒ Ｎ Ａ, Ｈ Ｂ Ｖ 抗原合成和新生 Ｄ Ｎ Ａ 合成,表明ｔ Ｒ Ｎ Ａ 包埋核酶比裸露核酶有较高的抑制 Ｈ Ｂ Ｖ 活性．ｔ Ｒ Ｎ Ａ 包埋核酶和裸露核酶分别使靶 Ｒ Ｎ Ａ 减少 ８２％ ～８７％ 和 ７５％ ～８１％ ,抗原减少 ７３％ ～８０％ 和７０％ ～７４％ 以及新生 Ｄ Ｎ Ａ 减少 ７４％ ～７６％ 和 ６７％ ～７１％ 结果指出,核酶,特别是 ｔ Ｒ Ｎ Ａ 包埋核酶,对 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞中 Ｈ Ｂ Ｖ 表达和复制有明显抑制作用,可能作为 Ｈ Ｂ Ｖ 基因治疗的手段之一 