左手螺旋Z—DNA的研究：V 环境因子对Oligo—d（G—C）6构象的影响

脱氧寡聚核苷酸ｄ（Ｇ－Ｃ）６是迄今所报道的同类脱氧多聚核苷酸中能形成左手螺旋ＤＮＡ（Ｚ－ＤＮＡ）的最短序列。环境因子如ＰＨ,温度和离子的类别与浓度对ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中的Ｚ－构象的形成和Ｂ－、Ｚ－构象的相对稳定性有着明显的影响。在合适的条件,ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中可呈现Ｂ－构象区,Ｚ－构象相对稳定区和Ｂ－、Ｚ－构象跃迁过渡区。     

左手螺旋Z-DNA的研究 Ⅴ 环境因子对Oligo-d(G-C)_6构象的影响

脱氧寡聚核苷酸ｄ（Ｇ－Ｃ）６是迄今所报道的同类脱氧多聚核苷酸中能形成左手螺旋ＤＮＡ（Ｚ－ＤＮＡ）的最短序列。环境因子如ＰＨ,温度和离子的类别与浓度对ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中的Ｚ－构象的形成和Ｂ－、Ｚ－构象的相对稳定性有着明显的影响。在合适的条件下,ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中可呈现Ｂ－构象区,Ｚ－构象相对稳定区和Ｂ－、Ｚ－构象跃迁过渡区。     

用2D—NMR测定人卵泡促性腺激素释放肽（hF—GRP）的溶液构象

人卵泡促性腺激素释放肽是１９８７年才被发现的一种激素类１４肽,本文利用２Ｄ－ＮＭＲ技术首先测定了它的溶液构象,在残基归属的基础上,据ＲＯＥＳＹ距离信息得到该１４肽的初步构象为,羧基端三个残基是运动性较大的无规卷曲,氨基端Ｔｈｒ１的侧链靠近主链,Ｈｉｓ１０－Ｐｒｏ１１间的肽链以ｔｒａｎｓ构型占优势,在Ｓｅｒ４－Ｈｉｓ５－Ｈｉｓ６区域可能形成一个部分类似β－转角Ⅱ的弯曲。     

〔B25－Trp〕去B链C端五肽胰岛素酰胺的合成及性质

去Ｂ链Ｃ端八肽胰岛素（ＤＯＩ）与Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＮＨ２通过胰蛋白酶催化缩合后,经分离纯化得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的Ｂ２５－Ｔｒｐ取代的去Ｂ链Ｃ端五肽胰岛素酰胺（〔Ｂ２５－Ｔｒｙ〕ＤＰＩ－ＮＨ２）．酶促缩合率大于８５％,回收率为３６．２％。用小白鼠惊厥法测得〔Ｂ２５－Ｔｒｐ〕ＤＰＩ－ＮＨ２的体内活力约为天然胰岛素的７０％,用人胎盘细胞膜测得的其胰岛素受体结合能力为天然胰岛素的７２．５±２．４％;利用色氨酸和酪氨酸的内源荧光研究了此类似物的溶液构象．     

2D－NMR归属两个合成十八肽的~1H共振谱线

ＢＢ１０４和ＪＫ分别是两个合成的十八肽,前者是与ａ－ＢＧＴＸ有结合作用的乙酰胆碱受体的活性部位,后者是前者的修饰多肽。为了研究发生结合作用时它们三维结构的变化,有必要首先归属它们的共振谱线。本文利用ＣＯＳＹ．ＴＯＣＳＹ、ＮＯＥＳＹ等２Ｄ－ＮＭＲ技术,对这两个十八肽的共振谱线进行了归属,这些归属为进一步研究它们与ＢＧＴＸ的相互作用奠定了基础。     

表面活性剂TritonX－100对菌紫质蛋白紫外荧光性质的影响

用荧光光谱方法研究了ＴｒｉｔｏｎＸ－１００（以下缩写为ＴＸ－１００）对菌紫质蛋白（Ｂａｃｔｅｒｉｏｒｈｏｄｏｐｓｉｎ,ＢＲ）及视黄醛生色团漂白后的紫膜（Ｂａｔｅｒｉｏｐｓｉｎ,ＢＯ）紫外荧光性质的影响．结果表明：表面活性剂ＴＸ－１００使ＢＲ中色氨酸在３２６ｎｍ处的荧光发射强度增加。随着ＴＸ－１００对ＢＲ的增溶,改变了生色团的构象环境,破坏了ＢＲ中色氨酸与生色团之间的能量转移。增溶后的ＢＲ中,Ｔｒｐ趋向于更疏水性的环境。     

pH值及Na^＋诱导α—辅肌动蛋白构象变化

用ＦＴＩＲ研究了不同浓度ＮａＣｌ溶液中α－辅肌动蛋白二级结构的变化,实验结果发现,在不同ＮａＣｌ浓度下,α－辅肌动蛋白至少具三种不同的构象,低盐（３０－９０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）中盐（１５０ｍｍｏｌ／Ｌ－２５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）与高盐（３００－５００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）构象。在低盐溶液中,α－辅肌动蛋白含有较高比例的α－螺旋结构（３３－３４％）,随着溶液中钠盐浓度的升高部分α－螺旋结构转变为     

蛇肌果糖1，6－二磷酸酯酶的R态和T态的构象

几种高活性形式的蛇肌果糖１,６－二磷酸酯酸的紫外差光谱与酶在尿素或盐酸胍中差光谱相似,它们的酶学性质及巯基暴露的程度各不相同,提示这些高活性形式的酶的构象呈稳定的松驰状态（Ｂ态）,构象松驰的程度也各不相同。受果糖２,６－二磷酸、ＡＭＰ和过量底物抑制的酶处于三种不同的低活性状态,它们的构象特征与Ｒ态相反,提示此三种低活性酶构象处于较紧凑状态（Ｔ态）。这几种Ｔ态酶流基暴露的程度,受蛋白水解酶限制性酶解的速度不同,说明这些Ｔ态酶的构象的紧凑程度是有差异的。蛇肌酶的不同的活化状态所具有不同的稳定的构象状态,在能量上可能相差很小,便于受到多种因子的调节。这可能是别构酶所普遍具有的现象。     

pH值及Na＋诱导α-辅肌动蛋白构象变化

用ＦＴＩＲ研究了不同浓度ＮａＣｌ溶液中α－辅肌动蛋白二级结构的变化。实验结果发现,在不同ＮａＣｌ浓度下,α－辅肌动蛋白至少具有三种不同的构象：低盐（３０－９０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）,中盐（１５０ｍｍｏｌ／Ｌ－２５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）与高盐（３００－５００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）构象。在低盐溶液中,α－辅肌动蛋白含有较高比例的α－螺旋结构（３３－３４％）,随着溶液中钠盐浓度的升高部分α－螺旋结构转变为β－转角或β－折叠结构。此外还研究了ｐＨ诱导α－辅肌动蛋白构象的变化,定量分析结果表明在ｐＨ７．０和中盐条件下（α－辅肌动蛋白交联Ｆ－ａｃｔｉｎ成束的活性最高）,α－辅肌动蛋白β－转角结构含量最高,而α－螺旋结构含量较低。由此可见,β－转角结构在α－辅肌动蛋白交联肌动蛋白成束中可能具有重要的功能。     

胰岛素B链N端的修饰及其生物活性变化

通过对在大肠杆菌体系中表达及部分加工的粗产物的反相快速蛋白液相色谱的分离,我们得到了Ｌ－Ｍｅｔ~（ＢＯ）－人胰岛素原、Ｌ－Ｍｅｔ~（Ｂ－１）－Ｌ－Ｌｙｓ~（ＢＯ）－人胰岛素原,氨基酸组成分析结果与设想的完全一致。两者的胰岛素受体活性分别为人胰岛素原的６６％及５４％,而胰岛素的放射免疫活性分别降为人胰岛素原的２２％及９％。表明胰岛素Ｂ链的Ｎ端对胰岛囊分子与其受体的结合有一定的重要性,而更重要的是它非常可能参与组成胰岛素分子的抗原决定簇。     

无机磷和叠氮钠对线粒体F_1-ATPase构象的不同影响

用εＡＤＰ作荧光探针,用荧光猝灭的方法证明无机磷（Ｐｉ）能影响Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ的构象从而使酶结合ＡＤＰ的能力降低．用ａｕｒｏｖｅｒｔｉｎＢ作荧光探针研究了Ｐｉ和叠氮钠对Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ构象的影响,发现Ｐｉ能影响洗去催化位点核苷酸的Ｆ１的构象,而叠氮钠对其没有影响,但却能影响结合有ＡＤＰ的Ｆ１的构象．因此Ｐｉ和叠氮钠对酶构象的影响是不同的,二者可能有不同的作用位点．     

黄原胶对α-淀粉酶耐热性及其在热变性过程中构象变化的影响

黄原胶（ＸＧ）对α－淀粉酶（ＢＦ－７６５８）具有较好的热稳定作用,０．２％黄原胶α－淀粉酶液７５℃处理７分钟残余酶活为２５．８％,而对照酶液几乎完全失活。酶分子立体构象的变化与其相应的生物活力有着一定的联系。加胶酶在相同条件的部分热变性过程中,酶活损失较少,其分子构象的变化程序也较弱。     

2．5分辨率单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

空间群为Ｐ２１的Ａ１－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶胞内,一个不对称单位含有一个六聚体,应用差值Ｆｏｕｒｉｅｒ技术,立体化学制最小二来技术和Ｘ—ＰＬＯＲ程序并辅以电子密度图的人工拟合,解析了分辨率ＡＩ—（Ｌ－丙氨酸）胰岛素（Ａｌ－Ｌ－ＡｌａⅠ）的晶体结构。最终Ｒ因子为２０．６％,与标准键长与键角的均方根偏差分别为和４．１９°,从电子密度图与模型的拟合来看,六聚体中每条Ａ链的Ａｌ位置替换的Ｌ—Ａｌａ清晰可见,每条Ｂ链Ｎ端Ｂ１—Ｂ８伏段都为α螺旋构象,形成了Ｂ１—Ｂ１９的连续α螺旋段。     

大鼠TGF－α修饰16肽的溶液构象

已知大鼠Ｔ０Ｆ－α的抗原部位干Ｃ环,且大鼠的ＴＧＦ—α（３４－４３）和ＴＧＦ－α（４４－５０）均有较强的活性以转化正常细胞。为了揭示其结构与功能关系,合成了大鼠ＴＧＦ－α修饰１６肽。在前文用二维核磁共振技术归属质子谱并验证其一级结构的基础上,本文测定了不同混合时间的二维ＮＯＥＳＹ谱。根据所得的数据因原始斜率法求出距离约束。通过约束分子动力学计算定出该分子的溶液构象。其中还用ＤＱＦ－ＣＯＳＹ的数据求出二面角作为决定溶液构象的参考。     

超氧化物歧化酶全酶和脱辅基酶胍变性时失活与去折叠的比较研究

利用紫外差吸收光谱和荧光发射光谱等监测手段研究天然铜锌ＳＯＤ（ｈｏｌｏ－ＳＯＤ）和脱铜锌ＳＯＤ（ａｐｏ－ＳＯＤ）在不同浓度胍溶液中的去折叠及活力变化．结果表明ｈｏｌｏ－ＳＯＤ和ａｐｏ－ＳＯＤ分别在４．０和２．０ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中去折叠,而分别在２．０和０．５ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中其构象尚未发生明显改变时活性几乎完全丧失．提示金属离子对维持酶的整体及活性部位构象具有重要作用,脱去金属离子的酶分子的构象特别是活性部位的构象更易受到变性剂的破坏．     

乳腺癌c－erb B－2表达与细胞形态定量及DNA含量的关系

应用免疫组织化学及图像分析技术对５０例乳腺癌的ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因表达与细胞形态定量及ＤＮＡ含量的关系进行了分析。结果显示：（１）ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性乳腺癌细胞平均ＤＮＡ含量及倍体数明显高于ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性者,且以非二倍体细胞为主;（２）ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性乳腺癌细胞平均核面积（ＮＡ）、核周长、核直径及核浆比例均大于ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性者。术后５年内死亡的ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性乳腺癌细胞ＮＡ值最大,ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性且有淋巴结转移者细胞ＮＡ值亦较大,核形状因子偏离“１”更远。表明ｃ－ｅｒｂＢ－２表达与乳腺癌细胞的分裂及分化关系密切。     

超氧化物歧化酶全酶和脱辅基酶胍变性时失活与去折叠的比较研究

利用紫外差吸收光谱和荧光发射光谱等监测手段研究天然铜锌ＳＯＤ和脱铜锌ＳＯＤ在不同浓度胍溶液中的去折叠及活力变化。结果表明ｈｏｌｏ－ＳＯＤ和ａｐｏ－ＳＯＤ分别在４．０和２．０ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中去折叠,而分别在２．０和０．５ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中其构象尚未发生明显改变时活性几乎完全丧失。提示金属离子对维持酶的整体及活性部位构象具有重要作用,脱去金属离子的酶分子的构象特别是活性部位的构象更易受到变性剂的破坏     

用FT—IR技术研究人卵泡促性腺激素释放肽hF—GRP及其类似物TF14的二级结构

用付立叶变换红外（ＦＴ－ＩＲ）技术,定量分析了人卵泡促性腺激素释放肽ｈＦ－ＧＲＰ及类似物ＴＦ１４这两个多肽在重水溶液中的二级结构,结果为ｈＦ－ＧＲＰ有近两分之一的残基处于无规卷曲,其余部分是非典型的伸展结构,ＴＦ１４则基本上处于伸展和转角结构,无规和螺旋的成分很少,这与用二维核磁共振技术测定的ｈＦ－ＧＲＰ和ＴＦ１４的溶液构象实验结果非常吻合。     

胰岛素B_(26-30)五肽的二维核磁共振研究

用同核相关谱(HOMCOR)和NOE相关谱(NOESY)在D_2O中完成了胰岛素B_(26-30)五肽共振峰的归属.对其溶液构象进行了初步分析.     

虎纹捕鸟蛛凝集素-I(SHL-I)的核磁共振氢谱谱峰的完全归属

描述了从虎纹捕鸟蛛毒液分离的凝集素ＳＨＬ－Ｉ的核磁共振氢谱谱峰的完全归属。通过分析二维ＤＱＦ－ＣＯＳＹ,ＣＯＳＹ,ＴＯＣＳＹ和ＮＯＥＳＹ谱,鉴别出全部３２个氨基酸残基自旋体系。然后由ＣＯＳＹ,ＮＯＥＳＹ谱指纹区的ｄαＮ连系推测出序列专一归属,并得到了ＴＯＣＳＹ和ＮＯＥＳＹ谱中ｄαＮ,ｄＮＮ的验证。从而明确分辨了除Ｃｙｓ２外所有主链质子和大于９６％的侧链质子。这一结果为最终确定ＳＨＬ－Ｉ的溶液构象奠定了基础。