一些裸子植物鲜叶提取物清除自由基的活性研究

用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法,对常见的60余种裸子植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较.发现不同科属,不同树种鲜叶的80%甲醇提取物的自由基清除活性有很大差异,其中罗汉松科罗汉松属树木鲜叶在浓度在0.5mg/mL,于37℃下孵育20min时的自由基清除率平均可达55.9%,而柏科侧柏属平均仅为7.1%;罗汉松,孔雀柏、小叶罗汉松、湿地松、杉木和刺柏等鲜叶有很强的自由基清除活性,它们的自由基清除率分别可达61.1%,58.4,57.6%,57.1%,51.8%和50.4%,表明这些树种有较大的开发潜力。     

瓦宁木层孔菌中多酚和黄酮类成分分离及清除自由基活性的研究

采用硅胶和反相C18柱层析方法,首次从瓦宁木层孔菌中分离得到了5个化合物,运用NMR波谱法分析和鉴定为樱花亭、7-甲氧基二氢莰非素、二氢莰非素、4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮、hispolon。并通过建立体外二苯基苦味酰基苯肼自由基（·DPPH）、超氧阴离子自由基（·O2?）以及羟自由基（·OH）发生体系,研究了5个化合物对·DPPH、·OH和·O2?的清除作用。结果表明当浓度达到100μg/mL时,化合物4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮和hispolon对·DPPH清除率分别为92%和93%,对·OH的清除率分别为90%和95%,而对·O2?的清除率分别为70%和77%,略低于清除·DPPH和·OH的能力;二氢莰非素对·O2?自由基的清除率为39%,强于清除·OH和·DPPH的能力;而樱花亭和7-甲氧基二氢莰非素对3种自由基的清除率均低于30%。2个多酚类化合物清除自由基的能力均强于3个黄酮类化合物。5个化合物清除自由基能力均表现出一定的浓度依赖性。     

一些单子叶木本植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性初探

研究用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法,对常见的三十余种单子叶木本植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较,发现不同科属、不同种植物鲜叶的80％甲醇提取物对DPPH自由基的清除活性有很大差异,其中供试的棕榈科7种植物鲜叶提取物,在相当于鲜叶浓度为2．5mg／ml于37℃下孵育20min时,对0．5mmol／L DPPH自由基清除率平均可达40．0％,而龙舌兰科5种植物平均仅为7．2％;刺葵、棕竹、筋头竹、蒲葵和棕榈等鲜叶有较强的自由基清除活性,它们在相当于鲜叶浓度为2．5mg/ml时的自由基清除率分别可达83．1％、79．2％、64．9％、60．5％和51．3％。这些树种有一定的开发潜力。     

蔷薇科一些植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性的研究

用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法,对业热带蔷薇科常见的50种木本植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较,发现不同属、不同种树木鲜叶的80%甲醇提取物的自由基清除活性有很大差异,其中苹果属5种植物在相当于鲜叶浓度为0.5mg/mL于37℃下孵育20min时,对0.5mmol·L-1DPPH自由基平均清除率达62.4%,而绣线菊属3种植物的平均自由基清除率仅11.6%.尖嘴林檎、棣棠、木瓜、三叶海棠、湖北海棠、木香花、小果蔷薇和黄山花楸等鲜叶有较强的自由基清除活性,它们在浓度为0.5mg/mL时的自由基清除率分别可达85.0%、75.8%、70.7%、69.6%、64.5%、62.5%、61.8%和61.3%,显示其有较大的开发潜力.     

球孢白僵菌菌株间差异性的研究

本文对不同来源的4个球孢白僵菌菌株进行了培养观察。在培养基量、接种量相同;培养条件一致的情况下,比较它们之间的产孢量。并通过生物检测,计算出对菜青虫的致死中时。结果表明,菌株间在培养性状、产孢量及毒力诸方面均存在差异。     

球孢白僵菌种群野生菌株异核现象的分子验证

球孢白僵菌28S rRNA基因D11域由于一内含子的存在与否,引起这一区域的扩增产物有两种片段类型（约520bp及120bp),将此作为分子标记分析了球孢白僵菌的117个菌株,发现17％菌株的扩增产物为双片段类型,即为异核体,异核体在不同种群中的分布频率因地理生态条件而异,单孢分离分析表明,异核体的分离频率约为35％,RAPD检测结果说明异核体在准性循环中发生了不同程度的遗传交换及遗传重组,球孢白僵菌异核体在继代培养中极不稳定。     

亚热带一些常见木本油料树种鲜叶提取物清除自由基的活性初探

用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法,对亚热带常见的90余种油料树种鲜叶80％甲醇提取物的自由基清除活性进行了比较,发现所有树种提取物的自由基清除率都随浓度的增加和随着37℃下孵育时间的延长而增大。其中,苦茶槭、金缕梅、黄连木、茶、三角枫、黄山栾树、山麻杆、红瑞木、槛木、秀丽槭、算盘子、木蜡树、油茶、米心水青冈、乌柏、栾树和山茶等树叶提取物在相当于鲜叶浓度O．5mg／mL时,37℃下孵育20min后的自由基清除率分别达96．7％、93．2％、9o．6％、87．5％、86．4％、85．O％、84．3％、82．1％、80．8％、77．1％、74．5％、72．5％、72．3％、68．7％、63．8％、62．O％和61．7％。这些树种有较大的开发潜力。     

蔷薇科一些植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性的研究

用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法, 对亚热带蔷薇科常见的50种木本植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较,发现不同属、不同种树木鲜叶的80%甲醇提取物的自由基清除活性有很大差异, 其中苹果属5种植物在相当于鲜叶浓度为0.5 mg/mL于37℃下孵育20 min时, 对0.5 mmol.L-1 DPPH自由基平均清除率达62.4%,而绣线菊属3种植物的平均自由基清除率仅11.6%。尖嘴林檎、棣棠、木瓜、三叶海棠、湖北海棠、木香花、小果蔷薇和黄山花楸等鲜叶有较强的自由基清除活性,它们在浓度为0.5 mg/mL时的自由基清除率分别可达85.0%、75.8%、70.7%、69.6%、64.5%、62.5%、61.8%和61.3%,显示其有较大的开发潜力。     

不同碳、氮营养对球孢白僵菌生物学特性和抑菌活性的影响

研究了不同碳营养和氮营养对球孢白僵菌菌丝生长、分生孢子产生量、菌丝生物量及其次生代谢产物的抑菌活性.结果表明,球孢白僵菌对单糖、双糖、多糖等碳营养及有机氮和无机氮等氮营养均能够利用,但利用程度存在一定差异.其中,球孢白僵菌的菌丝生长以白砂糖和蛋白胨最快,以甘露醇和硫酸铵最慢;分生孢子产生量以白砂糖和硝酸钾最多,以甘露醇...     

蛹虫草无性型菌丝体提取液体外抗氧化活性研究

分别测定了蛹虫草无性型菌丝体不同溶剂提取液在不同抗氧化模型中的抗氧化作用。结果表明,各种提取液对二苯基苦味酰基苯肼自由基(·DPPH)和羟自由基(·OH)均有显著的清除作用:在50mg/mL时,去离子水、70%乙醇和70%丙酮提取物对DPPH自由基的清除率分别为89.2%、83.6%和75.9%;70%乙醇提取物在30mg/mL时对·OH自由基的清除率达到100%;在50mg/mL时70%丙酮和去离子水提取物的·OH自由基清除率分别为95.6%和89.6%。在一定浓度下,各提取液对邻苯三酚自氧化也均有抑制作用;不同溶剂提取物的还原能力强弱为:70%乙醇>去离子水>70%丙酮。各种提取物的抗氧化组分不同,提取物浓度与抗氧化性成正相关。     

球孢白僵菌对大豆蚜毒力的室内生物学测定

对来源于吉林省不同地区的15株球孢白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuill.菌种对大豆蚜Aphis glycines Matsumura毒力进行了室内生物学测定。所有供试菌株对大豆蚜虫均有一定的致病性,杀虫效率差异明显,杀虫效率与孢子浓度和作用时间均呈正相关。通过对大豆蚜毒力室内生物学测定结果的综合分析,菌株S14-X-1为毒力较高菌株,具有进一步研究应用价值。     

Cloning of a cuticle-degrading protease from the entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana

Abstract A Beauveria bassiana extracellular subtilisin-like serine endoprotease is a potential virulence factor by virtue of its activity against insect cuticles. A cDNA clone of the protease was isolated from mycelia of B. bassiana grown on cuticle/chitin cultures. The amino acid sequence of this gene was compared to that of Metarhizium anisopliae Pr1, the only pathogenicity determinant so far described from an entomopathogenic fungus, and proteinase K, isolated from Tritirachium album , a saprophytic fungus. The cDNA sequence revealed that B. bassiana Prl is synthesized as a large precursor ( M _r 37 460) containing a signal peptide, a propeptide and the mature protein predicted to have an M _r of 26 832.     

白僵菌固态发酵试验研究

以产孢量为指标,筛选出白僵菌固态发酵的培养基为：90％麦麸＋5％玉米粉＋5％黄豆粉,原孢粉的产孢量可达244．7亿／g。在25m^3发酵罐内进行浅盘固态发酵,培养基的最适起始含水率为60％～65％;最佳通气条件为：前12h不通气,12～48h通气量为1：2,48～144h的通气量为1：1;而温度只需在12～48＋8h内进行控制。常温干燥能最大限度地维持白僵菌的活孢率。     

球孢白僵菌降解昆虫体壁蛋白酶基因 CDEP-1的克隆与序列分析

构建了球孢白僵菌不同诱导时间的混合cDNA文库。根据丝氨酸类蛋白酶的保守区域设计引物,以构建cDNA文库同样的mRNA为模板,采用RT-PCR法得到长度为594bp的片段BbP。序列测定表明BbP是球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶Prl的一部分,以BbP为探针,从上述cDNA文库筛选得到长度为1557bp的克隆CDEP-1。CDEP-1含有一个1134bp的开放阅读框（ORF）,编码377个氨基酸,分子量为38616、PI=8.302的蛋白酶前体。CEDP-1的核苷酸序列与蛋白酶K、金龟子绿僵菌Prl、球孢白僵菌Prl的同源性分别为：57.9%、54.7%、83.3%。根据cDNA序列扩增到CDEP-1的基因组序列,分析表明其中含有3个内含子。Southern杂交表明CDEP-1在球孢白僵菌是单拷贝。     

寄主和分布区系不同的球孢白僵菌菌株近缘关系的研究

观察、测定了来源不同的球孢白僵菌 1 9个菌株的培养性状、产孢量、萌发中时、水分活性、紫外照射活率、水浴活率等指标 ,将培养性状编码后 ,由所得的 8个指标对供试菌株求相关系数矩阵 .分析表明 ,不同菌株近缘关系的远近主要由菌株原始分布区系距离远近所决定 ,受寄主不同的影响次之 .来源于相同 (或相近 )地区的菌株相关系数可达极显著水平 ,而从相同寄主角度分析 ,得到菌株间的相关系数有高有低 ,多表现为相关不显著     

球孢白僵菌野生及转基因菌株的退化

球孢白僵菌在人工培养基上继代培养容易发生退化变异,表现为菌丝徒长以及产孢量减少和毒力的逐渐下降,给真菌杀虫剂的生产和使用造成较大的损失.没有丢失被插入的外源毒力基因的工程株同样出现退化.培养基成分和含水量以及培养温度和光照等环境因子皆可不同程度地诱发退化的发生,但退化主要由其遗传机制决定,包括线粒体基因突变、异核现象、准性生殖、核基因突变以及有性重组等;菌落局变实质上也是菌种老化的征兆.真菌杀虫剂生产中防止退化的对策除减少传代次数外,还要根据具体菌株确定适宜的环境控制细则.     

球孢白僵菌对温室蚜虫的侵染生物学

研究了球孢白僵菌在不同浓度、施菌方式、温度和相对湿度下对温室蚜虫的侵染力以及接种后对蚜虫的侵染速率。结果表明,高(109个孢子.mL-1)、中(108个孢子.mL-1)、低(107个孢子.mL-1)3个浓度剂量对蚜虫都有较强的致病力,且浓度越大,蚜虫的死亡率越高,死亡时间越提前。用浸渍法和孢子浴法接种蚜虫,6 d的累积死亡率分别为100%和31.1%。在测试的3个温度(22、26、30℃)中,26℃时蚜虫侵染力最强,第3天出现死亡高峰,第5天时累积死亡率就达到100%,明显高于22、30℃的处理。相对湿度越大,球孢白僵菌的致病力越强,蚜虫死亡速度越快。在温湿度组合中相对湿度为95%时,温度对白僵菌的侵染力几乎无影响,但影响发病速度,相对湿度低于95%时,26℃的侵染力始终高于22和30℃时的侵染力。通过接种后不同时间段用0.2%百菌清处理蚜虫测定该菌株的侵染速率,结果表明接种后24 h是该球孢白僵菌有效侵染蚜虫的关键时期。     

Review on safety of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Beauveria brongniartii

The commercial use of entomopathogenic fungi and their products as mycoinsecticides necessitates their registration. Worldwide, several registration guidelines are available, however, most of them focus on similar or even the same safety issues. With respect to the two entomopathogenic fungi, Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. and Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch, many commercial products have been developed, and numerous papers on different biological, environmental, toxicological and other safety aspects have been published during the past 30-40 years. The aim of the present review is to summarise these data. The following safety issues are presented: (1) identity of Beauveria spp.; (2) biological properties of Beauveria spp. (history, natural occurrence and geographical distribution, host range, mode of action, production of metabolites/toxins, effect of environmental factors); (3) analytical methods to determine and quantify residues; (4) fate and behaviour in the environment (mobility and persistence in air, water and soil); (5) effects on non-target organisms (non-target microorganisms, plants, soil organisms, aquatic organisms, predators, parasitoids, honey bees, earth worms and nontarget arthropods); (6) effects on vertebrates (fish, amphibia, reptiles and birds); and (7) effects on mammals and human health. Based on the present knowledge it is concluded that both Beauveria species are considered to be safe.     

Influence of two FPLC fractions from Beauveria bassiana SFB-205 supernatant on the insecticidal activity against cotton aphid

The two FPLC fractions from Beauveria bassiana SFB-205 supernatant, displaying chitinase or Pr1/Pr2 protease activity were bioassayed against Aphis gossypii in different ratios. The decrease of the aphid population was more significantly influenced by the chitinase fraction in a dosage-dependent manner.