多肽、蛋白质的固相序列分析

本文综述了多肽、蛋白质固相序列分析的原理及目前的研究状况。讨论了各类载体在该方法中的使用及存在问题、载体与肽的偶联方式以及对Edman降解产物的分析鉴定等。着重说明了新型载体的研制及其应用。     

固相法合成多肽AN-M的工艺研究

目的:探讨生物活性肽AN-M的固相合成工艺,并为工业化合成目的肽提供理论依据。方法采用固相法,以Fmoc-保护基保护的α-氨基酸和Wang树脂为原料,经1—氧—3—双二甲胺羧基苯骈三氮唑四氟化硼盐(TBTU)、1—羟基苯并三氮唑(HoBt)、二异丙基乙胺(DIEA)缩合,20%哌啶的DMF溶液脱保护,用切割试剂将AN-M粗品从Wang树脂上切割下来。结果经反相高效液相色谱分析纯化,可得目的肽的得率大于67．00%,最终成品的纯度在98．78%以上,经质谱鉴定其分子量与理论值一致。结论该合成方法步骤简便、便于操作、产品得率高,可用于大规模合成目的肽。     

多肽固相序列分析载体的合成及应用

用合成的聚合物作载体,与模型15肽(纯品)偶联,使用Edman降解法进行多肽序列分析。比较了各种类型载体对肽的偶联效果。实验结果表明合成的大孔型四次乙基五胺类树脂载体已经达到国外同类产品水平。     

一项改进的固相多肽合成法——催产素与加压素的合成

多肽激素在医学和畜牧业方面的应用已日趋广泛,因此急需改进多肽合成的工艺以适应生产实际的迫切要求。本文报导了一个固相肽合成的改进方法。用N~α-保护的氨基酸钾盐代替三乙胺盐,与氯甲基化的苯乙烯和二乙烯苯聚合的树脂(2%交联度)反应,可获得较高的酯化率,并减少或避免季铵盐的形成及因此而引起的许多副反应。应用此法合成催产素和加压素,都获得了满意的结果。采用了水杨醛形成西佛碱测定α-氨基含量的新方法。     

两种树脂对固相法合成丙型肝炎疫苗多肽的影响

本实验采用固相法合成丙型肝炎疫苗多肽,比较Wang树脂和二氯三苯甲基树脂（以下简称二氯树脂）作为载体时的连接率以及目标肽的产率和纯度。通过质谱鉴定分析所得目标多肽的分子量,用茚三酮法对两种树脂与氨基酸的连接率进行比较,用反相高效液相色谱（RP-HPLC）进行粗肽的分析和纯化。结果显示以二氯树脂作载体,第一个氨基酸的连接率,以及目标肽的纯度和产率都要明显高于Wang树脂,因此二氯树脂作载体合成丙型肝炎疫苗多肽更适合大规模工业化生产的要求。     

多肽固相合成的研究进展

多肽固相化学合成法是蛋白质研究领域非常重要的研究方法之一,主要可以分为Boc方法和Fmoc方法,在生物药物、蛋白质工程、免疫学等研究中得到了广泛的应用。该文论述了多肽固相合成法的原理,比较了两种典型合成方法的优缺点,介绍了适用于该方法的多肽种类,提出了多肽合成过程中存在的问题与解决策略,最后展望了多肽合成法的应用前景,以供相关领域的研究人员参考。     

新的氨基酸——氨基柠檬酸

过去的生物化学教科书上一直断言,在生物体的蛋白质中只有20种氨基酸。但是,最近西德生物化学家却在一种极重要的蛋白质——核糖核蛋白中发现了一种新的氨基酸。所有蛋白质都是由氨基酸的头与尾连接而成的线性分子。西德法兰克福大学的生物学家G.Wilhelm和K.D.Kupka从各种不同来源的材料(如     

带有不同官能团的聚苯乙烯树脂在固相多肽合成中的应用概况

多肽激素不论是在科学研究、医药、农牧业等的应用方面已日趋广泛。固相多肽合成法的问世又给多肽合成带来了方便。近十几年来这个方法已被广泛的研究和应用。通常所谓的Merrifield固相合成法就是在2％二乙烯基苯和苯乙烯的共聚树脂上引入氯甲基,而后进行多肽合成,无疑聚苯乙烯共聚树脂本身的物化性质是起着一定的作用。它必须具有足够的机械强度,能经受碰撞、胀、缩和酸碱等苛刻条件,而此种树脂往往不能满足这些要求。几年来有许多工作者探索了一系列其它类型的聚合体,象大孔网格树脂等,关于这方面的资料已有综述     

β_2微球蛋白的固相放免测定

β_2微球蛋白(β_2mG)放射免疫测定方法已成为临床肾功能测定,预测肾移植成活的一种较可靠的灵敏指标。此法对某些肿瘤、免疫系统疾病、肝脏病诊断也有一定实用价值,因此在临床和科研中的应用日益广泛。固相放免分析法在国外已经成为很有前途的分析手段,有相当一部分检测RIA药盒由液相改为固相。本文将β_2mG固相测定和初步结果作一介绍。一、固相抗体包被利用国产塑料小珠,经简单处理后,将它浸泡于1∶10~3稀释度的β_2mG抗体IgG中,室温放置一天,4℃再放置2天;用PB缓冲液洗去     

稀有氨基酸的测定

<正> 本章讨论几种稀有氨基酸的测定。这些氨基酸在相当少的几种蛋白质中存在。它们的测定存在着特殊的困难或特性,然而,它们的测定方法对今后可能将是重要的。稀有氨基酸的测定蛋白质中除了已遇到的普通氨基酸外,还有许多非普通氨基酸存在,例如,这些非普     

麦苗中氨基酸测定与评价

用日立L-8800型氨基酸自动分析仪测定了麦苗中的氨基酸含量.结果表明麦苗中18种氨基酸总量、必需氨基酸及药效氨基酸含量较高,提示麦苗在营养学和医学上都有很高的研究价值.     

羊胎素中氨基酸测定与评价

用日立L-8800型氨基酸自动分析仪测定了羊胎素中的氨基酸含量。结果表明羊胎素中18种氨基酸总量、必需氨基酸及药效氨基酸含量较高,提示羊胎素在营养学和医学上都有很高的研究价值。     

蛋白质和多肽 C 端氨基酸序列研究进展

C 端序列测定长期以来是蛋白质化学领域中的一大难题,但是生物化学与分子生物学中的许多研究表明了 C 端序列的重要性.文中介绍了 C 端测定的一些最新技术,尤其侧重于化学降解法,特别是运用商品化的 N 端分析仪器分析 C 端序列,增强了仪器的通用性.文中还推荐了几种 C 端标记进而分离 C 端肽段,然后用 Edman化学法测定 C 端序列的简便方法,有一定的可行性.     

利用Dynabeads固相单链分离法直接测定PCR产物序列

用PCR方法扩增了低密度脂蛋白(LDL)受体基因外显子11-内含子11-外显子12片段,长约0.8kb。利用Dynabeads固相分离单链法测定了PCR产物序列,其中有105个碱基系第一次报道,结果证明:Dynabeads固相分离单链法是一种简便、可靠、快速的PCR产物测序法。     

氨基酸分离技术在测定氨基酸注射液中半胱氨酸衍生物(半胱磺酸)上的应用

<正> 引言近几年来,由国外进口及国内我公司生产的含有半胱氨酸这个成份的氨基酸注射液,由于半胱氨酸的存在使得在含量、检测上遇到一些麻烦,况且国内市售与进口的十八种水解氨基酸标准品中只含有胱氨酸,而无半胱氨酸这个成份,再者,一般常用的氨基酸分析仪只是带有UV 检测器的专用仪     

生物传感器测定氨基酸

<正> 前言利用酶只与特定的基质反应的作用分析特定基质开始于40年代,最近进展到利用微生物起源的各种酶的分析法。用这种酶选择性地分析复杂有机化合物已是可能,但需要高价酶,需要反应、显色、测定吸光度等烦杂操作,时间较长,期望一种只要把pH类电     

生物传感器测定氨基酸

<正> 前言利用酶只与特定的基质反应的作用分析特定基质开始于40年代,最近进展到利用微生物起源的各种酶的分析法。用这种酶选择性地分析复杂有机化合物已是可能,但需要高价酶,需要反应、显色、测定吸光度等烦杂操作,时间较长,期望一种只要把pH类电