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《生物技术通报》1993,(5)
931549利用毛细管系列电泳进~DNA.]II序[英3/Huang,X.C.…,Ahal.Chem.一1992,64(8)一.2149~2154[译自DBA,1992,11(23),92—12849] 一种DNA测序方法利用了毛细管系列电泳,双色荧光检测和双染料标记。在一系列毛细管上分离Sanger DNA测序片段,再用双色激光激发的confocal荧光扫描器进行桂上检测。在单个毛细管里分离出4套DNA测序片段,然后用双编码法进行区别,其中每套片段用两个有特定比率的染料标记的引物标记。这样就有可能筛选出电泳迁移率相同的染料l关键的是甩不同染料标记的DNA片段之间不应该出现电泳迁移的差异,而且染料具… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(6)
再于72℃下放置2.5分钟;用2种BLB引物对共扩增时,94℃1分钟(第一次循环3.5粉爹钟),在65922074利用pCR检测牛淋巴瘤中的牛白血病病那〔英〕/Rasmussen,H.B.…了Bioteeh。ForumEur一2991,s(9)一527~519〔译自DBA,1901,10(23),91一13308〕 利用聚合酶链反应(PCR)从含30只雌牛淋巴瘤样品的材料中将由牛白血病病毒(BLV)引起的肿瘤与其它病因的肿瘤区分开。设计了两种扩增DNA BLV一专性片段的引物对,还设计了第三种识别牛K一酪蛋白基因启动子区的引物对,以控制模板的质量。利用Taq DNA一聚合酶扩增DNA(0 .25件g),条件如下:用1种BLV… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923441利用PCR快速而生物学安全性地诊断非洲猪疽病毒〔英〕/Steiger,Y.…了J.Clin。Mierobiol。-1992,30(1)一i~s[译自DBA,1992,11 (5),92一02463〕 部分定序了非洲猪瘟病毒(ASFV)基因组保守区的740bp片段,设计并合成了4个PCR引物和1个寡核节酸DNA探针。利用寡核昔酸1和6为DNA引物、并利用来白下述样品的模板扩增了专性64obp PCR产物:受ASFV侵染的猪的器官和血浆;ASFV侵染的细胞培养物,含与原74obp克隆相同保守区的克隆的DNtA片段。对照无特殊反应产物。通过用巢状引物二次扩增或与专性生物素化寡核昔酸探针杂交确定PCR产… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(1)
940236在大肠杆菌中表达的脑膜炎双球菌运铁蛋白结合的蛋白一1是表面曝露的运铁蛋白并和人运铁蛋白结合〔英〕/Palmor,H.M.…/FEMS Mierobiol.Let七一1993,110(2)一139~146【译自DBA,1993,12(16),93一09208〕 在噬菌体补Zapll中建立了脑膜炎双球菌SD(B15pl.16)DNA的基因库,根据与运铁结合蛋白一1(TBP一1)的前21个N一末端氨基酸密码子为基础的63bp DNA探针杂交证明,含编码运铁结合蛋自DNA的克隆为一种疫苗候选物。含最天的插入片段 (2 2.3kb)的质粒pxl.6的定序证明,所有的基因间DNA(贯穿运铁结合蛋白一2基因3产端的tbp一1上游)… 相似文献
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北京油鸡MSAP毛细管电泳荧光检测技术的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
采用毛细管电泳荧光检测技术, 对北京油鸡肌肉组织基因组进行甲基化敏感扩增片段多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism, MSAP)检测。通过对基因组DNA用量、预扩产物稀释倍数、选择性引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和电泳内标量等6个主要参数进行分析和优化, 建立了适合北京油鸡基因组DNA甲基化分析的MSAP毛细管电泳荧光检测技术。重复实验表明, 建立的毛细管电泳荧光标记的MSAP检测技术能够自动地、高通量地分析北京油鸡基因组的DNA甲基化状态, 也适用于其他动植物基因组的DNA甲基化研究。 相似文献
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中华绒螯蟹两种微卫星DNA分型方法的应用比较 总被引：1，自引：0，他引：1
为对比荧光标记毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在微卫星等位基因分型上的效果,试验选择6对微卫星引物,对60个中华绒螯蟹个体基因组DNA进行PCR扩增,荧光标记法共检测出等位基因129个,平均每个位点21.5个等位变异,聚丙烯酰胺凝胶电泳共检测出等位基因174个,平均每个位点29个等位变异。对位点Esin67的PCR产物分别进行重复检测,发现荧光标记法的重复率为100%,而聚丙烯酰胺凝电泳法两次结果存在较大差异,证实了荧光标记法检测的可靠性显著高于聚丙烯酰胺凝胶电泳。对两种方法的检测效率和经济成本的分析表明,荧光标记法虽然成本较高,但效率高于聚丙烯酰胺凝胶电泳法。建立单重PCR的多重毛细管电泳技术是提高效率、降低成本的有效途径。 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920836用盆组聚合酶链反应构建小砚全长血型.蛋白签因〔英〕/Gu,H.一厂B ioehe皿.Biophys.Res.Commun一1991,177(i)一202~208〔译自})BA,1991,10(15),91一08450〕 分别从贫血小鼠脾基因库(质粒pBR322)和小鼠基因库(质粒pUC18)中分出小鼠血型搪蛋自一A基因不完全cDNA克隆(质粒pGP315)和基因组克隆(质粒pGX7,含第一个外显子和转录起始位点附近的序列),并定序。由于缺乏构建小鼠全长血型糖蛋白一A基因的限制位点,用聚合酶链反应拼接这两部分序列克隆擂人的成分,获得全长的重组DNA片段(IO53bp,含小鼠血型糖蛋白A eDNA)。用5种DNA… 相似文献
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程介克 《生物化学与生物物理进展》1995,22(3):223-227
高速DNA序列分析是人类基因组研究的关键技术．文章对高速DNA序列分析方法如阵列毛细管电泳、超薄层凝胶板电泳、质谱、杂交法、原子探针法、流动单分子荧光检测法等新进展进行了评论． 相似文献
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本研究采用毛细管电泳技术,构建并优化了荧光标记复合PCR同时扩增多个微卫星位点。主要过程为：首先根据设计所扩增微卫星位点的期望长度,将9个微卫星位点分成两组,5个位点用FAM（蓝色）标记,4个位点用HEX（绿色）标记;两种荧光类型分组优化,用琼脂糖胶电泳检测。其次,荧光标记的复合PCR扩增8个中华绒螯蟹样品的9个微卫星位点,采用ABI3730xl毛细管电泳检测,以ROX500（红色）为长度标准物,结果经Genemapper3.5软件 分析,检测结果表明毛细管电泳检测荧光标记复合PCR产物不仅精确读取微卫星位点的长度（分辨率高达1bp）,还能区分微卫星位点复制时滑链所引起的“回声斑”;调整各微卫星位点引物比列使所有位点扩增强弱均匀。最后,逐一检测复合PCR基本参数（dNTP浓度、 PCR程序和模版DNA用量）对复合PCR产物的影响,优化PCR。结果表明通过毛细管电泳检测荧光标记复合PCR产物来读取微卫星位点的基因型具有精确性、高效性和稳定性。 相似文献
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《生物技术通报》1993,(3)
950777用荧光标记的双脱曩桉苷酸终止片段对cosmid DNA进行自动定序和作圈[英]/Obermaier,B.…,BioTechniques.一1992,13(1).一46～47[译自DBA;1992,1l(17),92—09538] 本法使用的一种DNA自动定序仪。只用少量COSmid模板DNA来进行引物的平移,此时,按提供的核苷酸序列数据来合成弓I物,用其对较长序列做分段测定。不需标记gI物在一支管子里即可完成测序反应,而在6.5％PA.GE的单泳道中即能将反应产物分开。用酿酒酵母染色体一Ⅱ左端一个33kb区上.以10个不同的寡核苷酸引物进行lO次独立的定序反应,每个泳道的辨析度是280～340个核苷… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(5)
921758浦定苏云金芽抱杆菌的活生物t浓度〔俄〕/Mura-tov,V.S.…1 Mikrobiologiya一1901,60(3)。一546~551〔译自DBA,1091,10(21),91-12214〕 发展3一种用来测定苏云金芽抱杆菌(Ba成-Z妞。比。八:好e:就幻培养物细胞活力及优化培养基的方法。在复合培养基上培养该菌2个亚种de-“‘rol““5 49/7和K助,sta无￡Z一52。用苯胺蓝和荧光素染色,在荧光显微镜下检测细胞、抱子和晶体。在营养生长阶段,用两种染料所得结果相似,表明在此阶段基本无死细胞,在颗粒形成阶段,16~25%(菌株49/7)和10~25%(Z一52)的细胞无活力。还可测定此阶段(从颗粒中… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922864降解的PCR引物的一个简单有效的纯化方法〔英〕//Fekete,A.…1 Bioteehnol.Teeh一1901,5 (6)一479~452〔译自DBA,2992,11(3),92一01226〕 引物是在一20~一9。℃下贮存过程中降解的。在8%的琼脂糖凝胶将引物电泳,通过对凝胶进行槽切使主带电析出来。电泳和电洗脱过程只需45分钟。用这种装置也可对PCR样品作这类分析。用异丁醇提取再用乙醇沉淀来回收引物。产率为20~40%,在26Onm的吸收值与在280nm波长上吸收值比率大于1.8。这样纯化后可得到好的扩增效果。使用本法可使流产布氏杆菌(B,”ee乙la abo,‘咎s)519 DNA的一个607bp的… 相似文献
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《生物技术通报》1985,(6):4
852171 DNA片段链的分开及其从非变性聚丙烯酞胺凝胶中的分离〔英〕/James,R.…了Anal.Bioehem一1954,140(2)一456一458〔译自DBA,1984,3(21),84一09915〕 报道利用尿素和温和加热快速而定量地变性双链DNA(d sDNA)的一个技术。利用DNA聚合酶和适当的““PdNTP,通过填充反应将带有5产延长末端的DNA片段的3/末端加以标记,没结合的标记混合物通过SephadexG一50柱并用SDS一EDTA洗脱除去。标记的dSDNA加入固体尿素,65℃保温3分钟,接着在上聚丙烯酸胺凝胶前快速冷却变性。变性的互补DNA链在丙烯酞胺与双丙烯酸胺比率为60,1的非变… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923843RFLP在分析桃遗传连锁图谱中的应用〔英〕/Eld-redge,L.…f Hortseienee一1992,27(2)一160一163〔译自DBA,1992,11(9),92-05149〕 利用桃(P,“:。s尹ers云ca)作为模型植物,借助于RFLP研究了桃的基因组组成。从其各个品种叶组织分离出基因组DNA,用之构建基因库。再用携带着存在于基因组内特定位点的DNA序列的DNA探针筛选RFLP“。初步结果表明,60%的克隆DNA以低拷贝数存在于桃基因组内。对其序列进行筛选和鉴定后,发现存在多态现象,这足以制备RFLP图谱。在各个桃品种中约33%cDNA克隆和20%基因组克隆出现RFLP。两个家系… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
881187 OganomyeinE的生产方法〔专,英〕/Abe,M.…了European Patent Appl.EP 0226636 Pub 01.0遵.87,Appl.JP21一386/85,filed 24.09 .85〔译自CBA,1 987,(6),2577〕 通过一种醋酶的作用,从头霉素化合物中生产oganomycinE。头霉素可由细菌就地提供。酉旨酶活性由酵母菌提供。球拟酵母(ToruloPsl’s) YE一08叨7L株是一种具醋酶活性特点的代表株。(戴顺志)881188生理活性物质FO一8洲及其制备方法仁专,英〕/Mizoue,K.…了EuropeanPatent Appl EP 0216607.Pub.01.04.87.Appl.JP 205278/85,filed 19.09.85〔译自CBA,1987,(6),25… 相似文献