HIV感染检测技术的研究进展

ＨＩＶ感染的检测是防治艾滋病和控制其传播的重要手段。本文综述了从宿主标本中直接检测到病毒本身的ＰＣＲ技术的抗原检测,以及抗ＨＩＶ检测技术的应用情况及优缺点,并结合自己的工作实际对ＨＩＶ感染检测技术的选择使用进行评述     

艾滋病病毒抗体检测初筛实验室室内质量控制措施探微

目的:为提高艾滋病病毒抗体初筛检测实验精度,降低误检或漏检率,提高检测工作质量。方法:我实验室严格按照《艾滋病检测质量管理工作指南》开展艾滋病病毒抗体初筛检测实验。结果:艾滋病病毒抗体初筛检测结果准确性符合标准,工作质量得到提高。结论:必须关注影响艾滋病初筛检测结果准确性的因素,采取有效的实验室室内质量控制措施,从而提高实验室检测水平及工作能力。     

一些新的艾滋病(AIDS)抗体试验可预测病程减少误诊

有些公司打算做一些可直接检测艾滋病(AIDS)病毒的试验,虽然在目前进行的对于检测AIDS病毒抗体的试验取得了一定进展。例如,Bio-Rad Laboratories公司(里士满,加利福尼亚州)已向美国食品及药物管理局提出一项以改进Western blot技术为基础的试验申请。据该公司报道,这项新试验(不同于目前一些试验)似乎可以区别那些有艾滋病或将发展成艾滋病以及哪些已发现有艾滋病但仍健康的人的体内的各种抗体类型之间的差异。     

Innogenetics公司的诊断目标—艾滋病、心脏病和阿尔茨海默氏病

Innogeneties公司(比利时根持)刚引进了一项检测艾滋病的新检测技术,以便同Western印迹检测法竞争,签订了一份诊断心血管疾病的市场协议;还与山内药品有限公司(日本东京)签订了两项R-D合作协议,内容涉及阿尔茨海默氏病和动脉粥样硬化的诊断和市场。以rDNA抗原为基础的艾滋病试验可以同时区分HIV-1和HIV-2。该试验主要用作确诊试验、紧急试验或用于小实验室中。该试验利用了艾滋病病毒的外壳和核心,可用肉眼读数,比Western印迹试验更好解释。这个名叫INNO-LIAHIV的试验将被提交到今年6月在加拿大蒙特利尔举行的国际艾滋病会议上首次发表。     

输血相关HIV感染实验室检测技术进展

开展有效的HIV检测能够控制输血传播HIV,阻断其传播途径,同时有助于确保临床输血安全.输血相关人类免疫缺陷病毒检测技术包括抗原、抗体检测和核酸检测等,抗体检测以酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验为主要方法,辅以P24抗原和核酸检测技术检测以降低人类免疫缺陷病毒窗口期传播的残余危险度.而输血相关艾滋病的实际发生的程度取决于人群中感染人数的比例和献血者筛检工作的有效性.     

抗HIV-p24单克隆抗体细胞株的建立及初步应用

拟建立抗HIV-P24蛋白的单克隆抗体细胞株及双抗体夹心法,用于检测艾滋病人血清中的P24抗原。用纯化的基因工程表达的HIV-P24蛋白免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0的细胞融合,有限稀释法克隆细胞,ELISA筛选特异性抗体。结果克隆筛选出12株细胞,初步建立了检测HIV-P24抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验。本方法为监控艾滋病病毒感染的窗口期和艾滋病病人临床治疗效果提供了检测手段。     

艾滋病病毒蛋白酶高效表达载体及体外活性检测系统的构建

艾滋病是本世纪80年代初发现的一种烈性传染病,5年病死率为100％,致病因子为人免疫缺陷病毒,该病毒的蛋白酶在病毒复制和成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶的高效表达的重组子及活性检测系统,限制了它的研究与应用。本文利用PCR技术修饰了艾滋病病毒蛋白酶的基因,使其具有便于克隆及表达用的限制酶切位点及转录终止码,井在其C末端设置了一个可用于检验该酶活性的特殊序列。DNA序列分析揭示上述突变策略成功,将修饰后的艾滋病病毒蛋白酶基因克隆入大肠杆菌表达系统,并获得高效表达(>30％),Western-Bolt鉴定结果表明所表达的蛋白为艾滋病病毒所特有,并具有较好的生物活性。     

白假丝酵母检测的研究进展

白念菌病已成为艾滋病等免疫功能低下患者的严重并发症和直接致死原因,是医源性感染的常见病之一,其早期诊断与防治是目前重要的研究课题。本文综述了近年来该菌免疫学及分子生物学检测技术试验与应用的研究进展。     

艾滋病病毒蛋白酶高效表达载体及体外活性检测系统的构建

艾滋病是本世纪８０年代初发现的一种烈性传染病,５年病死率为１００％,致病因子为人免疫缺陷病毒,该病毒的蛋白酶在病毒复制在成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶的高效表达的重组子及活性检测系统,限制了它的研究与应用。本文利用ＰＣＲ技术修饰了艾滋病病毒蛋白酶的基因,使其具有便于克隆及表达用的限制酶切位点及转录终止码,并在其Ｃ末端设置了一个可用于检验该酶活性的特殊序列。ＤＮＡ序列     

广州地区艾滋病患者中人类疱疹病毒8感染及部分序列的检测

检测广州地区艾滋病患者中人类疱疹病毒8(HHV-8)的感染状况并完成部分序列的测序,从而了解HHV-8感染相关的Kaposi’s肉瘤在本地区艾滋患者中可能的罹患风险,并初步探讨HHV-8在本地区是否存在基因序列的变异。使用n-PCR法检测患者唾液中的HHV-8 DNA,PCR产物经ABI3100系统直接测序。结果显示在广州地区艾滋病患者中唾液HHV-8 DNA阳性率为20.0%,而在作为对照的健康组的阳性率为0.0%,艾滋病患者组与健康对照组间具非常显著性差异;检测的部分碱基序列未发现变异。提示在广州地区的艾滋病患者中存在较高的HHV-8感染。     

试剂盒半小时擒获艾滋病毒

上海科华生物工程股份有限公司研发出一种艾滋病诊断试剂盒,只需一滴血加上少量药水,半小时内就能检测出血液中是否有艾滋病病毒。近日,该试剂盒被克林顿基金会确定为其在全球的艾滋病诊断系统四大供应商之一。通过这一渠道,科华公司的艾滋病抗体诊断试剂盒将大批量出口到亚非拉及欧洲部分地区。而在此次人选克林顿基金会的4家诊断系统供应商中,该试剂盒的表现优于美国、以色列和印度公司。     

实验动物血液及精液感染弓形虫动态研究

采用荧光定量PCR技术对实验动物家兔血液及精液感染弓形虫DNA检测实验及动态变化研究,阐明了弓形虫感染的发展和转归机理,为了解弓形虫与宿主动态关系,弓形虫经血液、精液传播提供理论依据.对性传播疾病、特别是艾滋病的预防提供重要参考价值.     

一种新型疱疹病毒：卡波济肉瘤相关性疱疹病毒或人类疱疹病毒8型

１９９４年从艾滋病相关的卡波济肉瘤（ＫＳ）病灶中发现了特异的疱疹病毒样ＤＮＡ序列，与γ疱疹病毒亚科核壳和包膜蛋白编码基因有相当程度的同源性。随后建立了检测该基因的多聚酶链反应（ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法，从各种类型的ＫＳ组织中检荻该基因，故认为是ＫＳ致病的相关因子。但从无ＫＳ的艾滋病、非艾滋病的免疫缺陷病人的Ｂ细胞淋巴瘤、淋巴结及外周血单个核细胞中也检测到该病毒基因的存在，因此称之为人类疱疹     

面临血液不足的危机 新技术陆续登场

为了应付血液制剂中可能存在的病原体,日本引进了”NAT”技术,这种技术的灵敏度很高,即使几个拷贝的病毒也能够被检测出来,也可以用来进行艾滋病病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）和乙型肝炎病毒（HBV）的检查。由于NAT的威力强大．使得日本近几年来由于输血引起的感染事故大大减少,只发生了十几起。     

HIV试验查出抗体血液筛选中未检测出的感染样品

美国食物和药物管理局(FDA)对于防治艾滋病药物的申请,反应越来越快,而且为它们的批准进行疏通工作。可是,最近美国Abbott公司研制了一种新的检测艾滋病的试剂。证明现有的一些血液筛选方法存在着某些缺点,这必将使FDA受到更大的舆论压力。 Abbott公司的这个产品正作为诊断试剂报批,它能够检查一种艾滋病抗原p24。这种抗原在感染约两周后和在显示抗体前两周在血中出现。由Abbott公司的Swsan Stramer领导的研究小组在最近的一项研究中检测了7个人的血浆。用现在一般血库采用的筛     

合肥市蜀山区206例艾滋病高危人群HIV、HCV感染情况调查

目的了解合肥市蜀山区艾滋病高危人群中人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染情况,为艾滋病高危人群疾病防治工作提供依据。方法采集合肥市蜀山区206例艾滋病高危人群血清样本,分别运用金标法和酶联免疫吸附法(ELISA)进行HIV抗体、HCV抗体检测。HIV抗体筛查结果阳性或一阴一阳标本再经蛋白印迹法(WB)确证阳性为最终结果,并对结果和不同人群、年龄、性别的感染情况进行统计分析。结果在206份血清样本中检出HIV抗体阳性17例,阳性率为8.73%;检出HCV抗体阳性21例,阳性率10.19%。合并感染病例2例,占0.97%。结论检测结果提示,在高危人群中存在HIV/HCV流行和传播的风险,因此应持续加强高危人群的监测,有效阻止艾滋病和丙型肝炎的流行和蔓延。     

我国研制出第三代艾滋病病毒抗体诊断试剂盒

华美生物工程公司郑州分公司最近研制成功第三代艾滋病病毒抗体诊断试剂盒.只需将血滴在试剂盒内就能立刻查出是否感染有艾滋病病毒,并能检测出血液中的5种抗体.     

酶联免疫与胶体金法检测艾滋抗体的效果观察

目的:探讨酶联免疫与胶体金法检测艾滋抗体的检测效果。方法:随机选取2011年1月~2012年1月我院收治及住院的患者1020例,对患者采用酶联免疫与胶体金法的检测方法检测艾滋抗体,观察对比两种检测方法的检测效果。结果:通过对检测效果的观察比较,可得酶联免疫法检测艾滋抗体的检测率为3.47%,胶体金法检测艾滋抗体的检测率为3.57%,两种方法的检测结果比较无显著差异性,无统计学意义(P0.05)。结论:采用酶联免疫与胶体金法检测艾滋抗体均具有良好的检测效果,可以准确、直观的检测出艾滋病病毒,可为艾滋病的诊断、预防和治疗提供参考依据,具有重要的临床价值,值得推广和应用于临床。     

科技信息

荧光定量PCR技术是一种先进的定量核酸检测分子诊断技术,在西方国家广泛用于乙肝HBV,丙肝HCV,艾滋病HIV,性病STD等传染病及肿瘤性疾病快速早期诊断,并作为一种先进手段用于多种生物学及医学研究,在我国现行禽流感诊断国家标准中也规定了要用该方法检测核酸确诊。荧光定量基因扩增PCR检测系统是实现荧光定量PCR技术的核心设备,目前国内主要依赖进口,价格大约是普通PCR仪的十倍。西安天隆科技有限公司通过与西安交通大学教育部生物医学信息工程重点实验室生物医学及分子光子学中心产学研结合,自主研发的荧光定量基因扩增PCR检测系…     

市场上艾滋病检测试剂的竞争

众多的公司不断地拥进日益拥挤的艾滋病检测试剂的市场。美国 Eastman kodak 公司是新近最大的加入者,它的临床产品部将销售由 Cellular Products 有限公司制造的艾滋病诊断药盒。这一试验技术是一种利用抗病毒的抗体的酶标记免疫吸附测定法(ELISA)。Kodak 公司计划以每份1～1.50美元的价格销售这些药盒(每份可作178个或534个试验。)去年秋天,Cellular Products 公司得到美国食品及药物管理局(FDA)批准,允许把这些药盒投放市场的。