花烛胚性悬浮细胞玻璃化超低温保存条件研究

为建立适宜的花烛(Anthurium andraeanum Lind. )胚性悬浮细胞玻璃化超低温保存技术,采用单因素实验方法对影响玻璃化超低温保存后细胞相对存活率的主要因素进行了研究.结果表明,经玻璃化超低温保存后花烛悬浮细胞的相对存活率与悬浮细胞的继代培养时间、渗透调节剂的种类和浓度及预培养时间、装载液种类和预处理时间、PVS2脱水时间以及超低温保存后的化冻温度均有一定的关系.继代培养3和5 d,细胞的相对存活率较高(约20%);分别以0.3、0.5、0.7 mol·L-1山梨醇和60、80、100、120 g·L-1蔗糖为渗透调节剂预培养0～4 d,以0.5 mol·L-1山梨醇预培养2 d的效果最好,细胞的相对存活率为26.2%;用体积分数25%PVS2预处理15 min,细胞的相对存活率最高(29.0%);分别用体积分数100%PVS2脱水0、5、10、15、20、25和30 min,其中脱水10 min的悬浮细胞相对存活率最高(32.1%);分别在10 ℃、20 ℃、30 ℃、40 ℃、50 ℃和60 ℃水浴条件下进行化冻处理,其中用40 ℃水浴化冻的悬浮细胞相对存活率最高(32.1%).花烛胚性悬浮细胞玻璃化超低温保存和化冻的适宜流程为:将继代培养3～5 d的胚性悬浮细胞团(直径2 mm)在含0.5 mol·L-1山梨醇的1/2MS液体培养基中预培养2 d后,于4 ℃条件下处理24 h,然后先用体积分数25%PVS2室温预处理15 min,再用体积分数100%PVS2 在0 ℃条件下脱水10 min,最后迅速投入液氮中冷冻保存;将经过冷冻保存的细胞置于40 ℃水浴中化冻3 min,用含1.2 mol·L-1蔗糖的1/2MS液体培养基洗涤3次(每次10 min),之后即可进行恢复培养.     

卵叶泥炭藓茎尖包埋玻璃化法超低温保存研究

该研究通过对脱水时间和化冻温度的探索,检验了包埋玻璃化法在超低温保存湿润生境中苔藓的可能性。结果表明:卵叶泥炭藓无菌苗在4℃条件下预培养3d后,在0℃用60% PVS_2装载30min,PVS_2脱水60min后迅速投入液氮保存,24h后用40℃水浴快速化冻2min再培养,成活率可达42.41%,且再生植株与常温状态下的植株形态指标没有显著性差异。研究认为,包埋玻璃化法超低温保存湿润环境中生长的苔藓植物是可行的。     

牡丹籽油精炼工艺技术研究

为提高牡丹籽油的油脂品质,采用脱胶、脱酸、脱色三种工艺方法,先后通过单因素实验、正交实验得出精炼牡丹籽毛油最佳的工艺条件。脱胶:柠檬酸量为0.2%,蒸馏水为3%,温度为70℃,时间为25 min;脱酸:温度为65℃,超碱量为0.2%,碱液浓度为11%,时间为40 min;脱色:脱色剂种类为活性白土,脱色剂用量为5%,温度为65℃,时间为35 min。最终得到的籽油质量采用国标法检测后,牡丹籽精炼油的过氧化值、酸价、碘值、磷脂含量均大幅下降,牡丹籽油的品质达到一级食用油的国家标准。     

星油藤种子萌发的生态学特性研究

对星油藤(Plukenetia volubilis L.)成熟种子特征及影响种子萌发的因素进行了研究。结果表明,星油藤种子的萌发对温度非常敏感,低温(15℃)下种子的萌发率极低;在25℃~35℃的适宜温度下,2周内种子全部萌发,25℃/15℃的变温没有显著提高种子的萌发率。光照不是星油藤种子萌发的必要条件,但能使种子在变温条件下萌发率降低。种子经极度脱水(1.55%)和液氮处理24 h后,在合适温度(30℃)下仍能全部萌发。常温环境(25℃~35℃,适宜水分)下星油藤种子就可以非常好地萌发,这也是原产地热带雨林林下幼苗更新良好的原因,因此,星油藤适宜采用种子育苗。     

假槟榔种子脱水耐性的发育变化

对假槟榔（Archontophoenix alexandrae）种子和胚发育过程中脱水耐性的变化、不同脱水速率对脱水耐性的影响及种子的萌发和贮藏特性进行了研究。种子含水量在花后55～70d逐步降低,随后不再变化,并保持在较高水平（37％）;花后90d的种子获得最大干重。花后60d后种子获得萌发能力,花后70d达到最大值。在交替光照下（14h光照,10h黑暗,12μnmol m^-2s^-1）,种子在15℃～40℃下均能萌发,其萌发的适宜温度范围为30℃～35℃;但光照对种子的萌发有较大的抑制作用。种子和胚在花后55～90d,脱水耐性逐渐增强;花后90d种子和胚的脱水耐性最强,此时种子和胚的半致死含水量分别为0．18g／g和0．3g／g。脱水至相同含水量,快速脱水的种子的存活率明显高于慢速脱水。无论是否进行脱水处理,-18℃下贮藏1个月后,种子均丧失萌发能力;在4℃,10℃和15℃下,适度脱水能延长种子的贮藏寿命。假槟榔种子不耐脱水,不适合在低温、低含水量条件下长期贮藏,属顽拗性种子。     

脱水速率和降温速率对葡萄柚种子超低温保存的影响

以新鲜葡萄柚(Citrus paradise)种子为材料,使用3种脱水速率处理至约20%含水量,然后用饱和盐溶液平衡至10种不同的含水量,再进行简化的二步法超低温保存;同时,以经过15 ℃、50%相对湿度(RH)条件脱水至含水量约12%的葡萄柚种子为材料,使用程序降温仪进行5个降温速率和3个预冷温度的传统二步法超低温保存。结果表明,葡萄柚种子对脱水敏感,种子含水量越低,成苗率越低。而且,脱水速率越快,对种子的损伤越大,成苗率呈现75% RH>50% RH>15% RH;冷冻处理对种子有进一步的伤害,含水量6%～8%的种子超低温保存效果最佳,但脱水速率对超低温保存的种子成苗率的影响不明显。用传统二步法超低温保存葡萄柚种子,与预冷对照相比,经液氮冷冻的种子成苗率都有明显下降。在预冷对照组中,-2.5 ℃·min^-1降温速率的种子成苗率最高,在冷冻保存中-0.5 ℃·min^-1和-0.25 ℃·min^-1的降温速率最有利于超低温保存。预冷温度从-40 ℃降至-60 ℃,未超低温处理种子的发芽率降低,但超低温处理种子的发芽率提高。     

泽泻的组织培养和快速繁殖

1植物名称泽泻(Alisma orientalis). 2材料类别种子萌发的无菌苗茎尖. 3培养条件(1)种子萌发培养基:MS;(2)不定芽诱导和增殖培养基:MS 6-BA 2.0 mg·L-1(单位下同) KT 0.5 IAA 0.2;(3)壮苗与生根培养基:MS 6-BA 0.1 NAA 0.8.培养基(1)～(3)附加3%蔗糖、0.7%琼脂,pH 5.8～6.0,在121℃下高压灭菌15 min.培养温度为25～28℃,光照时间10h·d-1,光照度为1500 lx.     

添加秸秆和生物炭土壤N2O排放对温度的响应

为探讨添加秸秆和生物炭土壤N₂O排放对温度的响应,利用室内培养试验,研究CK(不施秸秆和生物炭)、LC(1%生物炭)、HC(2%生物炭)和HS(2.75%秸秆)4个处理分别在10℃(T1)、20℃(T2)和30℃(T3)3个培养温度下的N₂O排放。随培养温度升高,CK、LC、HC和HS处理的土壤NH₄⁺-N含量降低,NO₃^--N含量升高。相同温度下,添加不同物料的土壤铵态氮浓度表现为CK>LC>HC>HS,硝态氮含量表现为HC>LC>CK>HS。不同温度下,添加不同物料的土壤N₂O排放差异较大。随着温度的升高(T1～T3),CK、LC、HC和HS处理土壤N₂O累积排放量分别升高了46.49%～412.81%、64.69%～456.55%、7.42%～145.96%和105.91%～1421.66%。T3时,生物炭添加越多对土壤N₂O排放的抑制作用越明显,L...     

不同温度段核桃壳木醋液的组分分析及生物活性研究

以核桃壳为材料,根据木材裂解规律、不同温度段木醋液得率和颜色的不同,收集精制得90℃～190℃(K1)、190℃～300℃(K2)、300℃～480℃(K3)及90℃～480℃(K)温度段木醋液。采用种子萌发法对精制后各木醋液进行生物活性测定,GC-MS测定脱水后的K1、K2和K3中有机组分,并利用核磁共振技术对其中的主要成分进行验证。结果显示:不同温度段木醋液含有的有机组分不同,含量差别大。K1、K2和K3分别检出13种、42种和37种物质,11种共有物质的相对总含量分别为76.38%、59.83%和57.08%,其中乙酸的相对含量随收集温度的升高逐渐减少。种子萌发试验表明,K1稀释1 000倍、K2稀释25 000倍时,对小麦根、苗生长和干物质的积累有显著促进作用,K和K3在供试范围对苗长、根长和干重都呈不同程度的抑制作用。     

包埋-玻璃化法冷冻保存湛江等鞭金藻的研究

采用包埋-玻璃化法冷冻保存湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis),探讨了装载液成分和浓度、装载时间、脱水时间、洗涤液浓度及洗涤时间对超低温保存后存活率的影响。结果表明在20℃50%PVS(PVS:30%甘油(GLY) 20%乙二醇(EG) 10%二甲基亚砜(DMSO),用f/2培养基定容)装载4.5h,0℃100%PVS脱水50min,冻存24h后取出冻存管并迅速投入40℃恒温水浴中快速化冻约3min,1.0mol/L山梨醇洗涤40min条件下,湛江等鞭金藻的存活率最高,为54%。与常规的两步法和包埋脱水法相比,包埋-玻璃化法简单、快速且存活率高,在藻类种质保存中有广阔的应用前景。