豌豆组织培养中器官的分化生长过氧化物酶同工酶及核酸含量的变化

在豌豆的离体组织中比较研究了培养基中不同浓度的氮源、蔗糖和细胞激动素(BA)对于培养组织的生长、过氧化物酶同工酶及核酸含量的影响。试验结果表明,培养基中上述因素的变化对外植体芽苗的分化生长有明显影响。在氮源(总氮量、NO_3~-和NH_4~ 的不同比例)、蔗糖浓度和激素水平都适宜时最有利于培养组织的细胞生长与分化。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离培养组织过氧化物酶同工酶的结果表明,过氧化物酶同工酶带数与外植体的生长速度有密切关系,亦即外植体的过氧化物酶同工酶带与外植体的生长速度呈正相关趋势。核酸含量的变化得到了相应结果。     

草木樨状黄芪抗甲硫氨酸变异系的离体筛选及鉴定

通过组织培养体系进行了草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides Pall.)抗甲硫氨酸变异系的筛选。无菌苗幼茎切段诱导的愈伤组织经NaN3诱变后,经过筛选获得了抗14mmol/L甲硫氨酸的变异细胞系,并分化出大量植株。再生植株已经在大田中开花结实。经分析表明：抗性细胞系脱离选择压6个月后,放在含15mmol/L甲硫氨酸的培养基上培养25天后,其相对增长率是对照的10．2倍。抗性系再生植株游离甲硫氨酸是对照的2．12倍,并且天冬族氨基酸都有明显增加。SDS-PAGE及过氧化物酶同工酶分析表明：在蛋白质及同工酶酶谱上抗性系再生植株均出现与对照不同的差异。     

草木樨状黄芪抗甲硫氨酸变异系的离体筛选及鉴定

通过组织培养体系进行了草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides Pall.)抗甲硫氨酸变异系的筛选。无菌苗幼茎切段诱导的愈伤组织经NaN_3诱变后,经过筛选获得了抗14mmol/L甲硫氨酸的变异细胞系,并分化出大量植株。再生植株已经在大田中开花结实。经分析表明:抗性细胞系脱离选择压6个月后,放在含15mmol/L甲硫氨酸的培养基上培养25天后,其相对增长率是对照的10.2倍。抗性系再生植株游离甲硫氨酸是对照的2.12倍,并且天冬族氨基酸都有明显增加。SDS-PAGE及过氧化物酶同工酶分析表明:在蛋白质及同工酶酶谱上抗性系再生植株均出现与对照不同的差异。     

红花的愈伤组织诱导及其与过氧化物酶和酯酶同工酶的关系

红花外植体培养于附加不同激素的 MS培养基中,根、胚轴、子叶均可大量形成愈伤组织和根。5个红花品种间过氧化物酶和酯酶同工酶酶谱的差异小于不同器官间的差异。随外植体子叶脱分化过程的进行,过氧化物酶同工酶酶带逐渐增多,而酯酶同工酶酶带则逐渐减少,并出现特异的诱导酶带。     

几丁质酶基因转化亚麻、红豆草、骆驼刺的同工酶研究

以亚麻、红豆草、骆驼刺的下胚轴为外植体,用含几丁质酶ＲＣ２４基因的根瘤农杆菌ＬＢＡ４４０４进行转化。对３种植物转化植株叶片及对照植株叶片的愈伤组织的过氧化物酶及酯酶同工酶分析表明,转基因植株叶片愈伤组织的同工酶谱与对照系相比具有明显的差异,由此推测转化系愈伤组织中可能存在变化了的基因产物,并认为导入的外源几丁质酶基因可能引起了转化材料的遗传变异。     

杨树花药培养筛选耐盐变异体的研究

以杨树花药为外植体诱导单倍体愈伤组织,进行耐氯化钠和碱性盐（模仿天然盐碱土成份配成的几种盐的混合物）变异体的筛选。结果表明,不同的杨树品种对这两种选择剂的耐性是不同的,分化态愈伤组织比脱分化态愈伤组织显示更强的抗性,不同的花氏愈伤组织无性系间在抗盐能力上也存在差异,对再生植株的叶子和愈伤组织进行过氧化物同工酶分析,发现耐盐变异体与对照的酶谱是有差异的,前者比后者在相同带区常常多出一条谱带。     

裂叶悬钩子组织培养研究——Ⅱ叶外植体培养不定芽发生过程中过氧化物酶同工酶的研究

本文在裂叶悬钩子的叶外植体培养不定芽发生的基础上,利用圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了其细胞分化过程中过氧化物酶同工酶的变化。实验指出:在有6-BA或2.4-D与NAA组合的培养条件下,随着培养时间和分化进程不同,过氧化物酶同工酶有变化,谱带由4条增加到8条,酶的活力分别由△0.24 OD/min提高到△1.82OD/min和△1.90 OD/min。在无外源激素条件下,过氧化物酶同工酶的变化不大,酶的活力也低,因而,叶外植体组织细胞也不能分化成植株。本文还从分子水平上探讨了酶和基因与细胞分化的关系。     

^60Co-γ和Ar^＋处理对小麦的诱变效应及POD同工酶分析

用60Co-γ射线和Ar 诱变小麦的干种子。结果表明,经60Co-γ辐射的8个品种(系)M1代,生育期延迟;7个品种(系)出苗率、成苗率、单株越冬蘖、单株最高蘖、单株产量均显著降低,但成穗率显著提高;千粒重5个品种(系)显著提高,3个品种(系)显著降低。M2代4个品种(系)发生株高、穗型、熟期、抗赤霉变异。经Ar 注入的8个品种(系)M1代,3个品种(系)处理的出苗率显著低于对照,处理的单株越冬蘖、单株最高蘖、株高、穗长、小穗数、千粒重均与对照差异不显著,成穗率3个品种(系)处理显著高于对照,1个品系显著低于对照,2个品种(系)的单株产量显著低于对照;M2代1个品系发现穗型、株高均变异的植株。60Co-γ射线和Ar 可诱发部分小麦品种M1代POD同工酶的表达量和酶谱变异,M3代部分变异株POD同工酶表达量和酶谱也发生了变化。     

甘蔗过氧化物酶同工酶分析

以３０个甘蔗品种为材料,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析甘蔗不同生长时期过氧化物酶同工酶。个别品种还进行同一品种在不同种植地区、同一植株不同叶位的同工酶酶谱比较,结果表明,不同品种的酶谱其酶带分布有明显的区别,但同一品种在不同种植地区、不同生长时期、不同植株、同一植株不同叶位其酶带分布无差异,体现了同工酶作为品种标记具有多态性及稳定性。用单一酶系即可准确、方便地鉴定甘蔗品种。     

60Coγ射线对广藿香的辐照诱变及再生植株的RAPD分析

探讨60Coγ射线辐照对广藿香外植体离体再生的影响及再生植株的诱变效应.采用60Coγ射线辐照广藿香外植体,考察辐照对外植体离体再生的影响,并观察再生植株的形态变异;同时采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析诱变再生植株的变异情况.广藿香外植体的存活率和外植体再生芽的能力,随着辐照剂量的升高而降低;部分再生植株在形态上发生一些变化;RAPD分析表明,4个辐照剂量的外植体再生植株多态性频率分别为39.13%、36.37%、23.09%及33.33%.60Coγ射线辐射会造成外植体存活率和再生芽能力的下降,辐照外植体培养获得的再生植株,在表型性状及分子水平上出现了一定的分离,为将辐照诱变技术应用于广藿香育种提供了依据.     

安南龟冬眠前后酯酶同工酶的比较研究

应用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对安南龟冬眠前后心、肝、脾、肺、肾、胃、骨骼肌7种器官组织进行了酯酶同工酶的检测.结果表明,安南龟不同器官组织的酯酶同工酶酶谱有明显差异,反映了酯酶同工酶的器官组织特异性;同一器官组织在冬眠前后其酶谱也出现明显的变化,反映了安南龟冬眠前后代谢过程和代谢水平的不同.     

黑小麦与普通小麦过氧化物酶和蛋白质的比较研究

以小麦作对照．系统研究了2种黑小麦幼苗生长过程中过氧化物酶(POD)活性的变化．同时利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对2种黑小麦的幼苗生长不同时期根、芽的过氧化物酶同工酶及其蛋白质进行了分离分析。结果显示：黑小麦POD酶活性高于小麦。黑小麦POD同工酶谱与小麦差异明显．且在幼苗生长不同时期变化显著。幼根与幼芽中可溶性蛋白的合成动态具有明显差异。     

甘蔗过氧化物酶同工酶分析

以30个甘蔗品种为材料,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析甘蔗不同生长时期过氧化物酶同工酶。个别品种还进行同一品种在不同种植地区、同一植株不同叶位的同工酶酶谱比较,结果表明,不同品种的酶谱其酶带分布有明显的区别,但同一品种在不同种植地区、不同生长时期、不同植抹、同一植株不同叶位其酶带分布无差异,体现了同工酶作为品种标记具有多态性及稳定性。用单一酶系即可准确、方便地鉴定甘蔗品种。     

芦苇胚性愈伤组织的形成及植株的再生

以芦苇种子为外植体,其愈伤组织的诱导率最高。叶鞘和叶片不发生脱分化。培养基中最合适的蔗糖浓度为4%。维生素 B 类、肌醇对愈伤组织的生长起促进作用。而酵母提取物对愈伤组织的诱导和生长具有明显的抑制作用。这种抑制效应,将随酵母提取物浓度的提高而增大。愈伤组织的继代培养,随培养基中2,4-D 浓度的提高,其平均鲜重明显降低。脱分化培养基中2,4-D 浓度对胚性愈伤组织的诱导形成具有一定的相关性。胚性愈伤组织经30代继代培养依然具有90%的分化频率,只是每块愈伤组织的分化苗数减少。反之,非胚性愈伤组织则完全丧失形态发生的能力。对两类愈伤组织进行扫描电镜的观察,发现其表面结构有很大差异。其过氧化物酶、酯酶同工酶谱以及可溶性蛋白的含量均有明显的差别。     

苜蓿抗甲硫氨酸变异体的筛选

紫花苜蓿(Medicago sativa L.)下胚轴愈伤组织用NaN_3溶液诱变处理后,在含有全致死浓度甲硫氨酸的MS培养基上进行了6个月的连续筛选培养,获得了能抗100mmol/L甲硫氨酸的变异细胞系,并分化成再生植株。所获变异细胞系在脱离选择压力6个月后,对甲硫氨酸的抗性仍比对照高7.2倍,并表现出对乙硫氨酸的交叉抗性(为对照抗性的3.3倍)。抗性细胞系及其再生植株的甲硫氨酸、赖氨酸、苏氨酸和异亮氨酸含量均比对照有大幅度增加。抗性系的SDS-PAGE电泳图谱及过氧化物酶同工酶谱带均与对照有显著不同,并出现了新带,表明变异系已经产生变化了的基因产物。     

植物激素对苧麻茎、叶外植体器官分化的影响

我们曾简单报道过苧麻茎、叶外植体诱导出完整植株的初步结果。为进一步完善苧麻组织培养技术,最近研究了七种植物激素不同浓度和各种组合及一些内外因素对茎、叶外植体器官分化的影响,并对器官分化过程中过氧化物酶同工酶谱作了初步分析。     

甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

白杄体细胞胚胎发生过程中过氧化物酶及酯酶同工酶的研究

同工酶的多种分子形式的时间特异性和组织特异性在植物中普遍存在,植物体内各种酶的同工酶酶谱随着细胞分化、组织器官及植株的生长、成熟而发生规律性的变化。这种变化在一定程度上反映了植物在发育过程中基因表达的时空顺序性,因而同工酶的酶谱特征可以作为植物组织培...     

2,4-D浓度对胡萝卜体细胞胚胎发生及其同工酶的影响

在含有不同浓度2,4-D的MS培养基上生长的胡萝卜组织,培养26天后,不含2,4-D培养基上的培养物,其酯酶同工酶谱比在含有2,4-D培养基上的培养物少一条酶带8(图3)。过氧化物酶同工酶谱中,发现前者出现的酶带1(图4)在后者的酶谱中看不到。 胡萝卜的培养组织和完整的小植物皆具有分泌过氧化物酶和酯酶的能力。总过氧化物酶活力的变化与愈伤组织、胚状体和小植物的形成有一定关系。