中亚林蛙的核型、C带和银带研究及田野林蛙起源的探讨

中亚林蛙（Rana asiatica）的核型为2n=26,NF=52。第2号染色体短臂有一条近端着丝粒区C带。第10号染色体长臂上有一对标准NORs。本文认为,田野林蛙（Rana arvalis）起源于欧洲,是欧洲林蛙群与亚洲2n=24的林蛙群间的过渡种类。The diploid number of Rana asiatica is 2n=26, NF=52,with an acrocetric C-band on 2p and a pair of standard NORs on 10q. The paper holds that Rana arvalis,originated in Europe, is a interim species between Rana group in Europe and Rana group in Asia with 2n=24.     

桓仁林蛙和桓仁产东北林蛙的染色体组型

用骨髓细胞制片法对桓仁林蛙（Rana huanrenesis）和桓仁产东北林蛙（R．dybowskii）的染色体组型进行了报道,两种林蛙的染色体数均为2n=24,都可配成12对,按照相对长度可分为3组,A组包括第1～5对,为大型染色体（相对长度〉9．0）;B组是第6对,为中型染色体（相对长度在7．0～9．0之间）;C组包括第7～12对,这一组为小型染色体（相对长度〈7．0）。在两种林蛙的染色体组型中未发现有异型性染色体。桓仁林蛙的第1、3、4、5对为中部着丝点染色体,第9对为端部着丝点染色体,其余各对为亚中部着丝点染色体。东北林蛙的第1、2、3、4、5、6、8对为中部着丝点染色体,第9对为端部着丝点染色体,其余各对为业中部着丝点染色体。两种林蛙的第11对染色体长臂有明显的次缢痕。     

四种林蛙核型及银带研究

林蛙又称棕蛙（ｂｒｏｗｎｆｒｏｇ）,是广布欧洲、亚洲和北美洲的一个自然类群,约有２８种,我国记载达１０种（谢锋,１９９５）。国内对２ｎ＝２６的林蛙染色体研究报道主要有李树深等（１９８１,１９８２）、王子淑等（１９８３）、陈文元等（１９８３）、韦今来（...     

寒露林蛙的核型和Ag-NORs研究

采用常规骨髓细胞制片法对产于湖南省双牌县的寒露林蛙的核型及NORs位点进行了观察和分析.结果表明寒露林蛙与分布于我国南方的其他林蛙相同:2n=26,NF=52,为5+8核型模式.寒露林蛙核型为14M+10SM+2ST,无次溢痕,NORs位于第11对染色体长臂的中部.通过比较分析我国2n=26的6种林蛙的核型等细胞遗传学信息,本文结果支持形态分类和分子系统发生的研究结论,认为寒露林蛙是一有效种.     

中国林蛙的分子系统关系

测定了 6种林蛙和用作外群的 2种侧褶蛙和 1种陆蛙的线粒体 12SrRNA基因序列 393bp。序列两两对位比较表明内外群间的位点替换率是 7 3%到 2 3 1% ,内群中物种间则为 0 0 %到 9 2 %。依据上述DNA序列 ,用距离法和最大简约法的系统发育分析表明 :①研究的 6种林蛙聚为一支 ,构成单系群 ,并有高的BPs值(90 %以上 )支持 ;② 6种林蛙可以分成 2个姐妹群 ,即中国林蛙、黑龙江林蛙和桓仁林蛙为一组 (BPs >94% ) ,峨眉林蛙、昭觉林蛙和镇海林蛙为一组 (BPs >5 0 % ) ;③昭觉林蛙与镇海林蛙有较近的亲缘关系 ;④中国林蛙的榆中种群与牡丹江种群间的遗传分化似乎达到了种级分化水平。     

北京产中国林蛙的染色体组型

通过外周血淋巴细胞短期离体培养方法,对北京产中国林蛙(Rana chensinensis)的染色体组型分析表明,北京产中国林蛙的二倍体染色体数目为2n=24,可分为三组,包括12个大型染色体和12个小型染色体。雌雄个体间未发现与性别决定有关的染色体存在。染色体组型的测量统计分析表明,全部染色体可配成12对,其着丝点位置分别为中部(1,4,5,8和10号)、亚中部(2,3,7,11和12号)及亚端部(6和9号)。除在第7染色体的长臂上具有明显的次缢痕外,在第1—5染色体的短臂上靠近着丝点的部位,以及第6和第9染色体的长臂上靠近着丝点的部位具有微小的次缢痕。根据其染色体的特征,北京产中国林蛙的细胞是研究细胞工程学的良好实验材料。作者还通过北京产中国林蛙与欧洲Rana temporaria的染色体组型的比较分析,确证前者不是后者的一个亚种,建议将过去Pope和Boring(1940)所使用的中国林蛙的学名Rana temporaria chensinensis更改为Rana chensinensis David。     

林蛙在中国的分布

作者收集有关我国林蛙分布的资料绘制了林蛙分布图,其中图1标明了主要分布于中国北方的中国林蛙种绀（Rana chensinensis species-group）和黑龙江林蛙种组（R．amurensis species-group）的分布,图2标明出了在亲缘关系上与日本林蛙很相近（R．jaonica）的分布于南方的长肢林蛙种组（R．longicrus species-group）的分布,图3重点标明了环渤海区域已知6种林蛙的分布。最后,作者提出环渤海区域是林蛙重要的分布中心,并对镇海林蛙（R．zhenhaiensis）和中国林蛙（R．chensinensis）的一些可疑或有争议的分布问题进行了简要讨论。     

中国特有两栖动物研究1.山东半岛林蛙的生活史

生活史的研究可以为系统发育研究和珍稀濒危物种的保护和管理对策的制定提供参考资料。林蛙是我国分布比较广泛而复杂多样的一个类群,在山东半岛的昆嵛山和崂山,分别分布有昆嵛林蛙（Rana kunyuensis）和中国林蛙（R．chensinensis）。本文报道我们从1997年到2006年,对这两种林蛙在山东半岛的地理分布、繁殖习性、蝌蚪特征和生长发育以及冬眠等方面的调查和观察研究结果。结果表明昆嵛林蛙和分布于崂山的中国林蛙尽管在栖息地生境方面比较相似,但在生活史方面表现出较大的不同。     

桓仁林蛙与东北林蛙蝌蚪的形态特征及比较

桓仁林蛙（Rana huanrenensis Liu,Zhang,＆ Liu,1993）为一种与东北林蛙（Rana dybowskii）同域分布的林蛙,但其分布区域较狭窄.通过对其蝌蚪的形态特征描述及测量相关的形态学量度并和东北林蛙比较,发现在体色、体型、尾部形态以及身体各部位量度比值等方面存在显著性差异.桓仁林蛙的蝌蚪外形与流水型的蝌蚪相类似,而东北林蛙的蝌蚪则属于典型的静水型蝌蚪.     

山东省的长肢林蛙种组物种

前人报道天津和山东有日本林蛙的分布,但也有学者表示怀疑。本文报道采集于山东徂徕山的该类物种。从成体量度和蝌蚪唇踟式来看,与现报道的镇海林蛙和峨眉林蛙有一定差异。该物种体型大小与峨眉林蛙相近似,唇齿式为1：2-2／111     

泽蛙、日本林蛙、饰纹姬蛙不同地理居群的核型多样性

本文研究了温州地区的泽蛙、日本林蛙、饰纹姬蛙的核型,并分析了9个地理居群泽蛙的核型、4个地理居群日本林蛙的核型和3个地理居群饰纹姬蛙的核型。结果表明,不同地理居群的同种蛙均有相同的染色体数和核型模式。泽蛙、日本林蛙都为 2n=26,NF=52,核模式5＋8;饰纹姬蛙 2n=24,NF=48,核模式6＋6。但同一种蛙的不同地理居群之间在SM数目和顺序、次缢痕或随体的位置等都有所不同,说明不同地理居群的同种蛙的染色体具有丰富的多样性。故保护蛙品种资源多样性,不仅要从整个群体上考虑,而且要针对每个品种（或类群）进行保护。 Abstract：The karyotypes of Rana limmocharis boie,Rana j.Japonica,and Microhyla ornata from Wenzhou were studied.The karyotypes of nine populations of Rana limmocharis boie,four populations of Rana j.Japonica and three populations of Microhyla ornata from different geographical regions were compared.The results demonstrated that the same species of different geographical populations have the same amount of chromosome and karyotypic formulae. Rana limmocharis boie and Rana j.Japonica have 2n=26,NF=52 and 5＋8 karyotypic formulae.Microhyla ornata has 2n=24,NF=48 and 6＋6 karyotypic formulae.But some dissimilarities were found among them.First,the number and sequence of submetacentric chromosome were different among them,and then the secondary contriction （SC）or satellite （Sat）were also different.It was showed that the chromosomes of same species of different geographical population have diversities.Conservation of frog genetic diversity must be considered of not only the genetic diversity conservation of the total frog population but also that of every frog breed.     

牛蛙(Rana catesbeiana)染色体研究

对牛蛙（Rana catesbeiana,Shaw）的染色体组型进行了研究。观察骨髓的C-中期细胞,结果证明牛蛙的体细胞染色体数目2n=26,其中有5对大型染色体和8对小型染色体,可以分成A、B、C3个组,雌性和雄性个体间没有发现异型性染色体。上述结果与前人的研究结果基本一致。但是作者发现牛蛙骨髓细胞的第7、8、10、12号染色体上均有次缢痕。牛蛙的核型为2n：26=22m＋4sm。     

云南南部3产地泽蛙核型比较研究

对采自云南个旧、绿春、江城3地的泽蛙进行染色体核型分析。结果表明,3地的泽蛙核型均为2n=26（5L＋0M＋8S）,NF=52,染色体次缢痕均出现在6p上。个旧大屯泽蛙的No．3为SM染色体,其余染色体均为M染色体;绿春大黑山的泽蛙No．2、6、7为SM染色体,其余均为M染色体;江城康平的泽蛙No．2、9均为SM染色体,其余为M染色体,显示出不同地区泽蛙核型的差异性。比较了滇南3地和国内外不同地区泽蛙染色体核型变化,结果显示,染色体核型模式及其大型染色体组比较稳定,但次缢痕位置不稳定,小型染色体组变异较大。根据泽蛙次缢痕的地理演化趋势,推测次缢痕位于7p上是一种原始类型,位于6p上是一种较为进化的类型,位于9p上是一种特化的类型。泽蛙的分布及核型分化与第三纪欧亚大陆边缘断裂形成日本海有关,也与第四纪冰期气候变化和随之产生的泽蛙南迁北移有关。     

蛙属三种的核型研究

本文研究了蛙属三种：脆皮蛙、长趾蛙和威宁蛙的染色体核型,结果表明均具有蛙属典型的核型：2n=26,由5对大染色体和8对小染色体组成。三种在臂比值和次缢痕的有无、位置方面存在差异。同源染色体对间未发现异形现象。     

昆嵛林蛙蝌蚪口器结构的研究

本文对昆嵛林蛙(Rana kunyuensis)的蝌蚪口部外形和口咽腔形态结构进行了观察,并与长肢林蛙进行了比较。结果表明它们有着基本相似的形态特征,但也存在明显的差别:昆嵛林蛙蝌蚪的上唇齿比长肢林蛙少一行;昆嵛林蛙蝌蚪口腔内突起数量明显少于长肢林蛙;昆嵛林蛙腺区不明显,而长肢林蛙腺区明显。     

两种蛙Sox基因的PCR-SSCP分析

采用PCR技术,以参考人SRI,基因HMG-box的保守区序列而设计一对特异引物,扩增了黑斑蛙和金线蛙的Sox基因。结果两种蛙的雌雄个体均扩增出217bp的基因片段,与人对照相同。对扩增产物进行SSCP分析显示,两种蛙雌雄个体间的单链迁移率相同,两种蛙之间差异较小,而与人有较大差异。测序表明,两种蛙的Sox序列之间以及与各类物种的Sox基因都有非常高的相似性,充分显示出Sox基因在系统进化上的高度保守性。     

棘胸蛙、虎纹蛙、黑斑蛙血细胞的比较

应用Giemsa染色法对棘胸蛙、虎纹蛙和黑斑蛙的血细胞进行显微观察和各形态参数测定,并对各类细胞作了图示和描述。结果表明,红细胞和白细胞的形态和数量比例有一定属和种的特征,并与其生长环境和进化地位有一定联系。     

辽宁产粗皮蛙的染色体组型研究(图版Ⅳ,下)

用骨髓细胞制片法分析了粗皮蛙的染色体组型 ,结果表明其二倍体染色体数为 2 6 ,可配成 13对 ,有5对大型染色体 (相对长度 >9)和 8对小型染色体 (相对长度 <6 5 ) ,其中 ,第 1、 5、 6、 7、 8对为中部着丝点染色体 ,第 12对为端部着丝点染色体 ,第 2、 3、 4、 9、 10、 11、 13对为亚中部着丝点染色体 ,第 4对为性染色体 ,属XY型 ,X染色体为亚中部着丝点 (相对长度为 10 70 ,臂比指数为 1 72 ) ,Y染色体为亚中部着丝点(相对长度为 12 83,臂比指数为 2 0 2 )。     

林蛙卵油的提取研究

利用林蛙卵提取林蛙卵油,并对影响林蛙卵油提取率的因素,如提取溶剂的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行研究,通过正交试验确定获得最大林蛙卵油产率的条件。即:以石油醚(30~60)作为提取剂;提取温度65℃;提取时间为4 h;提取料液比为1:9。并对提制的林蛙卵粗油进行精制。得到具有透明黄色,鱼腥味道的林蛙卵油。