甘蓝胞质雄性不育系和保持系POD同工酶分析

以育成稳定多代的甘蓝胞质雄性不育系及其保持系为试材,以盛花期的根、叶、花蕾和花以及9d和13d幼苗的叶和根为试样,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,分析了POD同工酶的谱带差异。结果表明,不育系和保持系：POD同工酶存在谱带增减,活性强弱变化和器官特异表达等差异;不育系和保持系间POD同工酶差异以花、大蕾和小蕾最大,叶和根间差异不明显。     

粳稻细胞质雄性不育系、保持系POD同工酶的比较研究

粳稻３４１Ａ、３４１Ｂ的不同器官和花药及雌蕊的不同发育时期共检测出９种ＰＯＤ同工酶谱带,其中ＰＯＤ＿５、ＰＯＤ＿６在所有１０个器官中存在,因此可以认为是粳稻３４１Ａ、３４１Ｂ的基本谱带。ＰＯＤ＿８、ＰＯＤ＿９谱带仅在少数器官中存在,具有一定的器官专一性。花粉粒发育的两个关键时刻,ＰＯＤ同工酶均多于保持系,这可能是雄性不育细胞质基因对核基因表达的调控作用所致,细胞质基因与细胞核基因存在着一定的相互关系,雄性不育可能是这两种基因共同作用的结果。     

小麦T型细胞质雄性不育系、保持系蛋白质双向电泳比较研究

以小麦T型细胞质雄性不育系为材料,利用双向电泳技术,对苗期、分蘖期、拔节期和孕穗期叶片和花粉母细胞减数分裂期、单核小孢子期、二—三核小孢子期蛋白质变化作了分析。在细胞质雄性不育系小麦拔节期、孕穗期叶片中,有一个33KD／P16．3蛋白组分存在,保持系中没有发现这个蛋白组分。在花粉败育的关键时期二—三核小孢子期,小麦细胞质雄性不育系有53KD／P15．5、50KD／P15．7、48KD／P15．6和20KD／P17．5四种蛋白组分存在,而保持系中也没有存在。小麦细胞质雄性不育系叶片和小孢子发育过程中存在的这五种特异蛋白可能参与育性调控,与细胞质雄性不育特性的形成有关。     

普通小麦T型细胞质雄性不育系及其保持系线粒体多肽的电泳比较研究

应用单向SDS-PAGE和双向IEF-SDS电泳技术对两个品种的普通小麦(T.aestivum L.)T型细胞质雄性不育系及其保持系的线粒体多肽进行了比较研究,结论如下:1.黄化苗期不育系和保持系线粒体多肽在单向SDS-PAGE和双向IEF-SDS电泳行为上无明显差别;2.在孕穗期幼穗线粒体多肽的单向SDS-PAGE图谱上,两个不育系都缺少28Kd多肽带纹,因而不育系和保持系间表现出明显的差异。双向IEF-SDS凝胶电泳证实28Kd带纹实际上是分子量相同而等电点分别为5.58和5.65的两个多肽;3.线粒体基因的表达是具有时空性质的;4.线粒体与T型细胞质雄性不育可能存在着某种特定的关系。 本文还就T型细胞质雄性不育的分子机制进行了探索性讨论。     

小麦K型及V型细胞质雄性不育系线粒体DNA的比较分析

采用ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ技术对具有相同核遗传背景的小麦Ｋ型不育系Ｋ１４９Ａ,Ｖ型不育系Ｖ１４９Ａ及相应保持系１４９Ｂ的线粒体ＤＮＡ进行了比较分析。结果表明它们之间线粒体ＤＮＡ的结构显著不同,ａｔｐＡ,ａｔｐ９,ｃｏｘⅡ,ｃｏｂ等线粒体功能基因有组织结构上的差异。     

小麦粘类雄性不育系生化标记及小孢子细胞色素氧化酶同工酶研究

对4种同核异质小麦粘类非1BL/1RS雄性不育系、保持系和恢复系的幼苗叶片、乳熟期籽粒以及不育系、恢复系和F1小孢子发育四分体至三核期花药进行了细胞色素氧化酶（COD）同工酶聚丙烯酰胺凝腔电泳（PAGE）分析。结果表明：（1）幼苗叶片COD同工酶谱带可以标记4种不育系和保持系;乳熟期籽粒COD同工酶谱带可以将4种不育系、保持系及恢复系区别开。（2）COD在不育系小孢子败育时或败育之前（单核到二核期）酶量降低,面在三核期酶量升高。（3）相同胞质背景下引入不同核恢复基因或不同胞质背景下引入桢核恢复基因,F1小孢子COD同工酶谱带之间有差异。可以将不同发育时期COD同工酶谱带作为鉴别1种不育系以及不育系、保持系、恢复系（“三系”的可靠生化标记）。     

辣椒细胞质雄性不育系和保持系过氧化物酶同工酶的比较分析

运用辣椒细胞质雄性不育系21A和保持系21B为试材,比较分析了过氧化物酶（POD）同工酶在幼叶和不同发育时期花蕾中的表达特征。结果表明,辣椒花蕾中的POD同工酶谱带均比叶片中的更丰富,表现出明显的组织特异性。不育系21A和保持系21B间的酶谱在幼叶和小花蕾（纵径0．8～1．5mm）中基本无差异,但从中花蕾（纵径2～3mm）开始,保持系21B的一些酶带（POD4b和POD4c）染色开始减弱。在大花蕾（纵径4．5～5mm）和特大花蕾（纵径6．8～7mm）时期,不育系比保持系分别多2条酶带（POD2c和POD4b）和1条酶带（POD2c）,表明辣椒细胞质雄性不育系21A与保持系21B花蕾中的POD同工酶表达与小孢子的发育过程相关,其表达差异发生在细胞学上观察到的败育之前。     

Ven、K型小麦雄性不育系春性F1杂种的优势表现及与叶绿素含量和同工酶谱的关系

利用Ven、K型小麦雄性不育系与北方春性普通小麦杂交,研究了Ven、K型春性F1杂种的优势表现及其与叶绿素含量、同工酶谱的关系。结果表明：Ven型和K型杂种F1存在显著的个体杂种优质,在主要农艺性状中尤其以单株穗数、千粒重、单株生产力的杂种优势明显,其中单株穗数对单株生产力的贡献最大;相关分析表明：单株生产力与单株穗数呈正相关,相关系数为0.7122;与每穗粒数和千粒重的相关系数分别为－0.1183和0.4941。灌浆期旗叶、倒二叶叶绿素含量与千粒重的相关性最大,呈正相关。杂种F1优势强的组合其种子和苗期的过氧化物同工酶和酯酶的酶谱一般呈双亲互补型或“杂种型”酶带,该特征可作为杂种优势预测的指标。     

小麦D^2型与K型,V型,T型细胞质雄性不育系线粒体DNA的RAPD比较分析

采用ＲＡＰＤ方法比较新育成的小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）Ｄ２型不育系ｍｓＤ２ＣＡ８０５７与Ｋ型、Ｖ型和Ｔ型细胞质雄性不育系的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）。结果表明,ｍｓＤ２ＣＡ８０５７的ｍｔＤＮＡ不同于其它３种类型不育系,而其它类型不育系的ｍｔＤＮＡ彼此也各不相同。这一结果从分子水平上为鉴定该Ｄ２不育系的不育类型提供了证据。实验还发现在胞质来源相同而核背景不同的Ｔ型不育系间存在线粒体基因组多态性,这是关于小麦中Ｔ型不育系ｍｔＤＮＡ在常规回交转育过程中发生变异的直接证据。这种变异在很大程度上可能是受不同核背景影响的结果。     

中国石龙子的同工酶

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对浙江温州和福建宁德中国石龙子（Eumeces chinensis)两个地理种群的皮肤、肌肉、胃、小肠、肝脏、肺、肾、心脏、性腺等9种组织中的乳酸脱氢酶、过氧化物酶和醇脱氢酶同工酶进行了研究。结果表明,中国石龙子两种群的同工酶电泳结果具有明显的地理种群特异性,且9种不同组织中的同工酶谱亦表现出组织特异性。     

小麦VE161雄性不育异代换系的染色体分析

VE161是一个具有一对长穗偃麦草(Agropyron elongatum)染色体的小麦雄性不育异代换系。由于不能用做父本,采用一般单体分析法确定其被代换的染色体比较困难。因此用一套中国春缺-四体和重双端体对其进行了分析,并以F_1花粉母细胞MI单价体的N-显带技术进行了验证。结果表明,VE161代换系所代换的染色体为7B,该方法对确定雄性不育代换系所代换的染色体是一个简单易行的方法。染色体行为观察说明,该代换系的一对长穗偃麦草染色体可能与小麦的染色体7B没有部分同源关系,除了引起雄性不育以外,有时与小麦染色体分裂不同步而表现落后,并有抑制Ph基因的作用,能强烈促进小麦部分同源染色体的联会配对,致使在中期Ⅰ出现很高频率的各种多价体。     

普通小麦Ｔ型细胞质雄性不育系及其保持系线粒体ＤＮＡ的比较研究

以小麦Ｔ细胞质雄性不育系７５－３３６９Ａ和相应保系７５－３３６９Ｂ为材料,用限制性内切酶ＢamHⅠ、EcoRⅠ、hINDⅢ完全酶解,以Ｏenothera mtDNA qtp6,小麦线粒体基因nad3/rps12、cos1为探针进行Southern杂交,杂交结果表明,７５－３３６９Ａ和 75-3369B在这３个基因上或附近有显著的组织结果差异,推测这些差异可能影响了线粒体基因组的正常功能,最终引起了７５－３３６９Ａ雄性不育。     

Ar+诱变拟南芥雄性不育材料花器官表型分析及小孢子发生细胞形态学观察

利用低能氩离子作为诱变源诱变拟南芥种子,选用诱变剂量为1.5×1017ions/cm2,30 keV的能量。在其M2群体中根据有无果荚及其果荚是否异常,筛选出tc243不育突变体。用石蜡切片技术,在光学显微镜下观察拟南芥部分雄性不育材料小孢子发育过程和各时期的花形态特征,分析雄性不育的原因。从花表型上分析导致雄性不育的原因有三个方面:(1)柱头伸长过快;(2)花药生长过慢;(3)花药开裂晚。从小孢子发生的细胞形态学观察表明花粉败育主要发生在小孢子四分体时期,此时绒毡层正常,小部分四分体正常,大部分四分体外面的的胼胝体过早降解释放游离小孢子,此时的绒毡层还没解体不能提供小孢子发育所需要的营养物质,使过早释放的小孢子不能正常发育,导致最后形成大量没有活力的花粉粒。     

从小麦雄性不育系的未授粉子房诱导单倍体植株

采用N₆培养基为基本培养基,附加不同水平的生长素,培养普通小麦、小麦雄性不育系及其保持系共10个材料的未授粉子房,所用的材料都能诱导出愈伤组织,出愈率在4.2-38.1%。经分化培养分别从T型不育系和太谷核不育材料获得了单倍体植株。供试材料的基因型、培养基中的生长素的种类及用量,对诱导愈伤组织及分化绿苗有重要的作用。 The unpollinated ovaries of male sterile lines and its manitainers of wheat, as well as common wheat, were cultured on N6 medium in vitro,when the pollen of the same panicle were at uninucleate stage. Callus were obtained from all of the materials, haploid plantlets were regenerated from the unpollinated ovaries of timopheevi cytoplasm male sterile line (T75-3369A) and Taigu nucleus male sterile line (Tal x C⁶⁸⁴₁).     

Isoelectrofocusing Electrophoretic Analysis on Soluble Protein of Germinated Embryos and Young Shoots from Different Cytoplasmic Male Sterile Lines and Their Maintainers in Wheat

The soluble proteins of germinated embryos and young shoots in Wheat were studied by means of isoelectrofocusing (IEF) electrophoresis. The materials used were three species of cytoplasmic male-sterile (CMS) lines (Type E, T and A) and their maintainers. The protein quantity of pI 4. 9 in male-fertile materials is higher than the corresponding male-sterile ones; the protein of pI 6.85 is probably the result of gene expression in Timopheevi cytoplasm; the protein of pI 7.6 is a typical band of Jinfeng male-sterile line. Evident differences on soluble protein chromatograms of IEF electrophoresis were observed both in germinated embryos and young shoots which were from different kinds of CMS line, these differences could be used as indexes identifying various CMS lines.     

异育淇鲫及其双亲同工酶的比较研究

用4.5％聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究了异育淇鲫及其母本淇鲫和父本兴国红鲤的肌可溶性蛋白以及肾、肝、眼、背白肌和心等五种组织的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和酯酶(EST)。结果发现:异育淇鲫的肌可溶性蛋白以及同工酶的电泳图谱与母本淇鲫相同而与父本兴国红鲤显著不同,因而认为异育淇鲫是淇鲫雌核发育的产物,父本基因对子代基本无影响。在此基础上,本文对异源精子在雌核发育中所起的生物学作用进行了初步探讨。     

大口鲇和鲇鱼血清蛋白质及同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板电泳,分析了大口鲇和鲇鱼的血清蛋白质以及心脏、肝脏、眼和肌肉4种组织的EST及MDH同工酶。结果表明,大口鲇和鲇鱼的血清蛋白质均能分离出20条左右的谱带,两者既表现出相同的谱带,又表现出迁移率和含量都不同的带型。两者的EST和MDH同工酶在4种组织及血清中均能特异性地表达,存在明显的组织和物种特异性。本文认为肝脏是研究大口鲇和鲇鱼种群生化遗传结构与变异的理想材料,同时还探讨了两种鲇鱼的M DH同工酶位点。 Abstract:The serum proteins and isozymes in four tissues (heart,liver,eye and musele)of Smeridionalis Chen and S.asotus Linnaeus were analyzed by polyacrylamide gradient gel vertical electrophoresis.The isozymes are esterase(EST)and malate dehytrogenase(MDH).The results showed that electrophoretograme of serum proteins were about 20 protein pattens in two species catfish,they were either the same protein pattens or the different pattens.Electrophoretogram of isozymes(EST,MDH)in two species catfish indicated tissues and species specificity.Experiment considered that the liver was a good material studied biochemical genetic constitution and variation in species group of S.meridionalis Chen and S.asotus Linnaeus.     

空间条件对几种粮食作物的同工酶和细胞学特性的影响

搭载１９８７年发射的两颗返地卫星（８月５—１０日和９月９—１７日）的几种小麦、大麦种子,经回收后初步研究表明：（１）对发芽率的影响：空间处理的种子,其发芽率与对照无差别;（２）对茎及生育期的影响：空间处理的种子长成的幼苗比对照强壮,植株高度有些品种明显的矮于对照。生育期有不同程度延长;（３）对染色体结构的影响：花粉母细胞减数分裂观察表明搭载卫星的种子当代可诱导出比地面更多的染色体桥、落后染色体及染色体数目异于正常体细胞数目的现象。小麦品种Ｃｏｃｏｒｉｔ—７１经空间处理后花粉母细胞的染色体数目异常可高达２０．５１％,而地面对照组其花粉母细胞基本正常（２ｎ＝２８）;（４）对同工酶的影响：经空间处理的小麦种子酯酶、过氧化物酶的同工酶谱带空间处理的比地面对照减少。由此可见,空间处理可诱导纯合植物种子发生变异,为农作物育种创造一个新途径。     

五种不同类型甘蓝型油菜雄性不育系花蕾及雌雄蕊干物质变化动态的比较研究

以5种不同类型甘蓝型油菜雄性不育系为材料,以保持系作对照,对甘蓝型油菜雄性不育系的花蕾及雌雄蕊干物质变化动态进行了研究。结果表明,干物质重量雄性不育系花蕾和雄蕊显著小于保持系,而雌蕊则明显大于保持系。大多数不育系雌雄蕊的发育曲线存在拐点,它们出现拐点的时期相同,但方向完全相反。暗示可能雄蕊败育后降解的生物大分子物质被部分运到了雌蕊,才引起了雌蕊干物重的异常增加。