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耐热芽孢杆菌E2菌株纤维素酶基因克隆的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用质粒pBR322作载体,大肠杆菌E.coli DH5αF’作受体,克隆到耐热孢杆菌E2菌株的羧甲基纤维素酶基因。重组质粒PBG3从产生CMCase的转化子中分离得到。克隆到的CMCase基因位于4.0kbHindⅠⅠⅠ片段上。功能状态CMCase基因被亚克隆到2.4kbDNA片段上。 相似文献
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抗冻蛋白结构基因片段的克隆 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究和开发利用抗冻蛋白或多肽,木文通过聚合酶链式反应(PCR)合成了抗冻蛋白110bp的结构基因片段,然后将该基因片段克隆到大肠杆菌质粒载体P(Bluescript)Ⅱks+/-上,获得了重组质粒,经酶切证明,获得的重组质粒中含有抗冻蛋白结构基因片段,以供该基因在大肠杆菌或酵母中表达抗冻蛋白。 相似文献
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鸡马立克氏病病毒B抗原片段在大肠杆菌中表达 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡马立克氏病病毒BamHI基因文库I3质粒中含有编码B抗原膜外Domain的DNA序列。经ScaI和SphI双酶酶解I3质粒,分离获得764bpDNA片段,并克隆进M13mp19中。DNA序列测定分析表明克隆片段为MDV-B抗原基因的494-1258bp部分序列。进一步分离NcoI-HindIII部分基因片(530bp),克隆于PLPromoter控制下的含有修饰型cIts857基因的表达载体中, 相似文献
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以Rhodobacter capsulatus的hupS‘L基因DNA片段为探讨,通过Southern杂交,从构建的Rhodobacter sphaeroides 601基因库中调取hup基因。阳性克隆Cosmid1可与Hup突变株JP91,RCC8以及BSE8互补,而Cosmid3和Cosmid9只能与BSE8互补。试验所产生的接合转移子均恢复了吸氢酶的活性和自养生长能力。 相似文献
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将含有Anabaenasp.PC7120反义glnA基因片段的穿梭表达质粒pDC-ATGS转化单细胞蓝藻聚球藻Syne-chococcussp.PCC7942,通过同源重组,外源DNA定位整合到染色体上。经过抗菌素筛选,获得一种高效泌氨的Synechococcussp.7942突变种。 相似文献
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乳酸克鲁维酵母高拷贝整合载体的构建及应用 总被引:7,自引:0,他引:7
用酿酒酵母26s rDNA作探针克隆乳酸克鲁维酵母K.lactis 2.2kb rDNA片段,对其作限制内切酶图谱分析。以该基因片段为同源整合的靶顺序,酿酒酵 URA3基因为选择标记构载体质粒pIRK并对其在宿主K.lactis MW98-8c细胞中的整合位点,拷数及稳定性进行测定和分析。 相似文献
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用耐高温的DNA聚合酶进行酶法DNA序列测定在分子生物学中具有十分重要的实际应用价值,从耐高温的嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)特异菌株中克隆分离了编码去除了5′-3′外切酶活性的BstDNA聚合酶大片段的结构基因。经重组于表达质粒载体pYZ23,在大肠杆菌JF1125(EscherichiacoliJF1125)中得到了稳定的高效表达,经分离纯化,此基因工 相似文献