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1.
香菇原生质体融合及融合子的鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
以香菇(Lentinusedodes)种内不同株一对亲和的单核菌丝(7402〈2〉和9101〈12〉)为亲本,以碘乙酰胺失活7402〈2〉作为筛选标记,经过原生质体制备、PEG融合及融合子再生等步骤,选育得融合子。融合子与双亲无拮抗性,在菌丝形态,核数目及可溶性蛋白质图谱、酯酶同工酶谱和过氧化物酶谱上均与双亲单核菌丝及担孢子杂交子有区别。将Knowlton等于1984年建立的一种分离高频再生衍生株的方法首次运用至食用菌中,使原生质体再生率提高2-3倍,为融合操作提供了方便。 相似文献
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菜心下胚轴原生质体培养和植株再生 总被引:6,自引:0,他引:6
以萌发3—4 天(长约4 cm )的菜心(Brassica campestris var.parachinesis)无菌苗苍白下胚轴为材料,酶解分离原生质体。经纯化的原生质体,在含0.5 m g/LZT、0.5 m g/L2,4-D、1.0 m g/LNAA 和0.4 m ol/L葡萄糖的K8p 培养基中,进行微滴培养。在起始培养14—18小时,原生质体再生新的细胞壁。36 小时再生细胞开始第一次分裂。第三天分裂细胞频率可达35% 。培养第8—9 天,可见含8—16个细胞的小细胞团,植板率为15% —18% 。3 周后将发育成直径为2 m m 的白色小愈伤组织,转到含0.3 m g/L 2,4-D并用gelrite半固化的培养基上,增殖成4—5 m m 直径的愈伤组织。在MS+ 3.2(或1.6) m g/L BA+ 1.6(或0.8) m g/LZT+ 0.01 m g/L NAA+ 0.1 m g/LGA3 和0.2% 蔗糖的分化培养基上,获得芽的分化。切下约2 cm 长的芽苗,转移到含0.2 m g/LIAA 和2% 蔗糖的培养基上,生根形成完整植株 相似文献
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家蚕病原球孢白僵菌的原生质体再生回复及核型分析 总被引:1,自引:0,他引:1
家蚕病原球孢白僵菌(Beauveria bassiana)原生质体的分离制备、性状及再生回复,并用脉冲凝胶电泳(PFGE0技术分析了其核型。以6mg/mL Driselase为酶解液,0.7mol/L NaCl液(pH5.8)为渗透压稳定剂,在30℃下轻轻振荡处理幼嫩菌丝1.5h,是的生质体分离的适宜条件。原生质体的无核率为26.5%,有核率为73.5%,其中单核率为53.5%。再生回复的形式可观 相似文献
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土人参原生质体培养再生植株 总被引:6,自引:1,他引:5
分别由土人参(Talinum paniculatum (Jaeq.) Gaertn.)组织培养再生苗的叶片和幼茎诱导的愈伤组织游离出原生质体.叶肉原生质体在培养中未能进行正常分裂,存活不过1 周.愈伤组织原生质体在P4 培养基中(K8p+ 2,4-D 0.2 m g/L+ NAA 1.0 m g/L+ ZT 0.5 m g/L+椰乳50 m L/L+ 葡萄糖0.5 m ol/L)培养3 d 开始第一次分裂,培养7 d 时分裂频率为36.7% . 愈伤组织再生率在液体培养中为0.31% ,在双层培养中为0.34% . 愈伤组织在含有较低浓度的6-BA 的分化培养基上分化出不定芽. 幼苗生根后移栽到花盆中继续生长,2~3个月后开花结实,长出粗壮的肉质根. 再生小植株在试管中继代培养2~3 个月开花结实. 研究结果还表明∶(1)愈伤组织在液体培养基或增殖培养基中培养时间过长,或继代次数过多均不利于分化.(2)较低浓度的6-BA (0.5~0.7 m g/L)对愈伤组织的分化是合适的.(3)GA3 对幼苗的发育有促进作用. (4)多效唑(MET)对土人参试管苗有明显的壮苗和壮根作用 相似文献
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芥蓝的组织培养和快速繁殖 总被引:8,自引:0,他引:8
1植物名称芥蓝(Brassicaalboglabra)优良种株,取自广东汕头白沙蔬菜原种研究所。2材料类别未开花的植株基部腋芽。3培养条件(1)诱导丛生芽培养基为M1:MS+6-BA2mg·L‘(单位下同)+NAA0.2;M2:MS+6-BA1+NAA0.1;M3:MS+6.BA1+NAA0.2。上述培养基均含蔗糖3%,琼脂0.8%,pH5.8~6.0。(2)生根培养基:MS+NAA0.5+2%蔗糖+0.45%卡拉胶(0.7%琼脂)。培养温度20~25℃,光照12h.d-1,光照度20001x4… 相似文献
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大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株 总被引:15,自引:0,他引:15
大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第12d的愈伤组织原生质体的得率为6.5×107/g鲜重。原生质体培养基为SH基本培养基,含有1.0mg/L2,4-0、0.5mg/LBA、2.0g/LCH、2%蔗糖、6%葡萄糖、5mmol/LMES,培养密度为1.0×105/mL。培养至第12d时的原生质体再生细胞植板率为3.7%。由原生质体形成的小愈伤组织在含2.0mg/L2,4-D的MS固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至2.0mg/L2-ip+0.1mg/LNAA的B5培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。 相似文献
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火炬松(PinustaedaL.)是我国亚热带和部分热带地区最重要的绿化和造林树种。它的生长周期长,杂合程度高,难以用常规的杂交方法进行品种改良。建立火炬松的原生质体胚胎发生体系,有可能、进而以遗传转化为基础进行火炬松等针叶树的品种改良。本研究以湖南省绍阳市的火炬松成熟种子为材料,建立胚性细胞悬浮系。将其培养至对数生长期,用1%RS、2.5%R10和0.2%Y23的酶混和液分离原生质体,活力达90%以上(Fig.1)。纯化原生质体,在再生培养基上培养2天后,细胞壁再生(Fig.2);;6天后,65%的原生质体第1次分裂(Fig.3);培养3周后,形成小细胞团(Fig.4);6周后,形成大细胞团(Fig.5);8周后,形成胚性胚柄细胞团(ESM)(Fig.6);10周后,形成早期体细胞胚(ESE)(Fig.7);12周后,形成后期体细胞胚(LSE)(Fig.8)火炬松原生质体胚形成过程中的关键结构是ESM,ESE和LSE。它们形成的最佳基本培养基是1.25LP培养基。再生培养基中高浓度的BA和低浓度的肌醇有利于ESM的形成,但不利于ESE和LSE的形成。反之,低浓度的BA和高浓度的肌醇不利于ESM的形成, 相似文献
8.
刺槐宽叶和四倍体无性系的组织培养 总被引:13,自引:0,他引:13
1植物名称刺槐(Robiniapseudoacacia)优良无性系:Tetraploidlocust、Glgastypelocust。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件(1)启动培养基:MS+6-BA0.25mg·L-1(单位下同)+NAA0.05。(2)分化培养基和继代培养基:MS+6-BA0.5+NAA0.1+AgNO310,MS+6BA0.5+NAA0.1。上述培养基均添加3%蔗糖、0.6%琼脂。(3)生根培养基:1/2MS+IBA0.2+NAA0.2,添加2%蔗糖0.6%琼脂。培养基pH… 相似文献
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本文报道茄属果树可乐茄(SolanumquitoenseLam.)叶肉原生质体的分离、培养及植株再生。幼嫩叶片原生质体经酶游离、纯化后,以1×104个/ml密度培养于稍加改良K8p(附加2,4-D0.5mgL(-1)、NAA1.0mgL(-1)和BA0.5mgL(-1))的培养基中,三天后开始分裂,一周分裂3—4次。一个月形成小细胞团,植板率为0.1—0.2%,小细胞团转培养于MS+2,4-D0.5mgL(-1)上增殖后进行分化。原生质体来源愈伤组织在IAA(0.1—1.0mgL(-1))与BA或ZT组合的培养基中能诱导器官发生,芽分化率最高可达42.9%;但IAA、BA、ZT三者一起使用未见任何器官分化。小芽在MS+IAA0.2mgL(-1)中生根成植株。可乐茄叶肉原生质体的植株再生,可应用于育种和茄属植物遗传工程研究。 相似文献
10.
柑橘细胞电融合参数选择及种间体细胞杂种植株再生 总被引:10,自引:2,他引:8
以“Page”橘柚(CitrusreticulataBlanco×C.paradisiMacf)胚性悬浮系原生质体和粗柠檬(C.jambhiriLush)叶肉原生质体为融合试材,摸索了适合柑橘的电融合参数。研究表明,在AC(交变电场)125V/cm、DC(直流脉冲)1250V/cm、AC作用时间60s、DC脉冲时间50μs、DC脉冲个数为3、DC脉冲间隔为0.5s时融合率较高,双核异核体率可以达到15%以上。利用不同类型原生质体比重的不同,融合后通过控制离心时间,可以收集到更高比例的双核异核体。融合产物经培养,3~4个月再生小植株。染色体计数结合形态学观察表明,再生的150株小植株中78%为四倍体,其余为二倍体叶肉亲本再生类型。再生植株经过氧化物酶同工酶及RAPD分析,表明得到了体细胞杂种,还证明获得了1株叶肉亲本同源四倍体再生类型。 相似文献
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沙门菌CWDMs脂代谢检测 总被引:9,自引:2,他引:7
采用毛地黄皂苷敏感试验和菌细胞胆固醇、甘油三脂及胆碱酯酶定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L 型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CW DM )的脂类代谢活性,了解这些CW DM 变异的性质和探讨细菌细胞壁缺陷突变与细菌演变的关系。结果表明,沙门菌CW DM s 具有显著的胆固醇和甘油三脂代谢活性、对毛地黄皂苷高度敏感并且还具有与白色念珠菌相似的胆固醇和甘油三脂的含量,但未能检出胆碱酯酶活性。CW DM s返祖菌丧失了脂类代谢酶类和胞浆膜不含胆固醇,恢复了与其亲代细菌型相似的代谢特征。提示在沙门菌天然即存在有与脂类及胆固醇代谢相关的基因,细胞壁的缺陷导致这些脂类及胆固醇代谢基因活化,以致 CW DM s 能够表达固醇和甘油三脂代谢活性和胞浆膜含有胆固醇 相似文献
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沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶(GPT)、谷草转酶(GOT)、乳酸脱氨酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-闳丁酸脱氢酶(α-HBD)、γ-谷志肽酶(γ-GT),酸性磷酸酶(ACP)定性与定量分析法,检测伤CWDMs变异的特点及其机制,探讨CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs在仅含蛋氨酸或脯氨 相似文献
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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的CWDMs及其宁代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶(LDH)同功酶,以了解沙门菌CWDMs生物氧化的特点和机制,探讨CWDMs变异的性质。结果表明,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的4种具有不同泳动速率的LDH同功酶,但CWDMs仅显示2种LDH。CWDMs的2种LDH同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆 相似文献
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光照对蕨类植物配子体假根向重力性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
对8种蕨类植物配子体假根向重力性反应的研究结果表明,除卷柏Selaginella tamariscina Spring配子体假根无向重力性反应并且其生长方向与光照方向无关外,其它7种的配子体假根均有向重力性反应,并且假根的向重力性反应在配子体发育初期,因光照的方向不同而异,表现为负向光性。随着配子体发育至片状体阶段,光对其向重力性反应的影响逐渐减弱,而重力的影响增强。在蕨类植物配子体发育初期,光对 相似文献
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省沽油科叶解剖结构的分类学意义 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对国产省沽油科 Staphyleaceae 4属植物叶的解剖结构进行了详细的比较研究。结果表明, 叶解剖结构特征在属间的区别较明显, 特别是瘿椒树属 Tapiscia 有着几乎与其他三属截然不同的独特性状。根据已有的孢粉学, 花、节及木材的解剖等方面的资料, 我们支持Тахтаджян(1987)将瘿椒树亚科分出而建立瘿椒树科 Tapisciaceae 的观点。瘿椒树属为我国特有属, 根据我们对采自不同产地的材料观察, 居群间的差异很小, 其可能仍为一单种属。 相似文献