应用阳离子交换树脂从棉籽饼粕水解液中分离、制备L—精氨酸盐酸盐

<正> 一概述L—精氨酸是棉籽饼粕蛋白中含量较为丰富的氨基酸之一。为了提高棉籽饼粕的利用价值,开辟精氨酸生产的原料来源,我们已于一九七五年从饼粕的水解液中,用苯甲醛缩合法分离、制备出 L—精氨酸盐酸盐。但是,这个分离方法有不少缺点。例如:缩合剂苯甲醛价格高、毒性大,缩合条件不易掌握,得率不够稳定等。为使这项研究工作便于在生产中推广、应用,我们遵照毛主席关于\"我们必须打破常规,尽量采用先进按术\"的教导,参照国     

二氯苯磺酸沉淀毛发水解液中亮氨酸和精氨酸的新方法

本文介绍了一种以二氯苯磺酸为沉淀剂从毛发水解液中分步沉淀亮氨酸和精氨酸的方法。利用两种沉淀形成速度的不同,通过控制反应条件,实现了亮氨酸和精氨酸的分步沉淀,确定了沉淀条件对目标氨基酸沉淀效率的影响,得到合适的工艺条件:200g人发,水解得400mL水解液;加50g二氯苯磺酸沉淀剂,在5℃加晶种,间歇搅拌12h,过滤得亮氨酸复合物沉淀;在沉淀亮氨酸之后的母液中再加50g二氯苯磺酸沉淀剂,于相同的温度条件下加晶种,连续搅拌至生成稠厚的沉淀,再静置沉淀12h,过滤得精氨酸复合物沉淀。亮氨酸的沉淀率为71.0%,母液中残留亮氨酸浓度为7.6g/L;精氨酸的沉淀率为76.6%,母液中残留精氨酸浓度为8.9g/L。     

猪毛水解条件对胱氨酸水解得率的影响——应用“正交法”的一个实验

<正> 我们是以酸水解法从猪毛中提取胱氨酸的。因此猪毛角蛋白质被水解成氨基酸的过程,受酸的浓度,水解的温度和时间这三个因素的影响。关于如何应用酸的浓度,控制水解的温度和时间,有各种各样的说法。为了取得第一手材料,摸清在常压下水解猪毛,酸的浓度、温度、时间三因素对胱氨酸得率的影响,我们在数学系同学的大力支援下,应用了\"正交设计法\"——这个能从多因素中找出最适条件的试验方法,进行了提高胱氨酸水解得率的试     

精氨酸治疗病毒性肝炎疗效探讨

<正> 遵照伟大领袖毛主席关于\"百花齐放、百家争鸣\"和\"古为今用、洋为中用\"的方针。我们于1976年6月至1977年5月应用精氨酸治疗病毒性肝炎谷丙转氨酶(以下简称\"谷丙酶\")异常的114病例,获得较好效果,现初步报导如下。病例选择经武医二院肝病门诊为病毒性肝炎谷丙酶异常的其中114例,包括急性病毒性肝炎18例,慢性持续性肝炎58例,慢性活动性肝炎38例。男性93例,女性21例。年令最小的5岁,最大的56岁,21～49岁占90%以上。114例肝功能谷丙酶持续异常或反复异常时间最小为一个月,最长者达12年,平均为2年7个月。这些病例大多数曾用过其它药物治疗,但疗效不满意。     

对日光氨酸生产技术交流会资料

<正> 日方工厂生产胱氨酸的详细工艺参数及操作过程一胱氨酸及氨基酸液工程图(调味液) 二各工序详细今数(一)水解1.配比:人发:盐酸二1; I.s c w/ir)(每料人发400ogg); HC16000L)2.水解缸:F.R.P或H.R I3mex23.工艺操作:先将人发直接投入水解缸内(投料时间约2小时)然后将所需盐酸经\"石墨交换器\"予热至60℃送至水解缸内,立即用吹入蒸汽方式(5Kg}/cm2)在40分钟内将缸内水解液温度上升至103 C,待液温稳定在I08℃---110℃,水解6小时,然后停止吹入蒸     

“毛发制备胱氨酸”文献索引

<正> 遵照毛主席\"外国一切好的经验,好的技术,都要吸收过来,为我所用\"的教导,我所下武汉助剂厂科研小分队为了配合该厂胱氨酸生产工作的需要,从毛发水解制备胱氨酸这条工艺路线出发,从美国化学文摘1-82卷中收集了有关胱氨酸的制备和分离方法的部分文摘。为了便于互相学习,特此整理出来,供查阅有关资料的同志们参考。     

从废羊毛中提取胱氨酸的生产小结

<正> 一、概述祖国新疆是重要的畜牧业基地之一,每年的皮毛加工工业有大量的下脚毛——废羊毛,目前尚未合理使用。遵照毛主席\"综合利用大有文章可做\"的教导,利用这类废羊毛进行综合利用生产氨基酸是大有作为的。在毛主席革命路线指引下,全系师生在校系党组织的正确领导下,在朝阳农学院办学经验的鼓午下,结合生物化学课程典型产品教学进行了生产试验,胱氨酸的平均收得率达到3%——3.5%,产品质量已达到医用标准。现将这一生产过程简单总结如下:     

高产精氨酸菌株选育及发酵培养基优化

利用改良阿须贝培养基筛选出4种产精氨酸的菌株,其菌落特征分别为白色链球状菌株,干白分散球状菌株,金黄色杆状菌株,粉红色球状菌株,对它们分别进行了产精氨酸发酵试验,利用分光光度计测定精氨酸含量,最终确定金黄色棒状菌株为生产精氨酸产量较高的菌株。通过单因素和正交设计试验,分别考察玉米浆、硫酸铵、尿素、葡萄糖对金黄色杆状菌株发酵产精氨酸的影响,结果表明最佳条件为:玉米浆浓度3%,硫酸铵浓度6%,尿素浓度0.3%,葡萄糖浓度13%,在此条件下,可获得精氨酸最大产量为368.9ug/mL,与初始发酵培养基条件下发酵相比精氨酸产量提高约300%。该研究为精氨酸菌株的筛选提供了一条新途径,也为所筛选的金黄色杆状菌后期的研究及进一步规模生产精氨酸提供了参考依据。     

L-精氨酸耐缺氧效应的研究

通过模拟缺氧环境,试验灌胃L-精氨酸溶液对小白鼠耐缺氧时间、呼吸率、血浆和脑组织中NO水平的影响。对比结果显示灌胃L-精氨酸组减压耐缺氧和常压耐缺氧时间比空白组明显延长;肺组织切片显示L-精氨酸组血管明显舒张,耐缺氧效果显著。     

L-精氨酸高产菌红曲霉的筛选及发酵初步研究

对不同样品中的真菌进行了L-精氨酸高产菌株的筛选,从红曲米中分离出1株高产L-精氨酸菌株红曲霉H13,其初始发酵液中L-精氨酸产量为1.67 g/L.通过单因素实验对其液体发酵进行研究.结果表明,最佳碳源是可溶性淀粉,最佳浓度为10％,最佳氮源是蛋白胨,最佳浓度为3％,最佳pH值4.5,温度30℃,种子培养时间为18 h,摇瓶装液量50 mL/250 mL.转速为120 r/min,发酵时间7d.在此条件下进行发酵培养,所得发酵液产L-精氨酸4.08 g/L,菌丝体干重为10.32 g/L,菌丝体中L-精氨酸含量为24.17 mg/g.     

日本足利工场脱氨酸简介

<正> 1981年9月10日,我们来到东京郊区枥木县足利市梁田町,日本理化学药品株式会社足利工场。受到代表取缔役中岛先生等友好接待,介绍情况并参观工场。一、工场概况据介绍该厂是个老厂,从中国、南朝鲜等进口人发,羽毛粉生产胱氨酸。批投料量为人发8吨,总收率8%。根据市场需要付产精氨酸、亮氨酸、酪氨酸。该厂生产胱氨酸有25年历史,胱氨酸的去向过去是用于医药,现在扩大到食品、化妆品方面。全厂职工62人,其中技术人员11人,工人34人,公务人员7人。厂区占地面积44,000m~2,其中生产建筑物占地面积5,220m~2,试验研究室650m~2,办公、食堂,卫生设施等2,060m~2。动力情况,用电负荷8,000kw,汽50吨/天。水6,000吨/天,其中污水500吨/天。     

产精氨酸的黄色短杆菌菌种保藏方法的研究

采用甘油防冻营养液对产精氨酸的黄色短杆菌（Brevibacterium flawm）变异株AN78在普通冰箱冷冻室（-18℃～-20℃）进行冷冻保藏试验,4年中分别进行了AN78菌株的产L-精氨酸试验,在500mL摇瓶试验中产精氨酸30-35g／L;保藏2年的菌种在20L发酵罐试验中产精氨酸63．1g／L,转化率22．8％,发酵周期81h。试验结果好于以前的报道。该方法可作为氨基酸生产行业中一种简便有效的菌种冷冻保藏方法。     

重组人载脂蛋白AI米兰突变体在大肠杆菌中的高表达

用RT-PCR法从人肝总RNA库中克隆出人载脂蛋白Al的cDNA序列,再通过重叠PCR将载脂蛋白AI的第179位精氨酸密码子突变成半胱氨酸密码子,即载胎蛋白AI米兰突变体基因。将此目的基因克隆至表达载体pQE30,重组质粒转化JMl09宿主菌,经表达试验筛选出高表达克隆;工程菌经诱导后表达出含6个氨基酸前肽的载脂蛋白AI米兰突变体。表达产物主要以可溶形式存在,但也有部分为包涵体。     

大熊猫乳汁中富含游离精氨酸

采用高效液相色谱法测定了8只圈养大熊猫20个乳样中游离氨基酸的含量。结果显示:大熊猫初乳和常乳中均含有丰富的游离精氨酸,并且是含量最高的游离氨基酸;泌乳2-10d的大熊猫初乳中总游离氨基酸含量约为82mg/100ml,其中游离精氨酸平均含量达61mg/100ml,常乳中游离精氨酸含量约为54mg/100ml,均明显高于人、牛和藏绵羊乳;游离精氨酸在大熊猫干乳期乳腺分泌物中含量显著下降。推测乳中高水平的游离精氨酸在大熊猫幼仔生长发育中可能发挥重要作用[动物学报52(2):309-315,2006]。     

发酵法生产L-精氨酸放大过程的工艺研究

本文报道了L-精氨酸产生菌株钝齿棒状杆菌突变株971．1继摇瓶发酵条件研究后所进行的2．6L台式发酵罐,2 0 0L和2000L通用发酵罐放大试验及其工艺条件研究的结果。试验表明,发酵PH值及供氧强度的合理控制对提高L-精氨酸的积累量非常重要。在所获得的工艺条件下,2000L发酵罐稳产试验的产酸率平均可达29.0mg/ml,最高32.0mg／ml。发酵液中L-精氨酸的提取收率平均为55．9％,最高可达66．04％。产品的质量符合药典标准。本文也对试验结果进行了分析与讨论。     

钝齿棒杆菌GlnK在氮代谢调控及L-精氨酸合成中的功能

【目的】钝齿棒杆菌是重要的氨基酸生产菌株,本研究针对氮代谢PⅡ信号转导蛋白GlnK展开相关功能研究,分析其在钝齿棒杆菌氮代谢调控及L-精氨酸合成中的作用。【方法】以GlnK蛋白为研究对象,通过基因敲除等遗传方法获得过表达、敲除及敲弱glnK的重组钝齿棒杆菌,研究GlnK对NH_4~+吸收的影响,通过RT-qPCR和酶活测定,从转录水平和蛋白水平上揭示GlnK对氮代谢和L-精氨酸合成相关基因表达水平及酶活的影响,通过5-L发酵罐发酵产L-精氨酸研究GlnK对L-精氨酸合成的影响。【结果】过表达glnK能明显促进NH_4~+的吸收,而敲除glnK后则会抑制NH_4~+的摄取;RT-qPCR和酶活测定发现,相比于野生型菌株Cc5-5,glnK过表达菌株Cc-glnK中与铵吸收相关的基因,表达量平均上调约4.58倍,L-精氨酸合成基因簇中基因的表达水平平均上调1.50倍。Cc-glnK中氮代谢相关蛋白的酶活平均提高46.97%;L-精氨酸合成途径上7个关键酶的酶活平均提高30.00%;5-L发酵罐发酵各重组菌株结果表明,Cc-glnK菌株的产量可达49.53 g/L,产率为0.516 g/(L·h),相比于出发菌株Cc5-5,其L-精氨酸产量提高了28.65%。【结论】过表达GlnK能促进NH_4~+的吸收及利用,并通过影响L-精氨酸合成途径上关键基因的表达水平,提高关键酶的酶活,最终提高L-精氨酸的产量。本研究为后续探索钝齿棒杆菌氮代谢调控机制及代谢工程改造钝齿棒杆菌生产L-精氨酸提供了一种新的策略。     

精氨酸、精氨酸盐酸、半胱氨酸、胱氨酸对重组人tPA蛋白复性的影响

以重组人tPA蛋白为材料研究了精氨酸、精氨酸盐酸盐、半胱氨酸、胱氨酸对蛋白质复性效果的影响,重组tPA蛋白包涵体经尿素变性溶解后,在精氨酸、精氨酸盐酸盐、半胱氨酸、胱氨酸存在的条件下进行复性,结果表明,碱性的精氨酸在质量分数0.2%时可减少蛋白质凝聚,显著提高复性效果,tPA复性后的活性可提高50%以上,半胱氨酸单独使用具有类似β-巯基乙醇的作用,精氨酸盐酸盐和胱氨酸单独使用对复性无影响,而半胱氨酸和胱氨酸联合使用,有类似氧化-还原系统作用。可提高活性20%。     

东湖假单胞菌HYS中的精氨酸琥珀酰转移酶途径缺失对秀丽隐杆线虫毒性的影响

【背景】东湖假单胞菌HYS是本实验室从武汉东湖水域中分离并鉴定的一株高产铁载体细菌,HYS菌株对秀丽隐杆线虫具有较强毒性。前期研究发现HYS中编码精氨酸琥珀酰转移酶基因(argS)的插入突变可导致其对线虫毒性明显减弱。【目的】探究argS基因功能及其如何参与细菌毒性,为后续深入研究HYS菌株的毒性机制提供理论依据。【方法】采用生物信息学比对、遗传分析和生理生化实验确认argS基因的生物学功能及其参与的精氨酸琥珀酰转移酶(arginine succinyltransferase,AST)途径与细菌毒性的关系。【结果】生物信息学比对结果显示argS编码精氨酸琥珀酰转移酶,其蛋白序列与铜绿假单胞菌中精氨酸琥珀酰转移酶β亚基具有高达88%的相似度;缺失argS导致菌株不能利用精氨酸作为唯一碳源进行生长;精氨酸脱羧酶(arginine decarboxylase,ADC)、精氨酸脱氢酶(argininedehydrogenase,ADH)以及精氨酸脱亚胺酶(argininedeiminase,ADI)途径中关键基因缺失菌株均可正常利用精氨酸作为唯一碳源,且对线虫并无明显毒性减弱现象;添加外源精氨酸导致菌株对线虫的减毒效果更加明显,且菌株产铁载体能力显著下降。【结论】东湖假单胞菌HYS中AST途径可以通过影响菌株铁载体合成来影响其对秀丽隐杆线虫的毒性,本研究为深入了解假单胞菌精氨酸代谢和致病性机制提供了新依据。     

不同精氨酸添加水平对哺乳仔猪生长性能的影响

为了研究日粮中不同精氨酸(Arg)水平对哺乳仔猪生长性能的影响,试验选用70头7日龄健康哺乳仔猪(长×大),按照所饲日粮精氨酸添加水平的不同(分别为0、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%),随机分为5组,每组14头,单栏饲养,试验期为14 天,并分别于7、14和21日龄空腹称重,记录每周采食量;并在采食后1 h颈静脉采血,检测血浆中氨基酸、血浆尿素氮、胰岛素和生长激素浓度.结果表明:7～21日龄段,试验组血浆精氨酸浓度随日粮精氨酸添加水平增大而升高,与对照组相比,0.6%和0.8%精氨酸添加组血浆尿素氮水平分别降低(P<0.05)30%～40%,生长激素和胰岛素的浓度提高(P<0.05)24%～27%,平均日增重分别提高了(P<0.05)42.2%和41.4%;各组采食量在整个试验期内无显著差异.本试验结果表明7～21日龄,仔猪日粮中精氨酸适宜添加水平为0.6%.     

精氨酸代谢途径抗酸关键基因对乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000胁迫抗性的影响

【目的】寻找精氨酸代谢途径中与酸胁迫相关的关键作用因素。【方法】通过在Lactococcus lactis NZ9000中分别过量表达来源于Lactobacillus casei Zhang的精氨酰琥珀酸合成酶(ASS)和精氨酰琥珀酸裂解酶(ASL)改变精氨酸代谢提高酸胁迫抗性。【结果】与对照菌株对比,重组菌株在环境胁迫下表现了较高的生长性能、存活率和发酵性能。生理学分析发现,酸胁迫环境下,重组菌株细胞有较高的胞内NH4+、ATP含量和H+-ATPase活性,并显著提高了精氨酸脱亚胺酶(ADI)途径中的氨基酸浓度。进一步的转录分析发现,天冬氨酸合成、精氨酸代谢相关的基因转录水平上调。【结论】在L.lactis NZ9000中过量表达ASS或ASL可以引发精氨酸代谢流量的上调,进而提高了细胞的多种胁迫抗性。精氨酸合成途径广泛存在于多种微生物中,为微生物,尤其是工业微生物提高胁迫抗性提供了新思路。