胃癌组织长链非编码RNA HIT000218960的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系研究

摘要 目的：探讨胃癌组织长链非编码核糖核酸（lncRNA）HIT000218960的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法：选择2018年1月至2019年6月于中国人民解放军联勤保障部队第九七Ο医院进行手术切除治疗的103例胃癌患者及进行胃粘膜活检的健康体检志愿者62例,取其对应组织,应用逆转录-定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测组织中lncRNA HIT000218960及高迁移率族蛋白A2（HMGA2）信使RNA（mRNA）表达,应用免疫组织化学法检测组织中HMGA2阳性表达。分析lncRNA HIT000218960表达与胃癌患者临床病理特征的关系。随访3年,应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同lncRNA HIT000218960分组患者预后情况,并应用Cox回归分析胃癌患者预后的影响因素。结果：胃癌组织中lncRNA HIT000218960、HMGA2 mRNA表达水平显著高于正常胃粘膜组织（P<0.05）,HMGA2蛋白阳性表达率显著高于正常胃粘膜组织（P<0.05）。胃癌组织中lncRNA HIT000218960表达与肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移显著相关（P<0.05）。lncRNA HIT000218960水平与HMGA2 mRNA表达呈正相关（r=0.462,P<0.05）。lncRNA HIT000218960低表达组3年生存率显著高于lncRNA HIT000218960高表达组（P<0.05）。Cox回归显示,肿瘤组织中低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、lncRNA HIT000218960高表达、HMGA2 mRNA高表达是胃癌患者预后不良的危险因素（P＜0.05）。结论：胃癌组织中存在lncRNA HIT000218960异常高表达,其与胃癌恶性进展及患者预后不良有关。     

PRDX1、HMGA2、FMNL2在胃癌组织中的表达及与临床病理特征、上皮间充质转化和预后的关系研究

摘要 目的：探讨过氧化物酶1（PRDX1）、高迁移率族蛋白A2（HMGA2）、同源形成素样蛋白2（FMNL2）在胃癌组织中的表达及与临床病理特征、上皮-间充质转化（EMT）和预后的关系。方法：选取2017年1月～2018年2月我院收治的153例胃癌患者,收集术中癌组织和癌旁组织。采用免疫组化法检测PRDX1、HMGA2、FMNL2、波形蛋白（VIM）、上皮细胞钙黏蛋白（E-cad）阳性表达情况,采用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测PRDX1、HMGA2、FMNL2、VIM、E-cad mRNA相对表达量。分析胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2表达与临床病理特征、EMT和预后的关系。结果：与癌旁组织比较,胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2、VIM阳性表达率和mRNA相对表达量升高,E-cad阳性表达率和mRNA相对表达量降低（P＜0.05）。胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2阳性表达率与患者TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示,胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2 mRNA相对表达量与VIM mRNA相对表达量呈正相关（r=0.562、0.517、0.621,P均＜0.05）,与E-cad mRNA相对表达量呈负相关（r=-0.603、-0.544、-0.574,P均＜0.05）。153例胃癌患者术后3年累积生存率为68.44%（106/153）。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,PRDX1、HMGA2、FMNL2阳性组术后3年累积生存率均低于阴性组（P＜0.05）。结论：胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2表达升高,其表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移、EMT以及预后有关,可作为胃癌病情和预后的辅助评估指标。     

结直肠癌组织AGR2、MFAP2蛋白表达与临床病理特征和预后的关系研究

摘要 目的：研究结直肠癌（CRC）组织前梯度蛋白2（AGR2）、微纤维相关蛋白2（MFAP2）蛋白表达与临床病理特征和预后的关系。方法：将我院从2015年1月～2016年2月收治的84例CRC患者纳入研究。分别采集所有患者的CRC组织以及癌旁正常组织（距离肿瘤边缘2~5 cm）,检测并比较不同组织中AGR2、MFAP2蛋白表达情况。分析AGR2、MFAP2蛋白表达与CRC患者临床病理特征以及预后的关系。采用Cox回归模型分析CRC患者预后的影响因素。结果：CRC组织中AGR2、MFAP2蛋白阳性表达率均高于癌旁正常组织（P＜0.05）。分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ期及脉管浸润的CRC患者的AGR2、MFAP2蛋白阳性表达率均高于分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无脉管浸润的CRC患者（P＜0.05）。AGR2、MFAP2蛋白阳性表达患者的3年生存率及5年生存率均明显低于阴性表达患者（P＜0.05）。经Cox回归模型分析发现：分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ期、脉管浸润以及AGR2、MFAP2蛋白阳性表达均是CRC患者死亡的危险因素（P＜0.05）。结论：CRC组织中AGR2、MFAP2蛋白阳性表达率升高,且和患者分化程度、TNM分期、脉管浸润有关,检测其表达情况有助于预测CRC患者预后。     

非小细胞肺癌组织PD-L1、TTF-1、SYN表达与临床病理特征及预后的关系研究

摘要 目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织程序性细胞死亡蛋白1配体（PD-L1）、甲状腺转录因子-1（TTF-1）、突触素（SYN）表达与临床病理特征及预后的关系。方法：对2013年2月至2015年2月期间在我院治疗的97例NSCLC患者进行研究。检测NSCLC组织以及癌旁组织中PD-L1、TTF-1、SYN表达。分析PD-L1、TTF-1、SYN表达与临床病理特征的相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析不同PD-L1、TTF-1、SYN表达患者总生存率的差异。Cox比例风险回归分析NSCLC患者预后的影响因素。结果：与癌旁组织相比,NSCLC组织中PD-L1、TTF-1阳性表达升高,SYN阴性表达升高（P<0.05）。PD-L1、TTF-1、SYN表达均与TNM分期和淋巴结转移相关（P<0.05）。PD-L1、TTF-1阴性患者的生存率分别高于PD-L1、TTF-1阳性患者,SYN阴性患者的生存率低于SYN阳性患者（P<0.05）。Cox比例风险回归分析结果显示,TNM分期、PD-L1阳性表达、TTF-1阳性表达、SYN阴性表达、淋巴结转移是NSCLC患者预后的影响因素（P<0.05）。结论：NSCLC组织中PD-L1、TTF-1阳性表达升高,SYN阴性表达升高,并且均与TNM分期、淋巴结转移和预后相关,其在NSCLC的诊断和预后评估中具有一定临床价值。     

食管癌组织环指蛋白2、环指蛋白6的表达与上皮-间质转化和预后的关系分析

摘要 目的：探讨食管癌组织环指蛋白2（RNF2）、环指蛋白6（RNF6）的表达与上皮-间质转化（EMT）和预后的关系。方法：选择广东医科大学附属医院2017年2月至2020年2月收治的162例食管癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织。采用免疫组化法检测RNF2、RNF6以及EMT标志蛋白[上皮钙黏附素（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）Slug 和Snail]表达。Spearman相关性分析RNF2、RNF6与EMT标志蛋白的关系;分析食管癌组织RNF2、RNF6表达在不同临床病理特征中的差异;Kaplan-Meier生存曲线分析RNF2、RNF6表达与食管癌患者预后的关系;多因素Cox回归分析影响食管癌患者预后的因素。结果：食管癌组织RNF2、RNF6、N-cadherin、Slug和Snail蛋白阳性表达率高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性表达率低于癌旁组织（P＜0.05）。食管癌组织RNF2、RNF6蛋白阳性表达率与N-cadherin、Slug和Snail蛋白阳性表达率呈正相关,与E-cadherin蛋白阳性表达率呈负相关（P＜0.05）;低度分化、TNM分IIIA期、肿瘤直径≥2 cm、淋巴结转移在食管癌组织中RNF2、RNF6蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移、肿瘤直径＜2 cm,中高度分化、TNM分期I～II期食管癌组织（P＜0.05）;RNF2阳性表达患者3年OS率为47.17%,低于RNF2阴性表达患者的59.26% （P＜0.05）,RNF6阳性表达患者3年OS率为47.06%,低于RNF6阴性表达患者的63.41%（P＜0.05）;多因素Cox回归分析显示TNM分期ⅢA期、淋巴结转移、RNF2阳性表达、RNF6阳性表达是食管癌患者预后的危险因素（P＜0.05）。结论：食管癌组织中RNF2、RNF6阳性表达率增加,且与肿瘤直径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及低生存率有关,RNF2、RNF6可能通过EMT参与食管癌恶性进展过程。     

结直肠癌组织RABEX-5、LASS2、HOXB7蛋白的表达及临床意义

摘要 目的：探讨结直肠癌组织Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子-5（RABEX-5）、人源长寿保障基因2（LASS2）、同源异型盒基因B7（HOXB7）表达与临床病理特征及预后的关系。方法：选择2013年10月至2015年4月期间在我院接受治疗的105例结直肠癌患者作为研究对象。检测其结直肠癌组织以及癌旁组织中RABEX-5、LASS2、HOXB7表达,分析RABEX-5、LASS2、HOXB7表达与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同RABEX-5、LASS2、HOXB7表达患者总生存率的差异,Cox比例风险回归分析结直肠癌患者预后的影响因素。结果：与癌旁组织相比,结直肠癌组织中RABEX-5、HOXB7表达阳性率上调,而LASS2阳性率下降（P<0.05）。LASS2表达与TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P<0.05）,而RABEX-5、HOXB7表达与TNM分期和淋巴结转移有关（P<0.05）。RABEX-5、HOXB7表达阳性患者的生存率分别低于RABEX-5、HOXB7表达阴性患者,而LASS2表达阳性患者的生存率高于LASS2表达阴性患者（P<0.05）。结直肠癌患者预后的影响因素包括TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、RABEX-5阳性表达、LASS2阴性表达和HOXB7阳性表达（P<0.05）。结论：在结直肠癌组织中RABEX-5、HOXB7阳性率升高,而LASS2阳性率下降,且与TNM分期以及淋巴结转移密切相关。RABEX-5、LASS2、HOXB7表达与结直肠癌患者的生存和预后联系密切。     

非小细胞肺癌组织PRRX1、VASH-1与微血管密度、临床病理参数和预后的关系研究

摘要 目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织配对相关同源框蛋白1（PRRX1）、血管抑制蛋白1（VASH-1）与微血管密度（MVD）、临床病理参数和预后的关系。方法：选择2018年1月至2020年1月辽宁省金秋医院行手术切除的156例NSCLC患者的癌组织及癌旁正常组织标本。应用免疫组织化学染色法检测癌组织及癌旁组织PRRX1、VASH-1的阳性表达率,并进行MVD计数。比较PRRX1阳性表达组/阴性表达组、VASH-1阳性表达组/阴性表达组MVD计数。分析PRRX1、VASH-1与NSCLC患者病理参数的关系。随访3年,应用Kaplan-Meier生存曲线分析PRRX1、VASH-1阳性/阴性表达与NSCLC患者预后的关系。结果：与癌旁组织相比,NSCLC患者癌组织PRRX1阳性表达率降低,VASH-1阳性表达率升高（P<0.05）。与PRRX1阴性NSCLC患者相比,PRRX1阳性NSCLC患者癌组织MVD降低,与VASH-1阴性NSCLC患者相比,VASH-1阳性NSCLC患者癌组织MVD升高（P<0.05）。与TNM I~II期、无淋巴结转移NSCLC患者的癌组织相比,TNM Ⅲ A期、淋巴结转移NSCLC患者的癌组织中PRRX1阳性表达率降低,VASH-1阳性表达率升高（P<0.05）。Kaplan-Meier法分析显示,PRRX1阳性组3年总体生存率（OS）、3年无病生存率（DFS）高于PRRX1阴性组（P<0.05）,VASH-1阴性组3年OS、3年DFS高于VASH-1阳性组（P<0.05）。结论：NSCLC患者的癌组织中PRRX1阳性表达率降低,VASH-1阳性表达率升高,与淋巴结转移、TNM分期及不良预后有关。     

Luminal B型乳腺癌不同亚型的临床病理特征及预后生存分析

摘要 目的：分析Luminal B型乳腺癌不同亚型患者的临床病理特征以及预后差异。方法：回顾性分析2006年1月至2016年1月期间上海市第六人民医院徐汇院区和临港院区收治的359例原发性Luminal B型乳腺癌患者的临床病理以及随访资料,根据Luminal B型乳腺癌分子亚型分为人表皮生长受体2（Her-2）阴性组（266例）和Her-2阳性组（93例）。比较两组患者的临床病理特征差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析两组患者5年无进展生存率和总生存率的差异,采用Cox风险比例回归分析Luminal B型乳腺癌患者预后的影响因素。结果：Her-2阳性组TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、肿瘤组织学分级Ⅲ级、PR阴性、Ki-67高表达、淋巴结转移比例高于Her-2阴性组（P＜0.05）。Her-2阳性组5年DFS、OS生存率分别为12.90%、40.86%,分别低于Her-2阴性组的24.06%、59.77%（Log-Rankχ²=14.500、12.860,P=0.000、0.000）。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移、Her-2阳性、PR阴性是Luminal B型乳腺癌患者不良预后的危险因素（P＜0.05）。结论：Luminal B 型乳腺癌患者不同分子亚型的TNM分期、肿瘤组织学分级、淋巴结转移、Ki-67和PR表达存在差异,同时,TNM分期、淋巴结转移、Her-2阳性、PR阴性是Luminal B 型乳腺癌患者预后不良的危险因素。     

鼻咽癌组织COX-2、SDHB、HSP90β表达与临床病理特征及预后的关系研究

摘要 目的：探讨鼻咽癌组织环氧化酶-2（COX-2）、琥珀酸脱氢酶（SDHB）、热休克蛋白90β（HSP90β）表达与临床病理特征及预后的关系。方法：应用免疫组织化学染色法对78例鼻咽癌组织和65例鼻咽部慢性炎症组织中COX-2、SDHB、HSP90β表达情况进行检测,并分析鼻咽癌组织中COX-2、SDHB、HSP90β表达与临床病理特征的关系及其相关性。所有患者随访3年,根据不同COX-2、SDHB、HSP90β表达情况将患者分为COX-2阳性组、COX-2阴性组、SDHB阳性组、SDHB阴性组、HSP90β阳性组、HSP90β阴性组,比较各组患者生存情况。结果：鼻咽癌组织中COX-2、HSP90β阳性率显著高于鼻咽部慢性炎症组织,SDHB阳性率显著低于鼻咽部慢性炎症组织（P<0.05）。TNM分期为III+IV期、中低分化、有颈淋巴结转移者鼻咽癌组织中COX-2、HSP90β阳性率显著高于TNM分期为I+II期、高分化、无颈淋巴结转移者,SDHB阳性率显著低于TNM分期为I+II期、高分化、无颈淋巴结转移者（P<0.05）。Spearman相关分析显示,鼻咽癌组织中COX-2表达与SDHB表达呈负相关（rs=-0.462, P=0.008）,与HSP90β表达呈正相关（rs=0.501, P=0.000）,HSP90?茁表达与SDHB表达呈负相关（rs=-0.438, P=0.012）。随访3年,存活49例,死亡29例,存活率62.82%。鼻咽癌组织COX-2阴性组、SDHB阳性组、HSP90β阴性组患者生存率、中位生存期显著优于COX-2阳性组、SDHB阴性组、HSP90β阳性组患者（P<0.05）。结论：鼻咽癌组织中COX-2、SDHB、HSP90β表达情况与患者TNM分期、肿瘤分化情况和颈淋巴结转移相关,且其表达情况与鼻咽癌患者生存期有密切关系。     

结直肠癌组织LRFN4、HMGB2、MAGE-A9的表达及与临床病理特征和预后的关系分析

摘要 目的：探讨结直肠癌组织富含亮氨酸重复序列/Ⅲ型纤维连接蛋白4(LRFN4)、高迁移率族蛋白B2(HMGB2)、黑色素瘤相关抗原-A9(MAGE-A9)表达与临床病理特征及预后的关系。方法：对2013年5月至2015年5月期间在我院接受治疗的102例结直肠癌患者进行研究。检测结直肠癌组织以及癌旁组织中LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达情况。分析LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达与临床病理特征的关系；分析LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达对患者总生存率的影响。分析影响结直肠癌患者预后的因素。结果：与癌旁组织相比，结直肠癌组织中LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达阳性率上调（P<0.05）。LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达与TNM分期和淋巴结转移相关（P<0.05）。LRFN4、HMGB2、MAGE-A9阳性表达患者的生存率分别低于LRFN4、HMGB2、MAGE-A9阴性表达患者（P<0.05）。Cox比例风险回归分析结果显示，TNM分期、LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达是结直肠癌患者预后的影响因素（P<0.05）。结论：结直肠癌组织中LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达阳性率上调，并与结直肠癌的进展和患者的预后有关，检测LRFN4、HMGB2、MAGE-A9表达情况有助于患者的预后评估。     

Piwil2 及Stat3、Bcl-2 蛋白在雄性不育小鼠 睾丸组织中表达

本研究主要是探讨Piwil2、Stat3、Bcl-2蛋白在不育的雄性小鼠中的表达量及三者之间的表达位置相关性。取雄性昆明种小鼠60只,随机分为实验组与对照组,每组30只。实验组采用雷公藤多苷药物灌胃造小鼠不育模型28 d;对照组按照同样剂量的生理盐水进行灌胃,持续时间及频次同实验组。造模后将两组雄性小鼠分别与雌性小鼠交配;再处死雄性小鼠取出两组的睾丸组织,采用免疫组织化学染色法和蛋白印迹检测法分别检测样本中Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白的表达状况。将实验组与对照组的检测结果进行比较,观察两组的蛋白表达差异性及三个蛋白表达的相关性。H.E染色显示,实验组小鼠睾丸组织生精小管结构与对照组相比,明显被破坏,精原细胞及初次级精母细胞数量明显减少,结合与雌鼠交配后受精能力明显下降的结果,说明不育造模成功。免疫组化(IHC)染色结果显示,实验组Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白的染色程度及阳性细胞数均明显低于对照组(P 0.01)。Western Blot结果同样显示,三种蛋白在实验组的表达量明显低于对照组(Piwil2蛋白P 0.05,Stat3蛋白P 0.05,Bcl-2蛋白P 0.01)。本研究说明,Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白在雄性不育小鼠中表达量均显著降低,这三个蛋白对小鼠精子生成及小鼠不育的发生起到重要调节作用。     

小鼠cofilin2蛋白的原核表达及纯化

[目的]构建小鼠cofilin2原核表达载体并纯化表达产物。[方法]以胚胎期小鼠心脏组织的c DNA为模板PCR扩增cofilin2基因,经酶切连接表达载体PGEX-4T-1后转化入大肠杆菌E. coli BL21感受态细胞中,利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达及优化,利用SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝R-250进行染色,检测GST-cofilin2的表达情况。通过谷胱甘肽树脂(Glutathione Resin)亲和层析进行纯化,最后通过Western Blot进行验证。[结果]PCR成功扩增cofilin2基因,双酶切及测序结果表明p GEX-4T-1-cofilin2原核表达载体构建成功,SDS-PAGE鉴定表明,在22℃、200μmol/L的IPTG能诱导出大量可溶性的GST-cofilin2蛋白,分子量为43 k Da。Western Blot验证得到纯化的GST-cofilin2。[结论]成功构建小鼠cofilin2原核表达载体,纯化得到的重组小鼠cofilin2蛋白可用于后续的生物学研究。     

Interactions of protein kinase CK2 subunits

Several approaches have been used to study the interactions of the subunits of protein kinase CK2. The inactive mutant of CK2 that has Asp 156 mutated to Ala (CK2A156) is able to bind the CK2 subunit and to compete effectively in this binding with wild-type subunits and . The interaction between CK2A156 and CK2 was also demonstrated by transfection of epitope-tagged cDNA constructs into COS-7 cells. Immunoprecipitation of epitope-tagged CK2A156 coprecipitated the subunit and vice-versa. The assay of the CK2 activity of the extracts obtained from cells transiently transfected with these different subunits yielded some surprising results: The CK2 specific phosphorylating activity of these cells transfected with the inactive CK2A156 was considerably higher than the control cells transfected with vectors alone. Assays of the immunoprecipitated CK2A156 expressed in these cells, however, demonstrated that the mutant was indeed inactive. It can be concluded that transfection of the inactive CK2A156 affects the endogenous activity of CK2. Transfection experiments with CK2 and subunits and CK2A156 were also used to confirm the interaction of CK2 with the general CDK inhibitor p21WAF1/CIP1 co-transfected into these cells. Finally a search in the SwissProt databank for proteins with properties similar to those derived from the amino acid composition of CK2 indicated that CK2 is related to protein phosphatase 2A and to other phosphatases as well as to a subunit of some ion-transport ATPases.     

猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引起猪的免疫抑制,是猪圆环病毒相关性系统疾病(PCV2-systemic disease,PCV2-SD)的主要病原,给养猪业带来了巨大的经济损失。文中从PCV2的进化历程、编码蛋白、对免疫系统的影响及技术防控四方面入手,对PCV2及PCV2-SD进行了全面回顾与展望。     

Bcl—2家族蛋白与细胞凋亡

Bcl 2家族蛋白是在细胞凋亡过程中起关键性作用的一类蛋白质。在线粒体上 ,Bcl 2家族蛋白通过与其他凋亡蛋白的协同作用 ,调控线粒体结构与功能的稳定性 ,发挥着细胞凋亡“主开关”的作用。Bcl 2家族包括两类蛋白质 :一类是抗凋亡蛋白 ,另一类是促凋亡蛋白。在细胞凋亡时 ,Bcl 2家族中的促凋亡蛋白成员发生蛋白质的加工修饰 ,易位到线粒体的外膜上 ,引起细胞色素c、凋亡诱导因子等其他促凋亡因子的释放 ,导致细胞凋亡 ;而平时被隔离在线粒体等细胞器内的该家族的抗凋亡蛋白成员则抑制细胞色素c和凋亡诱导因子等促凋亡因子的释放 ,具有抑制细胞凋亡的功能。但一旦这类抗凋亡蛋白成员与激活的促凋亡蛋白发生相互作用后 ,便丧失了对细胞凋亡的抑制作用 ,造成线粒体等细胞器的功能丧失和细胞器内促凋亡因子的释放 ,导致细胞凋亡。现以Bcl 2家族调控细胞凋亡的最新研究进展为基础 ,对Bcl 2家族成员及其蛋白质结构、分布和调控细胞凋亡的分子机制进行综述。     

Abi enhances Abl-mediated Cdc2 phosphorylation and inactivation

Abelson tyrosine kinase (Abl) is a non-receptor tyrosine kinase which is frequently coupled with adaptor proteins to interact with its substrates for the regulation of cytoskeleton rearrangement, cell growth and apoptosis in response to a variety of biological stimuli. The Abl interactor (Abi) family members were first identified as adaptor proteins of Abl for regulating Abl transforming and kinase activity. In the present study, we used a yeast two-hybrid screen to identify Cdc2 as a novel Abi-binding protein. This finding led us to investigate the role of Abi in linking Abl and Cdc2. These three proteins formed a trimeric complex inDrosophila and mammalian cells. The expression of Abi in cells greatly enhanced the formation of the Abl-Cdc2 complex, suggesting that Abi functions as an adaptor protein facilitating the binding between Abl and Cdc2. We show that Abi promotes Abl-mediated phosphorylation of Cdc2 at tyrosine 15 and inactivation of Cdc2 kinase activity. Furthermore, coexpression of Abl and Abi inDrosophila S2 cells led to suppression of cell growth. These data suggest that Abl signaling may be involved in the downregulation of Cdc2 kinase in cell cycle control.     

Activation of Pyk2 by CaM kinase II in cultured hypothalamic neurons and gonadotroph cells

Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is secreted from hypothalamic GnRH neurons and stimulates a GnRH receptor in gonadotroph cells and GnRH neurons. The GnRH receptor belongs to the G-protein-coupled receptors, and stimulation of the GnRH receptor activates extracellular signal-regulated protein kinase (ERK). We reported previously that the δ2 isoform of Ca²⁺/calmodulin-dependent protein kinase II (CaM kinase IIδ2) was involved in GnRH-induced ERK activation in cultured GnRH neurons (GT1–7 cells). Recently, we found that GnRH treatment of GT1–7 cells activated proline-rich tyrosine kinase 2 (Pyk2), and Pyk2 was involved in ERK activation. In the current study, we examined the possibility that CaM kinase IIδ2 might activate Pyk2. Knockdown of CaM kinase IIδ2 and KN93, an inhibitor of CaM kinases, inhibited the GnRH-induced activation of Pyk2. In the case of cultured gonadotroph cells (αT3-1 cells), knockdown of CaM kinase IIβ’e inhibited GnRH-induced Pyk2 activation. In addition, our inhibitor studies indicated that Pyk2 and CaM kinase II were involved in the GnRH-induced shedding of proHB-EGF in GT1–7 cells. These results suggested that CaM kinase II activated the ERK pathway through Pyk2 activation and HB-EGF production in response to GnRH.