新合成黄腐酚类似物联合顺铂对宫颈癌细胞化疗增敏作用的研究

摘要 目的：探讨新合成黄腐酚类似物联合顺铂对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响及其机制。方法：以不同浓度（5、7.5、15、20 μmol/L）黄腐酚类似物处理宫颈癌Hela细胞和正常MRC-5细胞48 h后,MTT实验检测细胞增殖活力并计算出黄腐酚类似物对2种细胞的半数抑制浓度(IC₅₀);采用MTT实验进一步观察IC₅₀最低的黄腐酚类似物联合顺铂对Hela和MRC-5细胞增殖活力的影响,采用流式细胞仪检测Hela细胞周期和凋亡情况,Western blot法检测Hela细胞中凋亡相关蛋白表达变化。结果：黄腐酚类似物a8、a13、b11和b12对宫颈癌Hela细胞增殖均有一定的抑制作用,且a13的IC₅₀值最小;另外,这4种浓度的黄腐酚类似物对正常MRC-5细胞有轻微的抑制作用,且a13的IC50值最大。与对照组比较,顺铂组、a13组、顺铂+a13组中正常MRC-5细胞存活率差异均无统计学意义（P<0.05）,但顺铂组、a13组和顺铂+a13组中宫颈癌Hela细胞存活率、G2/M期细胞百分比和B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）蛋白表达水平均明显降低,而G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中细胞色素C（Cyt-c）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved Caspase-3）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9（Cleaved Caspase-9）蛋白表达水平均明显升高,且顺铂+a13组中上述指标变化幅度明显大于顺铂组、a13组（P<0.05）。结论：黄腐酚类似物与顺铂联合可协同抑制宫颈癌Hela细胞增殖,表现良好的化疗增敏效果,其作用机制可能与阻滞细胞周期进程和调控凋亡相关蛋白表达促进细胞凋亡有关。     

人参皂苷Rh2对大鼠C6胶质瘤细胞Siah-1、Synaptophysin、MMP9及VEGF表达的影响

摘要 目的：探讨人参皂苷Rh2对大鼠C6胶质瘤细胞Siah-1、突触素（Synaptophysin）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：将大鼠C6胶质瘤细胞分为对照组、人参皂苷Rh2低剂量组（16 μg/mL）、人参皂苷Rh2中剂量组（32 μg/mL）、人参皂苷Rh2高剂量组（48 μg/mL），CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell检测细胞侵袭；实时荧光定量-聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测C6胶质瘤细胞中VEGF、Siah-1、Synaptophysin、MMP-9 mRNA表达；蛋白质印迹法（Western blot）检测C6胶质瘤细胞中VEGF、Siah-1、Synaptophysin、MMP-9蛋白表达。结果：与对照组比较，人参皂苷Rh2低剂量组、人参皂苷Rh2中剂量组、人参皂苷Rh2高剂量组大鼠C6胶质瘤细胞OD₄₅₀值（24 h、48 h）、克隆形成率、细胞侵袭数、VEGF、Synaptophysin、MMP-9 mRNA及蛋白表达降低，细胞凋亡率、Siah-1 mRNA及蛋白表达升高，且呈剂量依赖性（P<0.05）。结论：人参皂苷Rh2可能通过上调Siah-1，下调VEGF、Synaptophysin、MMP-9表达来抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖与侵袭，促进细胞凋亡。     

长链非编码RNA n336928对胃肠胰神经内分泌肿瘤细胞增殖及迁移的影响

摘要 目的：从基础实验层面研究长链非编码RAN n336928(LncRNA n336928,即n336928)在胃肠胰神经内分泌肿瘤(Gastro-entero-pancreatic neuroendocrine tumors，GEP-NETs)进展中的作用与影响。方法：首先采用实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测n336928在人正常胰腺导管上皮细胞系(hTERT-HPNE)、GEP-NETs细胞株(QGP-1、 STC-1)中表达情况。采用靶向n336928的小干扰(si-RNA)，以转染试剂lipo3000为载体进行敲降。通过CCK8法、克隆实验和 EdU 实验观察细胞增殖活力，通过Transwell 实验观察细胞迁移能力变化，通过流式分析实验检测n336928敲低是否与周期阻滞和细胞凋亡相关，并用Western blotting 检测周期和凋亡相关标志性蛋白表达。结果：QGP-1和STC-1中 n336928的mRNA水平的表达相较于hTERT-HPNE明显升高(P＜0.05)，抑制QGP-1及STC-1中 n336928的表达后，细胞的增殖及迁移能力明显减弱(P＜0.05)。QGP-1细胞转染n336928小干扰后，细胞周期主要阻滞在G1/S期，且细胞凋亡明显增加。与对照组相比，敲降组的周期相关蛋白（CyclinD1）明显减少，相反凋亡相关蛋白(Caspase3)明显升高(P＜0.05)。为了进一步研究基因作用机制，我们用RNA免疫沉淀反应（RIP）验证n336928可与EZH2结合，并共同调控下游基因P21。结论：LncRNA n336928可通过结合EZH2并表观调控下游基因P21，而参与胃肠胰神经内分泌肿瘤的发生发展过程。     

KGF联合HIF-1α对BECN1敲除IEC-6细胞缺氧的保护作用及机制

摘要 目的：探讨KGF联合HIF-1α对BECN1敲除后的IEC-6细胞在缺氧应激状态下的保护作用及相关机制。方法：构建敲除BECN1基因的稳定细胞系IEC-6B-细胞,分为空白对照组（BC）、阴性对照组（NC）、HIF-1α组、KGF联合HIF-1α组（KH）。观察细胞形态学改变。检测细胞存活率、ATP含量、细胞周期和细胞凋亡率。检测自噬相关基因表达水平和凋亡、自噬相关蛋白的表达。结果：低氧处理24 h后,各组细胞可见梭形、星形及其它异常形态变化;NC组细胞胞质内可见大量大小不一的吞噬溶酶体泡;其他各组细胞呈现细胞早期凋亡形态变化,BC组和KH组细胞胞质中可见自噬泡。与BC组相比较,各敲除组细胞存活率均显著降低（P<0.01）,其中KH组细胞存活率高于NC组、KGF组及HIF-1α组（P<0.05）。BC组细胞内ATP含量均显著高于其他各组（P<0.05）。与BC组和KH组比较,其他三组细胞G0/G1期百分比显著增加,细胞凋亡率均显著增加（P<0.05）。与BC组相比较,其余各组细胞自噬基因BECN1、SQSTM1及LC3基因mRNA表达均显著降低（P<0.05）;Beclin 1蛋白及LC3 II/LC3 I的比值均显著降低（P<0.05）,且p62蛋白表达显著增加（P<0.05）。KH组的Bax/Bcl-2的比值、Caspase3蛋白表达低于NC组（P<0.05）。结论：KGF联合HIF-1α能促进细胞增殖、增强细胞能量代谢、减少G₀/G₁期阻滞细胞率、抑制细胞凋亡作用,对低氧应激的IEC-6B-细胞具有保护作用。     

研究报告: 组织蛋白酶B介导NLRP3小体在砷致小胶质细胞炎症激活中的作用

目的 探究组织蛋白酶B（CTSB）介导NLRP3小体在砷致小胶质细胞（BV-2）炎症激活中的作用。方法 取处于对数生长期的BV-2细胞，分别暴露于终浓度为0、2、4、8 μmol/L亚砷酸钠（NaAsO₂）溶液培养24 h，检测细胞活性，测定各组细胞内CTSB和细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达水平。流式细胞仪检测胞内溶酶体膜稳定性。基于实验结果，增设CTSB抑制剂组（5 μmol/L CA074-Me +8 μmol/L NaAsO₂、10 μmol/L CA074-Me+8 μmol/L NaAsO₂），检测两组细胞内炎症相关蛋白NLRP3、Caspase-1和IL-1β、IL-18的表达水平。结果 与对照组比较，各染砷组细胞抑制率增高，呈现剂量效应关系，溶酶体膜稳定性下降，差异有统计学意义（P<0.01），胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1表达增高，差异有统计学意义（P<0.01）；与对照组（8 μmol/L NaAsO₂）比较，抑制剂组BV-2细胞胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1水平均降低，差异有统计学差异（P<0.01）。结论 NaAsO₂通过诱导小胶质细胞内CTSB水平的上升，介导NLRP3炎症小体激活小胶质细胞，促其释放炎性因子，致神经系统损伤。     

二十二碳六烯酸对氧糖剥夺环境下大鼠脑星形胶质细胞凋亡及血管生成因子分泌的影响

摘要 目的：评价二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)预处理对氧糖剥夺环境下(Oxygen and glucose deprivation,OGD)大鼠脑星形胶质细胞凋亡及血管生成因子分泌的影响。方法：大鼠脑星形胶质细胞传代培养,第3~4代用于实验。采用随机数字法将培养的细胞分为6组：正常对照组、OGD组、OGD+10 μMDHA组、OGD+40 μMDHA组、OGD+10 μMDHA+GW9662组、OGD+40 μMDHA+GW9662组。在所有缺氧模型组(除正常对照组外)先用无糖、无血清的DMEM液置换原培液;其次在OGD+10 μMDHA、OGD+40 μMDHA、OGD+10 μMDHA+GW9662、OGD+40 μMDHA+GW9662组加入相应浓度的DHA,同时在OGD+10 μMDHA+GW9662组和OGD+40μMDHA+GW9662组加入5 μM GW9662(过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ的抑制剂)。预处理完成后,正常对照组和其余各组分别在5% CO₂:95%空气和94％N₂:5％ CO₂:1％O₂条件下培养24 h。采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附剂测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测培养上清液中的促血管生成素1（Angiopoietin-1,Ang1）、促血管生成素2（Angiopoietin2,Ang2）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的分泌量,Western blotting法检测Bax、Bcl-2、caspase-3的表达。结果：与正常对照组比较,其余组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3表达水平明显增加(P＜0.01),而Bcl-2、Bcl-2/Bax表达明显降低(P＜0.01)。与OGD组比较,OGD+10 μMDHA组和OGD+40 μMDHA组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3表达水平明显降低(P＜0.01),而Bcl-2、Bcl-2/Bax表达明显增加(P＜0.01);Ang1分泌量明显增加(P＜0.01),而Ang2和VEGF分泌量明显降低(P＜0.01);上述各指标的差异在OGD+40 μMDHA组里更加显著(P＜0.01)。与OGD组比较,OGD+10 μMDHA+GW9662和OGD+40 μMDHA+GW9662组各个观察指标均无明显差异(P＞0.05)。相关性统计分析结果显示细胞凋亡率与Ang1水平呈显著负相关(P<0.01),与Ang2和VEGF的水平呈显著正相关(P<0.01)。结论：二十二碳六烯酸(DHA)预处理能够减少大鼠脑星形胶质细胞在氧糖剥夺(OGD)环境下的凋亡,其机制与增加Ang1分泌,减少Ang2和VEGF分泌,进而调控Ang/Tie2信号通路相关。     

龙鹿丸联合来曲唑对多囊卵巢综合征不孕症患者性激素、Th1/Th2免疫失衡和临床结局的影响

摘要 目的：探讨龙鹿丸联合来曲唑对多囊卵巢综合征（PCOS）不孕症患者性激素、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2（Th1/Th2）免疫失衡和临床结局的影响。方法：选择2020年4月~2023年4月期间在湖南省妇幼保健院接受治疗的135例PCOS不孕症患者。采用双色球法将患者分为对照组和联合组,分别为67例和68例。对照组接受来曲唑治疗,联合组接受龙鹿丸联合来曲唑治疗。对比两组疗效、性激素指标[雌二醇（E₂）、促卵泡激素（FSH）、孕酮（P）和黄体生成素（LH）]、Th1/Th2免疫失衡相关指标[干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）和Th1/Th2]、临床结局和安全性。结果：与对照组相比,联合组临床总有效率更高（P<0.05）。治疗后,联合组E₂、FSH、P高于对照组,LH低于对照组（P<0.05）。治疗后,联合组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2低于对照组（P<0.05）。联合组的排卵率、妊娠率高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：PCOS不孕症患者采用龙鹿丸联合来曲唑治疗,可通过更好地改善性激素水平和提高抗病能力来改善其临床结局。     

卵巢癌细胞中MTDH-PTEN互作对奥沙利铂耐药性的影响及机制

摘要 目的：探究卵巢癌细胞中MTDH-PTEN互作对奥沙利铂耐药性的影响及机制。方法：人卵巢癌细胞系通过慢病毒感染,将其分为对照组、NC-shRNA组和MTDH-shRNA组。通过RT-PCR分析不同组细胞MTDH和PTEN mRNA表达。通过MTT测定法测定细胞活力。通过CCK-8检测奥沙利铂诱导下的细胞增殖。通过膜联蛋白V染色细胞凋亡测定细胞凋亡。通过流式细胞仪分析细胞周期。通过Transwell试验检测细胞迁移和侵袭。通过流式细胞仪分析细胞周期。通过共免疫沉淀分析MTDH和PTEN的互联作用。结果：MTDH-shRNA组MTDH mRNA表达较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）,MTDH-shRNA组PTEN mRNA表达较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）。当未添加奥沙利铂（浓度为0 μM）,各组细胞活力比较无差异（P>0.05）。当奥沙利铂浓度为2 μM、4 μM和8 μM时,MTDH-shRNA组细胞活力较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。0 h,各组细胞增殖比较无差异（P>0.05）,第24 h、48 h和72 h时,MTDH-shRNA组细胞增殖较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。MTDH-shRNA组细胞凋亡率较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）。MTDH-shRNA组G1期细胞占比较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）,MTDH-shRNA组S/M期细胞占比较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。MTDH-shRNA组细胞迁移和侵袭数量较NC-shRNA组和对照组减少（P<0.05）。结论：MTDH在卵巢癌细胞中与PTEN共表达并与可与PTEN相互作用,因此可通过抑制MTDH表达、诱导PTEN表达可以恢复对卵巢癌细胞对奥沙利铂的药物敏感性。     

环黄芪醇治疗白癜风的作用及机制

摘要 目的：探索环黄芪醇（Cycloastragenol,CAG）对白癜风的治疗作用及机制。方法：将正常人皮肤黑素细胞PIG1分组如下：对照组、H₂O₂组、10CAG组、50CAG组和100CAG组,分别使用不同浓度（10、50、100 μM）的环黄芪醇和250 μM的H₂O₂ 与PIG1细胞共培养。通过CCK-8法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡,并测定细胞中的黑色素、SOD、CAT和MDA含量。将C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和CAG组。通过每天涂抹50 mg 40%的莫诺苯宗乳膏建立白癜风小鼠模型,然后使用50 mg/kg的环黄芪醇治疗小鼠。通过HE染色和Masson-Fontana染色检测皮肤组织中的毛囊和黑色素含量。通过Western blotting检测MITF、TYR、TRP-1、TRP-2、Bax、Bcl-2、p-p38/p38的蛋白表达。结果：与H₂O₂组相比,50CAG组和100CAG组的细胞活力和黑色素含量均升高,凋亡率均降低,Bax蛋白表达水平均降低,而Bcl-2均升高,SOD和CAT水平均升高,而MDA水平均降低（P<0.05）。10CAG组、50CAG组和100CAG组的毛囊和黑色素含量均较H₂O₂组增多。与H₂O₂组相比,50CAG组和100CAG组的MITF、TYR、TRP-1、TRP-2和p-p38/p38蛋白表达水平均升高（P<0.05）。与模型组相比,CAG组的的MITF、TYR、TRP-1、TRP-2和p-p38/p38蛋白表达水平均升高（P<0.05）。结论：环黄芪醇在细胞水平和动物水平上均能促进黑色素合成,对白癜风具有较好的治疗作用,其机制可能与p38信号通路的激活有关。     

右美托咪定联合丙泊酚对HVR患者氧化应激、脑氧代谢指标和细胞焦亡因子的影响

摘要 目的：探讨丙泊酚、右美托咪定复合麻醉对体外循环下心脏瓣膜置换（HVR）患者脑氧代谢指标、氧化应激和细胞焦亡因子的影响。方法：选取2021年3月~2022年12月期间在我院择期行体外循环下HVR的136例患者。按照随机数字表法将患者分为对照组（丙泊酚麻醉）和研究组（右美托咪定联合丙泊酚麻醉）,各为68例。对比两组血流动力学、氧化应激指标、心肌损伤指标、脑氧代谢指标、细胞焦亡因子和不良反应发生率。结果：开放主动脉后（T1）~术毕（T3）时间点,研究组心率（HR）、平均动脉压（MAP）高于对照组（P<0.05）。术后24 h,研究组超氧化物歧化酶（SOD）高于对照组,丙二醛（MDA）低于对照组（P<0.05）。术后24 h,研究组肌酸激酶同工酶（CK-MB）、N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）低于对照组（P<0.05）。术后24 h,研究组NOD样受体蛋白3（NLRP3）、半胱天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、消皮素D（GSDMD）低于对照组（P<0.05）。T1~T3时间点,研究组动脉-颈内静脉血氧含量差（Da-jvO₂）、脑氧摄取率（CERO₂）高于对照组,颈内静脉血氧饱和度（SjvO₂）低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：右美托咪定联合丙泊酚可减轻体外循环下HVR患者氧化应激、炎症反应和心肌损伤,改善脑功能。     

Recent advances in the study of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus replication and pathogenesis

It has now been over twenty years since a novel herpesviral genome was identified in Kaposi's sarcoma biopsies. Since then, the cumulative research effort by molecular biologists, virologists, clinicians, and epidemiologists alike has led to the extensive characterization of this tumor virus, Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV; also known as human herpesvirus 8(HHV-8)), and its associated diseases. Here we review the current knowledge of KSHV biology and pathogenesis, with a particular emphasis on new and exciting advances in the field of epigenetics. We also discuss the development and practicality of various cell culture and animal model systems to study KSHV replication and pathogenesis.     

The structure, reproduction and taxonomy of Vidalia and Osmundaria (Rhodophyta, Rhodomelaceae)

Comprises species occurring mostly in subtidal habitats in tropical, subtropical and warm-temperate areas of the world. An analysis of the type species, V. spiralis (Sonder) Lamouroux ex J. Agardh, a species from Australia, establishes basic characters for distinguishing species in the genus. These characters are (1) branching patterns of thalli, (2) flat blades that may be spiralled on their axis, (3) width of the blade, (4) primary or secondary derivation of sterile and fertile branchlets and (5) position of sterile and fertile branchlets on the thalli. Application of the latter two characters provides an important basic method for separation of species into three major groups. Osmundaria , a genus known only in southern Australia, was studied in relation to Vidalia , and its separation from the Vidalia assemblage is not accepted. Species of Vidalia therefore are transferred to the older genus name, Osmundaria. Two new species, Osmundaria papenfussii and Osmundaria oliveae are described from Natal. Confusion in the usage of the epithet, Vidalia fimbriala Brown ex Turner has been clarified, and Vidalia gregaria Falkenberg, described as an epiphyte on Osmundaria pro/ifera Lamouroux, is revealed to be young branches of the host, Osmundaria prolifera.     

New or rare chromosome counts in Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) and related genera from Kazakhstan

Fifteen chromosome counts of six Artemisia taxa and one species of each of the genera Brachanthemum, Hippolytia, Kaschgaria, Lepidolopsis and Turaniphytum are reported from Kazakhstan. Three of them are new reports, two are not consistent with previous counts and the remainder are confirmations of very scarce (one to four) earlier records. All the populations studied have the same basic chromosome number, x = 9, with ploidy levels ranging from 2x to 6x. Some correlations between ploidy level, morphological characters and distribution are noted.     

肝癌中HBV和HCV基因和抗原的分布及意义

采用原位分子杂交方法检测HCV RNA及HBV X基因;采用免疫组织化学方法研究HCV核心抗原,非结构区C33c抗原及HBxAg在肝细胞肝癌中的定位及分布.结果表明(1)HCV RNA、HBV X基因在肝细胞肝癌组织检出率分别为40%(55/136)和82%(112/136).HCV RNA定位于癌细胞的胞浆内,阳性细胞呈散在、灶状及弥漫分布三种形式;HBV X基因在肝癌细胞中的分布呈胞浆型、核型及核浆型,阳性细胞也呈上述三种分布形式;(2)HCV C33c抗原、核心抗原在肝细胞肝癌中的阳性率为81%(133/164)及86%(141/164).C33c抗原定位于癌细胞及肝细胞的胞浆内;核心抗原既定位于癌细胞核中,又可定位于胞浆中.C33c抗原阳性细胞以灶状分布为主;而核心抗原阳性细     

Selection with two alleles and complete dominance

For a plant selection model with frequency-independent viabilities, fertilities and selfing rates, it is shown that apart from global fixation, for certain parameter combinations a protected polymorphism and facultative fixation (either allele may become fixed according to initial frequencies) may both occur. Facultative fixation requires different selling rates for the dominant and recessive type. Protection of the polymorphism requires resource allocation for male and female function. In this connection the problem of purely genetically caused population extinction is discussed.
For general frequency dependence and regular segregation, the chances for establishment of a completely recessive gene are compared to those of a completely dominant gene. It is proven that the process of establishment of the recessive gene, despite a fitness advantage, may be considerably endangered by drift effects if random mating prevails. The recessive gene may reach the same effectivity in establishment as a dominant gene, only if the recessive homozygote mates exclusively with its own type during the period of establishment.