三阴乳腺癌新辅助化疗的预后与Ki-67、TOPK的表达情况相关性研究

摘要 目的：研究三阴乳腺癌（TNBC）新辅助化疗（NACT）的预后与Ki-67、TOPK的表达情况的相关性。方法：回顾性收集2014年3月至2016年6月期间我院收治并行NACT的TNBC患者90例作为研究对象,免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67和TOPK的表达,分析两者的表达与患者临床资料的关系,应用COX回归模型进行生存分析,分析影响TNBC患者预后的独立危险因素。结果：在治疗情况方面,91.11 %（82/90）的患者接受了≥4个周期的NACT治疗,84.44 %（76/90）的患者接受了手术治疗,术后pCR为22.22 %（20/90）,ORR为75.56 %（68/90）。为期5年的随访中,90例患者中共死亡8例（死于TNBC者6例,其他原因2例）,失访2例;治疗后Ki-67和TOPK的阳性率均显著低于治疗前（P＜0.05）;Ki-67、TOPK阳性和阴性表达病例在不同TNM分期、淋巴结是否转移上具有显著性差异（P＜0.05）;Ki-67和TOPK阳性表达患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）显著短于阴性表达者（P＜0.05）;TNM分期、淋巴结转移、Ki-67和TOPK阳性表达均为影响TNBC患者预后的独立危险因素。结论：Ki-67和TOPK在TNBC组织中的表达与患者的病理学特征及预后密切相关,是影响预后的独立危险因素。     

剪切波弹性成像定量参数对乳腺肿块良恶性的鉴别价值及其与组织Ki-67和C-erbB-2表达的关系研究

摘要 目的：探讨剪切波弹性成像（SWE）定量参数对乳腺肿块良恶性的鉴别价值,分析其与组织Ki-67和表皮生长因子受体2（C-erbB-2）表达的关系。方法：选择2021年1月至2022年1月于湖南省妇幼保健院超声医学科行乳腺SWE检查的106例乳腺肿块患者,根据术后或组织活检的病理检查结果分为恶性组59例和良性组47例。对比恶性组和良性组SWE参数的差异以及不同Ki-67和C-erbB-2表达乳腺癌病灶SWE参数的差异。Spearman分析乳腺癌病灶SWE参数与乳腺癌组织Ki-67和C-erbB-2表达的相关性。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析乳腺病灶SWE参数鉴别乳腺肿块良恶性的价值。结果：恶性组AE-max、Shell1 E _max 、Shell2 E _max 、Shell3 E _max 高于良性组（P＜0.05）。联合AE-max、Shell1 E _max 、Shell2 E _max 、Shell3 E _max 鉴别乳腺肿块良恶性的曲线下面积为0.841,高于单独参数鉴别的0.657、0.599、0.642、0.609（P＜0.05）。Ki-67阳性组、C-erbB-2阳性组AE-max、Shell1 E _max 、Shell2 E _max 、Shell3 E _max 高于阴性组（P＜0.05）。乳腺癌病灶AE-max、Shell1 E _max 、Shell2 E _max 、Shell3 E _max 与Ki-67和C-erbB-2表达均呈正相关（P＜0.05）。结论：乳腺恶性肿块与良性肿块的SWE参数存在明显差异,且与乳腺癌组织的Ki-67、C-erbB-2阳性表达有关,乳腺SWE检查有助于鉴别乳腺肿块良恶性。     

circPPP1R12A激活p53信号通路调控骨关节炎中软骨细胞增殖和凋亡

摘要 目的：探讨circPPP1R12A（circ_0000423）调控p53信号通路对骨关节炎（osteoarthritis,OA）中软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用qRT-PCR检测circPPP1R12A在OA软骨细胞中的表达水平。在OA软骨细胞中分别转染oe-circPPP1R12A和sh-circPPP1R12A后,采用CCK-8检测细胞增殖情况;免疫荧光检测Ki-67阳性细胞表达率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测Ki-67和p53表达水平;Western Blot检测Cleaved-caspase3、P53、BCL-2和BAX的表达水平。结果：OA软骨细胞中circPPP1R12A的表达水平明显高于正常软骨细胞。过表达circPPP1R12A能够抑制OA软骨细胞增殖和促进细胞凋亡,通过上调p53表达激活p53信号通路,低表达circPPP1R12A能够促进OA软骨细胞增殖和抑制细胞凋亡,通过下调p53表达阻滞p53信号通路。在OA软骨细胞中同时低表达circPPP1R12A和过表达p53能够反转单独低表达circPPP1R12A对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响。结论：circPPP1R12A在OA软骨细胞中明显高表达,circPPP1R12A能够通过激活p53信号通路抑制骨OA软骨细胞增殖和促进软骨细胞凋亡。circPPP1R12A可能成为OA治疗的干预靶点。     

能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性

摘要 目的：探讨能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性。方法：回顾性分析2018年6月-2021年6月我院经手术或穿刺活检病理证实为甲状腺肿瘤性病变的患者96例，其中29例为甲状腺癌局部浸润组（A组），34例为甲状腺癌无浸润组（B组），33例为甲状腺腺瘤组（C组）。另取56例甲状腺另一侧叶正常组织作为对照组（D组）。所有患者均完善能谱CT检查，采集图像后在能谱CT Viewer分析软件上测量病变区碘浓度，计算能谱曲线斜率。采用免疫组织化学染色分析Ki-67、VEGF、CD34、EGFR的表达情况。采用Spearman秩相关分析评价碘浓度、能谱曲线斜率与甲状腺癌肿瘤组织中Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达的相关性。结果：在平扫、动脉期、静脉期，A组、B组、C组和D组的碘浓度逐渐增大，两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。甲状腺癌局部浸润组织能谱曲线呈"低平型"，斜率为较小负值，正常甲状腺组织能谱曲线为下降型，斜率为负值；在平扫、动脉期、静脉期，A组、B组、C组和D组的能谱曲线斜率逐渐变小，差异均有统计学意义（P＜0.05）。A组中Ki-67、VEGF、CD34和EGFR的阳性表达率均高于B组和C组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。碘浓度在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关（P＜0.05），碘浓度在平扫与Ki-67表达呈正相关（P＜0.05），碘浓度在平扫与VEGF、CD34、EGFR表达无相关性（P＞0.05）。能谱曲线斜率在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关（P＜0.05），能谱曲线斜率在平扫与VEGF表达呈正相关（P＜0.05），能谱曲线斜率在平扫与Ki-67、CD34、EGFR表达无相关性（P＞0.05）。结论：能谱CT成像检查对甲状腺癌局部浸润深度的判断具有重要的价值，其定量参数碘浓度、能谱曲线斜率与Ki67、VEGF、CD34、EGFR具有相关性，可间接反映肿瘤微血管、肿瘤血管生成、甲状腺癌分化程度、浸润程度等情况，对评价甲状腺癌生物学行为可提供有价值的信息。     

侵袭性前列腺癌的CT、MRI表现与生物因子表达及淋巴结转移的相关性研究

摘要 目的：探讨侵袭性前列腺癌的电子计算机断层扫描（CT）、磁共振成像（MRI）表现与生物因子表达及淋巴结转移的相关性研究。方法：收集2016年2月-2021年2月于我院确诊前列腺癌患者117例,所以患者均行前列腺根治切除+盆腔淋巴结清扫术,术前均完善CT、MRI影像学检查,根据术后病理结果、Gleason评分分为侵袭性前列腺癌组（63例）和非侵袭性前列腺癌组（54例）,分析患者CT、MRI表现特征。采用免疫组织化学染色分析前列腺特异抗原（PSA）、增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞核增殖相关抗原 (Ki-67)及肿瘤抑制蛋白（P53）的阳性表达情况。分析侵袭性前列腺癌的CT、MRI表现与生物因子表达及淋巴结转移之间的关系。结果：侵袭性前列腺癌患者CT、MRI均可见不同程度的前列腺异常改变,主要表现为结节状、波浪状突起,边缘模糊、毛糙,前列腺癌突破包膜并累及邻近精囊腺、膀胱、直肠及周围脂肪组织,可见盆腔肿大淋巴结转移,测量表观扩散系数（ADC）值及动态增强MRI定量参数可大致区分病灶良恶性及恶性程度分级情况。侵袭性前列腺癌组PSA的表达低于非侵袭性前列腺癌组,而PCNA、VEGF、Ki-67、P53的表达及淋巴结转移高于非侵袭性前列腺癌组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。侵袭性前列腺癌患者肿瘤边缘表现为模糊、清晰时PSA、PCNA阳性表达率及淋巴结转移率组间差异均有统计学意义（P＜0.05）;肿瘤直径≤2 cm、＞2 cm时的淋巴结转移率组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。侵袭性前列腺癌组ADC值低于非侵袭性前列腺癌组,而Kep和Ktrans高于非侵袭性前列腺癌组患者,差异均有统计学意义（P＜0.05）。侵袭性前列腺癌患者ADC值与PSA阳性表达呈正相关性（P＜0.05）,与PCNA、Ki-67、P53阳性表达及淋巴结转移呈负相关（P＜0.05）。侵袭性前列腺癌患者Kep、Ktrans与PSA阳性表达呈负相关性（P＜0.05）,与PCNA、Ki-67、P53阳性表达及淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）。结论：侵袭性前列腺癌CT、MRI形态学具有一定特征性,通过测量ADC值及动态增强MRI定量参数可大致区分病灶恶性程度情况,初步评估前列腺癌的生物学行为,为指导临床综合治疗及预后情况提供客观依据。     

上皮性卵巢癌患者组织P53、Ki67表达及其临床意义

摘要 目的：探讨上皮性卵巢癌患者组织P53、Ki67表达及其临床意义。方法：选择卵巢肿瘤102例,其中病理诊断为良性卵巢肿瘤40例(良性组)和上皮性卵巢癌62例(恶性组),采用免疫组化法检测组织P53、Ki67表达水平,调查患者的临床病理特征并进行相关性分析。结果：恶性组的P53、Ki67表达阳性率为80.6 %和72.6 %,显著高于良性组的10.0 %和12.5 %(P<0.05)。在恶性组中,不同浸润转移、分化程度、病理分期患者的P53、Ki67表达阳性率对比差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关分析显示上皮性卵巢癌患者P53表达阳性率与Ki67表达阳性率呈现显著正相关性(r=0.872,P=0.000)。多因素logistic回归分析显示浸润转移、分化程度、病理分期都为影响P53、Ki67表达阳性率的主要因素(P<0.05)。结论：上皮性卵巢癌患者组织P53、Ki67都呈现高表达状况,与患者的临床病理特征显著相关,两者也可互相影响,共同参与上皮性卵巢癌的发生与发展。     

T3期子宫内膜癌的MRI影像表现及其与ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表达的关系研究

摘要 目的：探讨T3期子宫内膜癌的磁共振成像（MRI）影像表现及其与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、表皮生长因子受体2（C-erbB-2）及增殖细胞核抗原67（Ki-67）表达的相关性。方法：收集2016年1月-2021年10月于我院经手术病理证实为子宫内膜癌的患者194例,分析T3期子宫内膜癌的MRI影像表现,免疫组织化学染色方法检测子宫内膜癌患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表达,探讨T分期与ER、PR、C-erbB-2、Ki-67表达的关系及相关性,分析T3期子宫内膜癌MRI征象与ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性表达的关系。结果：T3期子宫内膜癌MRI主要表现为子宫体积增大,子宫内膜明显不均匀增厚并见增多软组织团块形成,子宫全肌层连续性中断,浆膜面不光滑,可见子宫附件、宫颈、阴道、宫旁组织受累,可见腹主动脉旁、髂动脉旁及盆腔淋巴结转移。随着MRI诊断T分期级别增加,ER、PR阳性率逐渐降低,C-erbB-2、Ki-67阳性率逐渐升高;ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性率在MRI诊断T分期中差异均有统计学意义（P＜0.05）。ER、PR阳性表达与MRI影像表现T分期呈负相关性（P＜0.05）,C-erbB-2、Ki-67阳性表达与MRI影像表现T分期呈正相关性（P＜0.05）。T3期子宫内膜癌MRI征象中有浆膜面受累、子宫附件受累、阴道受累及淋巴结转移或脉管癌栓时,多提示ER和PR阳性表达率降低,C-erbB-2和Ki-67阳性表达率升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：MRI检查对子宫内膜癌术前分期具有重要价值,影像表现与肿瘤标记物密切相关,可在一定程度上反映肿瘤细胞的恶性程度、分化程度、侵袭能力,有助于鉴别其病理分级,为临床综合治疗及预后提供依据。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤组织CMYC、叉头框转录蛋白1、ki-67蛋白表达及临床意义

摘要 目的：探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织CMYC、叉头框转录蛋白1（FOXP1）、ki-67蛋白表达及临床意义。方法：选择2013年2月～2018年1月我院收治的DLBCL患者100例,以免疫组织化学法分别检测DLBCL组织及癌旁组织中CMYC、FOXP1、ki-67蛋白表达情况,并分析DLBCL组织中上述蛋白表达和患者临床病理特征的关系。此外,对所有患者均进行为期2年的随访观察,将其按照生存情况分成存活组69例和死亡组31例,比较两组CMYC、FOXP1、ki-67蛋白表达情况。结果：DLBCL组织CMYC、FOXP1、ki-67蛋白阳性表达率均高于癌旁组织（P＜0.05）。国际预后指数（IPI）评分为3～4分的患者DLBCL组织CMYC蛋白阳性表达率低于IPI评分为0～2分的患者（P＜0.05）。病理分型为生发中心B细胞来源（GCB）、IPI评分为3～4分的患者DLBCL组织FOXP1蛋白阳性表达率分别低于病理分型为非生发中心B细胞来源（non-GCB）、IPI评分为0～2分的患者（P＜0.05）。年龄＜60岁、Ann Arbor分期为Ⅰ～Ⅱ期、IPI评分为3～4分的患者DLBCL组织ki-67蛋白阳性表达率分别低于年龄≥60岁、Ann Arbor分期为Ⅲ期、IPI评分为0～2分的患者（P＜0.05）。死亡组CMYC、FOXP1、ki-67蛋白阳性表达率均高于存活组（P＜0.05）。结论：DLBCL组织CMYC、FOXP1、ki-67蛋白表达均与IPI评分关系密切,FOXP1蛋白表达与病理分型有关,而ki-67蛋白表达与年龄以及Ann Arbor分期有关,DLBCL患者不良预后可能与上述三项蛋白阳性表达率的异常升高有关。     

血清P53和Wip1水平与小细胞肺癌患者化疗疗效及预后的关系研究

摘要 目的：探讨血清P53和野生型p53诱导的磷酸酶1（Wip1）水平与小细胞肺癌（SCLC）患者化疗疗效及预后的关系。方法：选择2015年6月至2017年6月青岛大学附属青岛市中心医院收治的109例SCLC患者为SCLC组和95例健康体检志愿者为对照组。所有SCLC患者均接受EP方案（依托泊苷+顺铂）化疗至少2个周期,化疗前检测血清P53和Wip1水平,出院后对所有患者进行为期5年的随访。统计随访期间SCLC患者总生存（OS）情况。分析血清Wip1和P53水平与SCLC患者临床病理特征、化疗疗效以及预后的关系。结果：SCLC组血清P53水平低于对照组（P＜0.05）,血清Wip1表达高于对照组（P＜0.05）。临床分期为广泛期、远处转移患者血清P53水平低于临床分期为局限期、无远处转移患者（P＜0.05）,血清Wip1表达高于临床分期为局限期、无远处转移患者（P＜0.05）。无效组血清P53水平低于有效组（P＜0.05）,血清Wip1表达高于有效组（P＜0.05）。低水平P53组、高表达Wip1组5年OS生存率低于高水平P53组和低表达Wip1组（P＜0.05）。多因素Cox回归分析显示化疗耐药、远处转移、高表达Wip1是SCLC患者预后不良的危险因素（P＜0.05）,高水平P53是其保护因素（P＜0.05）。结论：SCLC患者血清P53水平降低,Wip1表达增高与化疗效果较差和不良预后有关,检测血清P53表达和Wip1水平有助于辅助评估SCLC化疗疗效和预后。     

Luminal B型乳腺癌不同亚型的临床病理特征及预后生存分析

摘要 目的：分析Luminal B型乳腺癌不同亚型患者的临床病理特征以及预后差异。方法：回顾性分析2006年1月至2016年1月期间上海市第六人民医院徐汇院区和临港院区收治的359例原发性Luminal B型乳腺癌患者的临床病理以及随访资料,根据Luminal B型乳腺癌分子亚型分为人表皮生长受体2（Her-2）阴性组（266例）和Her-2阳性组（93例）。比较两组患者的临床病理特征差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析两组患者5年无进展生存率和总生存率的差异,采用Cox风险比例回归分析Luminal B型乳腺癌患者预后的影响因素。结果：Her-2阳性组TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、肿瘤组织学分级Ⅲ级、PR阴性、Ki-67高表达、淋巴结转移比例高于Her-2阴性组（P＜0.05）。Her-2阳性组5年DFS、OS生存率分别为12.90%、40.86%,分别低于Her-2阴性组的24.06%、59.77%（Log-Rankχ²=14.500、12.860,P=0.000、0.000）。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移、Her-2阳性、PR阴性是Luminal B型乳腺癌患者不良预后的危险因素（P＜0.05）。结论：Luminal B 型乳腺癌患者不同分子亚型的TNM分期、肿瘤组织学分级、淋巴结转移、Ki-67和PR表达存在差异,同时,TNM分期、淋巴结转移、Her-2阳性、PR阴性是Luminal B 型乳腺癌患者预后不良的危险因素。     

白蚁与动物及微生物的共生类型及其机制

综述了白蚁螱客的主要种类、共生关系及相关机制的研究进展。白蚁螱客中,已报道的动物种类达170种。在与动物的共生关系中存在偏利共生（宾主共栖和异种共栖）、互利共生和无关共生三种;在与微生物的共生关系中,存在与内生菌（原生动物、细菌、真菌和放线菌）和外生菌（蚁巢伞菌等）间的互利关系。指出了白蚁与螱客研究中存在的问题,给出了解决方案,并提出了今后可能的研究热点或方向,为白蚁的综合利用（如纤维素酶）及今后研究物种间的协同进化提供了基础资料。     

New amino-dithiaphospholanes and phosphoramidodithioites and their rhodium and iridium complexes

New sulfur derivatives of phosphoramidite ligands were synthesized and the impact of the sulfur unit on the spectroscopic properties of their rhodium and iridium complexes was investigated. The new ligands Bn₂NPSCH₂CH₂S^a(P-S^a) (Bn = benzyl, 4), Bn₂NPSCHCHS^a(CH₂)₃C^aH₂(P-S^a)(C^a-S^a) (6) and Bn₂NP(4-XC₆H₄OMe)₂ (X = S, 7a; X = O, 7b) were converted to the rhodium and iridium complexes trans-[Rh(CO)Cl(L)₂] (L = 4, 6, 7), [RhCl(COD)(L)] (L = 4, 6, 7), [IrCl(COD)(7a)] and [IrCl₂Cp∗(6)]. For comparison, some phosphoramidite complexes of these formulations also were synthesized. The new metal complexes were spectroscopically analyzed. For the carbonyl complexes, the ν_CO IR stretching frequencies were lower than for the corresponding phosphite and phosphoramidite ligands. The ¹J_PRh coupling constants for the rhodium complexes with the new ligands were also smaller than for the respective phosphoramidite and phosphite complexes. Finally, the ¹J_PSe coupling constants of the selenides of the new ligands were lower than those of the phosphoramidite ligands but higher than for PPh₃. The spectroscopic data reveal that the new thio ligands 4, 6 and 7a are more electron donating than phosphites and phosphoramidites but less electron donating than PPh₃.     

Astrocytes and Synaptosomes Transport and Metabolize Lactate and Acetate Differently

Astrocytes transport the monocarboxylate acetate, but synaptosomes do not. The reason for this is unknown, because both preparations express monocarboxylate transporters (MCT). The transport and metabolism of lactate, another monocarboxylate, was examined in these two preparations, and the results were compared to those for acetate. Lactate transport is more rapid in astrocytes than in synaptosomes, but of lower affinity (Kms of 17 and 4 mM, respectively). Lactate (0.2 mM) is metabolized to CO2 more rapidly in synaptosomes than in astrocytes (rates of 0.37 and 0.07 nmol x mg protein(-1) x min(-1), respectively). The reason for this is unclear, but cellular differences in lactate dehydrogenase isotype expression may be involved. Acetate is metabolized to CO2 more rapidly in astrocytes than in synaptosomes (rates of 0.43 and 0.02 nmol x mg protein(-1) x min(-1), respectively). This is likely due to cellular differences in the expression of monocarboxylate transporter subtypes.     

Rapporteur report: Basics and technology and metrology and standards

The first and second sessions of the Workshop focussed on the basics of ultrasound and infrasound, their applications in both industry and medicine, and metrology and protection standards for ultrasound applications.     

Relative and combined effects of ethanol and protein deficiency on strontium and barium bone content and fecal and urinary excretion

To elucidate accumulation of minerals in human iliac arteries with aging, the content of minerals was analyzed by inductively coupled plasma atomic emission spectrometry. Bilateral common, internal, and external iliac arteries of 16 men and 8 women, ranging ages from 65 to 93 yr, were examined. It was found that an extremely high accumulation of calcium and phosphorus occurred in the common iliac artery at old age, being higher than that of the internal and external iliac arteries. It should be noted that the accumulation of calcium and phosphorus is the highest in the common iliac artery among the human arteries examined to date. Regarding sexual differences, the content of calcium and phosphorus in the common and internal iliac arteries was higher in women than in men, whereas their content in the external iliac artery was lower in women than in men.     

Prostaglandin and thromboxane production by human and guinea-pig macrophages and leucocytes

The ability of partially purified human and guinea-pig haematogenous cell populations, when cultured in vitro, to metabolise arachidonic acid (AA) has been studied. Supernatants from 24 hour cell culture have been subjected to analysis for products of AA metabolism by gas chromatography with electron-capture detection.The cell types studied were human peripheral blood monocytes (both glass adherent and non-adherent), neutrophils, eosinophils and leukemic leucocytes; thoracic duct lymphocytes and lung alveolar macrophages. From the guinea-pig, induced and non-induced macrophage or neutrophil enriched peritoneal exudate populations, lymph node cells, peritoneal eosinophils and peripheral blood platelets were examined. Supernatants were assayed for the presence of PGE₂, PGD₂, PGF_2α, TXB₂ and 6-keto-PGF_1α. In all types studied PGE₂ and TXB₂ were the major products formed. The identification of PGE₂ and TXB₂ was confirmed by GC/MS with multiple ion monitoring.The results have been compared with other reports and their possible significance discussed in relation to the proposed role of prostaglandins as mediators and modulators in immunopathology.     

Chemokines and cytokines: axis and allies in asthma and allergy

Allergic asthma can be precipitated by many factors. For the atopic person, fungus, pollen, dust mites, cockroach antigens, and diesel exhaust are all agents that may trigger an allergic attack. Cytokines and chemokines are integral mediators of fungal asthma. From the earliest time points, they recruit and activate the cells required for the clearance of fungus as well as being critical factors involved in the immunopathology of this disease. In the final analysis, it is clear that these mediators can act to the benefit or the detriment of the host.     

Oxidation and nitration of ribonuclease and lysozyme by peroxynitrite and myeloperoxidase

In spite of the many studies on protein modifications by reactive species, knowledge about the products resulting from the oxidation of protein-aromatic residues, including protein-derived radicals and their stable products, remains limited. Here, we compared the oxidative modifications promoted by peroxynitrite and myeloperoxidase/hydrogen peroxide/nitrite in two model proteins, ribonuclease (6Tyr) and lysozyme (3Tyr/6Trp). The formation of protein-derived radicals and products was higher at pH 5.4 and 7.4 for myeloperoxidase and peroxynitrite, respectively. The main product was 3-nitro-Tyr for both proteins and oxidants. Lysozyme rendered similar yields of nitro-Trp, particularly when oxidized by peroxynitrite. Hydroxylated and dimerized products of Trp and Tyr were also produced, but in lower yields. Localization of the main modified residues indicates that peroxynitrite decomposes to radicals within the proteins behaving less specifically than myeloperoxidase. Nitrogen dioxide is emphasized as an important protein modifier.