IRX1甲基化激活CXCL14/NF-κB信号通路并改善心力衰竭

摘要 目的：探讨IRX1甲基化在心力衰竭(HF)大鼠中的作用机制。方法：通过生物信息学分析选择HF大鼠心肌细胞中的靶基因;通过TAC手术构建HF实验大鼠模型,并分组为假手术组（Sham组)、TAC组、Sham+5-Aza组和TAC+5-Aza组。通过心脏超声检测大鼠心脏功能,免疫组织化学染色评价心脏损伤程度;GSEA分析功能基因的相对丰富度。通过免疫荧光分析、Western blotting和qRT-PCR检测DNA甲基化和表达水平。结果：与正常人的基因组相比,HF患者基因组中甲基化程度显著提高,生物信息学分析确定IRX1为靶基因,IRX1表达与CXCL14/NF-κB之间存在显著相关性。超声心动图评估HF大鼠心脏功能的结果显示,与TAC组相比,TAC+5-Aza组的左心室与体重的比率显著降低,而LVDP、dP/dtmax和EF显著增加（P<0.01）。免疫染色结果显示,与TAC组相比,TAC+5-Aza组心肌细胞排列紊乱的情况得到有效缓解并恢复正常心肌细胞状态。qRT-PCR及Western blotting结果显示,与TAC组相比,TAC+5-Aza组大鼠的基因组DNA甲基化、IRX1甲基化、左心室ANP、BNP基因和β-MHC mRNA的表达水平显著降低（P<0.01）,α-MHC mRNA的表达水平、IRX1和CXCL14的mRNA和蛋白表达水平以及MMP9和C-FLIP蛋白表达水平显著增加（P<0.01）。心肌纤维化和心肌细胞凋亡实验结果显示,与TAC组相比,TAC+5-Aza组大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡阳性率显著降低（P<0.01）。结论：HF模型大鼠的IRXI甲基化水平提高可能激活CXCL14/NF-?资B表达,以改善TAC诱导的心肌纤维化和细胞凋亡情况。     

AAV-9病毒转载sfrp1靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠分子机制研究

摘要 目的：探讨腺病毒9（AAV-9）转载可溶性卷曲相关蛋白1（Sfrp1）靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠的效果和分子机制。方法：选择45只健康SD雄性大鼠作为研究对象,随机分为对照组、模型组和sfrp1组,各15只。模型组和sfrp1组采用左前降支动脉结扎手术建立慢性心力衰竭大鼠模型后,给予对照组和模型组大鼠经尾静脉注射生理盐水,给予sfrp1组大鼠经尾静脉注射AAV-sfrp1载体。分别在建模成功时和注射AAV-9病毒载体第28 d通过心脏超声评价各组大鼠心功能[左室射血分数（LVEF）、左室收缩期内径（LVIDS）和左室短轴缩短率（LVFS）]。采用酶联免疫吸附法检测腹主动脉血血清中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平。采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况。采用Western blot技术检测心肌组织细胞中β-catenin、Dvl-1和α-SMA蛋白表达情况。结果：模型组和sfrp1组大鼠建模成功时的LVEF、LVFS均显著低于对照组,LVIDS显著大于对照组。注射AAV-9病毒载体后第28 d时sfrp1组大鼠LVEF和LVFS显著增加并显著大于模型组,LVIDS显著降低并显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠血清胶原Ⅰ和胶原Ⅲ水平以及心肌细胞凋亡比例均显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠心肌组织中β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白相对表达水平显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。结论：AAV-9病毒转载sfrp1能够通过靶向抑制wnt信号通路以及抑制心肌胶原合成,降低心肌细胞凋亡,改善心力衰竭大鼠心脏功能。     

高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞CTGF和MT1-MMP的表达

目的观察高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)的动态变化,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制。方法体外培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞分为正常糖对照组,高糖组和甘露醇高渗对照组,采用RT-PCR及Western印迹法分别检测CTGF和MT1-MMP的mRNA及蛋白的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中IV型胶原的含量。结果与对照组相比,高糖组各时间点系膜细胞CT-GF表达明显上调,IV型胶原的分泌增加,且二者随时间持续增高;而MT1-MMP的表达则随时间呈明显下降趋势。结论高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加,同时抑制MT1-MMP的表达,二者可能参与DN中细胞外基质(ECM)代谢失衡过程。     

糖-钠协同转运蛋白2抑制剂对心力衰竭合并糖尿病小鼠治疗效果及左心室重构影响的实验研究

摘要 目的：探究糖-钠协同转运蛋白2（Sodium-glucose cotransporter2,SGLT2）抑制剂对心力衰竭合并糖尿病小鼠治疗效果及左心室重构影响的实验研究。方法：选择4周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过高脂饮食和免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,TAC)诱导心力衰竭建立心衰合并糖尿病模型,分为三组：对照组（正常脂肪饮食）、模型组（高脂饮食第2周,TAC诱导心力衰竭）、SGLT2抑制剂组（高脂饮食+恩格列净灌胃第2周,同时TAC诱导心力衰竭）。治疗6周后,记录并比较各组小鼠死亡案例和生存率;酶联免疫吸附实验检测各组小鼠的白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子--α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的含量;50 MHz传感器耦合的Vevo 2100系统进行超声心动图评估;逆转录聚合酶链式反应(reverse transeription-polymerase chain reaction,RT-PCR)实时分析p53、p21和p16的mRNA表达;蛋白印迹分析组织因子血管细胞黏著因子(Vascular cell Adhesion Molecule-1,VCAM-1)、SGLT1、SGLT2、一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达。结果：10天内模型组较对照组和SGLT2抑制剂组生存率降低（P<0.05）,第20天、40天时模型组较对照组大鼠生存率降低,SGLT2抑制剂组较模型组的生存率升高（P<0.05）。模型组较对照组IL-6和TNF-α含量、右心室收缩压（right Ventricular Systolic Pre-ssure,RVSP）和平均肺动脉压（mean Pulmonary Artery Pressure,mPAP）水平、p53、p21和p16的mRNA表达量、VCAM-1、SGLT1、SGLT2的蛋白表达量以及左心室收缩末前后径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)、左心室舒张末前后径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末容量(left ventricular end-systolic volume,LVESV)均显著升高,IL-10含量、肺动脉血流加速时间(Pulmonary artery acceleration time,PAAT)水平、eNOS蛋白表达量以及左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)均显著降低（P<0.05）,SGLT2抑制剂组较对照组以上指标变化均与上述相反,且差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：选择性SGLT2抑制剂恩格列净改善了心衰合并糖尿病小鼠的收缩压,心脏重塑和内皮功能障碍。促进心脏的保护作用,同时改善左心室重量和体积及后壁厚度。     

LncRNA Terc在心肌纤维化过程中的功能研究

摘要 目的：探讨lncRNA端粒酶RNA组分（Terc）在心肌纤维化（MF） 过程中的作用。方法：使用不同浓度的TGF-β1诱导心肌成纤维细胞（CFs）转分化，通过免疫荧光染色、western blot检测α-SMA、Vimentin、Collagen I、Collagen III蛋白的表达水平，qRT-PCR检测lncRNA Terc表达水平。过表达和敲减Terc后，通过western blot、CCK-8和流式细胞术观察模型细胞的胞外基质产生、细胞增殖、凋亡和Smads信号传导情况。皮下注射异丙肾上腺素（ISO）构建小鼠心肌纤维化模型，并使用Terc敲低慢病毒干预，其后多普勒超声仪检测小鼠的心脏射血分数（EF）和左室短轴缩短率（FS），称量小鼠心脏湿重，HE、Masson染色检测小鼠心脏的病理改变，IHC检测α-SMA、Vimentin蛋白的表达水平，qRT-PCR检测lncRNA Terc表达水平。结果：TGF-β1处理增加CFs的α-SMA、Vimentin、Collagen I、Collagen III的蛋白表达以及Terc水平；过表达Terc促进α-SMA、Vimentin、Collagen I、Collagen III的蛋白表达以及Smad2/3的磷酸化水平，同时还可促进CFs的增殖、抑制CFs的凋亡；敲减Terc则起相反的作用；动物模型中，ISO可抑制EF和FS，增加心脏湿重，加重心肌的病理损伤，而敲减Terc可有效缓解上述过程。结论：LncRNA Terc可通过促进Smads信号传导，加速心肌成纤维细胞转分化和心肌纤维化进展。     

老年心力衰竭患者BNP、LVEDD、LVEF水平与心脏功能的关系

摘要 目的：探究老年心力衰竭患者的脑利钠肽（Brain natriuretic peptide,BNP）、左室舒张末径（Left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）、左室射血分数（Left ventricular ejection fraction,LVEF）水平与心脏功能的关系。方法：选择2019年3月-2020年12月于我院接受治疗的150例老年心力衰竭患者,按照其BNP水平将其分为A（BNP水平<94 pg/mL,43例）、B（BNP水平94~349.9 pg/mL,40例）、C（BNP水平350~988.9 pg/mL,44例）、D（BNP水平≥989 pg/mL,23例）4组,对比4组患者LVEDD、LVEF水平、血同型半胱氨酸（Homocysteine,HCY）水平,对比4组患者不同心功能分级比率,对比4组患者随访2个月心脏不良事件发生率,最后分析BNP、LVEDD和LVEF与心力衰竭患者心功能分级相关性。结果：A、B、C、D四组患者LVEDD、HCY呈递增趋势,LVEF呈递减趋势,C、D两组患者的LVEDD、HCY水平明显高于A、B两组（P<0.05）,C、D两组LVEF水平明显低于A、B两组患者（P<0.05）;A、B、C、D四组患者心功能分级逐渐加重,A组患者I级70例,II级27例,B组患者II级60例,III级29例,C组III级68例,IV级20例,D组III级3例,IV级43例,各组间对比心功能分级差异具有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D四组患者心脏不良事件发生率分别为4.12 %、11.24 %、26.14 %,43.48 %,不良事件发生率逐渐升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;BNP、LVEDD与心功能分级呈正相关（r=0.878、0.564,P<0.05）,LVEF与心功能分级呈负相关（r=0.781,P<0.05）。结论：BNP、LVEDD与LVEF指标可以作为心力衰竭评估指标,能够对心力衰竭患者心脏功能及预后进行评估。     

心衰大鼠血脑屏障通透性改变对认知功能的影响及机制研究

摘要 目的：观察大鼠心衰（HF）后血脑屏障通透性的改变,并探讨HF后认知功能障碍的可能机制。方法：本实验采用成年雄性SD大鼠85只,体重300-350 g,将大鼠随机分为5组：假手术组、心力衰竭组、空白对照组、心力衰竭+TAK242组、心力衰竭+抗生素组。造模24 h后采用TTC染色法检测大鼠心肌梗死面积,采用荧光素钠检测血脑屏障通透性的改变,采用蛋白印迹法检测大鼠海马和皮质中炎症蛋白MMP-9与NF-κB表达表达情况。造模4周后采用超声检测大鼠心功能情况,Morris水迷宫法检测大鼠行为学改变,采用HE染色法检测大鼠心脏组织病理学改变。结果：与Sham组相比,HF组大鼠术中循环和血气分析无明显差异（P>0.05）。与Sham组相比,HF组大鼠术后24 h可见清晰的心肌梗死灶,荧光素钠通透性增加,大鼠海马和皮质内炎症蛋白MMP-9与NF-κB表达升高。与HF组比较,给予TAK242的HF组大鼠认知功能得到改善,给予抗生素的HF大鼠认知功能降低。结论：NF-κB /MMP-9炎症通路激活诱导的血脑屏障通透性改变可能是HF后认知功能障碍的作用机制之一。     

丹参酮IIA缓解大鼠心肌梗死后左心室重构的作用及其机制研究

摘要 目的：探讨丹参酮IIA（T-IIA）对于缓解大鼠心肌梗死（MI）后左心室重构（LVR）的作用及其机制。方法：选取SD雄性大鼠80只,通过结扎左前降支（LAD）建立MI大鼠模型。将大鼠随机分为8组,假手术组未结扎LAD,其余各组均结扎LAD;除假手术组和MI组腹腔注射生理盐水外,其余各组分别给予T-IIA、脂多糖（LPS）和TAK-242治疗。HE和马松（Masson）三色染色评估MI大小、组织病理改变和纤维化程度。末端dUTP镍末端标记（TUNEL）染色观察心肌细胞凋亡情况。采用反转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹试验检测Toll样受体4（TLR4）、髓样分化蛋白88（MyD88）和核因子κB（NF-κB）的表达水平。结果：T-IIA能改善MI大鼠心功能,可降低MI大鼠心脏体积,改善心脏形态,减轻MI大鼠的组织病理学改变,并有效减轻MI和心肌纤维化。T-IIA抑制MI大鼠的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,且能有效减少MI大鼠梗死边缘区心肌细胞凋亡。结论：T-IIA通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活,改善心脏形态、功能和病理组织学变化,有效减轻MI的严重程度,预防LVR。     

肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧大鼠的血管重塑作用

摘要 目的：探究肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠的血管重塑作用。方法：将32只大鼠随机分为慢性间歇性空气（CIA）假手术组、CIA手术组、CIH假手术组、CIH手术组。制备CIH模型，手术组在缺氧前行肾上腺髓质切除术，假手术组行相同操作但不切除肾上腺髓质。测量尾动脉血压；ELISA法检测血清肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）含量；HE、Masson染色和荧光显微镜观察胸主动脉形态，计算胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数和弹性纤维紊乱断裂比例；IHC观察胸主动脉α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；TUNEL观察胸主动脉细胞凋亡率；WB检测胸主动脉天冬氨酸半胱氨酸酶-3（Caspase-3）蛋白表达。结果：与CIA假手术组比较，CIH假手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达升高（P＜0.05）；与CIH假手术组比较，CIH手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达降低（P＜0.05）。结论：切除肾上腺髓质可改善由慢性间歇性缺氧引起的大鼠胸主动脉重塑。     

心脏彩超检查联合血清BNP、ALB、CysC在慢性心力衰竭患者预后评估中的临床价值分析

摘要 目的：分析心脏彩超检查联合血清B型钠尿肽（BNP）、白蛋白（ALB）、胱抑素C（CysC）在慢性心力衰竭（CHF）患者预后评估中的临床价值。方法：选取2017年6月-2018年5月我院收治的123例CHF患者,心脏彩超检查左心室射血分数（LVEF）、左心房内径（LAD）和左心室内径（LVD）,实验室检测血清BNP、ALB、CysC水平。按照3年随访后患者是否死亡分为死亡组35例和存活组88例,收集临床资料,采用多因素Logistic回归分析CHF患者预后的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析心脏彩超检查联合血清BNP、ALB、CysC对CHF患者预后的评估价值。结果：死亡组患者的LAD、LVD及血清BNP、CysC水平高于存活组患者,而LVEF及血清ALB水平低于存活组患者（P＜0.05）。心脏彩超指标LVEF、LAD、LVD及血清BNP、ALB、CysC是CHF患者预后的影响因素（P＜0.05）。心脏彩超指标LVEF、LAD、LVD联合血清BNP、ALB、CysC检测对CHF患者预后评估的ROC曲线下面积（AUC）（0.95CI）为0.857（0.771～0.938）,灵敏度及特异度分别为0.914（32/35）、0.795（70/88）,均明显高于上述各指标单独检测。结论：心脏彩超指标LVEF、LAD、LVD和血清BNP、ALB、CysC均为CHF患者预后的影响因素,且联合检测对患者预后的评估价值较高,具有一定的临床应用价值。     

A Unique Protease Cleavage Site Predicted in the Spike Protein of the Novel Pneumonia Coronavirus (2019-nCoV) Potentially Related to Viral Transmissibility

正Dear Editor,In December 2019, a novel human coronavirus caused an epidemic of severe pneumonia(Coronavirus Disease 2019,COVID-19) in Wuhan, Hubei, China(Wu et al. 2020; Zhu et al. 2020). So far, this virus has spread to all areas of China and even to other countries. The epidemic has caused 67,102 confirmed infections with 1526 fatal cases     

Curcuminoids as inhibitors of thioredoxin reductase: A receptor based pharmacophore study with distance mapping of the active site

Curcumin is the yellow pigment of turmeric that interacts irreversibly forming an adduct with thioredoxin reductase (TrxR), an enzyme responsible for redox control of cell and defence against oxidative stress. Docking at both the active sites of TrxR was performed to compare the potency of three naturally occurring curcuminoids, namely curcumin, demethoxy curcumin and bis-demethoxy curcumin. Results show that active sites of TrxR occur at the junction of E and F chains. Volume and area of both cavities is predicted. It has been concluded by distance mapping of the most active conformations that Se atom of catalytic residue SeCYS498, is at a distance of 3.56 from C13 of demethoxy curcumin at the E chain active site, whereas C13 carbon atom forms adduct with Se atom of SeCys 498. We report that at least one methoxy group in curcuminoids is necessary for interation with catalytic residues of thioredoxin. Pharmacophore of both active sites of the TrxR receptor for curcumin and demethoxy curcumin molecules has been drawn and proposed for design and synthesis of most probable potent antiproliferative synthetic drugs.     

The structure, reproduction and taxonomy of Vidalia and Osmundaria (Rhodophyta, Rhodomelaceae)

Comprises species occurring mostly in subtidal habitats in tropical, subtropical and warm-temperate areas of the world. An analysis of the type species, V. spiralis (Sonder) Lamouroux ex J. Agardh, a species from Australia, establishes basic characters for distinguishing species in the genus. These characters are (1) branching patterns of thalli, (2) flat blades that may be spiralled on their axis, (3) width of the blade, (4) primary or secondary derivation of sterile and fertile branchlets and (5) position of sterile and fertile branchlets on the thalli. Application of the latter two characters provides an important basic method for separation of species into three major groups. Osmundaria , a genus known only in southern Australia, was studied in relation to Vidalia , and its separation from the Vidalia assemblage is not accepted. Species of Vidalia therefore are transferred to the older genus name, Osmundaria. Two new species, Osmundaria papenfussii and Osmundaria oliveae are described from Natal. Confusion in the usage of the epithet, Vidalia fimbriala Brown ex Turner has been clarified, and Vidalia gregaria Falkenberg, described as an epiphyte on Osmundaria pro/ifera Lamouroux, is revealed to be young branches of the host, Osmundaria prolifera.     

New or rare chromosome counts in Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) and related genera from Kazakhstan

Fifteen chromosome counts of six Artemisia taxa and one species of each of the genera Brachanthemum, Hippolytia, Kaschgaria, Lepidolopsis and Turaniphytum are reported from Kazakhstan. Three of them are new reports, two are not consistent with previous counts and the remainder are confirmations of very scarce (one to four) earlier records. All the populations studied have the same basic chromosome number, x = 9, with ploidy levels ranging from 2x to 6x. Some correlations between ploidy level, morphological characters and distribution are noted.     

Comparative morphology of the carpel in the Liliaceae: Hewardieae, Petrosavieae, and Tricyrteae

The young pistils in the melanthioid tribes, Hewardieae, Petrosavieae and Tricyrteae, are uniformly tricarpellate and syncarpous. They lack raphide idioblasts. All are multiovulate, with bitegmic ovules. The Petrosavieae are marked by the presence of septal glands and incomplete syncarpy. Tepals and stamens adhere to the ovary in the Hewardieae and the Petrosavieae but not in the Tricyrteae. Two vascular bundles occur in the stamens of the Hewartlieae and Tricyrtis latifolia. Ventral bundles in the upper part of the ovary of the Hewardieae are continuous with compound septal bundles and placental bundles in the lower part. Putative ventral bundles occur in the alternate position in the Tricyrteae and putative placental bundles in the opposite. position in the Petrosavieae. The dichtomously branched stigma in each carpel of the Tricyrteae is supplied by a bifurcated dorsal bundle.     

肝癌中HBV和HCV基因和抗原的分布及意义

采用原位分子杂交方法检测HCV RNA及HBV X基因;采用免疫组织化学方法研究HCV核心抗原,非结构区C33c抗原及HBxAg在肝细胞肝癌中的定位及分布.结果表明(1)HCV RNA、HBV X基因在肝细胞肝癌组织检出率分别为40%(55/136)和82%(112/136).HCV RNA定位于癌细胞的胞浆内,阳性细胞呈散在、灶状及弥漫分布三种形式;HBV X基因在肝癌细胞中的分布呈胞浆型、核型及核浆型,阳性细胞也呈上述三种分布形式;(2)HCV C33c抗原、核心抗原在肝细胞肝癌中的阳性率为81%(133/164)及86%(141/164).C33c抗原定位于癌细胞及肝细胞的胞浆内;核心抗原既定位于癌细胞核中,又可定位于胞浆中.C33c抗原阳性细胞以灶状分布为主;而核心抗原阳性细