低聚果糖对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌小鼠辅助性T细胞的调控作用

探讨益生元低聚果糖（FOS）对结肠炎相关结直肠癌（CAC）小鼠肠道辅助性T细胞的调节作用。

将6周龄SPF级雄性C57BL6小鼠（体重18～20 g）随机分为对照组、模型组和干预组,每组10只。通过偶氮甲烷、葡聚糖硫酸钠构建CAC小鼠模型,干预组每日使用2 mg/kg b.w. FOS灌胃,持续10周。造模期间监测各组小鼠体重变化,造模结束后测量结肠长度和肿瘤数目。采用微球免疫分析法检测血清Th1/Th2/Th17相关细胞因子水平,流式细胞术分析肠系膜淋巴结内Th1、Th2、Th17细胞亚群比例。

与模型组相比,干预组小鼠结肠长度显著增加（t=3.106,P=0.006 4）,肿瘤数目显著减少（U=15.000,P=0.011 1）,血清中IL-17A（t=3.504,P=0.008 8）、TNF-α（t=2.381,P=0.030 0）等促炎细胞因子水平降低,肠系膜淋巴结Th17细胞比例显著降低（t=6.031,P=0.002 7）,Th1/Th2显著升高（t=2.419,P=0.038 7）。

FOS可调控CAC模型小鼠结肠内辅助性T细胞的分化,抑制肿瘤的发生。

     

血红素加氧酶-1、树突状细胞和调节性T细胞在慢性气道炎症中的作用及相互关系

慢性气道炎症是多种肺部疾病的共同病理生理过程,是由多种炎症细胞、炎症介质及细胞因子相互作用所致的气道病变。血红素加氧酶(HO)-1、树突状细胞(DC)和调节性T细胞(Treg)参与了气道炎症并发挥不同的作用,表现在HO-1具有抗炎抗氧化及保护细胞的作用;DC除可导致或持续气道炎症反应外,也具有负向调控作用,可诱导免疫耐受而抑制炎症的发展;而Treg可发挥免疫调抑功能,以此维持免疫稳态及抑制气道炎症。HO-1、DC和Treg相互作用,影响着气道炎症的发生发展。现对三者在气道炎症中的作用及相互关系进行综述。     

滤泡辅助性T细胞分化和功能的研究进展

滤泡辅助性T细胞(Tfollicular helper cells,TFH细胞)是新近发现的一种CD4+辅助性T细胞亚群,具有不同于其他亚群的独特功能:迁移到B淋巴滤泡并辅助B淋巴细胞产生抗体。在短短的几年里面,已有大量针对滤泡辅助性T细胞分化与功能的研究。该文将对滤泡辅助性T细胞的最新研究进展作一综述。     

苦参碱注射液对宫颈癌患者化疗的增敏作用及对T细胞亚群、CA125、IL-6的影响

目的:研究苦参碱注射液对宫颈癌患者化疗的增敏作用及对T细胞亚群、CA125、IL-6的影响。方法:选择2015年4月至2017年3月在我院进行宫颈癌治疗的76例患者,随机将其均分为观察组(59例)和对照组(59例),对照组患者给予化疗,而观察组则在对照组化疗的基础上增加苦参碱注射液进行治疗,记录并比较两组患者治疗前后T细胞亚群、CA125及IL-6水平的变化、肿瘤病灶面积的改善情况、临床疗效及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组患者的肝肾功能损伤、骨髓抑制剂胃肠道反应等不良反应发生率、血清CA125及IL-6水平均明显低于对照组(P0.05),而总有效率(81.58%)显著高于对照组(50.00%)(P0.05),CD3~+、CD4~+及CD4/CD8~+水平也明显高于对照组(P0.05),而观察组患者CD8~+水平则明显低于对照组(P0.05)。结论:苦参碱注射液辅助宫颈癌化疗的增敏效果显著,能有效降低患者CA125及IL-6水平,显著改善机体T细胞免疫功能。     

黄芪提取液治疗呼吸道合胞病毒感染小鼠的作用机制研究

目的:分析黄芪提取液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠的作用机制。方法:将30只SD小鼠随机分为对照组、模型组和黄芪组各10只。模型组和黄芪组均滴鼻滴度为10-3.5 TCID50/mL的RSV病毒液,制备小鼠RSV模型,对照组滴鼻等量生理盐水。黄芪组腹腔注射黄芪注射液18 g/kg,每日1次,连用9 d;对照组和模型组小鼠腹腔注射等体积的蒸馏水。治疗后,检测小鼠血清白细胞介素(IL)-2、IL-23、IL-17、IL-6、干扰素(IFN)-γ、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平,Western blot检测Toll样受体(TLR)7蛋白表达水平,HE染色观察肺组织形态。结果:与对照组相比,模型组小鼠IL-23、IL-17、IL-6、NO、MDA和TLR7水平显著升高(P0.05),IL-2、SOD和IFN-γ水平显著下降(P0.05);与模型组相比,黄芪组小鼠的IL-23、IL-17、IL-6、NO、MDA和TLR7水平显著下降(P0.05),IL-2、SOD和IFN-γ水平显著升高(P0.05)。结论:黄芪提取液可以有效调节辅助性T细胞释放细胞因子,保护呼吸道合胞病毒感染引起的免疫系统功能紊乱。     

薄芝糖肽对小鼠T细胞IL-2、IL-3 mRNA表达的影响

目的:探讨薄芝糖肽对小鼠T细胞IL-2、IL-3 mRNA表达的影响.方法:制备静息T淋巴细胞和活化T淋巴细胞,收集细胞并提取总mRNA,进行RT-PCR扩增,测定IL-2活性和IL-3活性,并对数据进行t测验.结果:小鼠IL-2、IL-3 mRNA表达量随薄芝糖肽浓度的增加而升高,且有一定的浓度依赖性.结论:薄芝糖肽免疫增强和抗肿瘤作用的基础是与其在转录水平增强IL-2 mRNA的表达分不开的.T细胞是薄芝糖肽作用的靶细胞,而且说明了增强T细胞中两种细胞因子mRNA的表达是薄芝糖肽免疫调节的重要作用机制.     

不同培养基对流式细胞仪分选外周血T细胞的影响

摘要 目的：通过探讨用于流式分选的T细胞体外扩增的无血清培养基，提高过继细胞的增殖能力和活性。方法：采用人外周血淋巴细胞分离管制备外周血单个核细胞，再用流式细胞分选仪从6例健康志愿者的外周血单个核细胞中分选CD3+T细胞到4种常用的培养基中：X-VIVO 15、KBM 581、TexMACS GMP和10 % FBS/1640，观察并记录培养细胞的状态和体外增殖能力。于第3天，第6天和第8天，通过胎盼蓝染色后进行活细胞计数。于第8天用凋亡试剂盒检测扩增细胞的凋亡情况，并用流式细胞分析仪检测细胞的免疫表型。结果：X-VIVO 15、TexMACS GMP和10 % FBS/1640作为流式细胞分选的接收液仅少量细胞碎片，而分选在KBM 581的细胞大量死亡，显著高于X-VIVO 15组（P<0.05）。X-VIVO 15中扩增的细胞数量最多，增殖检测结果显示活细胞在X-VIVO 15中快速增殖且细胞凋亡率显著低于KBM 581 和 TexMACS GMP（P<0.05）。4种培养基扩增的细胞主要呈现效应记忆型。其中，X-VIVO 15中效应记忆型T细胞比例显著高于TexMACS GMP（P<0.05）。TexMACS中效应细胞比例显著高于10 % FBS/1640（P<0.05）。结论：X-VIVO 15无血清培养基扩增流式分选的T细胞具有高增殖能力、细胞活性和记忆表型，适用于经流式分选后细胞的体外扩增。     

沙眼衣原体持续感染对Hela细胞TLR4/IL-6/STAT3信号通路的影响

目的：分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）持续感染对靶细胞TLR4/IL-6/STAT3信号通路的影响.方法：利用Hela细胞分别建立Ct急性感染及持续性感染模型,通过qRT-PCR、ELISA等方法比较Ct感染过程中靶细胞TLR4、STAT3、IL-6转录水平及细胞因子IL-6分泌量的变化.结果：Ct感染后靶细胞TLR4、IL-6、STAT3转录水平及细胞因子IL-6分泌量均呈现时间相关性上调,且持续性感染状态下比急性感染状态下的上调更为显著;IL-6/STAT3的表达量与TLR4转录水平正相关.结论：Ct持续感染过程中TLR4 的持续活化可大幅上调IL-6/STAT3信号通路表达,可能参与了Ct持续感染后慢性炎性损伤过程.     

齐墩果酸通过调控STAT3通路改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损表现

摘要 目的：观察齐墩果酸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮损及STAT3通路的干预作用。方法：72只BALB/c雄性小鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组,每组12只,于背部备皮。除空白组外,其余各组小鼠每日于背部备皮区域涂抹5%咪喹莫特乳膏诱导银屑病样皮损;甲氨蝶呤组及齐墩果酸各浓度组每日灌胃对应药物0.2 mL/只;每日观察皮损状态并拍照记录,每日对小鼠皮损面积及严重程度（Psoriasis Area and Severity Index,PASI）进行评分;造模第4、7天取小鼠皮损区域皮肤,免疫印迹法检测皮损中STAT3信号通路中STAT3磷酸化表达情况;第7天称量小鼠体重及脾重,计算脾指数,同时取小鼠皮损区域皮肤;苏木素-伊红（HE）染色观察皮损组织病理学改变,并测量表皮厚度;免疫组织化学法及免疫组织荧光法检测皮损中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞浸润情况及Ki67表达情况;实时荧光定量PCR法检测皮损中白介素-17（Interleukin-17,IL-17）mRNA相对表达情况。结果：与空白组相比,造模后模型组小鼠背部皮肤出现红斑、鳞屑、浸润性皮损,第4天及第7天PASI评分升高（P<0.01）;第7天模型组表皮厚度明显增加,体重下降,脾指数上升,皮损中Ki67、CD3⁺、CD4+⁺、CD8⁺T细胞表达量升高,皮损中IL-17的mRNA相对表达量升高（均P<0.01）;第4及第7天,模型组小鼠皮损中p-STAT3的表达量均明显升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组相比,第4天各治疗组在PASI评分略降低（P>0.05）,第7天各治疗组PASI评分明显降低（均P<0.01）;第7天齐墩果酸各剂量组小鼠体重略有上升（P>0.05）;甲氨蝶呤组小鼠脾指数明显下降（P<0.01）,齐墩果酸低、中剂量组小鼠脾指数略下降（P>0.05）;各治疗组小鼠表皮厚度较模型组明显下降（P<0.01或P<0.05）,小鼠皮肤中Ki-67表达量、CD4⁺、CD8⁺T细胞表达量均明显降低（均P<0.01）;甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组小鼠皮损中CD3⁺T细胞表达量均下降（P<0.05,P>0.05,P<0.01,P<0.01）,其中在齐墩果酸各剂量组中,中剂量组在脾指数下降、表皮厚度变薄、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞减少方面均略优于低、高剂量组（P>0.05）;甲氨蝶呤组及齐墩果酸中剂量组小鼠皮损中IL-17的mRNA水平较模型组明显下降（P<0.01,P<0.05）;造模给药第4天,甲氨蝶呤组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组明显下降（P<0.05）,齐墩果酸中剂量组略下降（P>0.05）;造模给药第7天,两个治疗组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组均明显下降（均P<0.01）。结论：齐墩果酸低、中、高剂量均可以改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的严重程度,减轻炎性细胞浸润,中剂量组疗效较好,其机制可能通过抑制STAT3通路中p-STAT3的表达从而降低了IL-17的含量,且药效随作用时间的延长而逐渐增加。     

信必可都保对慢性阻塞性肺疾病患者树突细胞的调节

目的:探讨布地奈德/福莫特罗吸入剂(商品名:信必可都保)对于慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseaseCOPD)患者外周血中树突状细胞(dendritic cell DCs)亚群、肺功能以及炎症反应因子的影响。方法:选取符合入组标准的COPD急性加重期患者,共80例,随机分成2组,每组40人。对照组给予常规对症治疗,实验组在此基础上给予信必可都保吸入,观察入组对象治疗前、治疗4周后两组患者外周血树突状细胞亚群(m DCs和pDCs)的水平、C反应蛋白(C-reactive protein CRP)、白细胞计数表达水平及CAT评分、肺功能的变化。结果:用药后m DCs和pDCs占外周血的百分比及m DCs/pDCs实验组及对照组均较用药前明显降低(P0.05),实验组优于对照组低,但差异无明显的统计学意义(P0.05)。用力肺活量(FVC)、FEV1占预计值百分比(FEV1%)、FEV1/FVC、CAT评分两组均较用药前有所改善,实验组较与对照组更明显(P0.05)。用药后C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)较用药前有所改善,但用药后实验组与对照组相比无统计学差异(P0.05)。结论:信必可都保可有效改善COPD患者肺功能,改善其临床症状,但对树突细胞亚群的影响不明显。     

Augmentation of Suppressed Antibody Responses in Mice During Experimental Chagas'Disease by T Helper Cells Activated in a Time-Dependent Mode of Immunization

ABSTRACT. Mice infected with the protozoan parasite Trypanosoma cruzi , the causative agent of human Chagas'disease, develop immunosuppressed responses to heterologous antigens. Experiments were performed using infected mice in the acute stage of infection to assess immunoregulatory activities during induction of direct plaque-forming cells (DPFC) to sheep erythrocytes (SRBC), hapten-conjugated SRBC (TNP-SRBC), and horse erythrocytes (TNP-HRBC). Studies in vivo demonstrated that anti-SRBC responses were best enhanced when T. cruz -infected mice were injected with primed T cells derived from normal or infected mice immunized four days previously. The presence of enhancing capacities for DPFC responses by T cells from T. cruzi -infected mice were also supported by experiments examining the hapten-carrier effect. Preimmunization of infected mice with SRBC or HRBC four days before injection of hapten-homologous (TNP-SRBC or TNP-HRBC) carrier resulted in markedly augmented anti-hapten antibody responses. These results show that functional help provided by T cells activated during priming and exposed to a challenge dose of antigen (SRBC) in a time-dependent mode can overcome the effect of immunosuppression in T. cruzi -infected mice.     

IL-6在胶质母细胞瘤的表达及作用机制研究

目的:探讨白介素6(IL-6)在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达,并探讨其高表达的作用机制,以期阐明GBM发生发展潜在分子机制。方法:采用免疫组化检测表皮生长因子变体3 (EGFRv III)阳性和阴性GBM组织IL-6的相对表达。以恶性胶质瘤细胞U87MG为研究对象,构建表达EGFRv III的U87MG-EGFRvIII细胞,用IL-1β分别处理U87MG、U87MG-EGFRvIII细胞,ELISA检测IL-6分泌量。采用EGFR下游效应通路p38MAPK、MK2、MEK1/2、JNK抑制剂SB、sc-48、PD、SP预处理细胞1小时,IL-1β刺激细胞后,检测各组IL-6分泌量变化。将IL-1β处理后的U87MG-EGFRvIII细胞记为IL-1β组,以不做任何处理细胞记为Control组,用联合SB、sc-48处理的IL-1β细胞依次命名为IL-1β+SB和IL-1β+sc-48组,western blot检测p38MAPK-MK2通路蛋白和IL-6蛋白表达,qPCR检测IL-6 m RNA表达。结果:IL-6在EGFRv III阳性GBM组织中普遍高表达,在EGFRv III阴性GBM组织中普遍低表达。EGFRv III可在未受IL-1β刺激的恶性胶质瘤细胞中上调IL-6基础分泌,也可在IL-1β刺激情况下进一步促进IL-6分泌。在U87MG细胞中,所有通路抑制剂对IL-6分泌均无影响;在U87MG-EGFRvIII细胞中p38 MAPK-MK2通路抑制剂SB和sc-48明显抑制IL-1β诱导的IL-6分泌,而MEK1/2、JNK抑制剂PD和SP则无明显影响。IL-1β能够诱导p38MAPK-MK2通路激活,诱导细胞内IL-6表达增加,联合SB、sc-48处理细胞后,p38MAPK-MK2通路活性降低,细胞内IL-6表达降低。结论:癌基因EGFRv III能够上调恶性胶质瘤细胞中IL-6基础分泌,IL-1β可进一步刺激IL-6分泌,其机制可能与p38MAPK-MK2通路激活有关。     

CD147在调节性T细胞中作用的研究进展

CD147是一种免疫球蛋白超家族,它与肿瘤侵袭和转染,类风湿性关节炎,病毒入侵,淋巴细胞的迁移和活化,老年痴呆症,疟原虫入侵等病理过程密切先关,已成为癌症等疾病的新型药物靶标分子。作为一个单次跨膜蛋白,CD147的多功能性依赖于它的胞外结构域以及细胞膜和细胞外多种分子的相互作用。有研究发现CD147可作为细胞膜受体并且在上皮细胞,肿瘤细胞和免疫T细胞中均有表达。其可作为T细胞亲环素受体并具有趋化T细胞的功能。近几年研究发现,CD147在调节性T细胞高表达并且具有标志性意义。该文就以作为活性调节性T细胞标志的CD147的潜在作用进展综述如下。     

IL-6/STAT3信号途径介导肉芽肿性乳腺炎的作用研究

目的:探讨IL-6/STAT3信号途径介导肉芽肿性乳腺炎的机制研究及临床意义。方法:收集我院2017年1月至2017年6月收治入住的30例肉芽肿性乳腺炎患者及30例普通患者的血清样本,对肉芽肿性乳腺炎患者同时采集炎性肿块组织样本及距离炎性肿块边缘大于等于3 cm且镜检为正常乳腺组织的样本。采用ELISA法检测血清样本中的IL-6的表达水平,同时采用Western blot检测组织样本中IL-6和pSTAT3蛋白的表达水平并分析二者的相关性。结果:与普通患者血清样本相比,肉芽肿性乳腺炎患者血清中IL-6的表达水平明显增高(P0.05),肉芽肿性乳腺炎组织样本中IL-6和pSTAT3蛋白的表达水平明显高于毗邻的正常乳腺组织(P0.01),IL-6表达与组织STAT3磷酸化水平具有明显的正相关性(r=0.353,P0.05)。结论:IL-6/STAT3信号途径可能介导肉芽肿性乳腺炎的发生发展。     

In vitro inhibitory effects of cirsiliol on IL-6-induced STAT3 activation through anti-inflammatory activity

Many studies have identified and described various medicinal effects of cirsiliol. Here, we investigated the signaling pathway involved in the anti-inflammatory effects of cirsiliol on IL-6-induced activity. Cirsiliol showed no cytotoxicity and inhibited pSTAT3-induced luciferase activity. At the molecular level, cirsiliol suppressed the expression of IL-6-induced inflammatory marker genes such as CRP, IL-1β, ICAM-1 and SOCS3, IL-6-induced activation of Jak2, gp130, STAT3 and ERK and nuclear translocation of STAT3, as measured by PCR, immunofluorescence staining and western blot analysis. However, the interaction between IL-6 and its receptor was not affected by cirsiliol treatment. These results indicate that cirsiliol attenuates IL-6-induced cellular signaling by regulating Jak2 phosphorylation. Therefore, cirsiliol could be a therapeutic agent for IL-6-related inflammatory diseases.     

小鼠树突状细胞亚群与T细胞关系的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是目前已知机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞,其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(naive T cells)增殖,是机体免疫反应的始动者。近年来,随着对小鼠DCs研究的不断深入开展,本文在此对DCs亚群与T细胞之间相互关系的研究取得的进展综述如下。     

生酮饮食对难治性癫痫患儿滤泡辅助性免疫细胞的影响

目的:探讨难治性癫痫患儿应用生酮饮食对其滤泡辅助性T细胞及B细胞的影响。方法:将32例难治性癫痫患儿设为实验组,选取正常同龄对照20例,流式细胞术检查生酮饮食治疗前后Tfh细胞及B细胞比例,ELISA检测IL-21血清中浓度,RT-PCR检测Blimp-1、Bcl-6、m TOR基因表达情况。结果:生酮治疗后Tfh细胞数量明显下降,Tfh细胞抑制因子Blimp-1表达降低,转录相关因子Bcl-6表达也降低,血清中IL-21浓度及m RNA表达均显著减低,CD27+Ig D-B细胞、CD27+Ig D-BCD38bigb与治疗后相比显著下降。治疗后Tfh细胞及各阶段B细胞与m TOR表达存在正相关关系。结论:KD治疗通过m TOR降低了Tfh细胞与B细胞比例或是抑制了Tfh细胞与B细胞的功能,这可能是导致接受KD治疗过程中少数患儿出现低丙种球蛋白血症原因。     

乙型肝炎患者外周血T细胞亚群、IL-6及IL-8水平的表达及临床意义

目的:探讨乙型肝炎患者外周血T细胞亚群、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)水平的表达及临床意义。方法:选取2015年1月-2017年12月期间我院收治的乙型肝炎患者240例为研究对象。其中急性乙型肝炎患者55例(急性组),慢性乙型肝炎患者185例,并根据临床症状严重程度分为慢性轻度组65例、慢性中度组61例、慢性重度组59例。将乙型肝炎患者HBV-DNA载量103copy/m L作为HBV-DNA阳性组(n=158),HBV-DNA载量≤103copy/m L作为HBV-DNA阴性组(n=82)。另选取同期于我院行健康体检的志愿者50例为对照组。比较各组研究对象CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-6、IL-8水平,比较HBV-DNA阳性组、HBV-DNA阴性组患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)以及白蛋白(ALB)水平。采用Pearson相关性分析乙型肝炎患者血清IL-6、IL-8与肝功能指标的相关性。结果:急性组、慢性轻度组、慢性中度组、慢性重度组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于对照组,CD8+、IL-6、IL-8均高于对照组(P0.05)。HBV-DNA阳性组与HBV-DNA阴性组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-6、IL-8、ALT、TB以及ALB比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示,乙型肝炎患者血清中IL-6、IL-8均与ALT、TB水平呈正相关,与ALB水平呈负相关(P0.05)。结论:乙型肝炎患者CD3+、CD4+和CD4+/CD8+显著降低,CD8+、IL-6和IL-8显著升高,且血清中IL-6、IL-8水平可反映乙型肝炎患者肝细胞损害程度及病情严重程度。