胰岛α细胞对β细胞功能的影响

众多研究表明,胰岛移植的短期效果较显著,但长期效果仍不尽人意。在胰岛移植的早期,绝大多数病人可以获得明显的治疗效果,而后大多数的病人发生进行性的胰岛功能丧失,产生这种现象的原因至今仍不甚明了。如何解决移植胰岛的长期存活问题对于胰岛移植的临床应用至关重要。近年来人们对胰岛移植失败的原因进行了不断探索,发现胰岛移植后期的失败不仅与免疫反应有关,而且与移植物的细胞组成有密切关系,即胰岛细胞间的相互作用对移植物的功能维持可能有重要影响。因此,本文就胰岛α细胞及其分泌的胰高血糖素对β细胞功能的影响作一综述。     

胰高血糖素样肽-1在构建胰岛样细胞中的应用

糖尿病治疗的主要方向之一是胰岛细胞的替代疗法,但供体来源不足成为阻碍其临床应用的难题。胰高血糖素样肽-1是体内的一种促胰岛素激素,对胰岛β细胞的增殖、分化均起重要作用。目前,利用胰高血糖素样肽-1构建多种细胞成胰岛样细胞,以作为移植胰岛细胞替代物成为研究的热点。     

胰高血糖素样肽-1及其类似物抗胰岛β细胞凋亡作用及机制的研究进展

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)及其类似物通过提高增殖、减少凋亡,从而有效地保护β细胞数量及功能。该文综述了GLP-1及其类似物能够对抗引起β细胞凋亡的多种有害因素——如细胞因子(IL-1β、TNF-α和IFN-γ等)、高游离脂肪酸血症、高血糖或低血糖等——进而降低胰岛β细胞的凋亡率,并探讨了相关的作用机制。     

饥饿状态大鼠胰腺高血糖素和胰岛素变化的定量分析

用免疫组织化学方法结合图象分析技术对饥饿状态大鼠胰岛Ａ、Ｂ细胞中胰因糖素和胰岛素的免疫反应强度进行定量分析。结果表明：与正常对照相比,饥饿大鼠胰岛细胞中的Ｇｌｕ含量明显下降,Ｂ细胞中Ｉｎｓ含量明显升高。提示饥饿可导致Ｇｌｕ释放增加,Ｉｎｓ和减少。与饥饿５天大鼠线要比较,饥饿５天后静脉注射葡萄糖组９０ｍｉｎ后胰岛内Ｇｌｕ含量明显升高,Ｉｎｓ含量无显著变化。提示：静脉注射葡萄糖要快速作用下胰岛Ａ细胞,     

有机铬对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞形态结构及功能的影响

目的探讨有机铬(2-吡啶甲酸铬)对大鼠胰岛β细胞形态结构及内分泌功能的影响。方法首先通过尾静脉注射新鲜配制的1.5%四氧嘧啶溶液制备糖尿病大鼠模型;通过灌胃的方式提高糖尿病大鼠体内有机铬含量;治疗12周后,通过氧化酶法测定大鼠血清葡萄糖水平,利用免疫组织化学方法和放射免疫学方法分别观察大鼠胰岛β细胞形态结构的改变及大鼠血清胰岛素含量的变化。结果两治疗组大鼠血清葡萄糖水平明显下降,与糖尿病模型组相比,差异均有显著性;400μg治疗组大鼠体内胰岛素水平明显升高,与糖尿病模型组相比差异有显著性,而200μg治疗组大鼠血清胰岛素水平虽有所增加但与糖尿病组相比,差异无显著性;免疫组化显示治疗组大鼠胰岛β细胞数量增多,胞质内胰岛素免疫反应阳性颗粒明显增多。结论有机铬对糖尿病大鼠具有明显的降低血糖功能,并能促进受损胰岛及β细胞形态结构功能的恢复,对糖尿病大鼠病理状态具有明显的改善作用。     

胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的影响

为寻求一种可替代人肝细胞研究载脂蛋白（apolipoprotein, apo）CⅢ受体的生理模型,并探讨apoCⅢ受体的生理功能及其在内源性高甘油三酯血症发病机制中的作用,首先以¹²⁵I标记的人apoCⅢ为配体,利用放射性配体结合分析法观察了人肝癌细胞系HepG2细胞是否有apoCⅢ受体存在.结果证实HepG2细胞上存在高亲和力的、可饱和的、特异的apoCⅢ受体结合位点,其受体的亲和力(K_d)和apoCⅢ受体结合容量(B_max)分别为(9.53±1.03)×10^-9 mol/L和(3.28±0.31) μg/g.随后又分别研究了胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞apoCⅢ受体功能的影响,结果表明：胰岛素可使HepG2细胞apoCⅢ受体结合容量（B_max）显著增加,但对受体的亲和力（K_d）无影响;胰高血糖素可使HepG2细胞apoCⅢ受体亲和力显著下降（即K_d值升高）,对受体的结合容量无影响.提示人肝apoCⅢ受体的功能可能受胰岛素及胰高血糖素的不同调节.     

微囊化胰岛B细胞系体外生长和分泌功能的研究

目的：研究海藻酸钠－多聚赖氨酸－海澡酸钠（APA）微囊化胰岛B细胞系BTC6－F7的生长和分泌规律,探索其作为生物人工胰岛的可能性。方法：以微囊静电液滴发生器制作APA微囊化BTC6－F7细胞,体外培养并定期测定微囊化细胞的生长和胰岛素分泌。结果：在实验观察的90d内,BTC6－F7细胞可在微囊内以细胞团的形式生长、存活。囊内细胞总数随培养时间的延长而增加,但细胞活率呈下降趋势,胰岛素分泌与囊内活细胞数的变化规律一致,最初呈上升趋势,然后较长时间维持在相对恒定的水平。结论：本研究所制备的APA微囊化胰岛B细胞可在较长时间内保持生长、存活和分泌功能,为进一步发展生物型人工胰岛奠定了基础,并可用于糖尿病的发病机理和治疗研究。     

胰高血糖素样肽-1保护胰岛β细胞相关分子机制的研究进展

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠道L细胞分泌的一种重要的肠促胰岛素.大量研究表明,除刺激胰岛素分泌外,GLP-1可通过促进胰岛β细胞增殖,抑制β细胞凋亡而增加胰岛β细胞量,本文就其相关分子信号转导机制进行综述.     

内,外源性生长抑素对离体培养的胰岛β细胞抗链佐霉素损伤的保护作用

在以前整体及器官水平工作的基础上,本工作进一步在离体培养的胰岛细胞上观察生长抑素(somatostatin,SS)对链佐霉素(streptozotocin,STZ)诱导的胰岛β细胞损伤的保护作用。结果表明,在向培养的胰岛细胞中加入STZ前10min,加入不同剂量(0.025,0.05和0.1μg/ml)的SS,可不同程度地保护β细胞免受STZ的破坏。给药后6h,活细胞数由STZ破坏组的41.13±0.65万个/ml分别回升到49.0±2.0,53.0±1.33和53.38±1.74万个/ml;在给药后12h,活细胞数由破坏组的46.75±0.75万个/ml,分别升为53.0±1.25,57.04±2.39和63.13±0.62万个/ml,与破坏组间均有显著差异。电镜下超微结构的观察显示,破坏组胰岛内β细胞大量死亡,胞质内正常细胞器结构消失,代之以大量空泡和颗粒状物质;胞核结构不清。而保护组的β细胞结构完整,分泌颗粒轮廓典型,高尔基复合体及线粒体结构正常。用SS抗血清中和内源性SS后再给予STZ,β细胞破坏更为严重,但重新补充SS则可翻转抗血清的效果。加入钙离子载体A_(23187),对SS的保护作用无明显影响,表明这一作用可能与Ca~(2 )机制无关。     

消症汤对子宫内膜异位模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨“消症汤”对子宫内膜异位症 (endometriosis,EMT)模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响 ,为临床用药提供实验依据。方法　制作大鼠EMT动物模型 ,模型鼠每日分别以 0 5ml和 1 0ml中药灌胃 ,连续用药 3周后观察异位组织细胞增殖指数和凋亡指数。结果　模型对照组细胞增殖指数大于用药组 ,凋亡指数小于用药组 (P <0 0 1)。 0 5ml组和 1 0ml组比较细胞增殖指数和凋亡指数无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　“消症汤”能促进异位组织细胞凋亡 ,抑制异位组织增殖。     

胰岛细胞抗体分型与胰岛细胞凋亡的实验研究

研究通过大量临床糖尿病病人胰岛细胞抗体（Islet Cell Antibody,ICA)检测,发现ICA阳性反应有两种完全不同的形态学表现;弥漫型ICA和边缘型ICA,经免疫组织化学双标技术鉴别。弥漫型ICA可同时有着染α细胞和β细胞,边缘型ICA则仅着染α细胞。这种只着染α细胞的ICA国内外尚未见有报道,为探讨其在糖尿病发病中所起的作用。选择1型糖尿病（1-DM）的弥漫型ICA和边缘型ICA各3例。另选正常3例作对照,用患血清分别以2、4、8小时三个时相与分离并贴壁生长的正常人胰岛细胞孵育后,进行原位细胞凋亡检测。结果发现,弥漫型ICA,边缘型ICA均可导致胰岛细胞产生凋亡,其中弥漫型ICA使β细胞及α细胞出现凋亡;边缘型ICA使α细胞产生凋亡,这一结果提示;糖尿病发病机制除与分泌胰岛素的β细胞有密切关系的经典途径之外,可能还与分泌胰高血糖素的α细胞存在某种关系。     

锌和铜在生长抑素对链佐霉素引起的胰岛B细胞损伤的保护中的作用

我们以前的工作指出,生长抑素可以预防链佐霉素对大鼠胰岛B细胞的损伤。本工作测定给药前后大鼠血清和组织中Zn、Cu含量,以进一步观察链佐霉素破坏大鼠胰岛B细胞后生长抑素预防效应的可能机制。结果为:链佐霉素(STZ)(35mg/kg,ip)注射后24h的大鼠,血清Zn浓度下降,Cu浓度升高,Zn/Cu比值倒置;用生长抑素作预防性注射后,血清Zn浓度与正常对照水平相同,Cu浓度虽稍有升高,但Zn/Cu比值正常。保护组的血清Zn与损伤组比较,差异极为显著。两组的Zn/Cu比值同样也具有显著差异。在给药后72h,血清Zn/Cu比值在各组之间仍呈上述关系,但差异减小。在大鼠胰腺,注射链佐霉素后胰腺组织Zn浓度未见改变,但生长抑素作预防性注射可使组织锌含量增加。上述结果提示,在生长抑素对胰岛B细胞的保护机制中可能有Zn和Cu的参与。预防性注射生长抑素所引起的高Zn状态可能有利于机体细胞含Zn酶类的活性,增强已损伤细胞的修复。     

组胺对培养新生大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

以培养大鼠乳鼠心肌细胞为模型,观察组胺对培养心肌细胞自发性搏动频率及动作电位的影响。结果表明：组胺０．１－１０ｕｍｏｌ／Ｌ可以引起剂量依赖性的心肌细胞搏动频率的增快,而且这种效应呈时间依赖性。组胺１０ｕｍｏｌ／Ｌ可以使心肌细胞动作电位的幅度（ＡＰＡ）,最大上升速率（Ｖｍａｘ）及超射（ＯＳ）明显增加,动作电位持续时间（ＡＰＤ５０和ＡＰＤ９０）明显延长,窦性周长（ＳＣＬ）明显缩短。以上结果提示,组胺致     

大鼠原生殖细胞培养和分化的研究

研究大鼠胚胎原生殖细胞（primordial germ cells,PGCs)的培养及分化,取受精后11-12.5天大鼠PGCs进行原代培养,光、电镜观察PGCs及其分化细胞的微细结构,碱性磷酸酶染色检测细胞的分化程度,结果显然显示大鼠PGCs大而圆,散在分布,或多个聚集成团,胞质中含有椭圆形的线粒体和丰富的核糖体,在鼠胚成纤维细胞饲养层存在的情况下,PGCs保持未分化状态,碱性磷酸酶反应呈强阳性,在缺乏饲养层的条件下PGCs很快分化,形态不规则,有伪足,碱性磷酸酶反应减弱,进一步分化可形成具有细长突起的神经元样细胞,胞质中含有细丝束的表皮细胞,可见节律性跳动的心肌细胞,具有分泌颗粒的分泌细胞及似血管,心脏形状的管腔结构等,由PGCs分化来的细胞碱性磷酸酶反应均呈阴性,结果表明大鼠PGCs能够分化形成三个胚层的衍生物,生殖嵴来源的PGCsp是一种具有发育全能性的胚胎多能干细胞,本研究同时证明鼠胚饲养层能抑制大鼠PGCs的分化。     

唾液酸对正常造血细胞及白血病细胞增殖分化的影响

本实验以测定细胞电泳率(EPM)反映细胞表面唾液酸相对含量。发现胎肝细胞电泳率明显高于成年骨髓细胞,经神经氨酸酶(NA)处理胎肝细胞、骨髓细胞、L_(801)急性白血病细胞和KCL-22慢性白血病细胞后,细胞EPM均明显下降。细胞集落数及细胞形态学检测表明,NA处理后,多向造血干细胞(CFU-S)增殖能力减弱,向粒系的分化增强;KCL-22细胞生成的集落数明显减少,成熟细胞的比例明显增加。     

汉防己甲素对四氧嘧啶引致大鼠胰岛β细胞损伤的保护作用

本实验采用四氧嘧啶损伤大鼠胰岛β细胞,复制糖尿病动物模型。若预先腹腔注射汉防己甲素（１００ｍｇ／ｋｇ）则可完全预防引发的糖尿病。预防组血糖（７．６３±０．４４ｍｍｏｌ／Ｌ）明显低于对照组（２５．４６±１．２１ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜０．００１）;血清胰岛素水平（１１．３３±１．９７μＵ／ｍｌ）高于对照组（７．１３±０．４５μＵ／ｍｌ,Ｐ＜０．０５）;血浆胰高血糖素（６６．８５±５．０７ｐｇ／ｍｌ）明显低于对照组（９０．３５±３．１５ｐｇ／ｍｌ,Ｐ＜０．０１）．口服葡萄糖耐量实验显示预防组耐糖功能较对照组明显改善,糖耐量曲线下血糖面积预防组（２９．４５±１．６３ｍｌ·ｈ／Ｌ）低于对照组（１１３．２８±５．０２ｍｍｏｌ·ｈ／Ｌ,ｐ＜０．００１）。胰岛β细胞免疫组织化学染色结果显示,预防组胰岛β细胞数目及胰岛素分泌颗粒的含量均与正常大鼠胰岛相同,无形态学改变,而对照组胰岛内β细胞免疫反应阳性产物减少甚至消失。结果表明,汉防己甲素对四氧嘧啶引起的胰岛β细胞急性损伤有保护作用。     

亮氨酸脑啡肽抑制培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

实验以培养的ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,用四唑盐比色地及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入技术动态观察发现亮氨酸脑啡肽可显著抑制血管平滑肌细胞的增殖及ＤＮＡ的合成,阿片受体阻断剂纳洛酮对ＶＳＭＣｓ的增殖及ＤＮＡ的合成无影响,但ＮＡＬ可拮抗亮氨酸脑啡肽对ＶＳＭＣｓ增殖的抑制作用。     

IAPP与SS在大鼠和家兔背根神经节细胞内分布与共存的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法,观察到在大鼠和家兔背根神经节内存在胰岛淀粉样多肽免疫阳性反应细胞.用相邻镜像邻片免疫双标记技术,证实胰岛淀粉样多肽存在于背根神经节内那些生长抑素免疫反应阳性的细胞中,说明胰岛淀粉样多肽在大鼠和家兔背根神经节内与生长抑素共存.实验结果为胰岛淀粉样多肽的胰腺外研究提供了新的资料,为进一步研究背根神经节内生物活性物质间的关系及生理作用提供了形态学证据.