I型胶原对巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白的作用

为探讨胶原的存在对细胞摄取氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）的影响,本研究在体外制成Ｉ型胶原凝胶和巨噬细胞实验体系,ＬＤＬ经Ｃｕ＾２＋催化氧化,丙二醛（ＭＤＡ）及乙酰化修饰后,与胶原的结合能力明显增强,但４－羟基壬烯醛（ＨＮＥ）修饰的ＬＤＬ与胶原的结合能力反应不如天然ＬＤＬ。当小鼠腹腔巨噬细胞培养在胶原凝胶上时,其对ｏｘ－ＬＤＬ的摄取明显减少,这时大部分ｏｘ－ＬＤＬ为胶原凝胶所结合,如用细胞松弛素Ｄ     

巨噬细胞对氧化和丙二醛修饰的低密度脂蛋白结合与降解特性的比较研究

用Cu~(2+)(引发氧化修饰)和脂质过氧化降解产物丙二醛对低密度脂蛋白(LDL)进行修饰,分别测定了巨噬细胞系P~(300)D_1和小鼠腹腔巨噬细胞对两种被修饰LDL的结合量(包括内移量)和降解量。结果显示:LDL经氧化修饰和丙二醛修饰后被两类巨噬细胞的结合量与降解量均高于正常LDL,在修饰程度相近(琼脂糖电泳迁移率相近)时,两类巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合量与降解量高于丙二醛修饰的LDL。竞争性抑制结果显示,丙二醛修饰的LDL和乙酰化修饰的LDL均可部分抑制巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合与降解。     

ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE分泌的研究

目的通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型,观察ApoAI对THP—l源性泡沫细胞ApoE分泌的影响,探讨ApoAI与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响。方法采用聚乙二醇-6000（PEG-6000）沉淀法制备人血浆HDL,再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoA I;佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,OXLDL）使分化后THP-1细胞荷脂,建立动脉粥样硬化细胞模型;ELISA检测不同浓度ApoAI（0,5,10,15,25ug／m1）及不同孵育时间（0．3,6,12,24h）,THP—1源性泡沫细胞ApoE的分泌;RT—PCR检测细胞ApoEmRNA的表达情况。结果ApoAI增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量;且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAI孵育时间增加而增加,在24hApoE的分泌量达最大;在剂量试验中,ApoE的分泌量随着ApoAI剂量的增加有增加趋势,ApoAI浓度为25μmol／L时,ApoE分泌量最大;而却oE基因的表达不受ApoAI的影响。结论-定浓度的ApoAI促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌,且具有时间及剂量依赖性。而在基因水平上,ApoAI对ApoEmRNA表达没有影响。     

Ⅰ型胶原对巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白的作用

为探讨胶原的存在对细胞摄取氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）的影响,本研究在体外制成Ⅰ型胶原凝胶和巨噬细胞实验体系。ＬＤＬ经Ｃｕ２＋催化氧化,丙二醛（ＭＤＡ）及乙酰化修饰后,与胶原的结合能力明显增强,但４－羟基壬烯醛（ＨＮＥ）修饰的ＬＤＬ与胶原的结合能力反而不如天然ＬＤＬ。当小鼠腹腔巨噬细胞培养在胶原凝胶上时,其对ｏｘ－ＬＤＬ的摄取明显减少,这时大部分ｏｘ－ＬＤＬ为胶原凝胶所结合。如用细胞松弛素Ｄ（细胞非特异性吞噬抑制剂）处理巨噬细胞,在无胶原存在时,可见细胞对ｏｘ－ＬＤＬ的降解明显减少;而有胶原时,细胞的降解量则无明显变化,其水平与无胶原时的细胞处理组相当。上述结果提示,Ⅰ型胶原的存在可能阻止了巨噬细胞通过非特异性吞噬途径摄取ｏｘ－ＬＤＬ。     

巨噬细胞新型氧化低密度脂蛋白结合蛋白的研究

小鼠腹腔巨噬细胞（ＭＰＭ）膜上存在能结合氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）的Ａ类清道夫受体（ＳＲ－Ａ）,但用配体印迹技术研究制备ＭＰＭ膜蛋白,发现还存在一种新型ｏｘ－ＬＤＬ膜结合蛋白,其分子量低于ＳＲ－Ａ,为９２ｋＤ它不结合乙酰化低密度脂蛋白ａｃ－ＬＤＬ）,与配体的结合也不受还原剂的影响,但唾液酸酶处理则明显减弱其与ｏｘ－ＬＤＬ的结合,未标记ｏｘ－ＬＤＬ能竞争性抑制（＾１２５Ｉ）ｏｘ－ＬＤＬ与９２ｋ     

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化周永列（浙江省人民医院,杭州３１００１４）关键词氧化修饰低密度脂蛋白,动脉粥样硬化在动脉粥样硬化（ＡＳ）与血浆脂质关系的研究中,血浆低密度脂蛋白（ＬＤＬ）浓度升高被认为是引起ＡＳ的重要危险因素而受到广泛的重视。但是脂...     

激活多巴胺I类受体对氧化性低密度脂蛋白诱导的人单核细胞THP-1分泌NO/NOS的影响

目的：探讨激活多巴胺Ⅰ类受体（DR1）对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人单核细胞（THP-1）分泌一氧化氮/一氧化氮合酶（NO/NOS）的影响及可能机制。方法：THP-1细胞经佛波酯PMA诱导分化,分为正常对照组（control）,氧化型低密度脂蛋白处理组（ox-LDL）,DR1激动剂干预组（SKF）,DR1阻断剂干预组（SCH）,ERK阻断剂干预组（PD98059）;应用油红O染色法鉴定泡沫细胞;硝酸还原法检测NO、NOS的变化情况;免疫荧光和Western blot检测各组细胞蛋白表达情况。结果：ox-LDL刺激48 h可形成泡沫细胞;DR1在THP1细胞上表达,ox-LDL刺激后,DR1蛋白表达降低（P<0.01）;激活DR1受体能够明显抑制由ox-LDL引起的NO、iNOS增多（P<0.01）;在MAPK阻断剂PD98059存在的情况下,SKF的作用部分丧失。结论：激活DR1受体可抑制ox-LDL引起的THP-1细胞NO的大量产生,此过程可能由ERK信号通路所介导。     

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化的发生发展与低密度脂蛋白受到氧化修饰有关。本文从以下四个方面对本室的工作进行了综述：（１）动脉粥样硬化机体受到脂质过氧化损伤;（２）Ｏｘ－ＬＤＬ对内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞的毒性效应;（３）Ｏｘ－ＬＤＬ和ＭＤＡ－ＬＤＬ的比较及与Ｏｘ－ＬＤＬ和ＭＤＡ－ＬＤＬ结合的清道夫受体的特征;（４）不同方法对ＬＤＬ氧化修饰的比较和以ＬＤＬ氧化修饰为模型对某些物质的抗氧化修饰研究。研究结果为动脉粥     

氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡的机理研究

近年来的研究发现,氧化型低密度脂蛋白(oxi-dizedlowdensitylipoprotein,OX-LDL)是导致动脉粥样硬化发生的重要因素[1].OX-LDL具有双重效应,既有强烈的促细胞生长效应,又可诱导细胞发生凋亡.这主要根据过氧化物量的变化而定,少量的OX-LDL可促进增殖,而长时间大量的OX-LDL作用于平滑肌细胞则可导致其凋亡[2].OX-LDL诱导的平滑肌细胞凋亡有助于氧化脂质的生成,导致动脉粥样硬化形成.在动脉粥样硬化晚期,由于斑块中的平滑肌细胞凋亡,细胞外基质分泌减少,使斑块极不稳定而易于破裂,诱发急性临床事件如心肌梗塞、猝死等的发生[3].OX-…     

兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的诱导表达调节

在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT- PCR和配体结合实验检测平滑肌细胞 LRP的m RNA和蛋白质水平的表达 .结果表明 :五种脂蛋白均能在转录和翻译水平诱导兔主动脉平滑肌细胞的 LRP表达 ,尤以富含胆固醇的 N- LDL ,ox- LDL和β- VLDL的刺激作用更明显 .用胆固醇单独或与脂蛋白共同温育 SMC后 ,发现胆固醇本身可促进 SMC的 LRP蛋白水平的表达 ,脂蛋白与胆固醇的共同刺激作用更为显著 .结果提示 :上述五种脂蛋白对 SMC上 LRP的表达有上调作用 ,其机制可能主要是通过其中的胆固醇来实现的 .     

血栓通联合依达拉奉对老年急性脑梗死患者氧化低密度脂蛋白和MMPs水平的影响及临床疗效

目的:探讨血栓通联合依达拉奉对老年急性脑梗死患者氧化低密度脂蛋白及MMPs水平的影响及临床疗效。方法:收集我院收治的126例急性脑梗死患者,随机分为实验组和对照组,每组各63例。对照组患者给予血栓通注射液治疗;实验组患者在对照组基础上给予依达拉奉治疗。观察并比较两组患者治疗前后血清氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平的变化情况以及临床疗效。结果:与治疗前相比,治疗后两组患者Ox-LDL,MMP-2及MMP-9水平均下降,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,实验组患者Ox-LDL,MMP-2及MMP-9水平较低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,实验组患者的临床疗效较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:血栓通联合依达拉奉能够降低老年急性脑梗死患者氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,临床疗效较好。     

Oxidized Low-Density Lipoprotein Induces Neuronal Death

Low-density lipoprotein (LDL) exists within the brain and is highly vulnerable to oxidative modifications. Once formed, oxidized LDL (oxLDL) is capable of eliciting cytotoxicity, differentiation, and inflammation in nonneuronal cells. Although oxLDL has been studied primarily for its role in the development of atherosclerosis, recent studies have identified a possible role for it in neurological disorders associated with oxidative stress. In the present study application of oxLDL, but not LDL, resulted in a dose- and time-dependent death of cultured rat embryonic neurons. Studies using pharmacological inhibitors implicate the involvement of calcium, reactive oxygen species, and caspases in oxLDL-induced neuronal death. Coapplication of oxLDL with either amyloid beta-peptide or glutamate, agents that enhance oxidative stress, resulted in increased neuronal death. Taken together, these data demonstrate that oxLDL induces neuronal death and implicate a possible role for oxLDL in conditions associated with increased levels of reactive oxygen species, including Alzheimer's disease.     

硫酸镁联合小剂量阿司匹林对子痫先期患者氧化性低密度脂蛋白、内脂素水平及临床疗效的影响

目的:探究硫酸镁联合小剂量阿司匹林对子痫前期患者氧化性低密度脂蛋白,内脂素水平及临床疗效的影响。方法:选取2015年1月到2016年7月我院收治的子痫先期患者90例,根据随机数字对照表分为对照组与试验组,各45例。对照组患者给予静脉滴注硫酸镁治疗,试验组联合给予小剂量阿司匹林治疗。比较两组患者临床疗效、氧化性低密度脂蛋白及内脂素水平。结果:治疗结束后,与对照组相比,试验组临床总有效率较高(P0.05),治疗后两组氧化性低密度脂蛋白及内脂素水平较治疗前降低(P0.05);与对照组相比,试验组氧化性低密度脂蛋白及内脂素水平较低(P0.05)。结论:硫酸镁联合小剂量阿司匹林对子痫先期患者有明显治疗效果,推测其可能与氧化性低密度脂蛋白及内脂素水平降低有关。     

Oxidized lipoprotein lipids and atherosclerosis

Plasma lipoproteins contain variable amounts of lipid oxidation products (LOP), which are known to impair normal physiological functions and stimulate atherosclerotic processes. Recent evidence indicates that plasma lipoproteins are active carriers of LOP, low-density lipoprotein (LDL) directing transport toward peripheral tissues, and high-density lipoprotein (HDL) being active in the reverse transport. It has been proposed that the lipoprotein-specific transport of LOP could play a role in atherosclerosis-related effects of LDL and HDL. This article gives an overview of the present knowledge of lipoprotein LOP transport and its association with the risk of atherosclerosis and cardiovascular diseases (CVD). Evidence of the significance of lipoprotein LOP transport comes mainly from studies of physiological oxidative stress and is supported by studies of the functionality apolipoprotein A-1 mimetic peptides. A large body of data has accumulated indicating that lipoprotein LOP transport is connected to the risk of atherosclerosis. While high levels of LOP carried by LDL are indicative of elevated risk, high LOP level in HDL appears to associate with protection. If confirmed, the proposed lipoprotein LOP transport function would affect conception of the etiology of atherosclerosis, but would not conflict current views of the pathophysiological mechanisms. It could open new perspectives, such as the dietary origin of LOP, and the protective function of HDL in clearance of LOP. Focusing on LOP could give additional tools especially for prevention and diagnosis, but would not radically change the management of atherosclerosis and CVD.     

氧化修饰LDL诱导U937细胞凋亡及其机制探讨

用氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导人髓系白血病细胞株U937细胞凋亡,并研究其作用机制.用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(TUNEL法)、流式细胞仪和DNA断裂分析检测细胞凋亡;用免疫组化检测c-fos、c-jun和c-myc蛋白表达,RT-PCR显示c-fos、c-jun和c-myc mRNA表达水平.结果表明ox-LDL可致U937细胞凋亡,其作用具有浓度效应;ox-LDL可以上调c-fos、c-jun和c-myc基因表达,使c-fos、c-jun和c-myc蛋白合成增多,最终诱导U937细胞凋亡.     

氧化修饰极低密度脂蛋白增强其致动脉粥样硬化作用

研究了氧化修饰极低密度脂蛋白（ｏｘ－ＶＬＤＬ）对小白鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积作用及其机制。经Ｃｕ~（２＋）修饰后ＶＬＤＬ的电泳迁移率及脂质过氧化物含量均显著增加。ｏｘ－ＶＬＤＬ更易导致小鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积。以相同浓度（３００μｇＴＧ／ｍＬ）或不同浓度（２００─５００μｇＴＧ／ｍＬ）的ｏｘ－ＶＬＤＬ及正常ＶＬＤＬ（ｎ－ＶＬＤＬ）与巨噬细胞温育２４ｈ,前者使巨噬细胞内ＴＧ堆积均比后者显著（Ｐ＜０．０１）。同时,随ｏｘ－ＶＬＤＬ的脂质过氧化物含量（ＴＢＡＲＳ水平）增加,巨噬细胞内ＴＧ含量的百分率相应增加。以５０μｇ蛋白／ｍＬ的ｎ－ＬＤＬ,ｏｘ－ＬＤＬ,ｎ－ＶＬＤＬ及ｏｘ－ＶＬＤＬ与巨噬细胞温育６０ｈ。细胞内ＣＥ堆积中氧化组均比正常组高（Ｐ＜０．０１）。巨噬细胞对~（１２５）Ｉ－ｎ－ＶＬＤＬ与~（１２５）Ｉ－ｏｘ－ＶＬＤＬ的结合、降曲线均有饱和趋势。两结合曲线无明显差异,但细胞对后者降解的量比前者多。结合的竞争实验表明,ｎ－ＶＬＤＬ能抑制大部分~（１２５）Ｉ－ｏｘ－ＶＬＤＬ与细胞结合,而Ａｃ－ＬＤＬ只能抑制小部分。结果表明ｏｘ－ＶＬＤＬ主要通过受体途径：大部分经过ｎ－ＶＬＤＬ受体,小部分经过清道夫受体被巨噬细胞摄     

Oxidized LDL autoantibodies are related to apolipoprotein E phenotype,independently of postprandial change in plasma triglycerides and LDL size,among patients with angiographically verified coronary artery disease and healthy controls

OBJECTIVE: Oxidized low-density lipoprotein (LDL) autoantibodies (oxLDLab), apolipoprotein E (apoE) phenotype, postprandial triglyceride changes and LDL size are suggested to be risk factors for coronary artery disease (CAD). Our aim was to study the interaction between these new risk factors among patients with CAD and healthy controls. METHODS: oxLDLab from 31 men with angiographically verified CAD and 31 healthy men were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay. Isoelectric focusing and immunoblotting were used for apoE phenotyping. Triglyceride level was measured after 12 h of fasting and 3, 5 and 7 h after a high-fat meal. Nondenaturing gradient gel electrophoresis was used to separate LDL particles according to size. RESULTS: oxLD- Lab levels increased according to apoE phenotype in the following order: E2 < E3 < E4 (p = 0.004, ANOVA). The postprandial response of triglycerides, the size of LDL particles and the concentration of LDL and high-density lipoprotein (HDL) cholesterol did not differ between apoE phenotypes, and the use of these variables as covariates did not change the statistically significant difference in oxLDLab levels between apoE phenotypes (p = 0.01, ANCOVA). oxLDLab levels did not differ between the patient and control groups. CONCLUSION: We found an association between apoE allele epsilon2 and decreased levels of oxLDLab, which was independent of the postprandial response of triglycerides, the size of LDL particles and plasma LDL and HDL cholesterol levels. The mechanism by which apoE affects oxidation of LDL remains unknown.