多聚酶链反应检测宫颈HPV感染及分型的研究

本文应用ＰＣＲ技术检测２ｌ２例临床宫颈标本的ＨＰＶ－６、ｌｌ、１６、１８型特异性核酸序列。结果发现ＨＰＶ－ＤＮＡ的阳性率：宫颈癌组为６２．５％（２５／４０）．慢性宫颈炎为５７％（８１／１４２）,正常宫颈对照组为２０％（６／３０）,Ｐ＜０．００１,提示ＨＰＶ的感染与宫颈炎、宫颈癌有关。同时分型结果显示：ＨＰＶ－６、１６、１８型与宫颈炎相关,１６型与宫颈癌密切相关,且ＨＰＶ不同型别的混合感染在宫颈中普遍存在（３１．３％）。成年女性各年龄组间ＨＰＶ的感染率并无明显差异（Ｐ＞０．０５）。     

宫颈癌病变组织人乳头瘤病毒感染率的免疫细胞化学与DNA杂交的比较观察

近年来人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）被认为与宫颈癌的发生有密切关系。该实验报道了用分子杂交技术（在严格条件下）检测了宫颈活检组织：慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤（ＣＩＮ）、宫颈癌和宫颈正常组织中１６型乳头瘤病毒（ＨＰＶ－１６）ＤＮＡ的阳性率,并将其与用免疫细胞化学方法（ＰＡＰ）所得结果进行了比较。结果显示１３％（２／１５）的慢性宫颈炎、１７％（２／１２）的ＣＩＮ、５６％（５１／９１）的宫颈癌含有ＨＰＶ－１６ＤＮＡ,而正常组织为阴性;ＨＰＶ属抗原仅见于３５％（６／１７）的ＣＩＮ,其他受检组织均为阴性。结果提示用ＰＡＰ法检查ＨＰＶ－１６的抗原,所得阳性率不及ＤＮＡ杂交所得阳性率高;但它作为一种简便、快速的方法用于福尔马林固定、石腊切片材料,显示ＨＰＶ属抗原,借以筛选多种不同型的ＨＰＶ对ＣＩＮ或其他组织中ＨＰＶ的增殖性感染有一定的价值。     

巢－PCR分型检测人乳头状瘤病毒同源序列

采用Ｌ１通用引物ＭＹ１１／９介导聚合酶链反应,（ＰＣＲ）,从人生殖道疣,癌组织中扩增人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）同源序列得３９４－５５２ｂｐＤＮＡ片段,再以内引物ＧＰ５／６介导第二次扩增得１３９－１５４ｂｐ片段,然后根据ＲｓａＩ酶切扩增片段的电泳图谱来分出ＨＰＶ型别,无需特异型别的探针进行分子杂交,３５例宫颈癌和３０例生殖器疣ＨＰＶ同源序列检出率分别为８５．７５％和９６％;１２例卵巢腺癌检出ＨＰＶ同源     

用质量控制狭缝式杂交法（Coslot）检测妇女宫颈上皮中人乳头瘤病毒（HPV）DNA

本文报道一种能对ＨＰＶ进行较为准确分型的刚Ａ杂交程序和方法。它具有如下特点：１．由于简化了实验程序,标本消耗减少。因此该方法尤其适用于小组织活检标本（１－２ｍｇ）中ＤＮＡ同源序列检测;２．敏感性高。由于标本消耗减少,使ＨＰＶ检出率大为提高,与斑点杂交技术相比,敏感性提高１．６倍;３．型别特异性强。由于改变了实验条件及在实验过程中实行严格的质量控制,明显减少了不同ＨＰＶ型别的交叉反应,甚至在部分出现交叉反应的标本中,仍可通过强度对比来最后判定ＨＰＶ感染型别。应用该技术对１４３份宫颈炎标本、１７份宫颈不典型增生标本及２５份宫颈癌标本进行了ＨＰＶ１６型检测,阳性率分别为５０．０５％（７３／１４３）、５７％（２７／４７）及７６％（１９／２５）,并与Ｄｏｔｂｌｏｔ方法进行了比较。该方法在ＨＰＶ感染与宫颈癌关系的分子流行病学研究中具有重要意义和广阔的应用前景。     

金黄色葡萄球菌L型和人乳头瘤病毒与宫颈癌关系的研究

应用改良革兰氏染色和免疫组化染色（ＡＢＣ法）,对２７０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现,宫颈癌革兰氏染色切片中细菌Ｌ型感染率（７５．１％）明显高于慢性宫颈炎（４５．５％）（Ｐ＜０．０５）,金黄色葡萄球菌Ｌ型抗原阳性率（７６．２％）明显高于人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）抗原阳性率（５７．１％）。Ｌ型、ＨＰＶ混合感染率为４２．８％。上述结果表明宫颈癌中金葡菌Ｌ型与ＨＰＶ感染均常见,尤其金葡菌Ｌ型感染更为多见;金葡菌Ｌ型与ＨＰＶ感染的致病特征相似,两者均有不同程度的空泡细胞出现。提示金葡菌Ｌ型感染可能也是宫颈癌的致癌重要因素之一。     

细菌L型与人乳头状瘤病毒致凹空细胞的比较

应用组织切片革兰染色和免疫组织化学染色等方法,对２４０例有凹空细胞的标本（鳞状细胞乳头状瘤３６例．尖锐湿疣６１例,喉癌８５例,子宫颈鳞癌５８例）进行人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）和细菌Ｌ型检测,比较两者在组织中的检出阳性率、分布及组织病理学表现。结果发现,凹空细胞中ＨＰＶ—Ａｇ检出阳性率（７２．１％）与金葡菌ＣｏｗａｎＩ株Ｌ型－Ａｇ检出阳性率（６５．０％）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;革兰染色有６５．４％的凹空细胞检出Ｌ型菌,ＨＰＶ－Ａｇ与Ｌ型－Ａｇ在组织中的分布和组织病理学表现基本一致。表明细菌Ｌ型与病毒具有相似的病理致病特征。细菌Ｌ型感染是引发上述病变及凹空细胞的重要原因之一。     

戊型肝炎病毒(HEV)合成肽及基因重组抗原免疫反应性研究

用ＯＲＦ２、ＯＲＦ３合成肽抗原（１～１０号）及基因工程重组的ＯＲＦ２抗原（１和２号）分别建立了酶联免疫方法（ＥＩＡ）,检测６０份戊型肝炎病人血清中ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ１０个合成肽抗原（Ｓｐ１－Ｓｐ１０）及２个重组抗原（Ｒｅ１、Ｒｅ２）,均和ＨＥＶ阳性血清发生特异反应,但阳性率和反应强度差别很大。以Ｒｅ１（ＯＲＦ２,４０２～６６０）检测的抗体阳性率最高,为９６．７％（５８／６０）;Ｓｐ６（ＯＲＦ３,８８～１２３）次之,为９３．３％（５６／６０）;以上两种抗原混合使用阳性率为１００％（６０／６０）。Ｓｐ６、Ｒｅ１及这两种抗原混合使用检测抗ＨＥＶＩｇＭ,阳性率分别为１８．３％（１１／６０）、６６．７％（４０／６０）和６６．７％（４０／６０）。研究结果表明：合成肽６号（Ｓｐ６）及重组抗原１号（Ｒｅ１）是制备戊肝抗体诊断试剂的理想抗原。     

原位核酸杂交检测宫颈癌中金黄色葡萄球菌L型DNA

应用病原微生物培养、改良革兰氏染色、免疫组化染色及原位核酸杂交等方法,对５０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现宫颈癌病原微生物培养细菌及其Ｌ型阳性感染率为５８％（２９／５０例）,以金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其Ｌ型多见（１３／２９例）;宫颈癌和慢性宫颈炎组织切片革兰氏染色,细菌Ｌ型检出率分别为６６％和４５．５％;免疫组化染色（ＡＢＣ法）金葡菌Ｌ型抗原阳性率各为６８％和４８．５％。Ｌ型主要分布于癌间质、癌巢及宫颈上皮下结缔组织内。１２例宫颈癌金葡菌Ｌ型ＤＮＡ探针原位杂交显示,１０／１２例癌细胞核内有金葡菌Ｌ型ＤＮＡ杂交阳性信号,表明金葡菌Ｌ型ＤＮＡ已进入宫颈癌细胞内,可能会在基因水平上影响宫颈上皮恶变,提示宫颈癌发生与金葡菌Ｌ型感染关系密切,值得进一步研究。     

妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关关系的研究

为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｓＶｉｒｕｓ２,ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌａｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ）的感染及其相关关系,我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４８例患有性病、生殖道感染的妇女和３９例正常妇女进行了下生道ＨＳＶ２、ＨＰＶ的检测。ＨＳＶ２在实验组和对照组妇女中的感染率分别是７２９％和２５６％,两组有极显著性差异（Ｐ＜００１）;ＨＰＶ在实验组和对照组妇女中的感染率分别是５３３％和３３３％,两组无显著性差异（Ｐ＞００５）;两组中ＨＳＶ２、ＨＰＶ双阳性率分别是４５８％（２２／４８）和２３１％（９／３９）,有显著性差异（Ｐ＜００５）;在两组共８７份标本中,ＨＳＶ２和ＨＰＶ双阳性者占３１例,阳性率是３５６％。统计学分析表明：ＨＳＶ２和ＨＰＶ感染之间有极显著的相关性（Ｘ２＝２４０８,Ｐ＜００１）。研究表明：患有生殖系感染和性病妇女其ＨＳＶ２或ＨＰＶ和ＨＳＶ２混和感染的机率显著高于正常妇女,ＨＳＶ２和ＨＰＶ的感染具有协同作用。由于这两种病毒均与宫颈癌的发生有关,它们在生殖道中感染的相互作用机理有待于进一步研究。     

尖锐湿疣HPV感染与淋病关系初探

尖锐湿疣ＨＰＶ感染与淋病关系初探王镇美（广州番禺何贤纪念医院，　５１１４００）在我院经病理组织学诊断或结合免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＰＶ－Ａｇ、聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＰＶ－ＤＮＡ确诊为尖锐湿疣的有１６９名患者。对其中临床病史完整的５０例患者采集宫颈...     

PCR方法检测淋巴结组织中结核菌L型的研究

用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ），改良抗酸染色（ＩＫＳ）和结核菌抗体免疫组化染色（ＩＨＣ）三种方法检测６０例淋巴结组织中结核菌Ｌ型感染情况，以病理检查结果分为结核组（１３例），淋巴结非特异性炎症组（３０例）和淋巴结对照组（１７例）。各组三种方法检测阳性率分别为：ＰＣＲ８４．６％（１１／１３），６０％（１８／３０）．２３．５％（４／１７）．ｌＫＳ７６．３％（１０／１３），６６．７％（２０／３０）；１７．６％（３／１７）；ＩＨＣ８４．６％（１１／１３），６３．３％（１９／３０），１１．８％（２／１７）。三者均为阳性者为８０％。结果表明淋巴结非特异性炎症组感染率与结核组相似，与对照组间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示：结核菌Ｌ型可能是引起淋巴结非特异性炎症的致病因子之一，ＰＣＲ技术在淋巴结非特异性炎症的病原学诊断上具有重要价值。     

247例人乳头瘤病毒的PCR检测结果分析

２４７例生殖系分泌物标本用ＰＣＲ检测人乳头瘤病毒ＨＰＶ－ＤＮＡ。结果显示：阳性感染率达８７．６％,在与临床疾病密切的亚型中,６、１１型感染率（６０％）,高于１６、１８型感染率（５１．６％）,但统计学处理没有显著性差异。女性发病率明显高于男性。易感人群组以２０～４０岁最高（占感染人数的８４．４％）,并且有年轻化的趋势（１０～２０岁年龄组占８．４％）。     

妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关 …

为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｓＶｉｒｕｓ２,ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌｌａ－ｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ）的感染及其相关关系,我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４８例患有性病,生殖道感染的妇女和３９例正常妇女进行了生道ＨＳＶ２,ＨＰＶ的检测,ＨＳＶ２在实验组和对照组妇女中的感染率分别为７２．９％和２５．６％,两组有极显著性差异（Ｐ〈０．０１）;ＨＰＶ在实验     

重组HCV NS5区蛋白抗原在丙型肝炎检测中的应用

对ＨＣＶ ＮＳ５区部分基因进行了克隆表达,获得优质ＮＳ５区蛋白抗原。通过对不同人群抗－ＮＳ５检测表明,随访３年和６年的输血后丙肝病例抗－ＮＳ５阳性率分别为７０．５％和８０．９％,随访８年和１１年慢性丙肝病例分别为５０．７％和８２．４％。一般人群阳性率仅为１．７％,正常献血员中未检出阳性。     

一氧化氮对急、慢性缺氧大鼠血流动力学及缺氧性肺血管收缩反应的影响

观察了吸入０．００４％的一氧化氮（ＮＯ）对急、慢性缺氧大鼠血流动力学、缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ）、血气及高铁血红蛋白（ＭｅｔＨｂ）的影响。结果表明：（１）常氧吸入ＮＯ时能明显降低慢性缺氧大鼠肺动脉平均压（Ｐｐａ）和肺血管阻力（ＰＶＲ）,但对正常大鼠的Ｐｐａ和ＰＶＲ无明显影响;（２）慢性缺氧大鼠急性缺氧时ＨＰＶ较正常大鼠弱,吸入ＮＯ不但降低两者的急性缺氧肺动脉高压,且完全逆转两者的ＨＰＶ;（３）吸入ＮＯ对急、慢性缺氧大鼠体循环血流动力学、血气及ＭｅｔＨｂ含量无明显影响。提示吸入ＮＯ能选择性降低急、慢性缺氧性肺动脉高压,且逆转ＨＰＶ。     

乙型肝炎病人重叠感染丙型肝炎的评价

应用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ法检测５０２例乙肝病人血清,４０１例ＨＢｓＡｇ阳性血清中,有１１４例（２８．４％）抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ双项阳性,２５例（６．２％）ＨＣＶＲＮＡ单项阳性;２１例（５．２％）抗－ＨＣＶ单项阳性。将ＨＢｓＡｇ乙肝病人分成ＨＢＶＤＮＡ,ＨＢｅＡｇ阳性组和ＨＢＶＤＮＡ,ＨＢｅＡｇ阴性组。前者抗－ＨＣＶ阳性率为１１．６％～２０．５％,ＨＣＶＲＮＡ阳性率为１６．２％～２０．５％。后者抗－ＨＣＶ阳性率为２０．２％～５５．６％,ＨＣＶＲＮＡ阳性率为２３％～６０．３％。结果说明长期携带ＨＢＶ者和慢性乙肝病人均可重叠ＨＣＶ感染。ＨＢＶＤＮＡ阳性组抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率明显高于ＨＢＶＤＮＡ阳性组     

肛门生殖器区肿瘤组织中HPV的快速检测和分型

迄今已发现的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）型已超过７７型,其中至少有３０个型与泌尿生殖道肿瘤有关。所以ＨＰＶ的检测与分型对于泌尿生殖道肿瘤的病因和预后将是非常重要的。ＨＰＶ有很大的异质性,故用常规的诊断技术来测定未知标本中的ＨＰＶ基因型有一定困难。为此,我们应用了反向点杂交法（ＲＯＢ）来检测ＨＰＶ分型。即用７种序列特异性寡核苷酸探针分别对应７型ＨＰＶ（ＨＰＶ６Ｂ、１１、１６、１８、３１、３３、３５）,这些     

常用功率密度CO2激光治疗尖锐湿关疣时烟尘中HPV DAN的检测

目的：了解临床常用功率密度的ＣＯ２激光治疗尖锐湿疣术中烟尘是否含有ＨＰＶ ＤＮＡ。方法：选择皮损较多的尖锐湿疣，病程在６个月以内的患者作为研究对象，分别用５Ｗ、１０Ｗ、１５Ｗ对应功率密度下的ＣＯ２激光汽化在体疣体组织，离光斑５ｃｍ或５０ｃｍ处用吸尘器提吸烟尘于ＰＢＳ中，经固定后观察烟尘的细胞形态学，并用ＨＰＶ通用型引物作ＰＣＲ检测烟尘是否含有ＨＰＶ－ＤＮＡ。结果：三种功率密度的烟尘主要由炭化颗粒组     

献血员血清抗—HCV和HCV RNA检测

本文对宜昌市的２９９９名献血员,５９４名自然人群的血清进行了抗－ＨＣＶ、ＨＣＶＲＮＡ检测,结果表明,献血员中抗－ＨＣＶ阳性２３例,阳性率为０．７７％。其中宜昌、巴东分别为０．７３％和０．７６％,沙市为０．８３％。地区、性别、城乡之间抗－ＨＣＶ阳性率无显著性差异（ｐ＞０．０５）。参照以往文献报导,此阳性率比国内报导的低,与国际的相一致。５９４名自然人群抗－ＨＣＶ结果均为阴性,献血员与自然人群之间抗－ＨＣＶ阳性率差异显著（ｐ＜０．０５）。２０例抗－ＨＣＶ阳性者中检出ＨＣＶ　ＲＮＡ阳性６例,占３０％（６／２０）,占受检献血员的０．２０％（６／２９９９）,比武汉（０．８０％）低４倍,地区之间无显著差异（ｐ＞０．０５）。由此初步确认：宜昌市献血员中丙型病毒性肝炎感染低于国内某些大中城市、宜昌市（含七县二市）巴东县、沙市市是丙型病毒性肝炎低感染区。但存在无症状病毒血症携带者传染源。     

大连地区尖锐湿疣中HPV感染的调查

大连地区尖锐湿疣中ＨＰＶ感染的调查大连医科大学附属二院大连１１６０２３聂大平范治璐韩锐尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染所致。本文用ＰＣＲ技术检测４４例尖锐湿疣组织中ＨＰＶＤＮＡ,报告如下：１材料与方法标本来源于经临床或病理诊断为尖锐湿疣的患者,...