土壤丝状真菌中能引起稻瘟霉分生孢子形态畸变的活性菌种筛选的研究

本实验对安徽、湖南、江苏等十三个省的60份土样进行了分离纯化．获得791株真菌。采用目前属国内领先的以稻瘟零分生拖子形态变化为指标的筛选体系,初筛得到能使猪瘟霉抱子畸变和抑制孢子萌发的菌株140株一进而经过复筛得到能够使稻温零胞于畸变的19株,抑制稻盛霉抱子萌发的16株。其中76－2、76－6、100－3、100－7、100－10,5株菌的抱子畸变活性最好且遗传稳定。     

云南滇池土壤丝状真菌中具有引起稻瘟霉孢子形态异常活性菌株的筛选

从13份云南滇池土样中获得423株真菌,以稻瘟霉孢子形态变形或生长抑制为筛选模型对这423林真菌进行初筛,得到47株活性菌株。经复筛,最终得到两株（07－11,07－80）稳定的变形活性菌株。     

稻纵卷叶螟根虫瘟霉的分离鉴定及其流行病研究

在广东省发现一种新的侵染稻纵卷叶螟幼虫的昆虫病原真菌,经鉴定该病原真菌为根虫瘟霉Zoophthora radicans,这是中国首次报道该菌侵染稻纵卷叶螟。在室内进行的温度和光周期对该菌生长的影响实验表明,该菌在15－25℃均可生长,最适生长温度为25℃;光周期对菌落生长影响不显著。根虫瘟霉主要侵染稻纵卷叶螟3－5龄幼虫,对3－5龄幼虫的侵染率分别为2.71%、24.32%和72.97%。在10－11月,根虫瘟霉可持续引发稻纵卷叶螟幼虫高强度流行病,侵染率高达95%。该菌以休眠孢子越冬,成为次年稻纵卷叶螟幼虫流行病的初侵染源。因此,根虫瘟霉是稻纵卷叶螟幼虫一种有效的自然控制因子。     

稻瘟菌诱导的水稻几丁酶、β-1.3-葡聚糖酶活性及分布

稻瘟菌(Pyricularia oryzae C.)孢子感染或菌丝培养液处理后,水稻的几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活力被分别诱导提高6～9倍和3～5倍。用亲和层析初步纯化的几丁酶在体外能降解稻瘟菌细胞壁和抑制它的孢子萌发。这两个酶在细胞间隙和细胞内都有分布。     

根际放线菌I06—03431产生的核苷类抗生素3431的研究

在抗稻瘟菌农用抗生素的筛选过程中,从60多种中药植物根际土壤获得的放线菌中发现,放线菌106—03431的发酵液具有强抗稻瘟菌的活性。经色谱分离纯化,获得活性成分3431,经光谱学数据分析,证明3431为已知核苷类抗生素,丰加霉素（Toyocamycin）：进一步生物活性研究表明,0．005μg／mL的3431能够抑制稻瘟菌孢子萌发和菌丝生长。另外,3431还具有与植物生长调节剂6-苄基腺嘌呤（6-BA）一样的抑制拟南芥根生长的活性。     

诺氏虫疠霉生物学特性的研究

通过对诺氏虫疠霉生物学特性的研究,明确了该菌孢子萌发,生长的适温范围为15℃-25℃,萌发最适湿度为100％,最适pH为9－10。紫外线对诺氏虫疠霉分生孢子有强烈杀伤作用,照射10分钟,萌发率降低41．9％,不同光照处理间菌落生长差异显,全光照可完全抑制菌落生长,明暗交替最地菌落生长和产孢。     

靛红衍生物的合成及其对稻瘟菌的生物活性

以靛红为原料合成了系列3-亚胺基/亚甲基-吲哚-2-酮化合物及其Mannich碱衍生物,研究了它们在抗稻瘟菌方面的活性,发现了这两种类型的若干化合物有较好的抑制稻瘟菌孢子萌发的活性,初步讨论了构效关系。认为1位的羟甲基和胺甲基、3位的亚甲基是药效团,芳基亚甲基苯环上对位取代基、羟基取代基和吸电子取代基不利于活性的提高,邻位的供电子取代基有利于活性的提高。     

云南滇池土壤丝状真菌中具有引起稻瘟霉孢子形态异常活性菌株的 …

从１３份云南滇池土样４２３株真菌,以稻瘟霉孢了形态变形或生物凶制 ４２３株真菌进行初筛,得到４７株活性菌株。经复筛,最终理到两株稳定的变形活性菌株。     

水霉拮抗菌的筛选与拮抗物特点初步分析

水霉病是淡水和咸淡水鱼类被水霉菌感染引起的常见疾病。该研究从多个养殖水体中分离得到6株水霉拮抗菌,SZK15、XL03、TG08、DJ12、HD05和DS08,以SZK15的拮抗作用最强。对SZK15研究发现,在PDA平板上,其对水霉菌丝抑制距离为11.5 mm,对水霉孢子抑制圈直径为29.7 mm,其10倍浓缩的无细胞发酵液的抑水霉菌圈直径达30.2 mm;在液体培养条件下,SZK15无细胞发酵原液能完全抑制水霉菌丝和孢子的萌发生长,其5倍稀释液中,水霉菌丝生长受抑制而长度稳定在2.0 mm,有30%的孢子萌发,且萌发后菌丝受抑制而未形成菌丝网,其10倍稀释液中水霉菌丝生长慢于对照组。SZK15分泌的拮抗活性物质对121℃高温敏感,对80℃、100℃高温、蛋白酶K和胰蛋白酶均部分敏感。本研究为水霉病害的生物防治提供了潜在新途径。     

块状耳霉的分离、鉴定、培养和寄主范围

1981年自感染真菌的扁豆蚜(Aphis craccivora Koch)虫尸上分离到一株虫毒菌,经鉴定是耳霉属的块状耳霉(couidiobolus thromboides Drechsler)。该菌易于分离和培养,在培养基上可形成大量休眠孢子,休眠孢子容易萌发,六天中萌发率达53%。经试验该种虫霉可以感染多种蚜虫,是一种有希望制成杀蚜菌剂的真菌。     

温度,pH和后熟处理对缩球囊霉孢子萌发的影响

研究了温度、ｐＨ和后熟处理对缩球囊霉（Ｇｌｏｍｕｓ　ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｕｍ Ｔｒａｐｐｅ）孢子萌发的影响,结果发现从云南热带植物河口观音座莲（Ａｎｇｉｏｐｔｅｒｉｓ ｈｏｋｏｕｅｎｓｉｓ, Ｃｈｉｎｇ）根际土壤中采集的缩球囊霉孢子萌发的最适温度在２５℃～３０℃之间,最适ｐＨ在５～６之间,后熟处理明显能提高缩球囊霉孢子的萌发率;同时还观察到缩球囊霉孢子萌发时只产生一根芽管;缩球囊霉孢子的萌发率较其他一些ＶＡ菌根真菌孢子的萌发率低,不同季节采集到的孢子其萌发率有明显的差异。     

EPA高产菌的繁殖体诱导条件初探

研究了诱导介质、处理时间及温度等因素对高产EPA、AA等多不饱和脂肪酸的菌株－－轮梗霉（Diasporangium sp.）产游动孢子能力的影响。结果表明：胡萝卜片介质上、25℃诱导6d,要得到最大数量的孢子。同一条件下游动孢子量则在第8d达到最高。进一步探讨孢子的萌发条件发现：25℃、营养琼脂上孢子的萌发率最高。     

内生芬芳镰刀菌Dzf2中两个抗菌活性成分(英文)

采用活性追踪的方法从盾叶薯蓣内生芬芳镰刀菌Dzf2中分离到两个抗菌活性成分,通过物理化学性质和波谱学特征鉴定为镰刀菌酸(1)和9,10-脱氢镰刀菌酸(2)。采用多孔板-MTT-比色法和孢子萌发法测定了化合物的抗菌活性。镰刀菌酸和9,10-脱氢镰刀菌酸对供试细菌的半抑制浓度(IC50)值为35.35μg/mL至171.29μg/mL;对稻瘟菌孢子萌发的IC50值分别为28.83μg/mL和27.06μg/mL。     

温度、pH和后熟处理对缩球囊霉孢子萌发的影响*

研究了温度、ｐＨ和后熟处理对缩球囊霉（Ｇｌｏｍｕｓ　ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｕｍ Ｔｒａｐｐｅ）孢子萌发的影响,结果发现从云南热带植物河口观音座莲（Ａｎｇｉｏｐｔｅｒｉｓ ｈｏｋｏｕｅｎｓｉｓ, Ｃｈｉｎｇ）根际土壤中采集的缩球囊霉孢子萌发的最适温度在２５℃～３０℃之间,最适ｐＨ在５～６之间,后熟处理明显能提高缩球囊霉孢子的萌发率;同时还观察到缩球囊霉孢子萌发时只产生一根芽管;缩球囊霉孢子的萌发率较其他一些ＶＡ菌根真菌孢子的萌发率低,不同季节采集到的孢子其萌发率有明显的差异。     

鄂西北产苍耳子甲醇粗提物抑菌活性及其清除DPPH能力的初步评价

采用生长速率法、孢子萌发法及DPPH自由基清除法,对产自鄂西北的野生植物苍耳子粗提物体外抑菌活性及抗氧化性进行了初步测定.结果表明,苍耳子甲醇粗提物对绿色木霉、黄瓜灰霉菌、黑曲霉、终极腐霉、尖镰孢菌黄瓜专化型五种病原真菌均有一定的抑制作用,其中无论是抑制菌丝生长还是孢子萌发,均对黑曲霉显示出了显著的抑制活性.实验结果也...     

水霉拮抗菌的筛选及其拮抗作用的初步研究

为了获得水产动物水霉病病原菌的拮抗微生物,以水霉为靶标,对其拮抗菌进行了筛选,并研究了拮抗作用最强菌株的拮抗活性.实验结果表明:从发生过水霉病害的水体中分离得到了130株细菌,能抑制水霉菌落生长的有三株:LD038、LD057和LD106,其中以LD038的拮抗作用最强,经梅里埃ATB微生物自动鉴定系统鉴定为黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens).培养基对LD038的拮抗活性影响显著,LD038在PDA平板上表现出的拮抗活性最强,大小依次为PDA＞BHI＞GY＞CA＞Sabouraud.进一步对菌株LD038体外拮抗活性进行了研究.平板抑制实验表明,LD038能抑制水霉菌丝生长和孢子萌发.琼脂扩散法中,LD038菌落周围产生的抑菌圈直径为20mm,而无菌水对照组中水霉菌丝蔓过滤纸纸片并长至平板边缘;D38菌线间孢子的萌发与孢子距菌线的距离有关,距LD038菌线22mm范围内,孢子的萌发完全被抑制.无菌发酵上清液实验表明,与对照组相比,LD038无菌发酵上清液对孢子的萌发和菌丝生长都表现出显著的抑制作用.其中孢子较菌丝对上清液更为敏感,5倍稀释上清液下的孢子萌发率仅为10%,且萌发后的菌丝生长也同样受到抑制,整个实验过程中菌丝均未形成网状,对照组中萌发形成的菌丝在16h后呈网状.无菌上清原液和2倍稀释上清液中孢子均未萌发.对菌丝而言,仅无菌上清原液能彻底抑制菌丝生长,与对照组相比,2倍和5倍稀释上清液显著延缓了菌丝的生长.当对照组中的菌丝铺满整孔时,2倍和5倍稀释上清液中的菌丝长度分别为0和2.6mm.显微观察表明LD038的无菌发酵上清液导致水霉菌丝形态发生变化,较正常菌丝短而粗大,且出现了黑色原生质聚集.本研究为水霉病害的生物防治提供了一定的理论基础和依据.     

潮霉素B抗性为选择标记的整合型表达载体的构建及在米根霉中的遗传转化

为了建立适合米根霉的遗传转化体系,应用重叠延伸PCR的方法构建了以潮霉素B抗性为选择标记的单交换整合型表达载体p BS-hygro-ldh A;分别采用PEG/Ca Cl2介导的原生质体转化、原生质体电转化及萌发孢子电转化的方法将表达载体p BS-hygro-ldh A转化入米根霉AS 3.819菌株中,并研究了菌丝酶解时间、孢子萌发时间以及电转化电场强度对于转化效率的影响;通过荧光定量PCR(q PCR)对米根霉转化子基因组中质粒整合拷贝数进行了检测,并研究了其对米根霉转化子抗性稳定性的影响。实验结果表明成功获得整合了表达载体p BS-hygro-ldh A的米根霉转化子。菌丝酶解140 min产生的原生质体其再生率和转化率最高,原生质体电转化最佳电场强度为13 k V/cm,孢子萌发2.5 h转化率最高,萌发孢子电转化最佳电场强度为14 k V/cm。萌发孢子电转化方法转化率要高于原生质体转化的方法。荧光定量PCR检测结果表明,在一定范围内,高质粒整合拷贝数的米根霉转化子比较稳定。研究建立了用于工业米根霉菌株的遗传转化体系,为米根霉代谢调控研究以及菌种改造工作提供了基础与支持。     

稻绿核菌(稻曲病菌)分离方法的比较研究

作者对不同情况下稻曲病菌的分离方法进行了比较研究。结果表明成熟早期稻曲球上的绝大多数新鲜的厚垣孢子具有萌发能力,及时进行分离培养是病原菌成功分离的关键。随保存时间的延长,厚垣孢子萌发能力急剧下降;消毒处理可杀死大部分的厚垣孢子。菌核可长期保存并保持极高的萌发生长能力,是稻曲病菌分离最为理想的材料。稻曲球中部的致密菌丝组织分离难度较大,只能作为稻曲病菌分离的一种补救方法。     

环境因素对安徽虫瘟霉生长发育的影响

安徽虫瘟霉是目前仅发现于我国的重要蚜虫病原真菌,对桃蚜具有明显的自然控制作用。本研究了温度和紫外光对安徽虫瘟等固体培养性状及不同温湿度组合对安徽虫瘟霉分生孢子萌发的影响。     

哈茨木霉的培养及其对烟草疫霉生长的抑制研究

哈茨木霉是一类重要的植病生防因子。哈茨木霉TH-1分别在PDA培养基、麦芽糖培养基、查氏培养基和琼脂培养基上培养均能产孢,其中PDA培养基为最适培养基。PDA培养基上,菌丝生长适宜温度27．5℃～35℃,最适温度32．5℃,产孢最适温度27．5℃。菌丝生长适宜pH值为3～7,产孢适宜pH值为5-9,生长与产孢最适pH值为5。光照对菌丝生长影响不大但明显影响菌株的产孢数量,光照时间越长产孢量越大。对峙培养试验表明TH-1明显抑制疫霉菌的生长速率,其无菌滤液明显抑制烟草疫霉菌游动孢子的萌发,并抑制游动孢子芽管的伸长,TH-1对游动孢子萌发的相对抑制率为12．7％,对芽管生长长度的相对抑制率为63．1％。水解酶平板活性测定显示,TH-1产生β-1,3葡聚糖酶与纤维素酶,从而使烟草疫霉菌细胞壁的消解,产生非挥发性抗生素抑制烟草疫霉菌孢子萌发,但对菌丝生长影响不大。