小刺猴头菌液体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了气升环流反应器培养小刺猴头菌过程中菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为0．0918g／g（干）,而子实体仅为外0．378g／g（干）,发酵液中多糖含量达0．285g／l,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝20．2：5．2：1,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

鸡Zong菌的液体发酵与毒理研究

鸡Ｚｏｎｇ菌Ｔｅｒｍｉｔｏｍｙｃｅｓａｌｂｕｍｉｎｏｓｕｓ（Ｂｅｒｋ）．Ｈｅｉｍ采自四川西昌野生子实体,经分离,纯化,鉴定、保存于ＰＤＡ琼脂斜面培养基。报道鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体深层发酵在５００Ｌ发酵罐中,温度２８～３０℃,ｐＨ６．０～７．０接种量１％～１．５％,通气量为１：１～１：１．２（体积比）,可在３０ｈ获得鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体２４．５ｇ／Ｌ（干重）还对鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体的毒性进行了探讨,选用Ａｍ     

蜜环菌多糖的生物合成与发酵条件的相关性

培养基的碳、氮源,ＰＨ值直接影响蜜环菌多糖的生物合成,泥炭水解液的添加量占培养基的１０％～３９％（Ｖ／Ｖ）时,对蜜环菌多糖的生物合成有促进作用。液体振范培养时,蜜环菌生长形成球形菌丝体,菌丝生物量３．４５ｇ／Ｌ,菌丝多糖（精糖）得率为０．２８４％,而静置液体培养有利于菌索形成,菌素生物量１４．０５ｇ／Ｌ,菌索多糖（精糖）得率为０．５１５％,胞外多糖的得率分别为２９．４％和８．３％     

金针菇菌丝体的深层培养及多糖制取

从２０株金针菇菌株中筛选出适于液体发酵的９４Ｂ２株。该菌种适宜的摇瓶培养条件：培养温度２３～２４℃,ｐＨ６．５,接液体种量１０％,装液量≤５０ｍｌ／５００ｍｌ瓶;不同的间歇振荡形式对菌丝球产量和形态有显著影响。深层发酵工艺相似于抗生素发酵。发酵期间发酵液ｐＨ变化幅度很小,总糖、还原糖、氨基氮与菌丝生长量有一定的相关性。发酵酵的菌丝产量可达４７．５ｇ（湿重）／１００ｍｌ、胞外多糖达１７４．７ｋｇ／１００ｍｌ发酵液上清、胞内多糖达３３８．１ｍｇ／１００ｇ湿菌丝体。     

灵芝深层发酵优良菌株的筛选

灵芝种类多,种间与品种间的不同均可能引起有效成分在产量表达上的差异,为了能筛选适宜深层发酵法生产的灵芝菌株,以8个灵芝菌株为研究对象,比较不同菌株在固体培养基上的菌丝体及液体发酵的菌球萌发菌丝生长速度、液体发酵产物、子实体多糖等指标。结果表明:8个菌株菌丝体生长速度有一定差异,以灵芝G9、红芝早萌发且生长速度快,甜芝、紫芝、灵芝G8、血芝其次,灵芝5760、黑芝最慢。8个菌株深层发酵产物由于生物学特性不同而有差别,同时菌株菌丝体生物量与次生代谢产物多糖之间无必然的联系,甜芝菌丝体生物量最大但自溶速度最快,灵芝5760菌球细小,速度最慢,血芝次生代谢产物多糖最高。菌丝体多糖与子实体多糖比较,各个菌株的菌丝体多糖含量均高于子实体多糖含量。提取多糖工艺以超声波辅助破壁处理后,再以热水浸提法提取多糖的得率明显提高,紫芝、黑芝提高了2倍以上。     

深层培养云芝菌丝体蛋白多糖的提取及性质

采用水、３％草酸和０．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠为溶剂分别提取深层培养的云芝〔Ｐｏｌｙｓｔｉｃｔｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ（Ｌ．）Ｆｒ．〕菌丝体蛋白多糖,其得率分别为菌丝体干重的２０％、４９％和１９％。提取的粗多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析进一步分离、纯化,纯化的多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后呈现一个斑点,在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析中有一个对称峰,紫外及红外光谱分析和蛋白质含量测定表明该多糖为蛋白多糖,其蛋白质和多糖含量在水提多糖中分别为１３％和６２％、在酸提多糖中分别为５％和９１％。在碱提多糖中分别为３％和８１％。组成该多糖的主要单糖是葡萄糖和木糖。     

云芝深层培养及发酵液的应用研究

经试验云芝菌深层培养合适培养基为马铃薯蔗糖综合培养基。其配方：马铃薯２０％,蔗糖２％,ＫＨ２ＰＯ４０．１％,（ＮＨ４）２ＳＯ４０．２％,水１００ｍｌ,ｐＨ自然。试验表明,利用云芝菌深层培养发酵滤液可制成营养丰富的保健饮料。经测定,每１００ｍｌ饮料中云芝糖含量０．８２ｇ、粗蛋白含量为０．５１ｇ,游离氨基酸为２７．０６ｍｇ饮料卫生指标符合中国食品卫生标准。     

桑黄液体发酵工艺的研究

通过对桑黄液体发酵培养基、培养条件优化实验研究,以获得具有与桑黄子实体相似功效成分的桑黄菌丝体液体发酵工艺。以菌丝体收率为主要考察指标,采用单因子及L9(34)正交实验的方法,对桑黄液体发酵培养基及培养条件进行优化,确定桑黄液体发酵工艺条件。桑黄液体发酵最佳培养基及培养条件:玉米粉2%,葡萄糖3%,酵母膏0.5%,蛋白胨0.5%,KH2PO40.3%,Mg SO4·7H2O 0.15%,VB120μg/100 m L,p H5.5,接种量8%,培养温度28℃,摇床转数180 r/min,培养周期82 h。优化条件下所获得桑黄菌丝体粉为土黄色,菌丝体平均得率为1.67%,菌丝体黄酮含量(0.84%)与桑黄子实体(0.88%)相当,菌丝体多糖含量(5.15%)是子实体(1.71%)的3倍。可见,该桑黄液体发酵工艺具有较大的推广应用价值。     

正红菇深层培养菌丝体与野生子实体有效成份的分析比较*

本文分析比较了正红菇深层培养菌丝体和野生子实体有效成份的含量和组成及抑菌作用。结果表明:正红菇深层培养菌丝体和野生子实体均含有蛋白质、多糖、氨基酸、不饱和脂肪酸、挥发性物质、麦角固醇及抑菌活性物质等多种有效成份,其组成基本一致,但菌丝体在多种成份的含量上略低于子实体。     

猴头菌子实体和固体培养菌丝体提取物化学组成及生物活性的比较

比较了猴头菌子实体和固体培养菌丝体的提取物化学成分的组成和含量的差异。研究结果表明,猴头菌子实体和培养菌丝体提取物的单糖含量分别为6.67%和6.68%,基本一致;蛋白质含量分别为12.73%和13.91%,比较接近;多糖的含量相差较大,分别为26.63%和18.71%,子实体提取物的多糖含量比培养菌丝体提取物高7.92%;而培养菌丝体中重金属的含量比子实体中的高;红外光谱分析子实体提取物的特征吸收峰显示二者在多糖构型上有差异;动物实验表明在等生药量时,猴头菌子实体提取物对大鼠胃粘膜损伤的保护作用优于培养菌丝体的提取物。研究结果表明,猴头菌子实体较培养菌丝体更合适于相应功能食品的开发。     

虎奶菇深层发酵及氨基酸成份分析

本文采用不同发酵培养基培养３虎奶菇,结果表明,以玉米组成的培养基培养的虎奶甘、菌丝长势相对较好,总干重为０．８６３／１００ｍｌ培养液,且通过氨基酸分析,总氨基酸含量为１１．６８０２％,氨基酸总产量为０．１ｇ／１００ｍｌ培养液,必须氨基酸含量为７．１１６９％,占总氨基酸的６０．９３％,且检出的氨基酸中,以亮氨酸和异亮氨酸含量相对较高。麦芽糖组成的培养基培养的虎奶菇菌丝体总干重为０．６３８ｇ／１００ｍ     

阿魏菇深层发酵菌丝体多糖提取工艺优化研究

以液体深层培养的阿魏菇新鲜菌丝体为原料,使用均匀正交设计的试验方法优化了阿魏菇多糖提取工艺。实验结果表明：在菌丝密度为100～250mg／mL(鲜重)范围内,超声波破壁时间为18min、热水浸提时间为4h、提取温度为70℃的提取工艺,多糖提取率可达到：0．914％(鲜重)。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较*

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖 hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖。气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12：0.04：1.00：0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.25：0.41：0.31：1.00：0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000。猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

pH对桦褐孔菌(Phaeoporus obliquus)H011菌株深层培养抗氧化特性的影响

研究了p H(4.0~7.0)对桦褐孔菌(Phaeoporus obliquus)H011菌株深层培养菌丝体和滤液甲醇提取物抗氧化活性、自由基清除能力及抗氧化成分的影响。结果表明:p H显著影响桦褐孔菌菌丝体和滤液甲醇抽提物的抗氧化能力、自由基清除能力、总酚和多糖产量;当p H为6.0时,滤液甲醇提取物的抗氧化能力、对自由基的清除能力最强,显著高于其他组(P0.05);当p H为6.0时,菌丝体甲醇抽提物多酚产量和多糖产量达到最高,分别是189.9和47.2 mg·g-1,均分别显著高于其他组的含量(P0.05),桦褐孔菌菌丝体和滤液甲醇抽提物的抗氧化能力、自由基清除能力与总酚、多糖产量有关;深层培养的抗氧化能力比子实体高。因此,可通过桦褐孔菌深层培养生成抗氧化剂来取代固体培养。     

蝉虫草子实体与发酵菌丝体胞内多糖成分分析

比较蝉虫草子实体、孢梗束、虫体以及蝉虫草发酵菌丝体的胞内多糖含量、单糖组成和分子量差异,结果表明,蝉虫草子实体与发酵菌丝中胞内多糖的含量和组成均存在差异。葡萄糖、半乳糖和甘露糖是蝉虫草发酵菌丝体和子实体粗多糖中主要的3种单糖,阿拉伯糖和木糖是子实体粗多糖中的特征性单糖,而果糖属于菌丝体的特征性单糖。子实体粗多糖中高分子量组分（>1×10 ⁶Da）的相对含量明显高于菌丝体粗多糖。本研究对提升蝉虫草发酵多糖产品品质、促进蝉虫草开发应用具有参考价值。     

硬粒小麦单倍体原生质体培养及植株再生

由硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）×玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）建立的单倍性胚性愈伤组织,在继代培养４ 个月后置于含２．０ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ液体培养基中进行悬浮培养,４ 个月后形成了生长迅速、由大小不同（０．５ ～５ ｍ ｍ ）的愈伤组织块组成的愈伤组织悬浮系。酶解试验表明,２．０％ 纤维素酶ＲＳ和０．５％ 的离析酶效果最好,而液体悬浮培养物和固体培养的愈伤组织（在酶解时用锋利的解剖刀片切成１ ｍ ｍ 左右的小块）都能释放出大量原生质体,但悬浮培养物释放出的原生质体状态较好,胞质更浓厚,用ＫＭ８ｐ 培养基以琼脂糖包埋培养方式培养时分裂频率可达５％ 左右。由原生质体再生的小愈伤组织经增殖、筛选后可获得胚性愈伤组织,将其转移至分化培养基Ⅰ（０．２ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／Ｌ ＢＡＰ、０．１ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ 水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ固体培养基）和Ⅱ（不含２,４－Ｄ,其它成分同Ⅰ）上进行分步分化培养可再生出完整植株,分化频率约为２０％     

蛹虫草对锌的耐性与富集特征

在培养基内添加不同量的锌,研究其对蛹虫草子实体的形成、子实体和菌丝体生物量、子实体多糖含量和葡萄糖含量的影响,以及蛹虫草子实体和菌丝体对锌的富集能力。结果表明锌对上述各项都有影响。液体培养条件下,锌浓度在453906mg/L范围内可以促进菌丝体生长,锌浓度超过4077mg/L时,菌丝生长受到抑制。培养基锌的浓度在4077mg/L以下时,蛹虫草菌丝体锌的富集量随着液体培养基锌浓度的提高而提高。固体培养条件下,锌含量在226453mg/kg范围内可以促进蛹虫草子实体生长,并且在此含量范围内,蛹虫草子实体中葡萄糖含量较高。培养基锌含量在680906mg/kg时,子实体多糖含量较高。培养基锌含量在2038mg/kg以下时,蛹虫草子实体中锌的富集量随着培养基锌含量的提高而提高,在培养基锌含量为2038mg/kg时,子实体中锌的含量达到28570mg/kg(干重)。     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖,气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12:0.04:1.00:0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,磨尔比为：0.25:0.41:0.31:1.00:0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000,猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

正红菇深层培养菌丝体与野生子实体有效成份的分析比较

本文分析比较了正红菇深层培养菌丝体和野生于实体有效成份的含量和组成及抑菌作用。结果表明：正红菇深层培养菌丝体和野生于实体均含有蛋白质、多糖、氨基酸、不饱和脂肪酸、挥发性物质、麦角固醉及抑菌活性物质等多种有效成份,其组成基本一致,但菌丝体在多种成份的含量上略低于于实体。