玉米胚乳和胚发育过程中干物质积累和同工酶、蛋白质的变化

用6个玉米自交系和杂交种为材料,分析籽粒发育阶段干物质积累的速度和持续时间、同工酶及可溶性蛋白质的变化。观察到胚乳,胚和籽粒发育过程中的干物质积累变化为“S”形曲线,平均日增重为“双峰”曲线。据此,将其发育过程分为四个时期,即(1)缓慢增重期(0～15天),(2)线性增重期Ⅰ(16～30天),(3)线性增重期Ⅱ(31～45天),(4)成熟期(46天以后)。同时用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳及光密度扫描方法,相应地定株检测了过氧化物酶、细胞色素氧化酶、α-淀粉酶、苹果酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、酯酶等的同工酶及可溶性蛋白质的变化。观察到(1)期同工酶和蛋白质带数少,活性(含量)较低。(2)期同工酶和蛋白质条带及活性(含量)都急剧增加,以脱氢酶类为甚。(3)期除酯酶等水解酶类条带和活性继续增加外,其余都开始降低。(4)期除酯酶外,其它同工酶和蛋白质条带及活性(含量)显著减少。此变化与干物质积累“S”形变化相一致。有一些同工酶酶带的变化更为显著。如α-淀粉酶Amy1-A和Amy1-B活性是在授粉后5～15天内急剧变化的;胚乳中P_x5、P_x6和P_x7按(1)、(2)和(3)期的顺序显现,而胚中(1)期不具有P_x5、P_x6和P_x7,(2)期以后开始出现,但P_x14、P_x15、P_x16和P_x17在(3)期后缺失。     

九连小檗悬浮培养细胞生理生化研究——Ⅳ.细胞生长与酯酶同工酶变化的关系

本文报道了九连小檗细胞悬浮培养过程中细胞生长与酯酶同工酶变化的关系。分析了25代及第10代和第25代不同生长时期的细胞和培养液的酯酶同工酶。结果表明,各代第18天的酯酶同工酶谱没有差异,而在生长周期中,不同时期的酶谱则有变化,对数期出现了新的谱带,这说明培养细胞的酯酶同工酶与细胞生长相关。     

绞股蓝细胞培养及其某些生理生化特性

从绞股蓝幼叶诱导并筛选出了胚性愈伤组织,其悬浮培养细胞生长曲线呈S形,生长周期中培养液pH值先降低后回升,可溶性糖含量避渐降低,培养细胞可溶性蛋白质含量及过氧化物酶活性出现两个高峰,过氧化物酶谱带数目无变化。培养细胞能合成皂苷,静止期皂苷含量最高。     

沙田柚花粉发育过程中同工酶的变化研究

分析了沙田柚花粉在发育过程中３ 种酶的同工酶的活力及类型的变化。结果表明, 过氧化物酶活力在单核期达到最大, 在四分体期与单核期所具有的一条染色较深的快速酶带在双核期消失。α－ 淀粉酶活力在成熟期达到最大, 谱带上也表现出在成熟期有酶带的增多。分析酯酶酶谱, 可见其在各个发育时期均有明显的特征带, 这些特征带可作为花粉发育各时期的生化指标。     

黄芩过氧化物酶同工酶电泳和抗坏血酸过氧化物酶活性分析

对黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi)二倍体和同源四倍体过氧化物酶进行了同工酶电泳分析及抗坏血酸过氧化物酶活性测定。结果表明,黄芩二倍体与同源四倍体过氧化物酶同工酶酶谱一致,但后者的着色程度大于前者,二年生黄芩叶子在快速区Rf为0．494和0．512处出现新的谱带,不同发育阶段和不同组织器官的谱带存在明显差异;根和叶中谱带数最多,花其次,种子最少;试管苗谱带数先减少后增加,并在整个培养过程中出现特征性谱带C。各组织器官抗坏血酸过氧化物酶总活力差异明显,顶芽最高,叶子次之,花最低。黄芩一年生和二年生各个多倍体株系叶子抗坏血酸过氧酶总活力均高于二倍体叶子抗坏血酸过氧化酶总活力。试管苗生长过程中抗坏血酶过氧化物酶活活力的变化与生长趋势一致,表明该酶与植株生长发育紧密相关。     

2,4-D浓度对胡萝卜体细胞胚胎发生及其同工酶的影响

在含有不同浓度2,4-D的MS培养基上生长的胡萝卜组织,培养26天后,不含2,4-D培养基上的培养物,其酯酶同工酶谱比在含有2,4-D培养基上的培养物少一条酶带8(图3)。过氧化物酶同工酶谱中,发现前者出现的酶带1(图4)在后者的酶谱中看不到。 胡萝卜的培养组织和完整的小植物皆具有分泌过氧化物酶和酯酶的能力。总过氧化物酶活力的变化与愈伤组织、胚状体和小植物的形成有一定关系。     

裂叶悬钩子组织培养研究——Ⅱ叶外植体培养不定芽发生过程中过氧化物酶同工酶的研究

本文在裂叶悬钩子的叶外植体培养不定芽发生的基础上,利用圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了其细胞分化过程中过氧化物酶同工酶的变化。实验指出:在有6-BA或2.4-D与NAA组合的培养条件下,随着培养时间和分化进程不同,过氧化物酶同工酶有变化,谱带由4条增加到8条,酶的活力分别由△0.24 OD/min提高到△1.82OD/min和△1.90 OD/min。在无外源激素条件下,过氧化物酶同工酶的变化不大,酶的活力也低,因而,叶外植体组织细胞也不能分化成植株。本文还从分子水平上探讨了酶和基因与细胞分化的关系。     

小麦不同发育时期酯酶、过氧化物酶同工酶酶谱 的比较研究

休眠干种子,浸种8小时和24小时萌动胚酯酶酶谱的特点是:酶带数较多,并且活力高的酶带基本上都集中在快带区与慢带区。一叶期、二叶期、三叶期酶谱的特点是酶带数大为减少,并且活力较低,在慢带区变化尤大。分蘖期是研究的九个发育时期中,酶带最少而且酶活力最低的一个发育时期。剑叶期酶谱与分蘖期相似,但酶带数和酶活力都有所提高。开花后15—18天的乳熟种子的酶谱有较大变化,酶带数显著增多,酶活力增强;并且在这一发育时期,不同材料间的差异容易显示出来。过氧化物酶同工酶酶谱,在不同发育时期是有差别的,但差异不及酯酶大。休眠干种子和浸种8小时种胚的过氧化物酶酶带数目较少而且活力低。但浸种24小时,酶带数显著增多而且活性较强,显色较深。一叶期、二叶期,三叶期的酶带数都比较多而强,至分蘖盛期酶带数有所下降,剑叶期又有所提高,乳熟期种子出现酶带数和酶活性都比较多而强。     

大蒜苗端和花序发育与过氧化物酶变化的相互关系

利用联苯胺组织化学染色、石蜡切片法和聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法,研究大蒜苗端和花序中形态解剖结构在不同发育阶段的变化,与过氧化物酶及其同工酶变化的相互关系。发现同工酶谱的变化与发育变化密切相关：营养生长时期有４条谱带（ＰⅠ、ＰⅡ、ＰⅢ、ＰⅣ）,成花转化期ＰⅢ、ＰⅣ带相继消失,花序发育时期出现了一条新的谱带（ＰⅤ）。酶的高活性部位集中在原形成层细胞中和生长分化区域的细胞壁上。探讨了过氧化物酶与个体发育     

冬小麦幼苗春化期间过氧化物酶的变化

研究了冬小麦幼苗在春化过程中过氧化物酶同工酶谱、过氧化物酶活性和可溶性蛋白质含量的变化。在冬小麦春化过程的中期,过氧化物酶同工酶谱存在着较显著的变化,第二条主要谱带逐渐减弱和接近消失,靠近正极的第四条主要酶带有所加强。而舂小麦正相反,第四条及第五条酶带都因春化处理而减弱。同时观察到春化21天以后冬小麦幼苗可溶性蛋白质含量迅速增加。     

石刁柏体细胞胚胎发生过程中蛋白质及同工酶变化的研究

本文报道石刁柏胚性愈伤组织的可溶性蛋白质含量与组分、过氧化物酶和酯酶的活力及同工酶带均比其体细胞胚的要少。而在体细胞胚胎发生过程中,过氧化物酶和酯酶活力、可溶性蛋白质含量均以球形胚为最低,子叶分化期胚为最高而呈递增趋势;可溶性蛋白质组分以子叶分化期胚、成熟胚为最多,球形胚、香蕉形胚为最少;过氧化物酶同工酶带以梨形胚为最多,子叶分化期胚、成熟胚为最少;酯酶同工酶则以子叶分化期胚为最多,成熟胚为最少。胚性愈伤组织与体细胞胚均有其特异性可溶性蛋白质及同工酶带,可作为体细胞胚胎发生的分子标记。     

豌豆组织培养中器官的分化生长过氧化物酶同工酶及核酸含量的变化

在豌豆的离体组织中比较研究了培养基中不同浓度的氮源、蔗糖和细胞激动素(BA)对于培养组织的生长、过氧化物酶同工酶及核酸含量的影响。试验结果表明,培养基中上述因素的变化对外植体芽苗的分化生长有明显影响。在氮源(总氮量、NO_3~-和NH_4~ 的不同比例)、蔗糖浓度和激素水平都适宜时最有利于培养组织的细胞生长与分化。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离培养组织过氧化物酶同工酶的结果表明,过氧化物酶同工酶带数与外植体的生长速度有密切关系,亦即外植体的过氧化物酶同工酶带与外植体的生长速度呈正相关趋势。核酸含量的变化得到了相应结果。     

苜蓿组织培养中球形胚发生时特异蛋白质和同工酶分析

试验在苜蓿组织培养中,对球形胚形成过程中特异蛋白质表达的模式、过氧化物酶及酯酶同工酶酶谱变化进行研究,结果表明：苜蓿组织培养中从胚性愈伤组织到球形胚发育的进程中,顺序消失和出现了11种中小分子量多肽;过氧化物酶同工酶酶谱发生了显著的变化;酯酶同工酶酶谱变化不大,但其总活力对于维持体细胞胚胎发生是必须的。     

大丽轮枝菌寡糖素诱导的棉花组培细胞的过氧化物酶表达分析

将已在察氏液体培养基中培养3d的强毒性（V44)或弱毒性（V64）大丽轮枝菌接种到新鲜的相同培养基中,加入棉花黄萎病感病品种（S）或抗病品种（R）的悬浮培养细胞（或其细胞匀浆）。培养4d后收获真菌孢子,用于致萎力测定,收获菌丝体细胞壁用于制备真菌寡糖素（H,来自V44或L,来自V64）,然后用该寡糖素诱导悬浮培养的棉花细胞（S或R）,棉花细胞的过氧化物酶（POD）同工酶结果表明;（1）所有寡糖素均诱导棉花细胞产生新的过氧化物酶;（2）感病品种豫棉6号的活组培细胞S（或其细胞匀浆）显著影响真菌,用生长过程中接触该活细胞（或其细胞匀浆）的真菌所制备的寡糖素再诱导该活细胞（即S→L（H）→S）时,棉花细胞在36h的POD同工酶谱与其对照,即L（H）→S比较,酶带增减变化显著,致萎力测定结果表明感病品种的活细胞提高了病原毒性和致病力;（3）耐病（豫棉8号）或抗病品种（中棉12号）的活组培细胞R（或其细胞匀浆）对真菌的影响不同于感病品种,R→L（H）→R在36h的POD同工酶谱与L（H）→R比。酶带没有增减变化。但是在H→R或H→S中于9h和24h出现的酶带在R→H→R或R→H→S中分别提前到6h和9h,致萎力测定结果表明抗病品种细胞对病原毒性影响很小。     

红花的愈伤组织诱导及其与过氧化物酶和酯酶同工酶的关系

红花外植体培养于附加不同激素的 MS培养基中,根、胚轴、子叶均可大量形成愈伤组织和根。5个红花品种间过氧化物酶和酯酶同工酶酶谱的差异小于不同器官间的差异。随外植体子叶脱分化过程的进行,过氧化物酶同工酶酶带逐渐增多,而酯酶同工酶酶带则逐渐减少,并出现特异的诱导酶带。     

红豆草体细胞胚胎发生早期过氧化物酶和酯酶同工酶酶谱变化

红豆草下胚轴切段接种于含1mg/l BA,1mg/l KT的LS培养基上,通过筛选和繁殖由一块外植体而来的淡黄色愈伤组织,而得到生理状态比较一致具有较高胚性发生能力的非胚性愈伤组织,将其转移到含1mg/l BA的LS培养基上后可诱导体细胞胚眙发生。在体细胞胚胎发生早期发现过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶酶谱均有规律性变化。过氧化物酶同工酶酶谱在胚性培养的第10天,两条明显的A_1、A_2带消失。酯酶同工酶各酶带之间酶活性比例在胚性培养过程中变化很大,培养后期酶带变得不明显或酶带数下降。说明胚性发生过程遗传信息的表达有选择性并为激素所调控。     

杉木种子涩籽胚败育与过氧化物酶同工酶活性及脂质过氧化作用的关系

本文报导杉木种子涩籽胚败育过程中过氧化物酶同工酶活性及脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。试验结果表明,涩籽胚败育过程伴随着过氧化物酶活性降低,后胚期同工酶带比健籽少一条,胚成熟期酶带强度明显比健籽弱,而丙二醛含量比健籽增高５—１０倍。由于过氧化物酶活性降低,促进了脂质过氧化作用,结果产生更多脂质自由基毒害细胞,导致胚与胚乳膜质结构破坏,细胞解体而死亡变质。健籽与涩籽同工酶谱的差异,可能是控制健籽胚正常发育的基因表达受到干扰,使形成涩籽的基因得到表达的结果。     

离子注入对萝卜过氧化物酶、淀粉酶和蛋白酶同工酶的影响

研究了氮离子和氩离子注入萝卜种子对萝卜幼苗蛋白含量、过氧化物酶活性及过氧化物酶、淀粉酶和蛋白酶同工酶的影响。结果表明 :离子注入后 ,减低萝卜过氧化物酶活性和蛋白含量。萝卜不同生长时期同工酶变化不一样。在子叶时期 ,过氧化物酶同工酶谱带无明显变化 ,淀粉酶同工酶有酶带的消失 ;而在真叶时期 ,过氧化物酶在负极区减少一条酶带 ,Rf为 0 .2 2 ,正极区增加一条酶带 ,Rf为 0 .6 ,且随剂量增加 ,酶带着色增强 ;淀粉酶同工酶在注入剂量为 5× 10 5N+ / cm2 )时 ,有同工酶带增加 ,Rf为 0 .6 1。低剂量时蛋白酶活性增强 ,谱带增多 ,大剂量则减弱。因此 ,N+和 Ar+注入后 ,可影响萝卜过氧化物酶和淀粉酶的表达及蛋白质的合成或降解。     

谷子耐盐系的几种同工酶的变化及外源ABA对它们的影响

对谷子细胞变异系的过氧化物酶,细胞色素氧化酶和脂酶同工酶的分析表明：耐盐系在无盐胁迫条件下过氧化物酶同工酶的总酶活性高于对照系,其各同工酶带的强度也与对照有明显差异;在ＮａＣｌ迫条件焉耐盐系中个别原有的酶带消失。细胞色素氧化活性与过氧化物酶同工酶的活性变化情况类似,均与对照有明显差异。     

烟草组织培养过程中过氧化物同工酶的变化

在烟草的组织中,老叶的过氧化物酶,在迁移速率慢的酶区带对照植株比变异植株多二条酶带,但在幼龄叶片无差异。~(60)Coγ射线诱变的外植体与对照相比,酶谱有显著不同。在组织分化进程中,酶谱亦有显著变化。随着细胞分化进程,定期测定不同剂量γ射线处理的培养组织中酶谱的变化历程,观察到在分化前后酶谱无明显差异。只有在诱变植株生长状态表现明显差异时才见酶谱的变化。培养基中不同浓度组合的激动素、椰乳和2,4-D对细胞生长和分化有不同的调节作用,随着组织分化与脱分化历程,同工酶谱表现明显差异。在组织开始形成愈伤组织以后同工酶谱已有显著变化,但培养在分化培养基上的外植体,在分化前后,其同工酶谱未见明显变化。