基因工程抗体的获得

一、抗体结构和抗体基因 1.抗体结构 抗体分为五类,即IgG、IgM、IgA、IgD和IgE,其理化性质各不相同,在体内的比例、分布及代谢速率也很不一样。IgG是最重要的血清免疫球蛋白,分为四种亚型:IgG1是主要的亚型(占IgG总量的67％),其次是IgG2、IgG3、IgG4。IgA是主要的分泌型Ig,分为IgA1,IgA2两个亚型。IgM是一五聚体分子,由10条H链、10条L链和一条J链通过二硫键连接而成。它是一个多价体。在B细胞膜上的IgM作为抗原受体与B细胞成熟、分化有关。     

IgG、IgM、IgA与结核分枝杆菌感染

抗结核分枝杆菌抗体是机体受到分枝杆菌生长繁殖过程中产生的代谢物、菌体蛋白和毒素等物质刺激后产生的免疫球蛋白,包括IgG、IgM、IgA、IgD和IgE等。其中,结核病患者血清中的抗结核IgG、IgM和IgA抗体检测常用于临床辅助诊断,我们主要叙述这3种抗体亚型与结核分枝杆菌感染及诊断之间的关系。     

新生儿如何从母体获得免疫力?

人体能产生5种抗体IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。在个体发育过程中,IgM合成最早,在胚胎发育后期就能够合成了。IgG是在出生后3个月开始合成的,IgA是在出生后4～6个月开始合成的,IgD、IgE开始合成的时间更晚,并且IgD、IgE在Ig中所占比例很小。所以,新生儿出生后3个月内主要依靠从母体得到IgG、IgA以获得免疫力。     

免疫球蛋白的结构与功能

免疫球蛋白(简称Ig),在人体上已发现有五类:IgG、IgA、IgM、IgD及IgE。根据结构和功能的差异,有的又细分为若干亚类,如IgG分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4等。五类Ig中,IgG含量最多,功能了解得最详尽,结构也研究得最清楚。60年代,基于化学法和酶解法的研究,提出Ig分子的四链化     

伤寒Vi多糖结合疫苗免疫小鼠后的抗体类型及动态分析

伤寒Vi多糖结合疫苗和Vi多糖疫苗分别免疫小鼠,分离血清,采用间接ELISA法测定不同时点血清中特异性IgA、IgM、IgG及其亚类(IgG1、IgG2a、IgG3)的抗体滴度。结果显示,免疫一针后,Vi多糖结合疫苗组的IgG抗体GMT值明显升高,第二针有加强效应(P<0.01);所测3种IgG亚型中IgG2a抗体滴度升高明显;Vi多糖和结合疫苗免疫小鼠后,血清中IgA和IgM抗体滴度均有显著升高,但无加强应答。显示Vi多糖结合疫苗在诱导小鼠血清IgG应答方面有加强效应。     

水痘-带状疱疹病毒对系统性红斑狼疮患者体液免疫功能的影响

目的:观察水痘患者、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者和系统性红斑狼疮合并水痘患者体液免疫指标的变化,探讨水痘-带状疱疹病毒对系统性红斑狼疮患者体液免疫功能的影响。方法:选择在我院诊断治疗的水痘患者、系统性红斑狼疮患者和系统性红斑狼疮合并水痘患者共66例,同时设21例正常对照组;利用血液细胞分析仪检测各组血液中白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)以及血红蛋白含量(HGB);采用免疫比浊法检测各组血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)以及补体C3、C4的水平。结果:与正常对照组比较,水痘组、SLE组以及SLE合并水痘组WBC、PLT和HGB含量下降,其中SLE组和SLE合并水痘组WBC、PLT降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);水痘组血清中IgG、IgA和IgM含量下降,SLE组和SLE合并水痘组血清中IgG、IgA和IgM含量上升,其中水痘组血清中IgA含量减少有统计学意义(P<0.05),SLE组和SLE合并水痘组血清中IgG、IgA含量增加有统计学意义(P<0.05或P<0.01);水痘组血清中补体C3、C4含量增加,SLE组和SLE合并水痘组血清中补体C3、C4含量减少,其中SLE合并水痘组减少且差异有统计学意义(P<0.05)。与SLE组比较,SLE合并水痘组WBC明显增加(P<0.05),血清中IgG、IgA和补体C3、C4降低且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:水痘-带状疱疹病毒可引起系统性红斑狼疮患者免疫系统相关指标的改变并对其产生影响。     

免疫肠内营养对于慢阻肺合并Ⅱ型呼吸衰竭患者免疫恢复情况的影响分析

目的:研究疫肠内营养对于慢阻肺合并Ⅱ型呼吸衰竭患者免疫恢复情况的影响。方法:选取2011年6月-2013年1月在我院进行住院治疗的90例慢阻肺合并Ⅱ型呼吸衰竭患者,按随机分组原则将其分为实验组和对照组,实验组患者给予免疫肠内营养支持治疗,对照组患者进行常规肠内营养支持,分别在方案实施前、实施后2天、9天测量患者血浆蛋白(前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白),外周血淋巴细胞亚群(CD3+,CD8+,CD4+/CD8+)、血清免疫球蛋白(IgA,IgG,IgM)、IL-2和IL-6的浓度水平,通过实验组、对照组、正常值之间的比较进行效果评价。结果:两组患者在进行营养支持疗法前,以上数值无明显差异,实施后第2天,两组患者血浆蛋白含量、血淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+/CD8+)、血清免疫球蛋白(IgA,IgG,IgM)、IL-2的浓度明显提升,但实验组患者的免疫相关数值和对照组无明显差异,P0.05,差异无统计学意义;第9天时,两组患者,两组患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+/CD8+)、血清免疫球蛋白(IgA,IgG,IgM)、IL-2在明显提升的基础上,实验组明显高于对照组,但仍低于正常值,P0.05,差异有统计学意义。但CD8+、IL-6出现明显下降,实验组明显低于对照组,P0.05,差异有统计学意义。结论:免疫肠内营养能够有效改善机体营养状态,增强机体免疫功能,促进患者恢复,建议在临床上推广应用。     

百草枯中毒患者血清补体及免疫球蛋白含量的变化及意义

目的:比较分析百草枯中毒患者血清补体水平及免疫球蛋白含量的改变及临床意义.方法:免疫球透射比浊法检测32例百草枯中毒患者(中毒组)与40例健康者(对照组)血清中补体C3,C5的水平及血清IgG、IgM、IgA含量.结果:百草枯中毒组患者血清IgM、C3、C5含量与对照组相比增高,且具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),而IgG、IgA含量与对照组相比无明显变(P>0.05).结论:血清补体C3,C5水平与百草枯中毒患者的发病机制密切相关,抑制补体系统的激活,可能是治疗百草枯中毒患者的一种途径.     

IgD及其受体功能和信号研究进展

自从1965年首次发现免疫球蛋白D(immunoglobulin D,IgD)以来,IgD一直是最为神秘的抗体家族成员。从鱼类到人类进化发展中,IgD一直保留并发挥重要的免疫学功能。IgD在免疫系统中兼具受体和配体的双重身份:作为膜受体,在B细胞早期发育中IgD可在IgM缺失时替代IgM的功能;在炎症和免疫平衡的监测中,IgD起到调节免疫应答和维持免疫系统平衡的作用;作为配体的IgD可以通过与其受体(IgD receptor,IgD-R)结合并激活下游信号通路,介导T细胞的活化及T、B细胞的相互作用。本文就IgD的生成过程、IgD与IgD-R的生理功能、相关的信号通路及以IgD/IgD-R为靶点的药物治疗前景等研究进展做一综述。     

粘膜免疫系统与粘膜免疫应答的诱导

粘膜免疫系统是机体抵抗病原体入健的第一道免疫屏蔽,同机体的系统免疫相比,粘膜免疫系统的淋巴细胞总数远远超过存在于骨髓,胸,腺,脾脏以及淋巴结中的淋巴细胞数量,粘膜表面分泌性免疫球蛋白A（sIgA)的量显高于循环IgG的总量,而且粘膜分泌物中的抗体以IgA抗体为主,由于粘膜免疫系统的区域性分布,诱导系统免疫的免疫途径和免疫佐剂不能诱导粘膜免疫应答,经消化道,呼吸道和生殖道免疫可有效地诱导粘膜免疫应答,霍乱毒素是良好的粘膜免疫,佐剂,能有效地诱导粘膜免疫应答,粘膜免疫的上述特点可能是某些疫苗经系统免疫后,尽管能诱导血液中产生高滴度的IgG抗体,但不能预防疾病的原因。     

白癜风患儿抗核抗体、免疫球蛋白及补体检测的临床分析

目的:探讨白癜风患儿中抗核抗体(ANA)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)以及补体(C3、C4)的表达及临床意义。方法:收集2014年10月至2016年5月我院收治的30例白癜风患儿为病例组,并于同期随机选取30例健康体检儿童为对照组,患儿的血清ANA、12种自身抗体谱分别采用间接免疫荧光法及免疫印迹法进行检测,IgG、IgA、IgM,C3、C4水平采用免疫透射比浊法进行检测。结果:病例组中ANA阳性率为13.33%(4/30),与对照组的3.33%(1/30)比较,差异无统计学意义(P0.05)。12种自身抗体谱中,分别有1例(3.33%)患儿dsDNA、SmDNA、SS-A/Ro60KD、SS-B/La、CENP-B阳性,与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。病例组患儿血清IgG、IgA、C4水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ANA阳性患儿血清IgG、IgA、IgM水平高于ANA阴性患儿,而补体C3、C4水平低于ANA阴性患儿,差异有统计学意义(P0.05)。结论:白癜风患儿ANA阳性表达与健康儿童无明显区别,体液免疫功能有明显异常,临床有重要的参考价值。     

牛乳中的免疫球蛋白与健康的研究

牛乳是日常生活中不可或缺的营养品,它含有丰富的营养物质,如酪蛋白、乳清蛋白、补体、脂肪和免疫球蛋白等。牛乳中含有的免疫球蛋白主要为IgG,IgA和IgM。其中,IgG含量最高,约为免疫球蛋白总量的80％。母牛分娩后第一天内分泌的初乳中免疫球蛋白含量最高,研究表明,其IgG的平均浓度可达59．80mg/ml。然而,第5-7天的初乳中IgG浓度已接近常乳水平,约为0．7．1．0mg/ml。这些免疫球蛋白不仅对犊牛,而且对新生儿以及普通人群的免疫系统都具有重要的作用。初生的牛犊免疫系统比较脆弱,在其免疫系统功能完善之前,从牛乳中获得免疫球蛋白成为它们抵抗微生物侵袭的重要方式。同样地,婴儿免疫系统功能也不健全,牛乳中的免疫球蛋白能在一定程度上帮助他们抵抗微生物侵袭。在成年人体内,免疫球蛋白具有多种生物活性功能,主要是识别和抵抗入侵的细菌和病毒等病原体,在增强机体的免疫能力、防止细菌和病毒入侵、活化补体、中和毒素、杀死肿瘤细胞等方面发挥着重要作用。经常饮用富含免疫球蛋白的牛乳,可以预防和治疗肠道病原菌引起的感染。牛乳的不同加工过程对其中的免疫球蛋白也有一定的影响。本文就牛乳中免疫球蛋白的成分功能以及各种处理加工过程对其含量的影响进行综述。     

手足口病患儿细胞因子水平及免疫球蛋白的变化及其临床意义

目的探讨不同病情的手足口病患儿(HFMD)主要细胞因子及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的表达水平及其变化的临床意义。方法收集HFMD患儿50例,根据病情分为重症组12例,轻症组38例,另外选取同龄健康者15例为对照组。应用液相芯片分析平台检测IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、IGF-β水平;实时荧光定量PCR检测上述细胞因子mRNA表达水平;免疫比浊法检测免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的水平。结果重症组患儿血清各细胞因子水平显著高于轻症组及对照组(P0.05);重症组患儿外周血单个核细胞表达的各细胞因子mRNA水平显著高于轻症组(P0.05);重症组及轻症组血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的水平较对照组明显下降(P0.05);重症组与轻症组间免疫球蛋白水平无明显差异(P0.05)。结论HFMD患儿存在细胞因子水平的改变,体液免疫功能低下,这些变化可能参与HFMD病情的发展。     

FMMU白化豚鼠免疫学特性研究

目的　通过测定补体含量、免疫球蛋白含量、淋巴细胞的转化率及红细胞免疫功能 ,比较FMMU白化豚鼠和花色豚鼠的免疫学特性。方法　利用自动生化分析仪测定FMMU白化豚鼠和普通花色豚鼠的免疫球蛋白含量 (IgG、IgA、IgM)、C3、C4含量及总补体水平 ;利用淋巴细胞转化实验测定淋巴细胞的转化率 ;利用红细胞免疫复合物 (immunocomplex ,IC)花环形成试验测定两种豚鼠红细胞免疫粘附功能。结果　FMMU白化豚鼠血清中免疫球蛋白含量 (IgG、IgA、IgM)、C3、C4含量及补体总活性均显著低于花色豚鼠 ;FMMU白化豚鼠淋巴细胞转化率比花色豚鼠略低 ;FMMU白化豚鼠红细胞C3bR花环形成率与花色豚鼠差异无显著性 (P >0 0 5 )。而RBC IC花环率显著低于花色豚鼠 (P <0 0 5 )。结论　封闭群FMMU白化豚鼠具有独特的免疫学特性 ,总体免疫学功能低于花色豚鼠。     

气温骤降前后慢性阻塞性肺疾病患者免疫情况的变化

目的:探讨COPD患者免疫功能在外界温度变化时的变化.方法:T淋巴细胞亚群测定采用单克隆抗体免疫组化荧光染色法.血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)用琼脂单向扩散法.结果:COPD患者体温骤降后CD3、CD4、CD4/CD8明显降低,CD8明显升高,IgG、IgA、IgM降低,与对照组相比有显著性差异(P＜0.01).体温下降前与体温下降后比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:体温骤降致COPD患者细胞免疫和体液免疫功能失衡,体温骤降后较体温骤降前体液免疫及细胞免疫功能进一步降低.     

ELISA间接法检测呼吸道合胞病毒和副流感病毒血清IgM和IgA抗体

建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PFV)血清特异性IgM和IgA抗体的间接ELISA方法。在方法统一的基础上比较了检测IgG、IgM和IgA抗体的结果,证明检测血清IgM和IgA可以作为RSV和PFV感染的早期诊断指标。检测了120份临床急性下呼吸道感染患儿的血清,RSV-IgM检出率为33.3％,RSV-IgA为36.7％;PFV-IgM为27.5％,PFV-IgA为31.6％。提出了对RSV和PFV感染以检测特异性IgA替代IgM或两者互补的设想。     

发热伴血小板减少综合征患者血清中核蛋白抗体的动态变化

目的:观察新发传染病发热伴血小板减少综合征(SFTS)的病原体新型布尼亚病毒(SFTSV)核蛋白(NP)IgM和IgG型抗体在SFTS患者外周血中的变化规律,为疾病的早期诊断和发病机制的认识提供依据.方法:用ELISA方法检测28例SFTS患者不同病程阶段血清中NP特异性IgM、IgG抗体.结果:①28例SFTS患者中,IgM阳性检出率为89.3 ％(25/28),IgG阳性检出率为85.7 ％(24/28).②IgM和IgG均在发病5天后开始出现,随着病程延长血清中抗体水平逐渐上升,其峰值出现在发病2周左右.③死亡组患者的抗体检出时间迟于痊愈组患者,且抗体水平低下.结论:①在SFTSV感染早期,SFTS患者血清中NP特异性抗体IgG和IgM的变化趋势一致,NP特异性抗体IgG和IgM一样是SFTS早期诊断的重要指标.②因疾病严重而死亡的患者,抗体出现延迟、抗体水平低下可能与患者细胞免疫系统严重受损及多脏器功能障碍有关,致使机体体液免疫应答减退或应答无能.③抗体出现延迟且抗体水平低下可能是病情严重患者预后不良的预测指标.     

测定Epstein-Barr病毒IgA/EA抗体的改进方法

用免疫酶法(IE)检查鼻咽癌(NPC)病人血清中IgA/EA抗体,阳性率为73％,几何平均滴度为25,将血清用马抗人IgG血清或葡萄球菌菌体A蛋白(SPA)处理后,以除去竞争性IgG类抗体后,阳性率可增高至92％,几何平均滴度提高到89,有15例NPC病人血清,经马抗人IgG血清处理前IgA/EA抗体为阴性,处理后均呈阳性反应。     

“深层海水”对小鼠免疫功能的影响

取健康昆明种小鼠72只,随机分为3组,即自来水(tap water,TW)对照组、45 ppm(mg/L)深层海水(deep sea water,DSW)组、90 ppm深层海水组,每组24只,均为雄性,自由喂养8周,观察深层海水对小鼠胸腺指数、脾指数,脾淋巴细胞增殖,巨噬细胞吞噬功能,外周血CD4+、CD8+T细胞百分含量及CD4+/CD8+T细胞比值,血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)的影响。结果表明,深层海水可显著提高小鼠胸腺、脾指数,增强巨噬细胞吞噬功能,促进脾淋巴细胞增殖,提高外周血CD4+细胞百分含量及CD4+/CD8+细胞比例,增加血清IgA、IgM含量。因而,深层海水可增强小鼠机体的免疫功能。     

糖皮质激素联合吗替麦考酚酯分散片对系统性红斑狼疮患者的疗效及对免疫功能的影响

目的:研究糖皮质激素联合吗替麦考酚酯分散片治疗系统性红斑狼疮患者的临床疗效及对免疫功能的影响。方法:选取2014年9月至2015年8月本院收治的84例系统性红斑狼疮患者,根据投硬币法分为观察组和对照组,42例每组。对照组使用单纯的糖皮质激素,观察组在此基础上使用吗替麦考酚酯分散片。比较两组患者临床疗效,治疗前后免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白(IgG)、免疫球蛋白(IgM)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组临床总有效率显著高于对照组(P0.05)。治疗前,两组患免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白(IgG)、免疫球蛋白(IgM)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)水平比较差异均无统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者IgA、IgG、IgM、CRP、ESR水平均较治疗前显著降低(P0.05),与对照相比,观察组的IgA、IgG、IgM、CRP、ESR明显降低(P0.05)。两组组的不良反应率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:糖皮质激素联合吗替麦考酚酯分散片能有效改善系统性红斑狼疮患者的免疫功能,临床疗效良好,安全性高。